rhCD40L及阿司匹林对人Ⅰ型胶原α2(Ⅰ)链启动子活性表达的影响

目的探讨rhCD40L及阿司匹林对人I型胶原α2(I)链启动子活性的作用。方法体外培养人血管平滑肌细胞(VSMCs),人Ⅰ型胶原α2(Ⅰ)链基因启动子重组质粒pCOLH22.4和pCOLH21.6扩增和酶切鉴定后,通过脂质体(Lipofectamin)转染VSMCs,rhCD40L刺激转染后细胞,ELISA检测CAT目的基因表达以及阿司匹林(100μmol/L)的影响。结果rhCD40L使CAT目的基因表达下降;阿司匹林可以增加CAT目的基因表达,并逆转rh-CD40L诱导的CAT目的基因表达下降(P<0.05)。结论阿司匹林上调人I型胶原启动子活性表达,并且逆转rh-CD40L对人I型胶原启动子活性的下调作用,可能是其抗动脉粥样硬化和稳定斑块的机制之一。     

rhCD40L及阿司匹林对人Ⅰ型胶原α2(Ⅰ)链启动子活性表达的影响

目的 探讨rhCD40L及阿司匹林对人Ⅰ型胶原α2(Ⅰ)链启动子活性的作用.方法 体外培养人血管平滑肌细胞(VSMCs),人Ⅰ型胶原α2(Ⅰ)链基因启动子重组质粒pCOLH22.4和pCOLH21.6扩增和酶切鉴定后,通过脂质体(Lipofectamin)转染VSMCs,rhCD40L刺激转染后细胞,ELISA检测CAT目的基因表达以及阿司匹林(100μmol/L)的影响.结果 rhCD40L使CAT目的基因表达下降;阿司匹林可以增加CAT目的基因表达,并逆转rh-CD40L诱导的CAT目的基因表达下降(P＜0.05).结论 阿司匹林上调人Ⅰ型胶原启动子活性表达,并且逆转rh-CD40L对人Ⅰ型胶原启动子活性的下调作用,可能是其抗动脉粥样硬化和稳定斑块的机制之一.     

环氧合酶抑制剂和重组人CD40配体对人Ⅰ型胶原α2(Ⅰ)链启动子活性表达的影响

目的探讨重组人CD40配体及环氧合酶抑制剂对人Ⅰ型胶原α2(Ⅰ)链启动子活性的作用。方法体外培养人血管平滑肌细胞,人Ⅰ型胶原α2(Ⅰ)链基因启动子重组质粒pCOLH22.4和pCOLH21.6扩增和酶切鉴定后,通过脂质体转染血管平滑肌细胞,重组人CD40配体刺激转染后细胞,酶联免疫吸附法检测CAT报告基因表达以及阿斯匹林(环氧合酶1抑制剂)和NS-398(环氧合酶2抑制剂)对其的影响。结果重组人CD40配体使CAT报告基因表达下降;阿斯匹林和NS-398均可以增加CAT报告基因表达,并逆转重组人CD40配体诱导的CAT报告基因表达下降,NS-398的作用强于阿斯匹林(P<0.05)。结论重组人CD40配体对人Ⅰ型胶原α2(Ⅰ)链启动子活性的作用部分与环氧合酶通路有关。     

