α-1,2岩藻糖基转移酶基因35C〉T和682A〉G突变点体外表达的研究

本研究探讨35C〉T和682A〉G突变点对α-1,2岩藻糖基转移酶（FUT1）表达活性的影响。PCR扩增FUT1全长编码序列DNA片段,通过TOPOTA技术连接至表达载体pcDNA3.1/V5-His,获取目的重组质粒。采用脂质体转染方法将重组质粒转染COS-7细胞,经G418筛选培养后,利用流式细胞术分析细胞表面H抗原,实时荧光PCR检测fut1 mRNA表达情况。结果表明：成功获取了35T、682G＋35T和682A＋35C重组质粒。转染2天后H抗原在COS-7细胞膜上表达,第4天达最高峰。与野生型（682A＋35C）转染的细胞相比,第4天重组质粒（682G＋35T）转染细胞H抗原的表达量仅为野生型的13.3%,而重组质粒35T转染细胞为野生型的52.7%。转染后fut1mRNA水平随着时间延长而逐渐递减,在第1天重组质粒（682G＋35T）转染细胞fut1 mRNA水平仅为野生型（682A＋35C）的14%。结论：682A〉G突变明显降低α-1,2岩藻糖基转移酶活性,而35C〉T引起H抗原的表达部分下降。     

肾癌免疫细胞浸润模式与生存预后分析

目的 探讨肾癌免疫细胞浸润模式,分析浸润模式与生存预后的相关性,预测患者生存期及肿瘤进展.方法 在肿瘤癌症基因图谱(TCGA)中下载肾癌转录本数据和临床信息数据,运用开源数据包CIBER-SORT反卷积算法计算肾癌22种免疫细胞浸润比例.采用R软件包绘制免疫细胞相关性热图.利用R软件包对肾癌免疫细胞浸润模式与肾癌临床分...     

基于生物信息学分析泛癌中PDPN的表达与预后及与免疫细胞浸润的关系

目的:探讨平足蛋白(Podoplanin,PDPN)在泛癌中的表达量与预后及PDPN与免疫浸润之间的关系,为癌症的免疫治疗提供一个新的方向.方法:通过UACLAN、Oncomine和TIMER2.0数据库分析PDPN在泛癌及对应的正常组织中的表达量;通过PrognoScan和Kaplan-Meier Plotter数据...     

基于免疫细胞组织浸润的免疫评分模型预测前列腺癌免疫治疗效果及预后分析研究

目的 探讨基于免疫细胞浸润的免疫评分模型对前列腺癌（PCa）患者免疫治疗效果及预后的预测。方法 从癌症基因组图谱 (TCGA) 选取266 个PCa 患者的基因表达谱和临床随访参数;通过单样本基因集富集分析（single-samplegene set enrichment analysis,ssGSEA）量化免疫细胞在肿瘤组织中的浸润情况,得到22 个免疫细胞的浸润情况;通过“Glmnet”包的套索方法（least absolute shrinkage and selection operator, LASSO）分析筛选关键预测因子,以验证不同浸润免疫细胞是否与预后相关;将符合条件的细胞构建预后风险评分模型,将PCa 患者分为高风险组和低风险组,并制作生存曲线（Kaplan-Meier）进行验证;基于风险模型建立列线图来预测PCa 患者治疗无效和生存的概率;绘制随时间变化的受试者工作特征（ROC）曲线,以验证列线图的准确性;利用校准曲线比较基于浸润免疫细胞列线图的预测和观察结果;采用临床决策曲线分析法判断模型的预测可靠度。结果 使用ssGSEA 量化免疫细胞浸润数据,最后得到22 个浸润免疫细胞包括:幼稚B 细胞、记忆B 细胞、浆细胞、CD8+ T 细胞、幼稚CD4+ T 细胞、静息记忆CD4+ T 细胞、激活记忆CD4+ T 细胞、滤泡辅助性T 细胞、调节性T 细胞（Treg 细胞）、γδ T 细胞、静息NK 细胞、活化NK 细胞、单核细胞、M0 巨噬细胞、M1 巨噬细胞、M2 巨噬细胞、静息树突细胞、活化树突细胞、静息肥大细胞、活化的肥大细胞、嗜酸性粒细胞和嗜中性粒细胞;最终选择6 个免疫细胞作为预测因子,分别为Treg 细胞、M1 巨噬细胞、M2 巨噬细胞、激活记忆CD4+ T 细胞、静息树突细胞和嗜中性粒细胞;根据6 个浸润免疫细胞,计算样本的风险评分,随着风险评分的升高,高风险组PCa 患者增多,预后不良人数增多;利用Kaplan-Meier 法绘制生存曲线,结果显示高风险患者总生存时间（3.8 年）显著低于低风险组（6.9 年）（Log-Rank χ2=4.259,P ＜ 0.001）;预后列线图模型总分430 分,对应死亡风险为74.69%;治疗效果列线图模型总分423 分,对应治疗无效的风险为73.21%,且通过模型验证结果安全可靠。结论 通过评估PCa 中的免疫浸润以及免疫评分模型建立了列线图,揭示免疫细胞浸润可以预测PCa 患者的预后和治疗效果。     

