脑冷冻伤脑水肿时膜磷脂代谢障碍的实验研究

采用兔脑冷冻伤实验模型研究脑水肿时膜磷脂代谢障碍。检测脑冷冻伤后1min、30min、6h、24h冷冻灶周围脑组织膜磷脂花生四烯酸代谢产物的变化规律。发现冷冻伤后极早期病灶周围脑组织TXB_2。显著升高(P<0.01),6-Keto-PGF_(1α)亦升高(P<0.02),但T/6比值严重失调,早期猛增10倍。同时期内,冷冻灶周围脑组织水含量递增。伊文思蓝染色至30min组才蓝染,并随时相增剧。研究结果提示脑冷冻伤后早期出现冷冻灶周围脑细胞膜磷脂代谢障碍。     

Nimodipine对冷冻伤性脑水肿的脑保护作用

本文观察了冷冻伤性脑水肿不同时间大鼠脑含水量和伊文思蓝(EB)含量的变化,脑含水量与EB含量之间的关系;以及尼莫地平(Nimodipine,Nim)对冷冻伤性脑水肿脑含水量和EB含量的影响。结果表明:冷冻伤脑含水量和EB含量明显升高,应用Nim治疗后,脑组织水分含量和EB含量明显降低,脑水肿减轻。这为临床颅脑损伤应用Nim治疗提供理论依据。     

冷冻诱导的脑外伤性脑水肿模型

本文报道用改良 Klatzo 法建立冷冻诱导的免脑外伤性脑水肿模型。通过测定脑组织H_2O、Na~ 、K~ 、Ca~(2 )含量,伊文思蓝染色、光镜、电镜检查,发现冷冻伤后早期出现脑细胞内水肿,继以血脑屏障破坏脑细胞外水肿,并随时相递剧。同时脑组织 Na~ 、Ca~(2 )含量渐升高、K~(?)减少,文中介绍建立稳定的兔脑冷冻伤脑水肿模型的经验,并建议供创伤性脑水肿脑细胞代谢障碍研究之用。     

水通道蛋白4在大鼠脑缺血再灌注损伤中的作用

目的研究水通道蛋白4(AQP4)在缺血再灌注损伤大鼠脑内表达及作用。方法以大脑中动脉线栓法建立大鼠缺血再灌注模型,采用干湿法测定模型的脑组织含水量及伊文氏蓝含量;免疫蛋白印记(WesternBlot)技术分析在缺血再灌注不同时程脑内AQP4的表达情况,以及AQP4与脑含水量和伊文氏蓝水平的相关性,并与对照组比较。结果与对照组相比,实验组大鼠脑组织含水量及伊文氏蓝水平在缺血再灌注后不同时间点明显高于对照组(P<0.05～0.01);AQP4蛋白表达明显增高(均P<0.05),并随着缺血再灌时间的延长,其表达量亦逐渐增加,在再灌后24～48h达到高峰。缺血再灌注后AQP4脑内的表达与脑组织含水量及伊文氏蓝水平呈正相关(r=0.38、r=0.45,均P<0.05)。结论AQP4的高表达参与了脑缺血再灌注后继发的血脑屏障的开放和脑水肿的发生,是脑水肿产生的重要分子基础。     

大剂量激素治疗创伤性脑水肿的动物实验研究

本文报道了大剂量激素治疗创伤性脑水肿的动物实验结果。SD 雄性大鼠52只,随机分为4组,按自由落体法致大鼠脑挫裂伤后,分别一次静脉注射甲基强的松龙30mg/kg,地塞米松5mg/kg,地塞米松0.5mg/kg 和等量生理盐水。6小时后取脑测定脑肿胀、创伤侧伊文氏蓝增量和伊文氏蓝表面蓝染直径,脑水肿标本送光镜和电镜检查。结果显示创伤早期应用大剂量激素可减轻脑水肿,减少蛋白渗出,为临床应用提供参考价值。     

