心肌样细胞和内皮祖细胞联合移植对兔心肌梗死面积的影响

目的:评价心肌样细胞和内皮祖细胞联合移植对心肌梗死面积影响是否优于单项细胞移植。方法:骨髓穿刺提取、分离、培养骨髓间充质干细胞(mensenchymal stemcell,MSC),向心肌样细胞和内皮祖细胞定向诱导分化。心肌梗死模型制作成功2周后沿梗死周边区域注射100μl培养基或心肌样细胞、内皮祖细胞及二者混合悬液各3×108/100μl。实验前、后4周行心脏超声检查心功能,TTC染色评价梗死面积。结果:①诱导后MSC呈现心肌样细胞超微结构特征,PCR检查表达心肌收缩、舒张特异性蛋白肌球蛋白重链、受磷蛋白以及心房颗粒;内皮祖细胞呈"铺路石"外观,高表达CD133并随时间推移表达逐步下降。②与对照组[(35.17±1.76)%]相比,细胞移植能降低梗死面积(均P<0.05);心肌样细胞组[(28.61±1.24)%]、内皮祖细胞组[(29.73±2.11)%]与联合细胞移植组[(22.82±3.12)%]比较,均P<0.05。结论:MSC可定向分化心肌样细胞和内皮祖细胞,两者联合细胞移植在改善心肌缺血及心肌细胞坏死,降低梗死面积方面效果优于单项细胞移植。     

移植心肌样细胞对心肌梗死后功能性室壁瘤大鼠心功能的影响

目的 探讨心肌内注射心肌样细胞对心肌梗死(MI)后功能性室壁瘤大鼠心功能的影响。方法 结扎大鼠冠状动脉前降支形成MI,4周后,用超声心动图检测并筛选形成功能性室壁瘤者,并随机分为两组,即移植组（n=10）,在室壁瘤部位及周边点状注射5-氮杂胞苷(5-Aza)诱导骨髓间充质干细胞（MSCs）分化、并用4,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)标记的心肌样细胞（106～107个）;对照组（n=10）:注射生理盐水。另取10只健康大鼠作为假手术组,只开胸不做任何处理。4周后,用超声心动图和血流动力学方法测定功能性室壁瘤大鼠的心功能,在荧光显微镜下观察DAPI标记的移植细胞的存活情况。结果 超声心动图的结果显示,对照组和移植组的左室舒张末内径（LVEDD）和左室收缩末内径（LVESD）均较假手术组增高（P<0.01）,而移植组较对照组有所降低［（8.749±0.091）、（5.109±0.171） vs (9.219±0.059)mm、(5.942±0.092)mm,P<0.05］;对照组和移植组的短轴缩短率（△FS）及左室射血分数（LVEF）均较假手术组明显降低（P<0.01）,移植组较对照组两者有所增高［（32.70±1.283）、（45.78±1.796） vs （22.80±0.593）%、（31.92±0.830）%,P<0.05］。血流动力学检测结果显示,移植组、对照组和假手术组的左室舒缩压差（LVDP）和左室正负最大变化速率（±dp/dtmax）,分别为（152.9±0.669）、（4109±33.86）、（-3579±49.09）,（122.5±2.639）、（3823±73.50）、（-2828±60.96）和（183.6±2.348）mmHg、（6 695±80.17）mmHg/s、（-6 294±71.39）mmHg/s,假手术组优于对照组和移植组（P<0.01）,移植组优于对照组（P<0.05）。在荧光显微镜下可以观察到移植组的心肌组织中有存活的标记细胞。结论 移植心肌样细胞能显著改善MI后功能性室壁瘤大鼠的心功能,为治疗功能性室壁瘤提供一种新的治疗思路和为临床研究奠定基础。     

骨髓单核细胞与心肌样细胞移植对兔心肌梗死面积影响的对比研究

目的评价骨髓单核细胞与心肌样细胞移植对心肌梗死面积影响是否具有差异。方法提取、分离、培养骨髓单个核细胞,向心肌样细胞定向诱导分化。心肌梗死模型制作2周后沿梗死周边区域注射100!l培养基或骨髓单个核细胞、心肌样细胞各3×108/100!l。移植前、后4周心脏超声检查,TTC染色评价梗死面积。结果①诱导后骨髓基质细胞(MSC)呈现心肌样细胞超微结构特征,PCR检查表达心肌收缩、舒张特异性蛋白肌球蛋白重链(β-MHC)、受磷蛋白(PHO)、心房颗粒(ANP)。②与对照组相比,细胞移植能降低梗死面积,心肌样细胞移植组效果更好[(35.17±1.76)%、(28.61±1.24)%和(22.82±3.12)%,P<0.05]。结论MSC可定向分化心肌样细胞,心肌样细胞移植在改善心肌细胞坏死,降低梗死面积方面效果优于骨髓单个核细胞移植。     

