丙型肝炎患者血清和外周血单个核细胞中HCV RNA检测及意义

目的 了解丙肝患者血清和外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）中ＨＣＶＲＮＡ存在情况及有其临床意义，方法 应用套式ＰＣＲ检测４６例急性丙型肝炎（丙型肝炎以下简称丙肝）和４２例慢性丙型肝炎患者血清和ＰＢＭＣ中ＨＣＶＲＮＡ。结果 慢性丙型肝炎患者ＰＢＭＣ中ＨＣＶＲＮＡ检出率显著高于急性丙型患者（Ｐ〈０．００１），急，慢性丙型肝患者血清和慢性丙肝患者ＰＢＭＣ中ＨＣＶ ＲＮＡ检出率显著高于ＡＬＴ正常的抗－ＨＣＶ阳性     

慢性乙丙型肝炎重叠感染后血清病毒标志物的变化

目的为了探讨病毒之间的干扰现象，作者对慢性乙丙型病毒性肝炎重叠感染患者的血清肝炎病毒标志物的变化进行研究。方法１９９２年１月＿１９９４年１０月连续在我院住院确诊的慢性乙丙型病毒性肝炎重叠感染患者６０例，同期连续收住院的单纯慢性乙型肝炎患者１１０例作为对照组，比较两组患者入院时的血清乙型肝炎病毒标志物，并对观察组中２０例患者进行了随访，随访期０．５＿３年。结果入院时观察组ＨＢｅＡｇ和抗＿ＨＢｃＩｇＭ阳性率较对照组显著减少（１９／６０对５２／１０６，８／６０对２９／１１０，Ｐ＜０．０５），ＨＢｓＡｇ阴性率和抗＿ＨＢｅ阳性率显著增高（１０／／６０对５／１１０，Ｐ＜０．０１；３８／６０对４８／１０６，Ｐ＜０．０５）。观察组２０例随访发现，ＨＢＶ＿ＤＮＡ阳性及ＨＢＶ＿ＤＮＡ，ＨＣＶ＿ＲＮＡ二项同时阳性例数都比入院时明显减少（４／２０对１０／２０，Ｐ＜０．０５；１／２０对７／２０，Ｐ＜０．０５）。结论慢性乙丙型病毒性肝炎重叠感染时存在病毒干扰现象     

抗HCV阳性慢性肝病患者HBV感染及前C／C区基因变异

探讨ＨＢＶ基因变异在ＨＢｓＡｇ阴性抗ＨＣＶ阳性慢性肝病中的意义。方法用巢式聚合酶链反应（ＰＣＲ）与限制片段长度多态性相结合，对５６例慢性肝病患者６例ＨＢｓＡｇ阴性抗ＨＣＶ阳性（Ａ组）．１９例ＨＢｓＡｇ阳性抗ＨＣＶ阳性（Ｂ组）及３１例单独ＨＢＶ成染（Ｃ组）进行前Ｃ区密码２８终止变异（Ａ８３）和Ｃ区密码９７异亮氨酸亮氨酸变异（Ｌ９７）分析。结果Ａ组和Ｂ组Ａ８３和Ｌ９７变异检出率分别为３３％和４２％显著低于Ｃ组８１％（Ｐ值＜０．００１）：而Ａ组和Ｂ组间无统计学差异（Ｐ值＞０．０５）。结论ＨＢＶ和ＨＣＶ双重感染ＨＢｓＡｇ阴性与Ａ８３和Ｌ９７变异无相关。     

聚合酶链反应检测血液病患者合并丙型肝炎病毒感染

聚合酶链反应检测血液病患者合并丙型肝炎病毒感染杨桂玲，陈文 ，杨碧云，曹瑞生，文艺丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）感染是输血后非甲非乙型肝炎的主要原因。在免疫抑制群体如恶性血液病，尤其是化疗或骨髓移植治疗后，以及再生障碍性贫血，常需输血治疗，大大增加了感染的机...     