细胞因子和氯沙坦对人α1I型胶原基因启动子活性的调控

目的：探讨转化生长因子β1（TGFβ1）和血小板源生长因子（PDGF）对人α1I型胶原基因启动子活性的调控作用和氯沙坦药物干预的影响环节。方法：将不同长度的人α1I型胶原基因启动子片段与氯霉素乙酰基转移酶（CAT）“报告基因”组成重组体pCOLH1.5和pCOLH2.5,采用脂质体法转染至培养的大鼠肾小球系膜细胞,分别加入不同浓度的TGFβ1、PDGF、血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）和氯沙坦,ELISA法测定CAT活性。结果：TGFβ1表现为剂量依赖性地促进pCOLH1.5和pCOLH2.5的活性,与对照组比较差别有非常显著性意义（P＜0．01）。PDGF（10－25μg/L）未发现有明显影响（P＞0．05）,AngⅡ则具有促进其活性作用。氯沙坦不但能抑制两个重组体的CAT表达,和AngⅡ共同作用时,pCOLH2.5CAT的升高幅度明显减少（P＜0．01）。结论：在肾小球系膜细胞中,TGFβ1具有促进人α1I型胶原基因启动子的转录活性,PDGF则未发现有显著促进或抑制效应。氯沙坦能下调人α1I型胶原基因启动子的激活,并可部分拮抗AngⅡ的促进作用。     

细胞因子和氯沙坦对人α1Ⅰ型胶原基因启动子活性的调控

目的探讨转化生长因子β1(TGF β1)和血小板源生长因子(PDGF)对人α1 Ⅰ型胶原基因启动子活性的调控作用和氯沙坦药物干预的影响环节.方法将不同长度的人α1 I型胶原基因启动子片段与氯霉素乙酰基转移酶(CAT)"报告基因"组成重组体 pCOLH 1.5和pCOLH 2.5,采用脂质体法转染至培养的大鼠肾小球系膜细胞,分别加入不同浓度的TGF β1、PDGF、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)和氯沙坦,ELISA法测定CAT活性.结果 TGF β1表现为剂量依赖性地促进pCOLH 1.5和pCOLH 2.5的活性,与对照组比较差别有非常显著性意义(P＜ 0.01).PDGF(10～25 μg/L)未发现有明显影响(P＞ 0.05),AngⅡ则具有促进其活性作用.氯沙坦不但能抑制两个重组体的CAT表达,和AngⅡ共同作用时,pCOLH 2.5 CAT的升高幅度明显减少(P＜ 0.01).结论在肾小球系膜细胞中,TGF β1具有促进人α1 Ⅰ型胶原基因启动子的转录活性,PDGF则未发现有显著促进或抑制效应.氯沙坦能下调人α1 Ⅰ型胶原基因启动子的激活,并可部分拮抗AngⅡ的促进作用.     

己酮可可碱对人α1(Ⅰ)前胶原基因启动子活性的影响

目的探讨己酮可可碱（pentoxifylline,PTX）对人α1(Ⅰ)前胶原（COL1A1）基因启动子活性的作用及其机制。方法构建含人COL1A1基因启动子序列-2483～+42bp片段与氯霉素乙酰基转移酶（CAT）报告基因的重组体pCOLH2.5,将其瞬时转染至人皮肤成纤维细胞,加入PTX或/和胰岛素样生长因子-1（IGF-1）及胰岛素,测定CAT活性。结果0.4mmol/L、2mmol/L和10mmol/L的PTX使pCOLH2.5的活性降至对照的（82±9）%、（58±8）%与（32±13）%。IGF-1与胰岛素能促进pCOLH2.5的活性。PTX能拮抗IGF-1与胰岛素的这一促进作用。结论PTX能下调人COL1A1启动子的活性,而IGF-1与胰岛素能上调该启动子的活性。PTX能拮抗IGF-1与胰岛素的这一上调作用。     

全反式视黄酸对人α1(Ⅰ)前胶原启动子活性的作用

目的探讨全反式视黄酸(t -RA)对人α1(Ⅰ)前胶原(COL1A1)启动子的调控作用,以及胰岛素样生长因子1(IGF-1)与胰岛素对这一调控作用的影响.方法构建含人C OL1A1启动子序列2483～+42bp片段与氯霉素乙酰基转移酶(CAT)报告基因的重组体pCOLH2.5.用Fugene转染试剂瞬时转染至人皮肤成纤维细胞,加入t-RA或(和)IGF-1及胰岛素,测定CAT活性.结果 2μmol@L1与10μmol@L-1 t-RA使pCOLH2.5的活性降至对照的79%±7%与29%±6%.IGF-1与胰岛素能促进pCOLH2.5的活性.t-RA能降低IGF-1与胰岛素的这一促进作用.结论 t -RA能下调人COL1A1启动子的活性,而IGF-1与胰岛素能上调该启动子的活性.t -RA能降低IGF-1与胰岛素的这一上调作用.     

