UPLC-MS/MS测定beagle犬内西罗莫司血药浓度

目的建立测定beagle犬内西罗莫司（SRL）血药浓度的UPLC-MS／MS联用方法。方法色谱柱为AgilentC18柱（50mm×2．1mm,1．7μm,）;预柱为C18柱（4．0mm×3．0mm,5μm）;流动相为乙腈-水（90：10,v／v）;流速为0．30ml／min;柱温为50℃;进样室温度为4℃。离子源为ESI源;正离子方式检测;扫描方式为多反应监测（MRM）;用于定量分析的离子反应分别为m／z936．6→m／z409．7（西罗莫司）和m／z826．6→m／z415．4（内标他克莫司）。取全血样品经液-液萃取后进样20μl。结果SRL在0．50～12．00ng／ml浓度范围内呈良好的线性（r=0．9997）,定量下限0．5ng／ml,日内、日间精密度（RSD）均小于15％,方法回收率均大于90％,萃取回收率大于76％。结论本方法具有样品处理简单,方法灵敏、快速、选择性强,满足西罗莫司在beagle犬体内药物检测的要求。     

HPLC/MS/MS联用技术测定全血中的瑞芬太尼

目的:建立全血中瑞芬太尼的HPLC／MS／MS测定方法,并测定围麻醉期患者体内瑞芬太尼的血药浓度。方法:全血样品中加入枸橼酸芬太尼作内标,用1-氯丁烷进行提取。以乙腈与三氯甲烷(V乙腈:V三氧甲烷= 1:1)混合液加乙酸铵(2 mmol·L-1)为流动相,色谱柱为Intersil ODS-3(50 mm×2．1 mm,3μm),流速0．3 mL·min-1。三级四极杆质谱采用正离子模式,离子采集方式为多反应监测模式(MRM),离子源温度200℃,离子源电离电压为5 000 V,雾化气流速8 L·min-1。采集离子(母离子／子离子)为瑞芬太尼377／228,芬太尼337／188。结果:瑞芬太尼在0．5～50．0 ng·mL-1浓度范围内呈良好的线性(r=0．9994)。日内、日间精密度均在15％以内,提取回收率大于67．3％,方法回收率在95．0％～97．6％。结论:本方法灵敏、准确,适合瑞芬太尼的体内分析。     

西罗莫司血药浓度监测方法的建立及在血管瘤患儿的应用

目的：建立测定人全血中西罗莫司浓度的超高压液相色谱-串联质谱（UPLC-MS/MS）方法。方法：色谱柱为Agilent SB-C18（2.1 mm×50 mm,1.8 μm）,流动相为水（A）-乙腈（0.1%甲酸,B）,流速0.3 mL/min,梯度洗脱。依维莫司为内标,电喷雾离子源,多反应离子监测模式,正离子模式检测。西罗莫司和依维莫司离子对分别为m/z 936.5/409.5、980.6/389.3。同时采用该方法对我院血管瘤患儿西罗莫司血药浓度进行监测。结果：西罗莫司在0.625~40.000 ng/mL浓度范围内相对峰面积线性关系良好（R2=0.999 5）,日内、日间RSD均小于10%,提取回收率91.95%~118.50%,基质效应81.67%~107.84%。结论：本方法灵敏、准确、快速,能满足临床常规监测西罗莫司血药浓度的需求     

LC—MS／MS法测定人血浆中左氧氟沙星浓度

目的：建立LC-MS／MS法测定人血浆中左氧氟沙星的浓度。方法：LC条件：色谱柱为SymmetryShield^TM RP18（100mm×2．1mm，3．5μm），流动相为甲醇-1mmol／L醋酸铵溶液-甲酸（35：65：0．01），流速为0．25mL／min，进样量为10μL；MS条件：电喷雾离子源，正离子电离模式，多反应离子监测的MS扫描方式。结果：左氧氟沙星血药浓度在8．86～5320μg／L范围内线性关系良好，最低定量限为8．86μg/L；日内、日间精密度良好，RSD均小于15％，准确度均在±15％范围内。采用本法对20名健康受试者单剂量口服0．2g盐酸左氧氟沙星片进行了药动学研究。结论：本法前处理简单，分析快速、灵敏、准确，适用于左氧氟沙星的药动学和生物等效性研究。     