内皮祖细胞移植治疗大鼠急性心肌梗死的实验研究

目的探讨大鼠内皮祖细胞(EPCs)移植于梗死心肌的增殖分化情况及对心功能的影响。方法分离培养大鼠EPCs,免疫荧光法检测其CD34+、CD133+和Flk-1+的表达。将SD大鼠冠状动脉左前降支结扎制造急性心肌梗死模型后,在梗死心肌处植入DAPI标记的EPCs(实验组)或M 199培养液(对照组)。移植后1周及4周,心脏超声检查心功能,并对梗死区心肌组织进行移植细胞形态学检查及毛细血管密度测定,逆转录聚合酶链反应及酶联免疫吸附测定梗死周边区血管内皮生长因子(VEGF)的表达。结果培养获得EPCs,其表型为CD34+、CD133+和Flk-1+。植入梗死区的EPCs可以分化为血管内皮细胞,实验组梗死心肌处血管密度较对照组明显增高(P<0.01),并且VEGF基因及蛋白表达在移植后1周均较对照组明显增高(P<0.01)。移植后4周,实验组大鼠左心室射血分数及左心室短轴缩短率较对照组明显提高(P<0.01);而移植后1周,两组大鼠超声检测心功能各指标变化不明显。结论同种异体EPCs移植到梗死心肌大鼠缺血心肌能分化为毛细血管内皮细胞,促进梗死后心肌血管新生,改善心功能。     

兔骨髓间充质干细胞体外可定向诱导分化内皮祖细胞

以内皮前体细胞为代表的干细胞移植可促进血管新生、改善心肌灌注,但干细胞中内皮祖细胞(endothelial progentiorcell,EPC)含量极低,一定程度上影响其疗效。本文旨在通过观察骨髓间充质干细胞(m ensenchym al stem cell,MSC)在适当诱导条件下向EPC分化并进行体外扩增情况,为EPC移植进行基础研究。1材料和方法1.1材料3~5月龄日本大耳白兔10只(武汉大学医学院实验动物中心提供),体质量2.0~2.5 kg,雌雄不限。特级胎牛血清和DMEM培养基(Hyc lone公司),Percoll分离液、内皮细胞添加剂(ECGS)、血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞…     

兔骨髓间充质干细胞移植后移植细胞凋亡的实验研究

目的利用TUNEL法检测5-氮胞苷体外诱导骨髓间充质干细胞（MSCs）移植后的凋亡情况。方法5-氮胞苷体外诱导骨髓间充质干细胞MSCs向肌源性心肌细胞分化,通过免疫组化,鉴定诱导后的MSCs是否向类心肌细胞转化。建立兔心肌梗死模型,将细胞移植于心梗区域。移值2周后,利用TUNEL法检测植入细胞的凋亡率。结果移植2周后,可见DAPI标记带蓝色荧光的供体细胞核,分布比较广泛,形态呈椭圆形类似心肌细胞核,并与心肌纤维排列方向一致,证明移植细胞已存活。移值细胞表达troponinT,证明移植的MSCs分化为类心肌细胞。移植细胞均出现不同程度细胞凋亡。结论移植的MSCs细胞可在缺血的心肌组织存活,并分化为类心肌细胞,但移植细胞均出现不同程度凋亡。     

人脐带间充质干细胞向心肌样细胞定向分化及其临床移植研究进展

人脐带间充质干细胞是一种非常有潜力的干细胞资源,在一定条件下可分化为骨、软骨、脂肪、神经、肝、心肌等多种组织细胞。因与其他来源干细胞相比,其资源丰富,不存在伦理道德问题,免疫原性弱,并已应用临床移植研究。现就人脐带间充质干细胞向心肌细胞的定向分化及其临床移植应用研究做简要综述。     