CD40L刺激诱导型环氧合酶表达及普伐他汀的作用

目的探讨重组人CD40配体（rhCD40L）对培养的人单核细胞（U937）表达诱导型环氧合酶（COX-2）的作用和普伐他汀对其影响。方法体外培养U937细胞,以0.05、0.1、0.2μg/m l的rhCD40L分别刺激24 h;0.4μg/m l的rhCD40L分别刺激3、6、12、24 h;终浓度10、1、0.1 mmol/L的普伐他汀与0.4μg/m l的rhCD40L共同刺激U937细胞24 h。RT-PCR检测COX-2 mRNA表达,W estern-b lot检测COX-2蛋白表达,ELISA法检测前列腺素E2（PGE2）的浓度反映COX-2酶活性。结果0.4μg/m l的rhCD40L刺激后3 h可诱导COX-2 mRNA和蛋白表达,随着rh-CD40L浓度和作用时间增加,COX-2 mRNA和蛋白表达显著增加（P<0.01）,且呈时效和量效关系;同样,rhCD40L以时间和剂量依赖的方式增加U937细胞中PGE2的合成。0.4μg/m l的rhCD40L与普伐他汀共同刺激24 h后,COX-2的表达显著被抑制。结论rhCD40L以时间和浓度依赖的方式诱导COX-2的表达,普伐他汀可以抑制此作用。     

吡喹酮异构体对肝星状细胞系LX⁃2增殖及活化的作用

目的　观察左旋吡喹酮（L⁃PZQ）和右旋吡喹酮（D⁃PZQ）体外对人肝星状LX⁃2细胞系增殖及活化的作用差异。方法　利用转化生长因子⁃β（TGF⁃β）刺激激活LX⁃2细胞;采用CCK⁃8法检测以0 ~ 50 μg/mL梯度浓度吡喹酮刺激24 h后的LX⁃2细胞增殖情况;采用实时荧光定量PCR（qPCR）和免疫印迹试验检测15 mg/mL吡喹酮刺激LX⁃2细胞24 h 后的Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原和α⁃平滑肌肌动蛋白（α⁃SMA）基因表达水平和48 h后蛋白表达水平,以分析LX⁃2细胞活化情况。结果　L⁃PZQ和D⁃PZQ两药物各浓度组LX⁃2细胞存活率差异均有统计学意义（F = 6.119、79.180,P均< 0.05）;药物浓度< 30 μg/mL时,L⁃PZQ和D⁃PZQ对激活型LX⁃2增殖能力均无显著影响（P均> 0.05）;L⁃PZQ浓度> 50 μg/mL和D⁃PZQ浓度> 40 μg/mL时,均对激活型LX⁃2增殖能力产生抑制作用（P均< 0.05）;D⁃PZQ浓度为40 μg/mL和50 μg/mL时,对激活型LX⁃2增殖的抑制作用均强于L⁃PZQ（t = 3.419、8.776,P均< 0.05）。空白组、TGF⁃β诱导组、L⁃PZQ组和D⁃PZQ组LX⁃2细胞中Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原和α⁃SMA基因（F = 21.55、79.99、46.70,P 均< 0.05）和蛋白表达水平（F = 20.12、30.29、32.93,P 均< 0.05）差异均有统计学意义。L⁃PZQ对激活型LX⁃2细胞中Ⅲ型胶原和α⁃SMA基因表达水平具有显著抑制作用（P均< 0.05）,但对Ⅰ型胶原基因表达水平及Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原和α⁃SMA蛋白表达水平均无显著影响（P均> 0.05）;D⁃PZQ对激活型LX⁃2细胞中Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原和α⁃SMA基因和蛋白表达水平均有显著抑制作用（P均< 0.05）;D⁃PZQ对激活型LX⁃2细胞中Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原和α⁃SMA基因表达抑制作用强于L⁃PZQ（P均< 0.05）。结论　L⁃PZQ和D⁃PZQ对LX⁃2细胞增殖及活化均有一定抑制作用,且D⁃PZQ的抑制作用强于L⁃PZQ。     

