慢性胃炎组织的三重染色法及幽门螺杆菌检测

慢性胃炎是一种常见病 ,幽门螺杆菌 (ＨＰ)感染是重要病因 ,目前 ,一般采用 3张切片 ,分别做ＨＥ、阿辛蓝和ＨＰ染色 ,以分别观察组织炎症、肠上皮化生和ＨＰ感染变化。此法既耗费材料试剂 ,又费时间 ,且不便于观察其彼此间关系。为此 ,我们通过反复实验 ,将上述 3种染色在 1张切片上进行 ,达到分别染色的良好效果。1　材料与方法1.1　材料　从广州市东山区人民医院 1994～ 1998年 6 0 0例胃镜活检材料中选取确诊为ＨＰ感染慢性胃炎伴肠上皮化生病例 2 2例 ,重新切片 ,厚 4 μｍ ,供三重染色试验使用。1.2　染料配制　ＨＥ及阿辛蓝 8ＧＸ(ｐ…     

温度对HID染色结果的影响探讨

近年来,许多研究提示分泌硫酸化粘液的胃粘膜大肠化生与肠型胃癌关系密切。高铁二胺—爱先蓝(HID/AB)法能将硫酸化粘液显示成清晰的棕黑色,由于此法稳定、简便、使之成为胃粘膜的常规粘液组化染色。本实验在不同温度和时间的条件下观察HID粘液染色的效果以及背景染色,旨在探讨温度与HID染色结果的相互关系。     

用EDTA缓冲液做抗原修复增进ER、PR免疫组化染色

要做好雌、孕激素受体 (ＥＲ、ＰＲ)免疫组化染色 ,抗原修复是一个至关重要的步骤。修复液的选择会直接影响ＥＲ、ＰＲ的免疫组化染色质量。为了达到敏感、价廉、简单、可操作性和可重复性 ,我们采用乙二胺四乙酸 (ＥＤＴＡ)缓冲液0 0 0 1ｍｏｌ/Ｌ(ｐＨ8 0 ) ,作为ＥＲ、ＰＲ抗原修复液 ,行ＥＲ、ＰＲ染色 ,获得了较为满意的结果。1　材料和方法1 1　材料　 5例已知乳腺癌ＥＲ、ＰＲ阳性标本。1 2　修复液　 1 8ｇＥＤＴＡ和 0 9ｇＥＤＴＡ 2Ｎａ(乙二胺四乙酸二钠 ) ,加 10 0 0ｍｌ蒸馏水 ,用 10 %ＮａＯＨ(约 8ｍｌ)调ｐＨ8 0。1 3　操…     

肠上皮化生的类型及其与胃癌发生的关系

肠上皮化生(简称肠化生),是一种后天性病变,常出现于胃的各种良性及恶性病,尤多见于慢性胃炎、胃溃疡及胃癌。近廿年来,各国学者应用组织化学、免疫组织化学、电镜、同位素自显影等方法,对肠化生进行了深入研究。本文主要探讨肠化生的类型及其与胃癌发生的关系。一、肠化生的来源早期的肠化生见于粘膜浅层。化生细胞来自腺颈部的未分化细胞。腺颈部是胃粘膜各型上皮的起源部,在生理性再生、修复以及各种粘膜病的增生中,新生的上皮细胞均来源于该部。在胚胎早期,内胚层发育成原始消化管,并进一步分化为消化     

单克隆抗体MG7在胃癌癌前病变组织中的免疫组织化学研究

作者应用胃癌单克隆抗体MG7对289例胃粘膜活检标本进行PAP免疫组织化学观察,发现伴有肠化生的萎缩性胃炎组(20.0％)与伴有肠化生的癌旁粘膜组(62.1％)间、弥漫型胃癌癌旁粘膜肠化生组(41.7％)与肠型胃癌癌旁粘膜肠化生组(76.5％)间、轻型不典型增生组(23.9％)与中重度不典型增生组(54.0％)间,MG7-Ag表达阳性率均有显著性差异(均为P<0.01)。在胃癌组织中MG7-Ag表达阳性率为87.8％,而8例正常胃粘膜均阴性。结果表明,胃癌单克隆抗体MG7对胃癌的诊断具有较高的特异性;肠化生与胃癌(尤其是肠型胃癌)的发生有密切关系;对MG7-Ag表达阳性的肠化生和异型增生患者加强随访,将有利于胃癌的早期发现。     