雪莲黄酮对大鼠创伤性脑水肿的治疗作用及其机制的初步研究

目的研究雪莲黄酮对大鼠创伤性脑水肿的治疗作用及其机制。方法采用液压冲击法制作大鼠脑创伤模型,用雪莲黄酮注射液进行治疗。治疗后不同时间取伤灶及其周围脑组织进行含水量和与脂质过氧化有关的一些指标进行检测。结果脑创伤后6h、24h及3d伤灶及其周围脑组织中含水量及丙二醛含量明显增加(P<0.01),而超氧化物岐化酶含量明显减少(P<0.01),但雪莲黄酮能逆转上述变化。结论雪莲黄酮对大鼠创伤性脑水肿有一定的治疗作用,作用机制可能与其抗脂质过氧化作用有关。     

急性局灶性脑挫裂伤后大鼠血脑屏障改变的实验研究

目的:研究急性局灶性脑挫裂伤后大鼠血脑屏障的改变及对脑水肿的影响。方法:采用Feeney's自由落体撞击法建立急性局灶性脑挫裂伤模型。每组6只测量伤侧脑组织伊文思蓝(Evans Blue,EB)含量、脑组织含水量。每组3只电镜观察微血管内皮细胞超微结构改变。结果:急性局灶性脑挫裂伤后24h脑组织含水量为(79.79±0.83)%,与正常对照组(78.68±0.63)%相比有明显差异(P<0.01),脑损伤后6h脑组织中EB含量为(362.12±28.16)ug/g,与正常对照组(11.89±2.28)ug/g相比有明显差异(P<0.01);脑损伤后30min,微血管内皮细胞有轻度受损迹象,伤后3h毛细血管腔内有微绒毛形成,伤后6h微绒毛增多,伤后24~72h毛细血管腔明显狭窄。结论:脑含水量的变化与脑组织中EB含量变化不同步,BBB的开放先于脑水肿的形成。BBB的开放与微血管的机械性损伤、内皮细胞吞饮小泡增加、内皮细胞紧密连接中断有关,也与早期缺血、缺氧关系密切。     

L─精氨酸甲酯及L─精氨酸对冷冻伤脑水肿的影响

利用液氮杯局部冷冻大鼠顶叶脑组织复制脑水肿模型，观察NO合酶（NOS）的特异性抑制剂L－精氨酸甲酯（L—NAME）及合成NO的底物L－精氨酸（L—ARG）对脑冷冻伤后脑水肿的影响。结果发现：局部冷冻伤脑水肿具有一般水肿的特征，冷冻伤后脑水肿指数升高，血脑屏障破坏，伊文氏兰渗出明显增加。L—NAME可不同程度地使脑水肿及血脑屏障破坏有所减轻，而L—ARG可逆转L—NAME所致的效应，并有加重脑水肿的倾向。我们的实验表明，NO是致大鼠冷冻伤脑水肿的一重要因素。     

L─精氨酸甲酯及L─精氨酸对冷冻伤脑水肿的影响

利用液氮杯局部冷冻大鼠顶叶脑组织复制脑水肿模型，观察NO合酶（NOS）的特异性抑制剂L－精氨酸甲酯（L—NAME）及合成NO的底物L－精氨酸（L—ARG）对脑冷冻伤后脑水肿的影响。结果发现：局部冷冻伤脑水肿具有一般水肿的特征，冷冻伤后脑水肿指数升高，血脑屏障破坏，伊文氏兰渗出明显增加。L—NAME可不同程度地使脑水肿及血脑屏障破坏有所减轻，而L—ARG可逆转L—NAME所致的效应，并有加重脑水肿的倾向。我们的实验表明，NO是致大鼠冷冻伤脑水肿的一重要因素。     

