人T淋巴细胞白血病系Jurkat细胞中Cdt1和Geminin的表达

目的探讨细胞复制允许因子Cdt1和复制抑制因子Geminin在白血病细胞中的表达,为阐明白血病的发病机制提供理伦依据。方法培养白血病细胞系Jurkat细胞,以处于对数生长期的Jurkat细胞作实验组,以正常人外周血淋巴细胞作对照组。利用RT-PCR方法检测细胞中Cdt1和Geminin mRNA的表达,进行半定量分析;利用流式细胞仪对细胞荧光强度进行定量分析,以检测细胞中的Cdt1和Geminin蛋白的表达。结果 (1)处于对数生长期的Jurkat细胞Cdt1 mRNA及蛋白表达显著高于对照组(P0.05)。(2)处于对数生长期的Jurkat细胞Geminin mRNA及蛋白的表达显著高于对照组(P0.05)。结论人T淋巴细胞性白血病细胞系Jurkat细胞,Cdt1、Geminin的表达水平较正常人外周血淋巴细胞显著增高,Cdt1、Geminin可能与白血病细胞恶性增殖有关。     

人巨细胞病毒感染对人神经胶质瘤U251细胞p38MAPK表达和细胞凋亡及细胞周期的影响

目的研究人巨细胞病毒(HCMV)感染对人神经胶质瘤U251细胞p38MAPK表达水平、细胞凋亡及细胞周期的影响。方法以免疫印迹法(WesternBlotting)分析HCMV感染人神经胶质瘤U251细胞后不同时间总p38MAPK、磷酸化p38MAPK蛋白表达水平;用流式细胞仪检测HCMV感染后人神经胶质瘤U251细胞凋亡百分率变化和细胞周期的分布。结果HCMV感染后不同时间U251细胞总p38蛋白的表达水平不变,但磷酸化p38于HCMV感染后6至10h明显增高,6h、10h平均灰度值分别为186.33±7.51和188.00±7.02,与对照组比较差异有统计学意义,16h后下降至基础水平。HCMV感染能诱导U251细胞凋亡,于感染后第5天凋亡率最高,达(10.18±1.24)%,与对照组比较差异有统计学意义。HCMV感染使G1期细胞明显减少,感染后2、5、7d分别减少至(56.50±2.57)%、(62.33±2.64)%和(67.45±4.44)%,与对照组比较差异均有统计学意义,细胞周期阻滞于S期和G2期。结论HCMV感染U251细胞能够激活p38MAPK,并诱导U251细胞凋亡、细胞周期阻滞。     

先天性人巨细胞病毒感染发病机制的研究进展

人巨细胞病毒（HCMV）是人类最常见的先天性感染病毒,可引起流产、早产、死胎、胎儿宫内发育迟缓及小头畸形、抽搐、脑瘫、智力低下、视力损害及听力损害等后遗症。目前先天性HCMV感染的发病机制仍处于研究阶段。该文对近年来先天性HCMV感染发病机制的研究报道进行综述,主要涉及HCMV的潜伏．激活;HCMV的致畸机制,包括HCMV的直接损伤、通过影响胎盘和绒毛的损伤而导致胎儿畸形、HCMV感染引起细胞凋亡、同源盒基因表达异常及HCMV感染对脑组织的损伤;HCMV感染对免疫系统功能损害机制。     

先天性人巨细胞病毒感染

一、流行病学人巨细胞病毒（CMV）是宫内感染最常见的病毒,可导致患儿多种出生缺陷,亦是引起非遗传性耳聋最常见的原因。     

小儿先天性心脏病与人巨细胞病毒感染的关系探讨

人巨细胞病毒 (ＨＣＭＶ)是人类先天性感染的主要病原 ,传递方式多为母婴垂直传播 ,先天性ＨＣＭＶ感染可导致流产、胎儿宫内生长迟缓、死胎、早产、生后夭折等 ,甚至造成婴幼儿智力低下、精神运动发育迟缓等严重后果[1] ,但其与小儿先天性心脏病 (ＣＨＤ)的关系 ,目前尚少见报     