诱导型环氧合酶-2在CD40配体诱导基质金属蛋白酶表达中的作用

目的: 探讨重组人CD40配体（rhCD40L）诱导U937细胞中基质金属蛋白酶（MMPs）表达的作用及其与诱导型环氧合酶-2(COX-2)途径的关系。方法: 体外培养U937细胞,以不同浓度（0.1、0.2、0.4 mg/L）的rhCD40L和不同浓度（10-5 mol/L、10-4 mol/L、10-3 mol/L）的COX-2特异性抑制剂(NS-398)分别刺激24 h。在加入终浓度为0.4 mg/L rhCD40L的基础上,加入终浓度为10-4 mol/L的NS-398,共同刺激U937细胞24 h后,收集培养上清液,用酶谱法测定MMPs的活性。结果: rhCD40L可使MMP-2和MMP-9的活性明显增加（P<0.01）,且呈剂量依赖性;NS-398可抑制MMP-2和MMP-9的活性,且抑制作用随剂量的增加而增强（P<0.05）。结论: rhCD40L以浓度依赖的方式诱导MMPs表达,rhCD40L对MMPs的诱导作用可能与COX-2途径有关。     

肾上腺素受体激动剂对基质金属蛋白酶基因转录的影响

目的从细胞水平了解肾上腺素受体对基质金属蛋白酶（MMP）的调控机制。方法构建含MMP-9启动子区的乙酰基转移酶（CAT）报告基因质粒，转染人脐静脉内皮细胞系ECV304细胞，测定肾上腺素受体激动剂刺激后报告基因的CAT活性。结果重组质粒转染ECV304细胞后，加入苯肾上腺素（PE，α肾上腺素受体激动剂）和异丙肾上腺素（ISO，β肾上腺素受体激动剂）后，含MMP-9启动子区域（-1285～＋1）和截短（-523～＋1）区域的转染细胞报告基因表达上调，但前者更为明显。PE与ISO的反应强度和变化曲线有较大差异，ISO峰值在4h反应强度为80倍，而PE为逐步上升，至24h达到最大值。结论肾上腺素受体与MMP活性之间存在着明显的相关性，为老年心血管病的进一步临床和实验研究提供了信息。     

脂肪酸影响血管内皮细胞纤溶酶原激活物抑制剂-1表达的机制初探

目的 探讨脂肪酸影响血管内皮细胞纤溶酶原激活物抑制剂－1 机制。方法 以PAI－1启动子控制表达氯霉素转移乙酰酶（CAT）报告基因的重组质粒－PAI－pCAT转染人血管内皮细胞株ECV304，并且部分共转染不同量的过氧化增殖物激活型肥体（PPAR）α或PPARγ表达载体。分别以亚麻酸，亚油酸，油酸，硬脂酸诱导转染细胞，酶联免疫吸附CAT表达量显示启动子片面转录活性。结果 亚麻酸，亚油酸，油酸诱导以及增加PPARα表达可提高PAI－1启动子转录活性，硬脂酸诱导和增加PPARγ表达无影响。结论 不饱和脂肪酸可通过提高PAI－1转录活性诱导其在血管内皮细胞的表达，此作用涉及PPARγα对PAI-1基因转录的诱导调节。     