猪骨髓间充质干细胞的分离培养及体外转化为心肌样细胞的实验研究

目的 探讨体外培养猪骨髓间充质干细胞(MSCs)的方法及MSCs的一些生物学特性，为细胞心肌成形术提供新材料。方法 按照Nancer方法培养MSCs，用5-氮胞苷(5-aza)诱导，流式细胞仪检测细胞周期，并行结蛋白(desmin)、肌球蛋白重链(MHC)、心肌特异性肌钙蛋白I(cTnI)、连接蛋白-43(Cx-43)免疫组化鉴定。结果体外培养的原代MSCs10～14天达到融合，细胞周期显示80％的细胞处于G0／G1期；经5-aza刺激后，部分MSCs呈梭形，结蛋白、肌球蛋白重链、心肌特异性肌钙蛋白Ⅰ、连接蛋白-43免疫组化染色阳性。结论 猪MSCs在体外条件下生长稳定，传代后仍保持未分化状态，有分化成心肌的潜能，可作为细胞心肌成形术的材料。     

丹酚酸B干预内皮祖细胞对骨髓间充质干细胞向心肌分化早期基因表达的影响

目的 探讨中药丹酚酸B预处理的内皮祖细胞(EPCs)对急性心肌梗死(AMI)大鼠移植骨髓间充质干细胞(BMSCs)向心肌分化早期基因表达的影响.方法 密度梯度离心法和贴壁筛选法培养、纯化EPCs与BMSCs;免疫细胞化学法(CD34/CD133/CD44)分别鉴定两种细胞.结扎大鼠左冠状动脉,制作大鼠AMI模型,42只大鼠随机分为假手术组,模型组,BMSCs组,EPCs+BMSCs组,其中治疗组用丹酚酸B最佳药物浓度处理的EPCs与BMSCs混合,在大鼠AMI区周边分五点注射.RT-PCR检测心肌分化早期基因Nkx2.5、GATA-4表达.结果 细胞移植4 w后,EPCs+BMSCs组心肌Nkx2.5、GATA-4表达量分别为2.256±0.524和1.567±0.287,与对照组比较差异显著.结论 丹酚酸B预处理的EPCs联合BMSCs的移植上调了BMSCs向心肌分化过程中Nkx2.5、GATA-4基因的表达,对心肌细胞的数量增加有重要影响,从而有可能改善心功能.     

同种异体骨髓间充质干细胞移植兔心肌梗死区域的研究

本研究旨在探讨同种异体骨髓间充质干细胞(marrow derivedmesenchymalstemcells ,MSCs)直接心肌梗死 (MI)区域注射移植后 ,MSCs能否存活定居于MI区域、能否转化为心肌样细胞及血管组织细胞 ,进而改善心脏功能。材料与方法1.材料 :MSCs取自健康成年兔股骨骨髓 ,通过密度梯度法分离获得 ,DMEM 2 0 %胎牛血清培养扩增 ,每周 2次换液 ,生长至培养瓶 70 %时传代。流式细胞仪分析 :CD34(- ) 2 0 % ,CD4 5 (- )1 5 % ,CD2 9( ) 99 9% ,CD16 6 ( ) 78 8% ,CD117( ) 77 4 % ,符合MSCs标准[1,2 ] 。成年雄性纯种新西兰白兔 4 9只 ,分组…     

小型猪自体骨髓内皮祖细胞移植对心肌梗死后心室重构的影响

目的:观察小型猪自体骨髓内皮祖细胞(Endothelial progenitor cells,EPCs)体外培养扩增后移植对改善心肌梗死(MI)后心室重构的影响并探讨其可能的机制。方法:将22头小型猪采用经皮冠状动脉球囊堵闭法建立心前壁MI模型。将存活的17头动物喂养2周后,随机分为EPCs移植组(n=10)和对照组(n=7)。移植组EPCs分离并体外培养扩增1周后注入梗死相关血管,对照组分离EPCs后注入培养基至梗死相关血管。继续喂养4周后,采用超声心动图、左心室造影评价心脏结构和功能。用流式细胞仪测定梗死边缘区心肌细胞的凋亡率。结果:EPCs移植组的左心室舒张末内径(LVEDD)较移植前明显缩小(P0.01),左心室射血分数(LVEF)较移植前明显增加(P0.01);对照组的LVEDD较移植前有所增加(但P0.05),LVEF无明显变化。EPCs移植组梗死区室壁的厚度率和梗死边缘区细胞的凋亡率均较对照组明显降低(P0.05)。结论:EPCs移植治疗可减弱梗死后心室扩张和室壁变薄程度,减少心肌细胞凋亡,进而改善MI后心室重构过程。     

