蓖麻毒素的化学修饰及其对小鼠肝脏毒性的影响

目的：观察蓖麻毒素（ＲＴ）修饰前后对小鼠肝脏毒性的影响，探讨化学修饰对改进ＲＴ抑瘤作用的意义，方法：Ｒ艇３－（２－吡啶二硫基）丙酸Ｎ－羟基琥珀酰亚胺酯（ＳＰＤＰ）－－一种异型双功能交联剂，进行修饰；生丰ＲＴ的ＳＰＤＰ衍生物（ＰＤＰ－Ｒ）；在同样条件下分别测定ＲＴ和ＰＤＰＲ中毒小鼠在没剂量和时间的血清谷胱甘肽转硫酶（ＳＧＳＴ）活性，以此为指标比较二者对肝脏的毒性差别，结果：伴随中毒剂量的增加和时间的     

SPDP制备酶结合物及其应用于ELISA检测HBV血清学标志的初步研究

在ELISA中,以异型双功能试剂—N-琥珀酰亚胺基3-(2-吡啶二硫基)丙酸酯(SPDP)作为交联剂制备酶结合物(S-ELISA),比同型双功能试剂制备的结合物活性要高。我们以SPDP制备的抗-HBS-HRP与抗-HBe-HRP结合物,较过碘酸钠法制备的同种结合物敏感性高,实验证明其特异性,可重复满意。     

低氧放疗对荷瘤小鼠肝脏还原型谷胱甘肽含量的影响

用分光光度法检测荷瘤小鼠在放疗同时吸入含１０．５％Ｏ２的混合气体后肝脏还原型谷胱甘肽（ＧＳＨ）含量变化。结果：放疗后第７、１４天低氧放疗组ＧＳＨ含量低于各实验对照组。认为低氧放疗对正常组织有保护作用。     

EDC/NHS交联剂在新型生物材料磁小体修饰中的应用

目的使用1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)-碳化二亚胺(EDC)/N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)交联剂制备基于磁小体的主动靶向纳米颗粒。方法使用EDC/NHS作为交联剂,在超声振荡孵育下交联细胞色素c适体修饰的磁小体及甲氧基-聚乙二醇-羧基(methoxy-PEG-carboxymethyl,分子量2 000 Da,mPEGCOOH2000),得到终产物聚乙二醇化的靶向细胞色素c适体的磁小体纳米颗粒PEG-cBMP。结果透射电镜表征结果显示终产物PEG-cBMP的包膜较纯化磁小体的包膜明显增厚,约10 nm,说明在交联剂的作用下修饰磁小体成功。结论采用EDC/NHS交联剂修饰磁小体这种生物源性纳米材料是可行的。     

MK-801及CNQX 对尾末端截断后小鼠血清褪黑素含量变化的影响

 目的观察谷氨酸N-甲基-D-天冬氨酸（NMDA）受体拮抗剂5-甲基二氢丙环庚烯亚胺马来酸（MK-801）、а-氨基3-羟基5-甲基4-异恶唑丙酸/海人藻氨酸（AMPA/Kainate）受体拮抗剂6-氰基-7-硝基喹喔啉-2,3-二酮（CNQX）对尾末端截断后小鼠血清褪黑素（MLT）含量变化的影响,为进一步研究截肢后中枢的可塑性变化提供依据。方法用ELISA 法测定尾末端2.5 cm截断后2 h小鼠血清MLT 含量,并观察静脉注射MK-801、CNQX 对断尾后小鼠血清MLT含量变化的影响。结果与对照组比较,断尾后2 h小鼠血清MLT含量降低;MK-801、CNQX 分别拮抗断尾引起的小鼠血清MLT 含量的降低。结论断尾后2 h小鼠血清MLT含量降低;NMDA受体、AMPA/Kainate 受体参与断尾引起小鼠血清MLT 含量降低的过程。     

邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯对原代培养小鼠胚胎睾丸Leydig细胞功能影响研究

目的探讨邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯[Di(2-ethylhexyl)phthalate, DEHP]对体外培养的小鼠胚胎睾丸间质细胞(Leydig细胞)3β-羟基类固醇脱氢酶(3β-HSD)活性及睾酮合成的影响.方法小鼠胚胎Leydig细胞原代培养.DEHP染毒剂量分别为25、50、100、200 mg/L,通过检测睾酮合成关键酶3β-HSD活性、放免法测定培养液中睾酮浓度,研究DEHP对Leydig细胞功能影响.结果小鼠胚胎Leydig细胞分离培养后,纯度和存活率分别达(81.17±2.32)%、(80.88±2.80)%.DEHP(25 mg/L)处理12 h,或DEHP(50 mg/L)处理6 h后,实验组与对照组比较3β-HSD酶活性明显降低(P《0.05),随着时间延长和药物浓度增加差异更显著(P《0.01).DEHP50、100 mg/L实验组,在12、24 h的睾酮水平明显低于对照组(P《0.05)或(P《0.01),存在时间-效应关系;DEHP 200 mg/L实验组在6、12、24 h与对照组比较均有非常显著差异(P《0.01),并可观察到Leydig细胞明显的形态学改变.结论 DEHP能影响原代培养小鼠胚胎Leydig细胞3β-羟基类固醇脱氢酶活性,并抑制睾酮合成,存在时间-效应和剂量-效应关系.     