胃癌及癌前病变的血型物质

血型物质或称A.B.H同族抗原,在各种正常组织和细胞中常具有一定的分布。当细胞发生去分化或癌变时,(包括胃癌),细胞内血型物质常呈现消失或减少,因此,有些作者试图应用血型物质作为肿瘤恶性度的指标。但到目前为止,对不同组织学类型的胃癌的血型物质消长情况;以及对胃粘膜不典型上皮增生及肠化生的血型物质变化的情况,均尚无详细的研究。本文的目的是研究胃癌的不同的组织学类型及癌前病变的血型物质的消长变化并分析其意义。材料和方法收集82例外科切除的带癌胃标本及33例具有不典型增生(其中24例伴有肠化生改变)的胃标本。采用Alcian Blue(AB)pH2.5及AB/PAS染色以显示酸性及中性粘蛋白。采用特异性红细胞粘附试验     

胃粘膜肠化生及粘液癌分类的探讨

对50例良性及50例恶性病变幻肠化生及固有病变进行了光镜观察,探讨了肠化生与粘液癌的分类及其与胃癌发生的关系。HE切片中,根据肠化生占粘膜组织的比例,将其分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级;在HID、AB、pH 2.5切片中,根据占优势的粘蛋白,将其分为大肠化生为主型(硫粘蛋白—棕黑色>唾液酸枯蛋白—蓝包)、小肠化生为主型(唾液酸枯蛋白>硫酸粘蛋白)、大小肠化生为主型(硫粘蛋白=唾液酸粘蛋白);将粘液癌分为大肠为主型、小肠为主型、大小肠     

介绍一种FAAPT冷冻切片快速固定液

手术中冷冻切片的病理诊断是根据冷冻切片组织学形态来进行 ,以确定病变组织的良恶性为目的〔1〕。制作冷冻切片包括制片、固定、染色三个环节 ,在冷冻切片中固定液的选择是不可忽视的一个因素。我们在工作中经反复试验在众多固定液中选择ＦＡＡ液 (福尔马林 -醋酸 -乙醇 ) ,经改良配成一种适合于冷冻切片的ＦＡＡＰＴ(福尔马林 -醋酸 -乙醇 -苦味酸 -ＴｒｉｔｏｎＸ - 10 0 )快速固定液。该液具有固定速度快、渗透力强、ＨＥ染色鲜艳、组织结构清晰等优点。1　材料与方法1 1　ＦＡＡＰＴ固定液的配制　福尔马林 15ｍｌ,醋酸 3ｍｌ,95 %乙醇…     

31例腺泡状软组织肉瘤组织学及免疫组化研究

腺泡状软组织肉瘤(Alveolar Soft Part Sarcoma,简称ASPS)是一种罕见的肿瘤,其组织发生至今仍未明确。我科自1974年至1988年间累积有31例,现作组织学及免疫组化分析,报道如下。1 材料和方法31例标本均经福马林固定,石蜡包埋,HE染色。28例做了PAS(经淀粉酶消化)及Alcian蓝染色。28     

胃组织发生中的粘液变化及其与胃癌组织中的粘液物质的比较

1.胎儿胃上皮内粘液物质随组织不断分化而由酸性向中性转变。足月时除贲门部与幽门部转变成中性粘液外,胃体部上皮仍未完全变成中性粘液,小凹底部与胃腺颈部仍保留有较多的酸性粘液。 2.成人胃体部之小凹底部与腺颈部仍为保留少量酸性粘液的唯一部位,从粘液分泌功能看,可能是整个胃粘膜内分化较低之区域。 3.正常成人幽门部之肠化生区与癌组织附近的肠化生区出现含有酸性粘液之上皮,以及腺癌组织含有不同数量的酸性粘液提示,它们可能来源于小凹底部与腺颈部之低分化细胞,表明有向胚胎性胃组织逆转的倾向。     

慢性萎缩性胃炎胃粘膜上皮的超微结构观察

关于慢性萎缩性胃炎(CAG)胃粘膜超微结构的研究,国内外均有报道。本文对6例经病理证实为CAG的病例,进行了超微结构观察,发现1例幽门腺上皮含有纤毛细胞。现将观察结果报告如下, 一、材料和方法: 本文所观察的材料,除1例手术切除标本外,其余5例皆系胃镜下取材(胃窦和/或胃体)。每例取材2～4块。经戊二醛锇酸双固定,乙醇系列脱水,Epon812包埋,LKBⅢ型超薄切片机切片,醋酸铀及硝酸铅双重染色后,以国产DXA_4~(-10)型和日本H-600型电子显微镜进行观察及拍片。二、观察结果: (一)壁细胞变化:主要为细胞内分泌小管扩张,微绒毛及管泡系统减少,线粒体肿胀。主细胞形态未见显著异常。颈粘液细胞富含游离核蛋白体粗面内质网及粘液颗粒,可见开放式局部分泌图象。亦可见整个分泌颗粒被排出到腺腔中。内分泌细胞存在于腺体的基底部,量多少不一,一般数量见减少。     