肝病患者血清中HBVcccDNA检测的临床意义

目的 了解cccDNA与病毒复制及拉米夫定耐药突变(YMDD)及肝脏病变的关系.方法 采用分子信标PCR技术检测HBV携带者、慢性乙型肝炎、乙型肝炎肝硬化、肝癌患者血清中cccDNA与HBVDNA及YMDD突变.结果 对283例不同HBV感染者血清进行了cccDNA检测,阳性123例(43.46%),全部为HBVDNA阳性标本;cccDNA与血清HBV-DNA相关(x2=28.27,P＜0.01)及ALT相关(x2=48.46,P＜0.01).68例接受拉米夫定治疗半年以上患者复查血清ALT、HBVDNA、YMDD及ccDNA,显示ALT异常32例(与cccDNA相关x2=48.46,P＜0.01),HBVDNA阳性24例(与cccDNA相关x2=28.27,P＜0.01),其中包括YMDD阳性18例与cccDNA阳性16例(P=0.046).结论 血清cccDNA,是反映HBV复制及肝脏细胞损伤的血清标志.监测YMDD与血清cccDNA可以提示抗病毒治疗中HBV复制状态及病变进展情况.     

α干扰素对慢性丙型肝炎血清中HCVRNA水平的影响

目的：了解ＨＣＶ不同基因型对α干扰素治疗的反应。方法：采取干扰素不同治疗量和不同疗程治疗病人。血清用逆转录酶一聚台酶链反应扩增ＨＣＶＲＮＡ５－非编码区，再用Ｓｌｏｔ－ｂｌｏｔ杂交鉴定。结果：ＨＣＶＲＮＡ阴转，丙氨酸转氨酶（ＡＬＴ）降至正常（完全反应）占４０．０％；３ｘ１０￣６Ｕ治疗一月无反应，增量６ｘ１０￣６Ｕ出现前述结果（部分反应Ｉ）占３６．７％：增量６ｘ１０￣６Ｕ治疗一月无反应，再增量９ｘ１０￣６Ｕ出现前述完全反应结果（部分反应Ⅱ）占１５．０％；增量９×１０￣６Ｕ治疗一月无反应（无反应）占８．３％。３８．６％ＨＣＶ基因１型、４４．４％Ⅱ型、４２．９％Ⅲ型是完全反应。２４例完全反应病人中１５例治疗前ＨＣＶＲＮＡ拷贝数低于１０／ｍｌ。结论：各基因型对于扰索的治疗反应无显著性差异，肝损害轻、血清ＨＣＶＲＮＡ拷贝数低者对干扰素治疗反应较好。     

定量聚合酶链反应在检测丙型肝炎病毒感染血清中的应用

定量聚合酶链反应在检测丙型肝炎病毒感染血清中的应用李伯安马洪滨薛净乔小红程云作者单位：１０００３９北京解放军第３０２医院附表ＰＣＲ定性与ＰＣＲ定量比较项目ＨＣＶＲＮＡ定量结果（拷贝／微升）＜１０１１０１～１０５＞１０５合计巢式（＋）４７７１６９７定性...     