三氧化二砷对细胞周期素B2基因转录水平的上调作用

目的探讨三氧化二砷（As2O3）对细胞周期素B2启动子（cyclinB2p）转录水平的调节作用。方法根据文献确定cyclinB2的启动子区域，聚合酶链反应（PCR）扩增cyclinB2p，克隆至真核报告载体pCAT3-Basic中，构建pCAT3-cyclinB2p报告载体；以该质粒转染人肝HepG2细胞，用酶联免疫吸附法（ELISA）检测氯霉素乙酰转移酶（CAT）的表达活性；并以不同剂量（5、10、50、100μmol／L）的As203刺激HepG2细胞，用ELISA法检测CAT的表达活性。结果正确克隆了cyclinB2p。用5～50μmol／L的As203刺激pCAT3-cyclinB2p转染的HepG2细胞，CAT活性有剂量-反应关系；10μmol／LAs20，刺激pCAT3-cyclinB2p瞬时转染的HepG2细胞后，报告基因CAT的表达活性为pCAT3-Basic空载体的5-84倍（0．485／0．083），是报告载体pCAT3-cyclinB2p的1．95倍（0．485／0．249）。结论克隆的cyclinB2p有顺式激活下游基因表达的活性；一定剂量的As2O3对HepG2细胞cyclinB2有上调作用。     

ApoAⅠ/ABCA1通过STAT3/TTP途径调节炎症因子mRNA降解

目的观察ApoAⅠ对脂多糖(LPS)诱导的THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞炎症因子表达的影响,并从ABCA1介导激活的STAT3/TTP信号途径入手探讨其分子机制。方法采用ELISA检测炎症因子表达;构建含肿瘤坏死因子α(TNF-α)启动子的CAT报告基因,转染THP-1细胞,采用ELISA检测TNF-α启动子活性;定量PCR检测TNF-α等炎症因子mRNA表达;免疫印迹技术检测pSTAT3、TTP和HuR等蛋白表达;RNA-EMSA检测TTP与RNA复合物;构建TTP、STAT3 siRNA,转染细胞。结果用10μg/L LPS和/或10 mg/L ApoAⅠ处理THP-1源性泡沫细胞4 h,结果显示ApoAⅠ明显抑制LPS诱导的TNF-α、IL-1β和IL-6的表达;CAT报告基因显示,ApoAⅠ并不明显影响LPS诱导的TNF-α启动子活性;LPS处理细胞3 h,加入放线菌素D(Act D)终止转录,检测TNF-αmRNA表达量(0、30、60及120 min),结果显示ApoAⅠ明显增加LPS作用下TNF-α的mRNA降解;ApoAⅠ明显促进LPS作用下TTP的表达,而对HuR的表达没有明显影响,TTP ...     

风湿性心脏病瓣膜胶原及转化生长因子β1改变的初步研究

为了解风湿性心脏病（风心病）病变二尖瓣和主动脉瓣组织中Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原及转化生长因子β１（ＴＧＦ－β１）基因表达的改变。用斑点杂交法测定９例风心病人和３例尸检中除外心血管病与胶原系统疾病者的二尖瓣和主动脉瓣中Ⅰ型胶原α１链［α１（Ⅰ）］ｍＲＮＡ、Ⅲ型胶原α１链［α１（Ⅲ）］ｍＲＮＡ、ＴＧＦ－β１ｍＲＮＡ的含量。结果显示：以对照组值为１．００，风心病人二尖瓣α１（Ⅰ）ｍＲＮＡ为２．３１±０．４８（Ｐ＜０．０１），α１（Ⅲ）ｍＲＮＡ为１．５９±０．１７（Ｐ＜０．０１），ＴＧＦ－β１ｍＲＮＡ为１．５７±０．２１（Ｐ＜０．０１）；主动脉瓣的结果分别为２．１０±０．４９（Ｐ＜０．０１），１．６６±０．２７（Ｐ＜０．０１），１．５２±０．１８（Ｐ＜０．０１）。结论：提示风心病病变瓣膜成纤维细胞胶原基因表达增强，使胶原合成增加，导致瓣膜纤维化。ＴＧＦ－β１基因表达增强的意义尚需进一步研究。     