柠檬酸-EDC/NHS胶原凝胶修复破损纤维环

目的 探讨利用柠檬酸-EDC/NHS一型胶原凝胶修复纤维环损伤,减缓椎间盘退变的效果.方法 使用鼠尾肌腱一型胶原凝胶,柠檬酸(CA)、1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)-碳化二亚胺(EDC)和N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)作为交联剂,将一型胶原凝胶与交联剂按不同质量比混合制成一型胶原混合凝胶.建立鼠尾椎间盘纤维环穿刺模型.清洁级SD大鼠48只,分为假手术组(n=8)、CA-EDC/NHS凝胶(CA6)治疗组(n=10)、CA-EDC/NHS凝胶(CA3)治疗组(n=10)、EDC/NHS凝胶(CA0)治疗组(n=10)、穿刺未治疗组(n=1O).分别于1、2、4周行小动物X摄片、小动物MRI检查,统计分析不同时间点椎间隙高度系数、髓核像素值及Pfirrmann分级,于第4周时将大鼠处死行组织学切片观察.结果 4周后,CA-EDC/NHS凝胶(CA6)治疗组的鼠尾椎间盘对比假手术组仅发生了轻微的退变,基本保持了髓核组织的完整性,在椎间盘高度系数(均数79％)、髓核像素值(均数126.9)和Pfirrmann分级结果(平均1.3分)均优于其余两个治疗组和穿刺未治疗组(P＜0.05).CA-EDC/NHS凝胶(CA6)治疗组的组织学观察显示,针道的周围没有发现炎性细胞浸润和瘢痕组织,针道尽头可见一团凝胶状物质在断裂的纤维环组织之间形成了桥接使其闭合.结论 柠檬酸-EDC/NHS胶原凝胶具有一定的修复破损纤维环,减缓椎间盘退变的能力,并且与柠檬酸剂量存在相关性.     

邻苯二甲酸二-(2-乙基已基)酯低剂量暴露对初断乳小鼠生长发育的影响

目的观察邻苯二甲酸二(2-乙基已基)酯(di-(2-ethylhexyl)phthalate,DEHP)低剂量暴露对初断乳小鼠生长发育的影响。方法利用亚慢性毒性试验的方法,采用经口灌胃的染毒方式,将36只初断乳昆明种小鼠随机分为对照(玉米油)组和两个DEHP实验组(100mg·kg-1组、500mg·kg-1组),每周染毒5d,休息2d,每天早上8:30开始灌胃染毒,重复染毒11周。每组12只,雌雄各半。记录比较小鼠每周的体重、摄食量,11周后,水合氯醛腹腔麻醉,心尖采血处死,取小鼠脏器称重并计算脏器系数;取脾脏的1/2进行研磨制备细胞悬液,应用流式细胞仪测定脾脏CD4+T、CD8+T的个体百分量。结果各组小鼠在染毒期间,体重及其体重增长量与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),各组肝脏、脾脏、胸腺、双肾脏、生殖器周围白色脂肪、腓肠肌脏器系数与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。DEHP染毒组小鼠脾脏CD4+T、CD8+T百分比,与对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05);DEHP染毒组小鼠脾脏CD4+/CD8+比值,与对照组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 DEHP低剂量暴露可能对初断乳小鼠细胞免疫水平具有一定抑制作用。     

蓖麻毒素修饰物的制备和细胞毒作用

为了降低蓖麻毒素的毒性，保留其抗肿瘤活性。采用３－Ｎ－羟基丙酸琥珀酰亚胺酯修饰ＲＴ，实验观察修饰前后ＲＴ的急性及体外对三株肿瘤细胞杀伤作用的。ＲＴ－ＰＤＰ小鼠腹腔ＬＤ５０为６８．２μｇ／ｋｇ，比ＲＴ大２．４５倍，并且对人子宫颈癌细胞胃癌及小鼠乳腺癌细胞的均有较强杀伤性。     

蓖麻毒素被修饰前后在小鼠主要脏器的定位比较研究

为探讨引入二硫吡啶硫酮（ＰＤＰ）基团后，蓖麻毒素（ＲＴ）毒性降低和免疫增强的机理，作者将用异型双功能交联剂３－（２－吡淀二硫基）丙酸琥珀酰亚胺酯（ＳＰＤＰ）修饰的蓖麻毒素（ＲＴ－ＰＤＰ）与其修饰的蓖麻毒素注入小鼠腹腔内，然后取小鼠的心、肝、脾、肺、肾等主要脏器进行了免疫组化定位和计算机辅助图像分析。提示ＲＴ－ＰＤＰ对主要脏器组织亲和力和毒性明显降低，且有可能产生一种活化吞噬细胞的新功能，从而为蓖麻     