原位聚合酶链技术检测肝细胞癌组织内丙型肝炎病毒核酸及其意义

应用一步反转录。聚合酶链原位扩增法（ＯＲＴ－ＰＣＲＩＳ）检测肝细胞癌（ＨＣＣ）及癌周组织内丙型肝炎病毒核糖核酸（ＨＣＶＲＮＡ），同时以一步反转录－ＰＣＲ（ＯＲＴ－ＰＣＲ）法检测血清及肝组织匀浆内ＨＣＶＲＮＡ。发现癌和癌周组织经原位扩增后ＨＣＶＲＮＡ检出率为７７．８％（２／２７）及８１．５％（２２／２７），而血清及组织匀浆内仅为２９．６％及３７．Ｏ％，两者与癌及癌周组织相比差异均有显著性（Ｐ＜０．０１）。ＯＲＴ－ＰＣＲＩＳ示在癌组织中ＨＣＶＲＮＡ以核型为主（１２／２１），阳性细胞点样分布，细胞内信号强度多为＋（５７．１％）；而癌周组织以核浆型为主（１４／２２），阳性细胞弥漫分布，信号强度多为＋＋＋（５０．０％）。无论在癌还是在癌周组织均未发现ＨＣＶｃＤＮＡ存在。结果提示ＯＲＴ－ＰＣＲＩＳ优于ＲＴ－ＰＣＲ，ＨＣＶ对本地区ＨＣＣ发生、发展起着极为重要的作用。癌周ＨＣＶ复制较癌组织内活跃，癌和癌周细胞核阳性表明ＨＣＶＲＮＡ在核内整合或复制，这种整合或复制对肝细胞基因组ＤＮＡ产生的影响可能与乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）相类似。     

聚合酶链反应检测乙型肝炎患者肝外组织中的乙型肝炎病毒DNA

应用巢式聚合酶链（ＰＣＲ）技术对１８例石蜡包埋的胆囊、肾、脾、肾上腺、心、睾丸、胰腺及肝脏组织的乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）ＤＮＡ进行了检测，并与其免疫组化及原位杂交方法作比较。二组引物检测的结果表明：肝组织中均有ＨＢＶ感染，其中５例有ＨＢＶ的复制。肝外组织中ＨＢＶ检出率分别为胆囊８５．７％、７５．０％、肾７２．７％、肾上腺６６．７％、心脏５５．６％、睾丸５５．６％和胰腺５４．５％，但均未检测出ＨＢＶ的复制，ＰＣＲ检测发现与免疫组化及原位杂交结果基本一致。ＨＢＶ可以感染肝外组织但并不在这些组织中复制的发现可以解释受感染的肝外组织可以作为肝外感染源，但并不引起这些脏器出现明显的病理变化。     

慢性乙型肝炎患者血清及肝组织中乙型肝炎病毒核心基因的研究

３６例肝穿刺诊断为慢性乙型肝炎患者的肝组织及血清，用ＨＢＶ全基因核酸杂交法及聚合酶链反应（ＰＣＲ）法扩增了病毒的ＰｒｅＣ／Ｃ区基因片段。发现ＰＣＲ法扩增后再经Ｓｏｕｔｈｅｒｎ吸印转移及核酸杂交（ＰＣＲ－ＳＢＨ）可显著提高检出ＨＢＶ基因的敏感性。对５例无任何血清ＨＢＶ标记者证实在其肝内存在ＨＢＶ基因。用ＡｖａⅡ，ｓａｕ３ＡＩ，ＸｍｎＩ，ＢｓｔＮＩ及ＴａｑＩ酶切图谱分析上述病例的ｃ基因，与ｐＡＤＲ－１Ｃ基因比较，有４例（５份标本）有Ｓａｕ３ＡＩ的异常酶切位点，提示ＨＢＶ不仅ＰｒｅＣ区存在变异株，Ｃ基因中亦可有变异。     

丙型肝炎病毒感染与各类肝病关系的探讨

为了解肝病患者丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）的感染状况，用ＲＴＰＣＲ及ＥＬＩＳＡ法测定肝炎病毒标志。有受血史者，急性丙肝（６０５３％）高于急性乙肝（１０５３％，Ｐ＜００１）。无受血史者，急性肝炎以甲、乙型肝炎为主（４１６７％、３０５６％），高于丙肝（４１７％，Ｐ＜００１）。有受血史者的急、慢性丙肝及无症状ＨＣＶ感染者（６０５３％、２０３４％，２９１７％），高于无受血史者的４２％、８７４％，３３３％（Ｐ＜００１～００５）。慢性及重型肝炎、肝硬化、肝癌及无症状感染者乙肝病毒（ＨＢＶ）感染均高于ＨＣＶ感染（Ｐ＜００１）。提示ＨＣＶ感染多与血制品有关；慢性及重型肝炎、肝硬化及肝癌主要由ＨＢＶ所致。     