内质网应激PERK途径在高糖诱导血管平滑肌细胞向成骨样细胞转化中的作用

目的：研究高糖刺激SD大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞（VSMCs）向成骨样细胞转分化中内质网应激蛋白激酶R样内质网激酶（PERK）途径的作用。方法原代培养VSMCs,分为正常对照组（5mmol/L D-葡萄糖）,甘露醇组（5mmol/L D-葡萄糖＋25mmol/L甘露醇）,高糖组（30mmol/L D-葡萄糖）,高糖＋PERK-小干扰RNA（siRNA）转染组（30mmol/L D-葡萄糖＋PERK-siRNA转染）,高糖＋RNA干扰阴性对照组（30mmol/L D-葡萄糖＋乱序RNA转染）。分别作用48和72h。逆转录-聚合酶链反应及Western blot分别从信使RNA（mRNA）和蛋白质水平检测不同时间点内质网应激相关分子GRP78、PERK、p-PERK、eIF2α、p-eIF2α、ATF4的改变,以及成骨样细胞标志性分子核心转录因子（Cbfα-1）、骨钙素以及平滑肌细胞标志性分子α-SMA的改变情况。应用碱性磷酸酶（ALP）活性检测试剂盒检测ALP的活性。结果与正常对照组和甘露醇组比较,在mRNA水平,高糖组和高糖＋RNA干扰阴性对照组PERK和eIF2α表达升高（P＜0.05）,PERK-siRNA转染后其表达水平均降低（P＜0.05）,在蛋白质水平,PERK、p-PERK、eIF2α、p-eIF2α表达升高（P＜0.05）,PERK-siRNA干预后其表达均降低（P＜0.05）。高糖刺激VSMCs后ALP活性升高（P＜0.05）,PERK-siRNA转染后其表达均降低（P＜0.05）。结论内质网应激PERK途径在高糖诱导VSMCs由收缩表型向成骨样细胞表型转化中发挥作用,抑制PERK途径可以部分阻止这一转化过程。     

表达谱基因芯片技术研究膦甲酸钠上调细胞凋亡蛋白酶激活因子-1基因的表达

目的：了解膦甲酸钠(PFA)与细胞凋亡蛋白酶激活因子-l(APAF-1)基因启动子的关系，为PFA的作用机制提供理论依据。方法：应用基因表达谱芯片技术对于膦甲酸钠刺激Jurkat细胞之后的基因表达谱进行研究。聚合酶链反应(PCR)扩增APAF-1基因启动子，命名为APAF-P。以T-A克隆法，将APAF-P基因片段连入载体pGEM-T。将获得的质粒pT-APAF-P，与报告质粒pCAT3-basic分别用KpnⅠ和NheⅠ双酶切后构建APAF-l启动子报告基因表达载体pCAT3-APAF-P，以重组表达质粒pCAT3-APAF-P瞬时转染Jurkat细胞，以转染pCAT3basic的Jurkat细胞为阴性对照，PFA刺激后24小时收获细胞。用酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞中氯霉素乙酰转移酶(CAT)的表达活性。结果：表达谱基因芯片研究结果表明，PFA可上调APAF-l基因表达水平达2．815倍。构建的报告载体pCAT3-APAF-P经过序列分析和酶切鉴定正确。pCAT3-APAF-P和PFA瞬时转染的Jurkat细胞的CAT表达活性是CAT3空载体的4．9倍，pCAT3-Weep的2．9倍。结论：PFA可以上调APAF-l启动子的活性，进而上调APAF-l基因的表达。为深入了解PFA的免疫调节作用及其在病毒的清除过程中的作用机制提供新的理论依据。     