婴儿期巨细胞病毒感染对生长发育影响的前瞻性研究

目的 了解北京地区婴儿期生后巨细胞病毒(cytomegalovlrus,CMV)感染状况及其对婴儿生长发育的影响.方法 2004年11月至2008年3月北京市4家医院联合进行了孕妇、新生儿和婴儿CMV感染的多中心队列研究.本文选取非先天性CMV感染婴儿210例,检测1岁龄婴儿血清CMV IgG.根据婴儿12周龄尿CMV DNA结果和1岁龄CMV IgG结果,将婴儿分为围产期CMV感染组、婴儿期生后CMV感染组和非感染组.收集母婴相关资料并检查婴儿1岁时的生长发育状况、智测、眼睛和听力,对3组婴儿的新生儿期状况、1岁龄的生长发育进行比较,对影响婴儿期生后CMV感染的危险因素进行了非条件Logistic多因素回归分析.结果 210例婴儿中围产期CMV感染42例、婴儿期生后CMV感染98例、非感染70例,婴儿期生后CMV感染率46.40%,结合前期先天性感染、围产期感染结果,婴儿1岁龄时CMV总感染率为66.85%.3组婴儿出生时与1岁龄时的临床表现、生长发育和总发育商比较差异均无统计学意义;要儿期生后CMV感染组中母乳喂养、混合喂养和人工喂养的比例分别为87.76%、9.18%和3.06%,非感染组为61.43%、21.43%和17.14%(χ~2=17.040,P<0.01).结论 我国婴儿CMV感染非常普遍,非母乳喂养是婴儿期生后CMV感染的重要保护因素.婴儿期生后CMV感染对婴儿的健康和发育没有见到明显的不良影响.     

巨细胞病毒感染对儿童肾病综合征的影响初探

目的　为了探索巨细胞病毒 (CMV)感染与儿童特发性肾病综合征 (INS)的关系。方法　 采用聚合酶反应 (PCR)测定 140例住院儿童CMVDNA ,并对CMV阳性的INS患儿的临床特征及感染原因作一分析。结果　 4 0例INS患儿CMV阳性率 50 % ,而非肾脏病 10 0例儿童阳性率 2 3% (P<0 .0 1)。CMV阳性INS患儿具有年龄偏大 ,90 %为复发病例 ,病程相对长 ,肾炎型占 75% ,血IgG明显低于CMV阴性组 (P <0 .0 5) ,6 0 %对激素治疗不敏感的临床特点。结论　对CMV感染与INS患儿的关系应作深入研究 ,对CMV阳性的INS患儿应做肾活检测定CMV。     

先天性无症状性巨细胞病毒感染对婴儿期发育的影响

目的 通过对先天性无症状性巨细胞病毒(HCMV)感染的新生儿进行系统随访,观察其听力学、体格发育、智能发育、行为发育等多方面的改变,探讨先天性无症状性HCMV感染对婴儿期发育的影响.方法 按照1998年宜昌会议通过的<巨细胞病毒感染诊断方案>标准及美国Fowler标准确定先天性无症状性巨细胞病毒感染.2003年7月至2005年7月符合人选条件感染病例41例,对照组21例.进行静脉血荧光定量PCR(FQ-PcR)检测确定HCMV感染.感染组与对照组于新生儿期、3月龄、6月龄、1岁分别进行新生儿20项行为神经检查(NBNA)、听力学检查包括耳声发射听力检查(OAE)、听力脑干诱发电位检查(ABR)、Bayley婴幼儿发育量表评估发育智商、52项运动神经检查(Amid-Tison法)和体格发育检查、一般状况检查.结果 (1)两组新生儿12～14 d时加项NBNA得分分别为38.8±2.75和38.5±2.29,差异无统计学意义(t=0.98,P＞0.05).(2)ABR检查:感染组中23例做ABR检查者V波阈值升高异常率为15.2%;对照组21例未发现V波阈值升高,差异有统计学意义,所有病例均通过OAE检查.(3)感染组中38例1岁时行Bayley婴幼儿发育量表检查智力发育指数(MDI)及精神运动发育指数(PDI)分别为106.86±10.24和108.45±18.25,与对照组2l例(107.49±19.31和107.19±10.98)差异亦无统计学意义(t=0.33,P＞0.05,t=0.35,P＞0.05).(4)52项运动神经发育:两组比较,差异无统计学意义(t=0.02,P＞0.05).结论 (1)先天性无症状HCMV感染在婴儿期即可出现脑干听性反应V波阈值升高,而OAE听力筛查未能检出异常.(2)先天性无症状性HCMV感染对新生儿期行为神经、婴儿期智力、婴儿期神经运动发育无明显影响.     