内皮祖细胞移植对兔心肌梗死后心功能的影响

目的:探讨移植内皮祖细胞(EPCs)对兔心肌梗死后心功能的影响。方法:通过密度梯度离心法体外分离兔单个核细胞,接种于人纤连蛋白包被的培养板上,并给予含血管内皮生长因子(VEGF)20μg/L的EBM-2完全培养液培养2周。取健康大耳白兔,结扎左冠状动脉前降支,并将制作心肌梗死模型成功的大耳白兔随机分为两组,即对照组和实验组,每组20只。2周后实验组心外膜下直接注射EPCs(1.6×1010/L)悬液,对照组注射无菌PBS液。此外,两组均给予心肌梗死后常规药物治疗。术后4周,分别行超声心动图检查和血浆脑钠肽(BNP)浓度测定及计数移植区毛细血管。结果:实验组左室舒张末期内径(LVEDD)与术前及对照组相比均无统计学差异,而实验组左室射血分数(LVEF)与术前及对照组相比有统计学差异(P0.05)。实验组血浆BNP水平较术前降低,差异有统计学意义(P0.01),且与对照组相比,血浆BNP水平明显降低(P0.05)。移植细胞4周后,实验组梗死边缘区毛细血管密度与对照组有显著性差异(P0.05)。结论:心外膜下直接注射移植EPCs能够改善兔心肌梗死后的心功能,延缓慢性心力衰竭的发生和发展。     

卡托普利联合美托洛尔对急性心肌梗死晚期左心室重构的影响

目的探讨急性心肌梗死(AMI)后应用卡托普利联合美托洛尔治疗与单用卡托普利治疗对晚期左心室重构的影响。方法将121例AMI患者随机分成治疗组(卡托普利联合美托洛尔)63例和对照组(卡托普利)58例,采用彩色多普勒心动超声仪分别于发病后早期(<24 h)、3、6个月末连续随访并测量、计算左心室形态、构型等多项指标。结果进行治疗组早期到6个月末前后比较,左心室形态均呈逐渐扩大,6个月末最大,对照组扩大程度更明显。对照组与治疗组同期对应比较,左心室形态逐渐扩大,6个月末最明显,且差异有显著性意义。同时左心室射血分数同组和两组间对应比较,均有明显改善(P<0.05,P<0.01)。结论AMI后应用卡托普利联合美托洛尔对晚期左心室重构的抑制作用明显优于单用卡托普利。     

氯沙坦对急性心肌梗死后心室重构的影响

目的:研究氯沙坦对急性心肌梗死后心室重构的影响。方法:符合入选标准的120例急性心肌梗死患者被随机均分为三组:氯沙坦组(A组)。卡托普利组(B组),常规治疗组(C组),分别于治疗前,治疗后6个月进行超声心动图检查。结果:对照组常规治疗后.左室舒张末容积(LVEDV)、左室射血分数(LVEF)、每搏量(SV)均进一步恶化(P<0.05),A、B组的LVEDV、LVEF、SV较C组则无显著恶化(P<0.05～<0.01).A组又好于B组(P<0.05)。结论:氯沙坦能明显改善急性心肌梗死后心室重构。     

贝那普利联合阿托伐他汀钙对急性心肌梗死后心室重构的影响及机制探讨

目的:观察贝那普利及阿托伐他汀钙对急性心肌梗死（AMI）后心室重构的影响。方法: 将符合标准AMI的患者74例随机分为对照组和观察组各37例。观察组在基础治疗基础上加用贝那普利及阿托伐他汀钙,对照组仅加贝那普利基础治疗,坚持服用24周,不能耐受贝那普利的改为替米沙坦。分析3 d和24周超声心动图的观察指标。结果: 观察组的左室收缩末期容积（LVESV）和左室舒张末期容积（LVEDV ）的下降幅度明显高与对照组;左室射血分数(LVEF)和左室快速充盈E波最大流速（VE）和心房充盈A 波最大流速(VA)比值（VE/VA）也明显高于对照组;左室心肌重量指数（LVMI）增高幅度显著小于对照组(均P<005)。结论: 贝那普利及阿托伐他汀钙抑制AMI后心室重构,改善心功能效应明显好于单用贝那普利。     

Prediction of left ventricular remodeling after acute myocardial infarction

Prediction of adverse left ventricular remodeling after acute myocardial infarction (AMI) may have important clinical implications. In this study, we evaluated the incidence of unfavorable changes of left ventricular volumes and ejection fraction after AMI. The ability of several cardiac markers, electrocardiographic and echocardiographic (including tissue Doppler) variables to predict adverse remodeling was demonstrated. The prognostic algorithm based on the investigated variables may help improve the treatment of patients after AMI.     