丹参酸乙对转化生长因子β1刺激的大鼠肝星状细胞的观察

目的 探讨丹参酸乙（SAB）对转化生长因子β1（TGFβ1）刺激的大鼠肝星状细胞活化、Ⅰ型胶原及c-fos基因表达的影响。方法 原位灌注、消化大鼠肝脏,分离肝星状细胞。以不同浓度SAB温TGFβ1刺激的大鼠肝星状细胞。异硫氰酸胍一步法提取细胞总RNA,RT－PCR法检测目的基因的表达。结果 1μmol/L SAB和10μmol/L SAB可分别抑制Ⅰ型胶原及c-fos基因表达,但1μmol/L SAB和10μmol/L SAB对SM α-actin mRNA均无显著影响。结论 TGFβ1对体外活化的大鼠肝星状细胞表达SM α-actin mRNA无明显影响,可促进Ⅰ型胶原和c-fos mRNA的表达。SAB可抑制TGFβ1促进细胞Ⅰ型胶原mRNA表达的作用。     

姜黄素激活PPARγ下调肝星状细胞α-SMA和Ⅰ型胶原的基因表达

[目的]研究姜黄素抑制大鼠肝星状细胞（HSC）活化作用与过氧化物酶体增殖因子活化受体γ（PPARγ）信号转导途径之间的关系。[方法]肝脏原位灌流酶消化、Nycodenz密度梯度离心方法分离培养大鼠HSC，并使用姜黄素对细胞进行相应处理，采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色分析法检测姜黄素对细胞增殖的影响。收集裂解细胞并抽提细胞总RNA，采用半定量RT-PCR检测姜黄素处理对α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）和Ⅰ型胶原的基因表达水平的影响。[结果]姜黄素在10-50μmol／L范围内呈剂量依赖性抑制体外培养大鼠传代HSC的增殖，且能在基因水平显著降低α-SMA（P〈0．05）和Ⅰ型胶原的基因表达水平（P〈0．01）。这些作用均可以被PPARγ特异性阻断剂GW9662阻断。[结论]姜黄素抑制HSC增殖、活化和合成Ⅰ型胶原的作用依赖于PPARγ信号转导途径的激活。     

乙型肝炎表面抗原基因启动子ⅠDNA结合蛋白1对诱导型一氧化氮合酶基因启动子转录活性的双向调节

目的探讨HBV表面抗原基因启动子ⅠDNA结合蛋白1（SBP1）对诱导型一氧化氮合酶（iNOS）基因启动子转录的凋节作用。方法利用生物信息学技术确定iNOS基因的启动子区域（iNOSp）和3个缺失突变体的基因序列，PCR分别扩增iNOSp和3个缺失体的基因序列，分别克隆至报告基因表达载体pCAT3-Basic中，构建pCAT3-iNOSp报告载体；以构建的这4种报告质粒分别转染人肝母细胞瘤细胞系HepG2，用ELISA检测氯霉素乙酰转移酶（CAT）的表达活性；并与构建的真核表达载体pcDNA3．1（-）-HBVSBP1共转染HepG2细胞系，用ELISA检测CAT的表达活性。结果成功获得iNOS基因启动子和3个缺失突变体的正确克隆，其中pl—iNOSp和pcDNA3．1（-）-HBVSBP1瞬时共转染HepG2细胞时，iNOS启动子的转录活性上升1．54倍；p3-iNOSp启动子和pcDNA3．1（-）-HBVSBP1瞬时共转染HepG2细胞时，iNOS启动子的转录活性下降31．3％，重复实验得到相似结果。结论克隆的新基因SBP1在细胞内的表达，对iNOS基因反式激活iNOS启动子的转录活性具有明显的双向凋节作用，双向调节的部位是iNOS启动子的核因子（NF）-IL6、A-激活域结合位点（AABS）和NF-κB这3个结合位点。