排毒保肝口服液对小鼠酒精性肝损伤的保护作用

[目的]探讨排毒保肝口服液对酒精性肝损伤的小鼠肝组织甘油三酯(TG)和还原型谷胱甘肽(GSH)含量的影响.[方法]取小鼠50只,随机分成5个组,即正常对照组、乙醇对照组及小、中、大剂量给药组,灌胃给予各给药组小鼠1.0、2.0、4.0 mL/kg排毒保肝口服液,连续30 d.末次给药1 h后,除对照组外均灌胃给予500 mL/L乙醇14 mL/kg,禁食12 h,测定小鼠肝组织中TG和GSH的含量.[结果]各给药组小鼠肝组织中TG含量均低于乙醇组,GSH含量均明显高于乙醇组.[结论]排毒保肝口服液对酒精性肝损伤具有保护作用.     

蓖麻毒素及其修饰物在肝癌细胞膜上的分布

目的：探讨３－（α－吡啶二硫基）丙酸Ｎ－羟基琥珀酰亚胺基酯（ＳＰＤＰ）修饰的蓖麻毒素毒癌活性及其机制。方法：用流式细胞仪分析蓖麻毒素及其修饰物在肝癌细胞膜上的分布变化。结果：修饰的蓖麻毒素在肝癌细胞上的分布比未修饰的蓖麻毒素明显增多,结论：ＳＰＤＰ修饰后的蓖麻毒素对肝癌细胞的亲和力增加,提示蓖麻毒素用ＳＰＤＰ修饰可能是改进其抗癌作用的一个有价值的途径。     

蓖麻毒素对小鼠的毒性及对骨髓多染性红细胞微核的影响

作者研究了蓖麻毒素对BALB/c雄性小鼠的毒性及对昆明种雄性小鼠骨髓多染性红细胞微核的影响.结果表明,BALB/c小鼠腹腔注射8 d后,6.4μg/kg剂量组体重由20.79±0.98 g降为19.62±1.00g,体重增长受到明显抑制(P<0.01);0.4,1.6和6.4μg/kg剂量组白细胞数目依次为9.070±0.751,9.210±0.801和8.270±0.396×10~9/L,与对照组(11.430±1.042×10~9/L)相比显著降低(P<0.05,0.05和0.01);脾和胸腺的重量则没有明显变化.昆明种小鼠腹腔注射24 h后,1.6和6.4μg/kg剂量组骨髓多染性红细胞微核率为21.90±4.28‰和29.26±3.48‰,与对照组(4.94±1.03‰)相比明显增高(P<0.01),且呈现出剂量 效应关系.此结果提示蓖麻毒素对小鼠有剧毒,对遗传物质也有较大的影响.     

蓖麻毒素细胞毒性及其中毒小鼠组织病理改变

目的：探讨蓖麻毒素对不同细胞的细胞毒性及小鼠各主要组织脏器毒性的基本病理改变。方法应用MTT法检测不同浓度（1 ng/ml,10 ng/ml,100 ng/ml,1μg/ml）蓖麻毒素给药24 h对不同细胞株（Caco-2,MDCK,MDCK-MDR1,HepG2, H1299）的细胞活性的影响;经灌胃方式使小鼠中毒,中毒24 h观察蓖麻毒素对小鼠脏器的基本病理变化,测定相关生化指标,分析蓖麻毒素对小鼠肝肾损伤。结果不同浓度的蓖麻毒素对Caco-2,MDCK,MDCK-MDR1,HepG2和H1299细胞均有一定的毒性,随着毒素浓度的升高,细胞毒性亦呈上升趋势,有明显量效关系,其中MDCK细胞对蓖麻毒素最为敏感。病理学检测显示蓖麻毒素可致小鼠肾小球出血及部分肾血管内皮细胞缺如,肝细胞水肿、近端肠绒毛损伤、轻度坏死性肺炎并有炎性细胞浸润。血清中谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、碱性磷酸酶（ALP）、总胆红素（TBIL）、甘油三酯（TG）、肌酐（CREA）均升高,表明小鼠中毒3 h内肝功能和肾功能已出现一定程度的损伤。结论蓖麻毒素通过抑制蛋白质合成而导致细胞坏死。不同细胞对蓖麻毒素具有不同的敏感性,表现为蓖麻毒素中毒早期,动物即可出现严重的肝、肾损伤。     

NAC对日本血吸虫病小鼠肝组织中iNOS、NO、GSH和GSH-PX的影响

目的:了解N-乙酰半胱氨酸(NAC)对日本血吸虫病小鼠肝组织中诱导型一氧化氮合酶(iN-OS)、一氧化氮(N0)、谷胱甘肽(GSH)及谷光甘肽一过氧化物酶(GSH-PX)的影响.方法:将小鼠随机分为正常组、模型组、预防a、b组和治疗a、b组,在感染同时给预防a、b组、感染后第6周给治疗a、b组分别以200 mg/kg和...