HPLC-MS/MS法测定全血中西罗莫司的药物浓度

目的:建立简便、快速地测定人全血中西罗莫司血药浓度的HPLC-MS/MS方法。方法:全血样品经硫酸锌及含有子囊霉素(内标)的乙腈溶液沉淀后,取上清液20μL进样分析。采用Symmetry-C18色谱柱(2.1 mm×50 mm,3.5μm),流动相梯度洗脱,流速为0.5 mL.min-1,质谱采用电喷雾离子化电离源,经多反应监测模式检测。结果:西罗莫司和子囊霉素的保留时间分别为2.24 min和2.21 min,空白血浆中内源性物质不干扰测定;西罗莫司的血药浓度在1~30 ng.mL-1时,线性关系良好(r=0.999 5);日内、日间RSD值均小于10%,提取回收率为86.4%~90.4%。结论:本方法灵敏、准确、简单、快速,可用于西罗莫司的血药浓度监测和早期肝移植患者药代动力学研究。     

Beagle犬血浆中丙酸倍氯米松和单丙酸倍氯米松的LC-MS/MS测定

建立了LC—MS／MS法测定丙酸倍氯米松及其代谢产物单丙酸倍氯米松在Beagle犬血浆中的浓度。血浆样品用乙醚萃取，采用Inersil—ODS 3色谱柱，甲醇-水（85：15，含2mmol／L甲酸铵，甲酸调至pH3．6）为流动相，流速0．2ml／min。使用电喷雾离子源接口，可同时检测丙酸倍氯米松和单丙酸倍氯米松。血浆中丙酸倍氯米松的线性范围为0．1～10ng／ml，相对回收率96．0％～104．3％，日内、日间RSD小于11．0％和9．1％。     

LC-MS/MS法测定全血中西罗莫司的药物浓度

目的建立测定人全血中西罗莫司(免疫抑制剂)浓度的LC-MS/MS的方法。方法全血样品经硫酸锌乙腈混合液沉淀后,用Zobox XDB-CN色谱柱,0.1 mmol.L-1乙酸水-0.1 mmol.L-1乙酸乙腈(60∶40)为流动相,流速0.45 mL.min-1,通过电喷雾离子化电离源,经多反应监测模式检测。结果全血中西罗莫司的线性范围为1.12～33.47μg.L-1,日内、日间RSD均小于10%,提取回收率为81.4%～92.4%。结论本法灵敏、准确、快速,可用于人全血中西罗莫司浓度监测和药代动力学研究。     

人血浆中克拉霉素浓度的LC-MS/MS测定及药物动力学研究

建立TLC-MS／MS法测定人血浆中克拉霉素的浓度，并研究了10名健康受试者口服国产克拉霉素片及其缓释片的药物动力学。以盐酸舍曲林为内标，乙腈．0．1％甲酸（70：30）为流动相，采用AlltimaC，。色谱柱，流速为0．2ml／min，血浆样品经乙腈沉淀后测定。质谱仪为串联四极杆质谱，采用大气压化学离子源（APCI），正离子扫描（ESI^＋）：离子选择通道分别为748．6／590．4（克拉霉素）和306．4／275．2（盐酸舍曲林）。克拉霉素在0．02～5μg／m1的范围内线性良好，方法回收率为101．3％～107．8％；日内和日间RSD均小于4．5％。     

HPLC—MS／MS法测定人体血浆中格列美脲及其活性代谢物

目的：建立同时测定格列美脲（Glimepiride,G）及其活性代谢物羟基格列美脲（Hydroxyl—glimepiride,M1）血浆浓度的高效液相色谱一串联质谱（HPLC—MS／MS）法。方法：血浆样品酸化后,经乙酸乙酯萃取后浓集进样,色谱柱为PhenomenexGeminiC18（50mill×3．0mm,5μm）,甲醇：水：甲酸（80：20：0．1）为流动相,流速为0．2mL／min,柱温为室温,采用电喷雾（ESI）离子源,多反应离子检测模式,以格列齐特（Gliclazide,IS）为内标。G、M1和IS的检测离子对分别为质荷比（仇／z）491．4—352．4、507．4—352．4、324．4—127．2。结果：G和M1的线性范围分别为1．25～400ng／mL和0．313～100ng／mL,最低定量限分别为1．25和0．313ng／mL;批内批间精密度均小于10％,方法回收率均在96．4％～102．5％之间。结论：该方法简便快速、特异性高,可用于同时测定G和M．血药浓度及其人体药代动力学的研究。     