黄体酮对局灶性脑缺血再灌注大鼠水通道蛋白-4表达及血脑屏障通透性的影响

目的研究黄体酮对大鼠局灶性脑缺血再灌注后脑组织内水通道蛋白-4(AQP4)的表达及血脑屏障通透性的影响。方法健康雄性SD大鼠96只,随机分为4大组:假手术组、手术组、溶剂治疗组和黄体酮治疗组,建立大脑中动脉栓塞再灌注(MCAO/R)模型,分别在缺血2h再灌注6h、1d、3d、5d 4个时间点将大鼠麻醉后断头取脑,采用Western blot法、伊文氏蓝(EB)渗出量及干湿重法分别测定脑组织AQP4的表达、血脑屏障的通透性及脑含水量。结果手术组AQP4的表达、EB的含量及脑组织含水量明显高于假手术组;黄体酮组AQP4的表达、EB的含量及脑组织含水量较手术组及溶剂组明显降低,差异有统计学意义。结论黄体酮可以降低缺血再灌注大鼠脑组织AQP4的表达,从而降低血脑屏障的通透性,减轻脑水肿。     

磁共振成像评估丁苯酞软胶囊对创伤性脑水肿大鼠的治疗作用

目的运用磁共振成像探索大鼠创伤性脑水肿的演变规律及丁苯酞软胶囊对其的治疗作用。方法 SD雄性大鼠175只。随机分为非干预组、干预组和正常对照组。采用Marmarou法制作创伤性脑水肿大鼠模型,造模成功后分别于6 h、12 h、1 d、3 d、7 d行磁共振成像扫描、HE染色、脑组织含水量测定、伊文思蓝渗出量测定。结果磁共振成像、HE染色、和脑组织含水量测定结果提示与对照组相比,非干预组和干预组脑组织可见明显脑水肿,其中以损伤后24 h最明显,3 d后开始减轻。干预组较非干预组脑水肿程度明显减轻。伊文思蓝渗出检测提示,创伤性脑损伤后伊文思蓝渗出量增多,其中以6 h渗出量最多。非干预组较干预组渗出明显。结论创伤性脑损伤后,继发血管源性脑水肿和细胞毒性脑水肿,其中以1 d时脑水肿最明显,丁苯酞软胶囊能明显减轻脑损伤后脑水肿的形成。     

亚低温对实验性脑出血后水通道蛋白4表达及脑水肿的影响

目的研究亚低温对脑出血后水通道蛋白4(AQP4)表达及脑水肿的影响,探讨亚低温对出血性脑水肿的作用机制。方法在大鼠苍白球注射胶原酶制作脑出血模型,用冰块降温及白炽灯照射加温的方法调节体温;应用免疫组化方法检测脑组织AQP4表达,采用干湿重法观察脑含水量的动态变化。结果脑出血模型大鼠病灶侧脑含水量、血肿周围AQP4的表达水平明显高于假手术组(均P<0.001);各个时间点亚低温组大鼠病灶侧脑含水量以及血肿周围AQP4的表达水平均明显低于对照组(P<0.05～0.01);AQP4表达水平与脑含水量呈正相关(r=0.977,P<0.001)。结论亚低温能明显减轻脑出血后脑水肿及AQP4的表达,亚低温可能通过抑制AQP4的表达而减轻脑水肿。     

IL-8单抗对颅脑损伤后继发性脑损害的保护作用

目的　观察抗IL 8单抗对兔脑损伤后脑内炎症反应的抑制作用 ,以及对血脑屏障通透性和创伤性脑水肿的影响 ,探讨颅脑损伤后继发性脑损害新的治疗方法。方法　采用自由落体兔脑损伤模型 ,观察家兔抗IL 8单抗治疗前后脑组织中IL 8表达、中性粒细胞 (PMNL)浸润有无变化 ,同时检测脑组织含水量的变化 ,并用胶体金示踪 ,电镜观察抗IL 8单抗使用前后血脑屏障通透性有无改善。结果　抗IL 8单抗治疗组与对照组相比 ,伤后脑组织中IL 8无表达 ,PMNL浸润也明显减少 (P <0 .0 1 ) ,血脑屏障通透性降低 ,脑含水量下降 (P <0 .0 5)。结论　颅脑损伤后早期给予抗IL 8单抗治疗 ,可抑制IL 8的表达 ,抑制IL 8趋化PMNL的作用 ,减少组织中PMNL的浸润 ,减轻脑损伤后脑内炎症反应 ,降低血脑屏障通透性 ,减轻创伤性脑水肿 ,从而改善继发性脑损害。     