慢性丙型肝炎患者血清HCVRNA定量分析：竞争性聚合酶链反应

目的：探讨ＨＣＶ复制水平与肝病进展的关系。方法：用竞争性逆转录聚合酶链反应（ＣＲＴ－ＰＣＲ）定量检测２７例慢性丙肝患者（ＣＨＣ）血清ＨＣＶＲＮＡ。结果：ＣＨＣ患者血清ＨＣＶＲＮＡ水平变化范围１０２～１０６ｃｏｐｉｅｓ／５０ｕｌｓｅｒｕｍ。１３例慢性迁延性肝炎（ＣＰＨ）患者血清ＨＣＶＲＮＡ平均水平（５．０６８±１．０４，Ｌｏｇ１０ｃｏｐｉｅｓ／５０μｌｓｅｒｕｍ）明显低于１０例慢性活动性肝炎患者（ＣＡＨ）（５．７９±０．２５）和４例肝硬化（Ｃｉｒ）患者（５．８３±０．７５），Ｐ值均＜０．０５。血清ＨＣＶＲＮＡ水平同ＡＬＴ水平间呈正相关（ｒ＝０．４９９７，Ｐ值＜０．０５）。结论：表明丙肝病毒感染后病毒血症水平低，ＨＣＶ复制水平与肝损伤相关，在慢性感染中ＨＣＶ仍活跃复制，并与肝病进展相关。     

乙型和丙型肝炎病毒感染与慢性肝病

检测天津地区１１９例慢性肝病毒者ＨＢＶ、ＨＣＶ标志，并对其中２８例ＨＣＶＲＮＡ阳性血清进行基因分型。结果，ＨＢＶ感染率明显高于ＨＣＶ感染率（Ｐ〈０．０５），肝癌患者中ＨＢＶ、ＨＣＶ重叠感染率明显高于慢性肝炎（Ｐ〈０．０５）；各组均以ＨＣＶⅡ型为主。提示天津地区慢性肝病上前仍以ＨＢＶ感染为主；ＨＢＶ、ＨＣＶ重叠感染对肝癌的发生似有相加作用；ＨＣＶⅡ型感染在天津地区ＨＣＶ相关性曙性肝病中可以起主要作用     

丙型肝炎特异性诊断的比较及其意义探讨

丙型肝炎特异性诊断的比较及其意义探讨邢益平，Ｓ．Ｂｏｗｄｃｎ，Ｓ．Ｌｏｃａｒｎｉｎｉ自Ｃｈｏｏ等首先发现并应用融合蛋白Ｃ１００－３诊断丙型肝炎以来，一些新的检测特异性抗体或直接检测病毒核酸的诊断方法相继问世，大大提高了丙型肝炎检测的敏感性和特异性。本...     

多重和套式聚合酶链反应检测血液、腹膜透析患者血清中HBV DNA和HCV RNA

利用免疫学和聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法，对３５例血液透析（血透）、１４例腹膜透析（腹透）患者的８４份血清进行了检测。血透组抗－ＨＣＶ阳性率８２．９％，ＨＣＶＲＮＡＰＣＲ阳性率５１．４％；腹透组抗－ＨＣＶ阳性率仅７．１％，ＨＣＶＲＮＡＰＣＲ均阴性。ＨＢｓＡｇ和（或）ＨＢｅＡｇ在二组的阳性率分别为２５．７％和２１．４％；ＨＢＶＤＮＡＰＣＲ阳性率分别为４５．７％和６４．２％。透析患者ＨＣＶ和ＨＢＶ感染率显著高于一般人群。血、腹透两组ＨＣＶ感染率相差非常显著，血透患者抗－ＨＣＶ和ＨＣＶＲＮＡＰＣＲ阳性高于腹透患者，表明血透过程在丙型肝炎传播方面起重要作用。作者还采用多重和套式ＰＣＲ方法，将ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ在合并的逆转录和ＰＣＲ扩增系统中，连续进行逆转录和第一轮多重ＰＣＲ扩增，再进行第二轮多重ＰＣＲ，具有特异、敏感、简便、快速和经济等特点，适于临床应用。     