胃部疾病患者组织和血清中白细胞介素23和胃蛋白酶原1的变化及临床意义

目的探讨胃部疾病患者组织和血清中白细胞介素23(IL-23)、胃蛋白酶原1(PG1)的变化及临床意义。方法分别收集慢性浅表性胃炎、慢性萎缩性胃炎伴肠化生以及胃癌患者病变组织及外周血,免疫组织化学染色检测IL-23在这3种胃部疾病组织中的表达,时间分辨免疫荧光分析法定量检测血清PG1的水平,ELISA检测血清IL-23的水平,Pearson相关分析验证慢性萎缩性胃炎伴肠化生及胃癌患者血清中IL-23与PG1的相关性。结果在组织样本中,与慢性浅表性胃炎组相比,慢性萎缩性胃炎伴肠化生组和胃癌组IL-23表达明显增高。与慢性浅表性胃炎组相比,慢性萎缩性胃炎伴肠化生组和胃癌组血清IL-23浓度也明显升高,且呈递增趋势;而PG1浓度则在慢性萎缩性胃炎伴肠化生组和胃癌组中明显降低。Pearson相关性分析显示慢性萎缩性胃炎伴肠化生组和胃癌组中血清IL-23的水平与PG1呈负相关。结论慢性萎缩性胃炎伴肠化生和胃癌患者组织中IL-23高表达,且血清IL-23的水平与PG1呈负相关。     

小鼠胸腺皮质酸性对硝基酚磷酸酶的细胞化学定位

用6周BALB/c小鼠,取胸腺皮质切成1mm~3小块,固定于含5％蔗糖的2％(戊二醛二甲胂酸(pH 7.2)中。经0.1 mol/L二甲胂酸缓冲液洗后,用振动切片机切成40 μm厚片。再经0.2 mol/L醋酸缓冲液(pH5.0)漂洗,入孵育液;3.0 mmol/L对硝基酚磷酸钠,2.0 mmol/L氯化亚铈,0.1mmol/L醋酸缓冲液(pH5.5),含5％蔗糖     

改良Warthin-Starry染色技术的新用途

我们用改良Ｗａｒｔｈｉｎ Ｓｔａｒｒｙ(Ｗ Ｓ)染色方法检查一些病原体取得较好效果 ,现将我们的工作体会介绍给同行。1　材料和方法1.1　材料　实验材料均取自外检组织 ,包括梅毒螺旋体感染的皮肤粘膜组织、鼻硬结症之鼻腔粘膜 ,侵袭性霉菌病之上颌窦粘膜组织、胃炎粘膜组织及淋病炎性渗出物涂片。组织均经常规处理、石蜡包埋 ,每份切成数张 6 μｍ厚的切片备用。涂片常规固定 1ｍｉｎ后漂洗吹干备用。1.2　染色液的配制和染色程序1.2 .1　 染色液的配制　①明胶原液 :明胶 5 ｇ ,蒸馏水 10 0ｍｌ,加热溶解。②显色剂 :明胶原液 8ｍｌ、2 …     

小儿胃黏膜肠上皮化生病理组织学特点

一、材料和方法1.材料:对1990—2004年我科及浙江大学附属儿童医院病理科共12746例胃镜活检胃黏膜组织进行回顾性研究,其中诊断胃炎伴胃黏膜肠上皮化生55例,男性23例,女性32例,年龄最小者3岁,最大16岁,平均年龄(9.1±2.8)岁。随机抽取200例经病理诊断胃炎不伴肠化患儿作为对照组。2.标本处理:分别在胃窦近幽门小弯侧3～5cm处钳取黏膜标本2块及十二指肠球部钳取黏膜标本1块。1块胃黏膜标本行快速尿素酶试验。其余经4%中性甲醛固定,常规石蜡垂直包埋3μm连续切片3张,分别用于HE染色、PAS染色和胃幽门螺杆菌(Hp)亚甲蓝法染色。取胃黏膜肠上…     