丁苯酞对局灶性脑梗死大鼠脑水肿及咬合蛋白表达的影响

目的探索丁苯酞对局灶性脑梗死大鼠脑水肿及咬合蛋白表达的影响。方法随机选取成年Sprague-Dawley雄性大鼠125只,分为对照组、模型组和丁苯酞组。丁苯酞组给予丁苯酞软胶囊灌胃。观察不同时间点大鼠脑水肿面积、脑组织形态学变化、脑组织含水量变化、梗死灶周围皮层咬合蛋白表达变化。结果与模型组相比,丁苯酞组脑水肿面积明显减少。脑组织含水量明显降低。咬合蛋白表达量明显增加。结论丁苯酞软胶囊可明显减少局灶性脑梗死大鼠脑水肿的形成,增加大脑皮层咬合蛋白的表达。     

人工脑脊液冲洗治疗对实验性大鼠脑外伤后低氧诱导因子表达的影响

目的探讨人工脑脊液局灶冲洗治疗对实验性大鼠创伤性脑损伤后脑水肿及低氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达的影响。方法采用自由落体打击装置制备大鼠创伤性脑损伤模型,分正常对照组、外伤对照组、生理盐水冲洗治疗组及人工脑脊液冲洗治疗组。于伤后30min开始分别以37℃的生理盐水和人工脑脊液进行局灶冲洗治疗维持3h。伤后4h、1、3、5、7d处死留取脑组织标本,采用干湿重法测伤灶脑组织含水量,RT-PCR方法检测HIF-1αmRNA的表达。结果与外伤对照组相比,生理盐水和人工脑脊液治疗组伤灶脑组织水含量明显降低(P<0.05);脑外伤后4h伤灶脑组织中HIF-1αmRNA表达即明显上升,1d达到高峰,持续至3d,5d开始下降,7d降至正常水平;局灶冲洗治疗后,伤后4h、1d、3d和5d各组脑组织HIF-1αmRNA表达均低于外伤对照组相应各时间点(P<0.05);其中以局灶人工脑脊液冲洗治疗效果最佳。结论局灶人工脑脊液冲洗治疗能明显减轻大鼠伤灶脑水肿,有良好的治疗作用;调节HIF-1α的表达是其脑保护作用的机制之一。     

黄芪甲苷对脑缺血再灌注后血脑屏障的保护作用及occludin蛋白表达的影响

目的探讨黄芪甲苷对大鼠脑缺血再灌注后血脑屏障的保护作用及occludin蛋白表达的影响。方法SD大鼠72只,随机等分为4组,每组18只。A组为假手术组;B组为生理盐水对照组;C组为小剂量黄芪甲苷治疗组,D组为大剂量黄芪甲苷治疗组。采用干湿重法、分光光度计法及免疫组化法分别检测各组大鼠脑组织含水量、伊文氏蓝含量及occludin蛋白的表达水平。结果与A组相比,B组大鼠脑组织含水量、伊文氏蓝含量明显增多,occludin蛋白的表达明显减少(P0.01);与B组相比,C组和D组大鼠脑组织含水量、伊文氏蓝含量显著减少,occludin蛋白的表达显著增加(P0.05;C组与D组相比,大鼠脑组织含水量、伊文氏蓝含量及occludin蛋白的表达无显著差异(P0.05)。结论黄芪甲苷对脑缺血再灌注后血脑屏障具有保护作用,这可能与黄芪甲苷上调occludin蛋白的表达有关。     