肝病患者肝组织HCV抗原的检测及意义

目的 探讨肝病患者肝组织丙型肝炎病毒（HCV）抗原的表达及意义。方法 应用免疫组织化学方法对252例肝病患者石蜡包埋肝组织中HVC抗原进行了检测。结果 多克隆抗HCV检出HcAg阳性25例（9．92％）,单克隆抗HCV-NS3检出HCV—NS3蛋白阳性19例（7．54％）。19例HCV—NS3阳性肝组织均同时表现HcAg阳性,二者在肝细胞分布状况相似,不同病理类型肝炎患者肝组织中HCV抗原检出率无统计学意义。252例血清检出HCV标志物阳性71例,单独抗HCV阳性者无1例肝组织中检出抗原。结论 肝组织中抗原的检出和血清HCV标志具有良好对应性,但不同血清HCV标志模式抗原检出率有统计学意义。     

聚合酶链反应评价原位杂交检测慢性HBV感染者肝内HBVDNA结果

用地高辛素探针原位杂交检测慢性ＨＢＶ感染者肝内ＨＢＶＤＮＡ，聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测血清ＨＢＶ ＤＮＡ评价病毒复制状态。发现肝内ＨＢＶ ＤＮＡ阳性肝细胞，在１４例肝组织病变不活动的ＨＢｅＡｇ阳性慢属于无症状ＨＢＶ携带者（ＡｓＣ）呈弥漫性分布；而ＨＢｅＡｇ阳性或阴性活动性肝病病人均聚合分布于肝细胞坏死区。上述慢性感染者９８％血清ＨＢＶＤＮＡ阳性。说明ＨＢＶ复制与肝组织病变有关但非肝损伤直接原因。１     

单纯抗-HBc阳性慢性丙型肝炎患者隐匿性HBV感染

目的观察单纯血清抗-HBc阳性CHC患者隐匿性HBV感染的状况及意义。方法采用FQ-PCR法对62例单纯血清抗-HBc阳性的慢性丙型肝炎（CHC）患者进行血清HBV DNA定量检测;常规进行肝脏组织病理学检查。结果在62例CHC患者中,血清HBV DNA阳性16例（25.81%）;血清HBV DNA阳性较阴性患者肝组织炎症活动度及纤维化程度明显加重（P〈0.05）;在62例CHC患者中,HCV RNA阳性41例（66.13%）;41例HCV RNA阳性患者HBV DNA定量水平（3.22±1.35lgcopies/ml）显著低于21例HCV RNA阴性患者（4.53±2.06lgcopies/ml,P〈0.05）。结论单纯血清抗-HBc阳性CHC患者隐匿性HBV感染并不少见。隐匿性HBV感染的CHC患者肝脏病变较重。     

多重和套式聚合酶链反应检测血液,腹膜透析患者血清中HBV D…

利用免疫学和聚合反应（ＰＣＲ）方法，对３５例血液透析（血透），１４例腹膜透析（腹透）患者的８４份血清进行了检测。血透组抗－ＨＣＶ阳性率８２．９％，ＨＣＶ ＲＮＡ ＰＣＲ阳性率５１．４％；腹透组抗－ＨＣＶ阳性率仅７．１％，ＨＣＶ ＲＮＡ ＰＣＲ均阴性。ＨＢｓＡｇ和（或）ＨＢｅＡｇ在二组的阳性率分别为２５．７％和２１．４％；ＨＢＶＤＮＡＰＣＲ阳性率分别为４５．７％和６４．２％。透析患者ＨＣＶ和ＨＢＶ感