新生儿高胆红素血症与人巨细胞病毒感染的关系

为了解高胆红素血症(简称高胆)新生儿中人巨细胞病毒(HCMV)感染状况.方法用聚合酶链反应(PCR)技术对120例12～28天高胆新生儿的血、尿进行HCMV-DNA序列测定.结果因出生有窒息史、感染致高胆的新生儿中HCMV-DNA阳性率分别为3.1%(1/32),8.1%(3/37).因高胆入院而找不到任何原因的新生儿占120例高胆新生儿的19.2%,与高胆低出生体重儿的HCMV-DNA阳性率分别为43.5%,36.8%.结论部分未明原因的高胆新生儿和高胆低出生体重儿为HCMV感染者.     

新生儿高胆红素血症与人巨细胞病毒感染的关系

为了解高胆红素血症（简称高胆）新生儿中人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）感染状况。方法：用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术对１２０例１２～２８天高胆新生儿的血、尿进行ＨＣＭＶ－ＤＮＡ序列测定。结果：因出生有窒息史、感染致高胆的新生儿中ＨＣＭＶ－ＤＮＡ阳性率分别为３．１％（１／３２）,８．１％（３／３７）。因高胆入院而找不到任何原因的数生儿占１２０例高胆新生儿的１９．２％,与高胆低出生体重儿的ＨＣＭＹ－ＤＮＡ阳性率     

碱性成纤维细胞生长因子对胚胎大鼠神经干细胞增殖分化的影响

目的探讨分离、培养及鉴定胚胎大鼠神经干细胞(NSCs)方法，观察碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对NSCs增殖、分化的影响。方法从大鼠胚胎脑组织中分离出NSCs，用bRGF和胎牛血清诱导其增殖和分化，予BrdU以标记分裂细胞，采用免疫细胞化学鉴定NSCs和分化神经细胞。结果大鼠胚胎脑NSCs在无细胞因子和胎牛血清的培养基中无新生细胞形成，但能在bFGF和血清诱导下形成克隆，并产生nestin和BrdU阳性细胞，贴壁后分化为神经元和星形胶质细胞。结论该方法从大鼠胚胎大脑分离出的细胞具有NSCs特性，即自我更新和多向分化潜能;bFGF是NSCs增殖必须的丝裂原。     

�����ϸ��������Ⱦ����Ѫ��ϵ��ϸ��ͬԴ��B6�������Ӱ��

目的研究脐血红系祖细胞的HOXB6基因的表达情况以及人类巨细胞病毒(HCMV)感染对红系祖细胞的HOXB6基因表达的影响,以探讨HCMV导致脐血红系祖细胞损伤的机制。方法在泸州医学院附属医院儿科以实时荧光定量PCR技术(FQ-RT-PCR)检测人类巨细胞病毒感染和(或)用全反式维甲酸(ATRA)处理后HOXB6基因的表达水平。结果人脐血红系祖细胞可表达HOXB6基因;HCMV感染后,红系祖细胞HOXB6基因的表达明显下调;ATRA能显著上调红系祖细胞HOXB6基因的表达水平,且能够在一定时间内上调HCMV感染后的红系祖细胞HOXB6基因的表达。结论HCMV感染能诱导脐血红系祖细胞HOXB6的表达下调,HC-MV有可能通过调控HOXB6基因表达异常而引起红系祖细胞的增殖障碍。     

Cytomegalovirus esophagitis in a child with human immunodeficiency virus-1 infection presenting as fever of unknown origin and stunted growth

We report a 12-year old boy with human immunodeficiency virus-1 infection and cytomegalovirus-associated esophagitis, who presented with an indolent clinical course associated with fever of an unknown origin, failure to thrive and weight loss.     