褪黑素抑制脑创伤后炎症反应的机制研究

目的观察褪黑素在创伤性脑损伤(TBI)后炎症反应中的作用。方法雄性印记控制区(ICR)小鼠,随机分为假手术组(sham)、TBI组、TBI加盐水组(saline)和褪黑素处理组(Mel)(每组24只)。通过自由落体模型使小鼠致伤,于术后24 h分别检测小鼠脑组织含水量、伊文氏蓝含量的变化,并使用酶联免疫吸附法、冰冻切片免疫荧光分别检测促炎细胞因子(白细胞介素-1和肿瘤坏死因子α)和离子钙接头分子-1(IBA-1)的表达。结果 TBI后24 h小鼠脑组织含水量、血脑屏障通透性显著升高;挫伤灶周围皮层促炎细胞因子含量显著升高;挫伤灶周围皮层小胶质细胞活化明显增强;使用褪黑素后,小鼠脑组织含水量、血脑屏障通透性均显著减少,同时褪黑素能够减少TBI后的促炎细胞因子表达、抑制小胶质细胞的活化。结论褪黑素可以缓解TBI后的炎症反应,可能与其抑制小胶质细胞的活化相关。     

氩氦刀处理后猪大脑组织急慢性期的变化

目的比较氩氦刀治疗系统处理后正常小型猪大脑组织的急性期和慢性期的变化。方法用氩氦刀冷冻治疗系统在6只小型猪左侧顶部大脑组织做一冷冻消融灶,饲养三周后以同法冷冻右侧顶部脑组织,随即处死动物并整体取出整个脑组织后用10%甲醛溶液固定,将标本整体经顶冠状切片进行病理学检查。结果大体标本:新鲜冷冻灶皮层可见明显瘀血并局部肿胀,边界清楚;陈旧灶局部可见脑体积减小,脑沟加深。镜下观察:新鲜冷冻灶皮质内明显瘀血,皮层神经细胞分层结构消失;陈旧灶大片坏死,其周围明显环绕炎性细胞浸润带;新鲜灶和陈旧灶白质内髓鞘结构均消失。结论氩氦刀冷冻可完全破坏正常脑组织。这提示用氩氦刀冷冻治疗颅内肿瘤时应严格控制冷冻范围,以免损伤周围脑组织。     

甘露醇对实验性脑水肿的疗效及机理探讨

向右颈内动脉注射百日咳菌液导致实验性兔脑水肿模型,分别于用药后30、60、120、240、360分钟处死。实验组兔于注射菌液后立即静注20％甘露醇,对照组兔静注等量的5％葡萄糖液;结果表明甘露醇明显减少脑含水量、降低颅内压及血粘度、提高血渗透压,脑含水量及颅内压的变化与血渗透压呈负相关关系;电镜观察甘露醇能明显减轻毛细血管周围胶质细胞的肿胀及病变。     

大剂量甲基强的松龙对大鼠局灶性缺血再灌注脑损伤的影响

目的 探讨大剂量甲基强的松龙（ＭＰ）对局灶性缺血再灌注大鼠脑保护作用的机理。方法采用大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,观察缺血前后应用大剂量ＭＰ对大鼠大脑中动脉闭塞侧梗死体积的影响以及脑含水量的变化,同时观察脑组织病理学改变。结果 缺血前后ＭＰ治疗组大脑中动脉供血区脑梗死体积较盐水对照组明显减小（均Ｐ〈０．０１）;缺血性前后ＭＰ治疗组与盐水对照组脑含水量比较无明显差别（均Ｐ〉０．０５）。病理学发现盐水对照组织血管周围可见巨噬细胞浸润,而ＭＰ治疗组无此病理改变。结论 大剂量ＭＰ可改善缺血性脑损伤,其机理与减小缺血区梗死体积、抑制脑组织巨噬细胞浸润有关。