用HPLC—MS／MS法测定人血浆中的二甲双胍浓度

目的：建立高效液相色谱-质谱／质谱（HPLCMS／MS）联用法测定人血浆中二甲双胍浓度的方法。方法：血浆样品经乙腈沉淀蛋白质后，用HPLC—MS／MS法测定二甲双胍浓度。甲醇-乙腈10mmol／L乙酸铵溶液（20：20：60）为流动相，流速为0．2mL／min；采用大气压化学电离源，以多离子反应监测（MRM）方式进行正离子检测，二甲双胍和内标苯乙双胍的定量分析离子对分别为m／z 130．2→71．0和m／z 206．1→59．9。结果：血浆样品中二甲双胍线性范围为2．0～2000μg／L（n=7，r=0．9996），最低定量限为2．0μg／L。低、中、高（10、500、1500 μg／L）3种浓度的日内RSD分别为4．65％、2．84％和3．41％（n=5）；日间RSD分别为7．96％、3．98％和4．77%（n=5）；准确度为95．9％、97．4％和89．90%（n=5）。结论：本方法灵敏度高、专属性强、重现性好、准确，可用于人血浆中二甲双胍的含量测定。     

LC/MS/MS与GC/MS法分析鉴定小鼠尿中沙美特罗的代谢产物

目的:鉴定沙美特罗在小鼠尿中的主要代谢产物.方法:ig给药后,收集小鼠尿液,经固相提取,葡萄糖醛酸酶水解,进行LC/MS/MS分析和硅烷化后进行GC/MS分析同时分离鉴定沙美特罗代谢产物.结果和结论:在给药后尿样中发现沙美特罗原型和4种代谢产物M1～M4,其结构推测为19-羟基沙美特罗(M1)、2-羰基沙美特罗(M2)、19-羰基沙美特罗(M3)和19-羟基-8-甲氧基沙美特罗(M4).     

高效液相色谱-质谱联用测定人血浆中辛伐他汀浓度

目的建立测定人血浆中辛伐他汀浓度的方法。方法血浆样品中加入内标,用乙醚提取,浓缩后采用高效液相色谱-质谱联用进行测定。结果血浆样品中辛伐他汀线性范围为0.1～20ng·mL-1(r=0.9999);萃取回收率为94.3%。结论本方法灵敏度高、专属性强、重现性好、准确,可用于辛伐他汀片人体药动学及生物等效性研究。     

LC/MS/MS的多反应监测方法定量测定灯盏乙素

目的：建立一种可靠的灯盏乙素定量分析方法。方法：用三级四极串联质谱(MS/MS)作为HPLC的检测器,其中MS/MS使用了多反应监测(MRM)扫描方式。选择母→子离子对m/z -461→m/z -285作为MRM监测的离子对;HPLC流动相为100％甲醇,流速0.9 mL.min^-1,色谱柱Beckman ODS-1。以测定短葶飞蓬提取物的灯盏乙素含量为例,对此方法进行了应用。结果：灯盏乙素在短葶飞蓬提取物中含量为6.98%。方法线性范围20～160 ng.mL^-1 (γ=0.999);加入灯盏乙素标准品20,60和160 ng的加样回收率分别为：96.5%,97.4%和97.3%。检测限为1 ng,每个样品的分析时间为4 min。结论：此法灵敏、快速、准确,可应用于灯盏乙素的各种药剂、药代的研究。     

System suitability in bioanalytical LC/MS/MS

System suitability is widely recognized as a critical component of bioanalysis. This paper discusses a generic system suitability test that monitors instrument performance throughout a run when used for liquid chromatography tandem mass spectrometry (LC/MS/MS) in bioanalysis. This system suitability process is designed to ensure that the LC/MS/MS system is performing in a manner that leads to the production of accurate and reproducible data that can be submitted with confidence to regulatory agencies. This process contains tests for signal stability, carryover, and instrument response. This approach is integrated throughout an analytical run and has been used in the analysis of over 25,000 batches of clinical samples. Two case studies are presented in which quality control samples and standards meet all acceptance criteria (based on Standard Operating Procedures and the Food and Drug Administration's recommendations for bioanalytical method validation) but failed the proposed system suitability test, and thus were rejected. In these case studies, the concentrations of a significant number of clinical samples (over 35%) were affected, resulting in changes of more than 15% when the samples were reanalyzed. These data indicate that the poor performance of an LC/MS/MS system could adversely affect the calculated concentrations of unknown samples even though the results for quality control samples appear to be acceptable.     