三氧化二砷联合长春瑞滨、多西他赛对神经母细胞瘤SK-N-SH细胞系杀伤作用和细胞周期的影响

目的观察三氧化二砷(As_2O_3)、长春瑞滨(vinorelbine)、多西他赛(docetaxel)对神经母细胞瘤SK-N-SH细胞系的杀伤作用和细胞周期的影响,为临床寻找新的治疗手段及合理用药提供依据。方法采用流式细胞术检测经过As_2O_3、vinorelbine或docetaxel作用后SK-N-SH细胞的凋亡率和细胞周期分布的变化,探讨它们对SK-N-SH细胞的杀伤作用和细胞周期的影响。结果As_2O_3作用48h、72h、96h和120h时SK-N-SH细胞的凋亡率分别为(10.91±2.27)%、(23.85±5.52)%、(36.61±14.75)%、(52.93±2.47)%;As_2O_3可使SK-N-SH细胞周期阻滞在G2/M,作用48h时处于G2/M期阻滞的细胞比例最高(26.54%±5.67%);Vinorelbine和docetaxel对SK-N-SH细胞具有杀伤作用,它们各自作用于SK-N-SH细胞的IC50分别为35nmol/L和90nmol/L;以不同浓度的vinorelbine或docetaxel作用于SK-N-SHI细胞48h,随着G2/M期阻滞的比例增高,SK-N-SH细胞的凋亡率随之升高。结论 As_2O_3对SK-N-SH细胞的杀伤作用具有时间依赖性,As_2O_3可使SK-N-SH细胞周期阻滞在G2/M期。Vinorelbine和docetaxel对SK-N-SH细胞的杀伤作用和G2/M期阻滞有关,属于G2/M期特异性杀伤药物。     

更昔洛韦和黄芪对巨细胞病毒感染所致造血祖细胞增殖抑制的影响

目的　探讨更昔洛韦 (GCV)和黄芪对巨细胞病毒 (CMV)感染所致脐血粒 巨噬系祖细胞 (CFU GM)、红系早、晚期祖细胞 (CFU E、BFU E)、多向造血祖细胞 (CFU Mix)及巨核系祖细胞(CFU Mk)体外增殖抑制的影响。方法　采用造血祖细胞培养技术 ,培养、观察、计数巨细胞病毒AD169株 (CMV AD169)感染CFU GM、CFU E、BFU E、CFU Mix和CFU Mk后各祖细胞集落、峰期及维持时间 ;用聚合酶链反应 (PCR)检测集落细胞内CMV DNA ;根据细胞毒性实验结果 ,将GCV和黄芪作用于CMV感染的CFU GM、CFU E、BFU E、CFU Mix及CFU Mk祖细胞 ,再分别计数集落、峰期及维持时间。结果 ( 1)CMV感染组CFU GM、CFU E、BFU E、CFU Mix及CFU Mk集落数较对照组明显减少 (P <0 0 1) ;集落维持时间CMV感染组较对照组明显缩短 ;( 2 )用PCR在感染组集落细胞内检测到CMV DNA的存在 ;( 3)黄芪和 (或 )GCV作用于CMV感染的祖细胞后 ,与病毒组比较集落维持时间明显延长 ,集落数和集落增殖率明显提高 (P <0 0 1) ,黄芪组集落增殖率分别为 2 7 2 %、4 5 2 %、4 9 1%、39 0 %、11 9% ;GCV组分别为 37 4 %、74 2 %、71 7%、6 7 4 %、38 9% ;GCV 黄芪组分别为 5 3 6 %、83 8%、88 7%、87 8%、6 1 5 %。结论　CMV AD169在体外能明显抑制CFU GM、CFU E、BFU     

β-榄香烯对K562细胞周期与细胞凋亡的影响及其机制探讨

目的探讨β-榄香烯(β-ELE)对人慢性髓性白血病细胞株K562细胞周期及细胞凋亡的影响及其机制。方法K562和不同浓度的β-ELE共同培养后,应用流式细胞仪技术和Hoe-chest33258/PI荧光染色法检测β-ELE对K562细胞周期及凋亡的影响,应用RT-PCR技术测定野生型p53活化片段(P21wild-type p53 activated fregmentl,P21WAF1)、Survivin mRNA水平。结果不同浓度β-ELE能使K562细胞阻滞于G1期,G1期细胞百分比增加,S期细胞百分比明显下降,呈剂量、时间依赖性,且与对照组相比差异均有统计学意义(P<0.01)。β-ELE作用于K562细胞24h,48h后,在G0/G1期前,可见明显的亚二倍体(凋亡峰),其凋亡率呈剂量、时间依赖性,与对照组比较有显著意义(P<0.01)。Hoechest33258/PI免疫荧光技术发现β-ELE能使凋亡细胞数目明显增多(P<0.01)。RT-PCR结果显示β-ELE能下调K562细胞Survivin mRNA表达,上调P21WAF1mRNA的表达(P<0.01)。结论β-ELE能够阻止细胞K562细胞从G1期向S期转换。β-ELE可以诱导K562细胞凋亡,呈剂量、时间依赖性。β-ELE导致细胞周期阻滞可能与上调P21WAF1mRNA的表达有关;促进K562细胞凋亡机制可能与下调Survivin mRNA的表达有关。随着药物浓度的增加,P21WAF1mRNA表达增加,而SurvivinmRNA表达下降。     