Endothelin-1 levels predict endothelial progenitor cell mobilization after acute myocardial infarction

IntroductionEndothelin-1 (ET-1), circulating endothelial cells (CEC) and endothelial progenitor cells (EPC) are well-known modulators of endothelial function with important cardiac effects after an acute myocardial infarction. However, the relationship between them has never been assessed.The objective of the present study was to establish the relationship between ET-1, CEC, and EPC concentrations after ST-elevation myocardial infarction (STEMI).MethodsEndothelin-1, CEC, and EPC levels were measured in 61 patients presenting with a first STEMI. Samples were withdrawn acutely 6–24 h and 1 week after admission. Assessments included reperfusion outcomes (angiography), left ventricular ejection fraction (echocardiography), and 30-day mortality.ResultsMean age was 60.6 ± 12.6 years and 45 (74%) were males. Higher ET-1 plasma levels were associated with lower EPC count after 1 week (7.45 ± 2.53 pg/ml if EPCs in the first quartile vs 5.72 ± 1.49 pg/ml if EPCs in the fourth quartile; P = 0.04).In contrast with CEC and EPC count, higher ET-1 concentrations on admission were associated with Killip ≥ 2 (9.92 ± 2.01 pg/ml vs 7.32 ± 2.13 pg/ml; P < 0.001), post-reperfusion thrombolysis in myocardial infarction (TIMI) < 3 (8.65 ± 2.86 pg/ml vs 5.87 ± 1.93 pg/ml; P = 0.002), myocardial blush grade (MBG) < 3 (7.46 ± 2.48 pg/ml vs 5.99 ± 2.01 pg/ml; P = 0.004) and higher 30-day mortality (10.29 ± 2.02 pg/ml vs 6.57 ± 2.20 pg/ml; P = 0.005).ConclusionsIn STEMI patients, high ET-1 levels on admission predict a lower EPC mobilization after 1 week. Endothelin-1 provides better clinical, angiographic and echocardiographic information for prognosis than do CEC and EPC concentrations.     

Effect of nitrates on myocardial remodeling after acute myocardial infarction

Nitrates are effective for the therapy of acute coronary syndromes, including acute myocardial infarction. Their application in acute infarction has established that vasodilators are beneficial provided hypotension is avoided. Nitrates limit early ventricular remodeling in infarction. New dosing strategies and formulations that permit chronic use after infarction with less tolerance might limit late remodeling. Over the last decade, the demonstrated effectiveness of angiotensin-converting enzyme (ACE) inhibitors in limiting ventricular dilation postinfarction has generated controversy over the usefulness of nitrates for that indication. The uncertainty has been intensified by 2 large mortality trials that tested both agents as adjuncts to conventional therapy. These trials were not designed to test whether nitrates might limit remodeling. Mechanistic experimental and clinical studies that tested whether nitrates or ACE inhibitors could effectively limit ventricular remodeling showed that both improved remodeling endpoints. However, experimental studies raise some concern about the decrease in infarct collagen associated with ACE inhibition and emphasize the fact that final outcome represents a balance of effects. That nitrates do not decrease infarct collagen could be important. Nitrate-induced early recruitment of ventricular function after late reperfusion of acute infarction might also be important. In the mortality trials, > 50% of patients received open-label nitrates as per indication. Thus, the trial results to date do not suggest that nitrates are ineffective for remodeling, but rather that ACE inhibitors can confer added benefit. There has been no large clinical trial to test the efficacy of nitrates for remodeling as there has been for ACE inhibitors.     

心脏肥大细胞与心肌梗死后心室重构

在心脏组织内,肥大细胞存在于心肌之间和靠近血管的位置.近年来对于心脏肥大细胞(CMC)在急性心肌缺血中作用的研究有升温之势.心肌梗死时,CMC数量增多功能处于活跃状态,并释放介质.随着心肌梗死后心肌的坏死,开始了大规模心室重构的调节过程.CMC释放的介质可以激活基质金属蛋白酶,后者参与了心肌梗死后的心室重构过程.目前有...     

急性心肌梗死后左室重构的诊断及干预

急性心肌梗死（AMI）后左室重构（VR）是梗死后心肌组织结构和心室功能变化的病理生理过程,影响梗死后患者的心脏血流动力学状态,并且是决定梗死后心脏事件发生率和远期预后的主要因素。