硫酸阿尔新蓝染色方法介绍

<正>淀粉样蛋白的鉴别是淀粉样变病理诊断重要的参考。传统方法依赖于刚果红染色,但其存在过程复杂,影响因素较多的缺点,近年国外新兴的一种染色方法——硫酸阿尔新蓝染色(SAB法)用于淀粉样蛋白的鉴别具有显著优势,我院病理科近期采用该方法取得良好效果,特介绍如下。1材料与方法1. 1组织标本选自武汉大学中南医院病理科活检组织,10%中性福尔马林固定,石蜡包埋切片,切片厚度8～10μm。1. 2试剂准备及配置阿尔新蓝染色液,1%硫酸钠溶液,     

双歧杆菌对食物过敏治疗作用的实验研究

目的探讨双歧杆菌对食物过敏的治疗作用。方法 4周龄棕色挪威大鼠(Brown-Norway Rat,BN Rat)构建卵清蛋白(ovalbumin,OVA)致敏动物模型,以OVA 1 mg每天连续灌胃6周,同时分别建立PBS对照组和双歧杆菌治疗组;第6周取血测定血清中OVA特异性IgE(OVA-IgE)水平和IgG(OVA-IgG)水平作为模型评测指标;采用张力换能器测定肠道收缩情况,苏木素-伊红染色(Hematoxylin-Eosin stain,HE)及甲苯胺蓝(Toluidine blue Benzen esulfonic acid,TB)染色观察肠组织病理变化和肠粘膜肥大细胞数目和形态变化。结果第6周时实验组OVA-IgE和OVA-IgG含量显著升高,与对照组相比,OVA-IgE存在显著性差异(P<0.05),OVA-IgG存在极显著差异(P<0.01);经益生菌治疗后,OVA-IgE和OVA-IgG含量显著下降,与实验组相比,存在显著性差异(P<0.05)。双歧杆菌治疗组肠组织收缩较OVA组显著降低,存在显著性差异(P<0.05);HE染色和甲苯胺蓝染色可见双歧杆菌治疗组肠粘膜破坏程度、肠粘膜肥大细胞脱颗粒现象较OVA组缓解。结论 OVA致敏模型和双歧杆菌治疗组模型成功建立,双歧杆菌对食物过敏有较好的治疗作用。     

小鼠呼吸道肥大细胞分布的研究

10只中国1号小鼠,5只为幼鼠(45天)和5只成鼠(95天),其呼吸道组织标本固定于等渗甲醛-醋酸混合液,分别用甲苯胺蓝和Alcian蓝-藏红染色,以显示肥大细胞。并用其皮肤肥大细胞作对照。结果表明:单位面积呼吸道粘膜的结缔组织肥大细胞(CTMC)数,在鼻腔粘膜显著高于喉、气管和肺。同时,呼吸道肥大细胞随年龄而增加,在成鼠明显多于幼鼠(p<0.05)。用Alcian蓝-藏红染色的成鼠肥大细胞颗粒,其Alclan蓝阳性率高于幼鼠。气管和肺内偶见粘膜型肥大细胞(MMC)。     

单胺氧化酶B在大鼠胃和十二指肠的分布

目的 研究单胺氧化酶B(MAO-B)在大鼠胃和十二指肠组织中的表达,为进一步研究MAO与应激导致的胃肠功能紊乱间的关系提供形态学依据.方法 采用免疫荧光组织化学的方法,观察了MAO-B在大鼠胃和十二指肠组织中的分布.结果 MAO-B免疫反应阳性细胞分布在大鼠胃底腺、贲门腺、幽门腺腺体基底部的肠嗜铬细胞,胃粘膜腺体的壁细...     

三种方法检测胃黏膜活检标本幽门螺杆菌感染的病理诊断价值

目的 探讨不同检测方法对胃黏膜活检标本中幽门螺杆菌(helicobacter pylori,HP)感染的诊断价值。方法 收集胃黏膜活检标本200例,采用美蓝染色、荧光染色及免疫组化染色检测HP的感染情况,分析各方法HP检测结果的一致性。结果 胃黏膜活检标本中HP的检出率:美蓝染色75%(150/200),荧光染色79%(158/200),免疫组化染色68.5%(137/200)。荧光染色的阳性率最高,κ系数检验结果显示,三种方法的检测结果高度一致,差异有统计学意义(P0.05),免疫组化染色与美蓝染色的一致性最高(κ=0.840)。HP的感染率与炎症程度、活动度呈正相关,与肠化生呈负相关(P0.05)。结论 免疫组化染色可在蛋白水平检测HP的表达,并可预测疾病的发展,是检测胃黏膜活检标本中HP的最佳方法。