液相色谱-质谱联用法测定人血浆双氢青蒿素浓度

目的:建立液相色谱-质谱联用法测定健康人血浆中双氢青蒿素浓度的方法。方法:以青蒿素为内标,血浆样品采用液-液萃取法处理。用电喷雾离子化和正离子多离子反应监测方式检测双氢青蒿素。结果:该方法双氢青蒿素线性范围为1.01~2020 ng.ml-1;定量下限为1.001±0.072 ng.ml-1;方法回收率在93.0%~98.2%;批内、批间变异系数均<10%。结论:该方法准确、灵敏、特异、简便,适用于健康人血浆双氢青蒿素浓度的测定。     

氯吡格雷在人血浆浓度的液质联用测定法

目的建立测定人血浆中氯吡格雷(抗心肌及抗脑梗死药)血药浓度的HPLC/MS/MS法。方法血浆样品用叔丁基甲醚提取,内标为噻氯匹定;色谱柱用X-Terra MS C_(18)(2.1 mm×50 mm,5μm),柱温30℃,流动相:乙腈-水(含10 mmol·L~(-1)醋酸铵,调pH为4.0)为70:30,流量为0.3 mL·min~(-1);质谱用ESI离子源,定量分析的离子反应分别为m/z 322→z 212 (氯吡格雷),m/z 264→m/z 154(内标噻氯匹定)。结果氯吡格雷的线性范围为10×10~4～1.2×10~4pg·mL~(-1)(γ=0.9993),日内、日间RSD均小于10%,提取回收率约为80%。结论该方法快速、准确、灵敏度高,可用于氯吡格雷血药浓度测定。     

LC/MS/MS法测定辛伐他汀血浆浓度及其在健康人体内的药物动力学研究

目的:建立人体血浆中辛伐他汀的LC/MS/MS测定方法,并研究辛伐他汀片在男性健康志愿者体内的药物动力学行为,评价其生物利用度和生物等效性。方法:采用两制剂双周期自身对照试验设计。18名男性健康志愿者随机交叉服用单剂量辛伐他汀试验片剂和参比片剂20mg,采用液相色谱-串联质谱(LC/MS/MS)分析方法测定血浆辛伐他汀的浓度。采用DAS2.0程序计算药物动力学参数和相对生物利用度,并进行等效性评价。结果:测定单剂量口服20mg辛伐他汀参比片剂和试验片剂的AUC_((0→24))分别为(14.90±5.86)和(14.37±4.94)ng·h·ml~(-1),AUC_((0→∞))分别为(15.62±6.29)和(14.78±5.02 )ng·h·ml~(-1);C_(max)分别为(4.54±2.11)和(4.00±1.34)ng·ml~(-1);T_(max)分别为(1.75±0.79)和(1.39±0.65)h。以AUC_((0→24))与AUC_((0→∞))计算相对生物利用度分别为(108.0±52.7)%和(106.4±52.5)%。结论:该法准确灵敏,测得的数据可靠,统计分析表明两种制剂生物等效。     

液相色谱-质谱联用法测定人参皂苷Re在健康人血浆的浓度

目的建立液相色谱-质谱联用法测定人参皂苷Re在健康人血浆中浓 度的方法。方法血浆样品用固相萃取法处理。用电喷雾离子化和正离子多 离子反应监测方式检测人参皂苷Re。结果该方法人参皂苷Re线性范围为 1．05～1 050 ng·mL-1;定量下限为1．05 ng·mL-1;方法回收率在99．3％～ 104．3％;日内、日间变异系数(RSD)均<15％。结论该法准确、灵敏、特异, 适用于健康人血浆人参皂苷Re浓度测定。     

LC/MS/MS法测定人血浆中愈创木酚甘油醚浓度及药动学研究

目的:建立以高效液相色谱-质谱联用法测定人血浆中愈创木酚甘油醚浓度的方法,并研究愈创木酚甘油醚片的人体药动学。方法:碱化的血浆药品经乙酸乙酯萃取后,以甲醇-1%甲酸(70:30)为流动相,对乙酰氨基酚为内标,采用Aquasil C18柱分离。通过液相色谱-串联质谱联用仪,以选择反应监测方式进行检测,定量分析的离子反应分别为m/z199→m/z125(愈创木酚甘油醚)和m/z152→m/z110(对乙酰氨基酚)。结果:愈创木酚甘油醚检测浓度在5·0～2500ng·mL-1范围内线性关系良好(r=0·9953),定量下限为5·0ng·mL-1。20名受试者口服愈创木酚甘油醚片0·2g后的主要药动学参数Cmax为(754·6±190·5)ng·mL-1、t1/2为(0·97±0·12)h、tmax为(0·63±0·22)h、AUC0～t为(1435·8±441·9)ng·h·mL-1、AUC0～∞为(1444·9±449·3)ng·h·mL-1。结论:本方法简便、快速、灵敏,可用于愈创木酚甘油醚的临床药动学研究。