人巨细胞病毒感染婴儿γδT、Treg细胞和相关细胞因子的表达及临床意义

目的 探讨人巨细胞病毒（HCMV）感染婴儿外周血γδT细胞、调节性T细胞（Treg）的表达和相关细胞因子的含量及其临床意义。方法 以22例HCMV感染婴儿（HCMV感染组）和22例门诊健康体检婴儿（对照组）为研究对象,流式细胞术检测两组外周血γδT细胞和Treg细胞的表达,ELISA法检测两组血浆IL-17、TGF-β1水平。结果 HCMV感染组的γδT细胞表达和IL-17水平高于对照组（P < 0.01）;Treg细胞表达和TGF-β1水平低于对照组（P < 0.01）。HCMV组的γδT细胞表达与Treg细胞表达、TGF-β1水平呈负相关（P < 0.05）,而与IL-17水平呈正相关（P < 0.05）;Treg细胞表达与TGF-β1水平呈正相关而与IL-17水平呈负相关（P < 0.05）,IL-17水平与TGF-β1水平无相关性（P > 0.05）。结论 HCMV感染婴儿存在γδT细胞和Treg细胞表达的失衡,γδT细胞可能参与了IL-17的分泌。     

细菌溶解产物对支气管哮喘合并反复呼吸道感染患儿血清β防御素1及免疫球蛋白的影响

目的 探讨细菌溶解产物治疗支气管哮喘合并反复呼吸道感染患儿的临床疗效及其对血清人β-防御素-1（hBD-1）和免疫球蛋白（Ig）等物质的影响。方法 采用随机、双盲法将2011年1~12月期间患支气管哮喘合并反复呼吸道感染的62例患儿分成两组,在进行规范的吸入糖皮质激素治疗的同时分别给予细菌溶解产物或安慰剂治疗,观察两组患儿临床疗效及治疗前、治疗6个月和12个月后血清各指标水平及可能出现的不良反应。血清hBD-1应用酶联免疫吸附法（ELISA）检测;血清IgA、IgG、IgM应用免疫比浊法检测;尿素（UREA）和丙氨酸氨基转移酶（ALT）分别用酶速率法和速率法检测。结果 与安慰剂组及治疗前比较,细菌溶解产物组治疗6个月及12个月后呼吸道感染次数均明显减少（均PPP>0.05）。两组患儿共发生不良反应3例,其中腹痛2例,便秘1例,程度均较轻。结论 细菌溶解产物治疗支气管哮喘合并反复呼吸道感染患儿具有有效性和安全性,可提高hBD-1、IgA、IgG水平,减少急性呼吸道感染的发生。     

高氧、维甲酸对胎鼠肺角化细胞生长因子及其受体表达的影响

目的　探讨高氧、维甲酸 (RA)对胎鼠肺成纤维细胞 (LFs)和肺泡II型上皮细胞 (AECII)角化细胞生长因子 (KGF)及其受体 (KGFR)表达的影响。方法　原代培养胎鼠肺LFs及AECII ,待生长至亚汇合状态时 ,随机分为 :空气组 ,空气 +RA组 ,高氧组 ,高氧 +RA组。于培养 2、6、12、2 4、4 8(AECII)和 72h(LFs)时 ,采用半定量RT -PCR方法检测KGF和KGFR的mRNA表达。结果　与空气组比较 ,高氧 2h时 ,胎鼠LFsKGFmRNA表达即明显下降 ,6h时达极点 ,以后下降趋势逐渐减弱 ,至 4 8h后已无显著性差异 ;高氧 2、6、12和 2 4h时 ,其下降幅度分别为 3 0、5 2、2 3和 2 1倍 (P <0 0 5、0 0 1、0 0 1和 0 0 5 )。RA可上调高氧状态下胎鼠LFsKGFmRNA表达 ,与高氧组比较 ,高氧 +RA组在 2、6、12和 2 4h时KGFmRNA表达分别是高氧组的 2 4、3 4、1 7和 1 8倍 (P <0 0 5、0 0 1、0 0 1和 0 0 5 )。高氧对胎鼠AECIIKGFRmRNA表达影响较小 ,与空气组比较 ,仅在高氧 12h和 2 4h时其表达量分别是空气组的 2 3和 1 3倍 (P <0 0 5 ) ;RA对AECIIKGFRmRNA表达没有影响。结论　促进KGF的表达是RA发挥高氧肺损伤保护作用的重要机制之一