乳腺癌预后标志物的研究进展

乳腺癌是女性常见的恶性肿瘤.为了提高存活率,临床借助于预后标志物,判断病人的预后,以给予适当的治疗.本文对与乳腺癌预后有关的一些蛋白质分子生物学标志物进行综述.     

白血病细胞株K562和SHI-1糖基转移酶表达的差异

目的 探讨白血病细胞株K562与SHI-1糖基转移酶表达的差异。方法应用RT-PCR法研究白血病细胞株K562与Sill-1糖基转移酶mRNA表达的差异。结果K562和SHI-1细胞株均表达0GnT、βGnT1、β3GnT5、βGalT2，但表达量不同。K562细胞株主要表达ppGalNacT2、T4、T5、T7，但表达量有差异，而SHI-1细胞株ppGalNacT1、T2、T3、T4均有表达但表达量亦有不同。     

基于N6-甲基腺苷修饰与免疫细胞浸润的结直肠癌预后模型构建及验证

目的 探讨N6-甲基腺苷(m⁶A)修饰相关基因和免疫细胞浸润在结直肠癌(CRC)中的预后价值并构建相应风险模型预测患者临床结局。方法 从癌症基因组图谱(TCGA)和基因表达综合数据库(GEO)下载CRC患者的肿瘤组织转录组数据及匹配临床信息,通过共识聚类及单样本基因组富集分析明确m⁶A修饰相关基因及免疫细胞浸润在CRC中的预后价值。基于加权基因共表达网络分析(WGCNA)筛选与两者相关的预后基因,运用Lasso回归分析构建多基因风险模型,并在基因表达谱交互分析(GEPIA)数据库中对筛选出的预后基因进行表达差异分析。通过Kaplan-Meier生存分析明确风险模型在不同亚组及外部验证队列中的预测效能。结果 基于21个m⁶A修饰相关基因及24个免疫细胞浸润的特征表型均可以显著区分TCGA队列中CRC患者预后。CRC组织中多数m⁶A修饰相关基因与免疫细胞浸润显著相关。WGCNA及Lasso回归分析筛选出4个预后基因,分别为内凝集蛋白1、淋巴细胞抗原6复合位点G6D、无调性同族体1和基质金属蛋白酶28。在...     

全反式维甲酸对HL60细胞株三种糖基转移酶家族表达的影响

目的从mRNA水平检测HL60细胞株中多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶家族(polypeptide:Nacetylgalactosaminytra -nsferases,ppGalNAcTs)、N-乙酰氨基葡萄糖基转移酶家族(UDP-N-acetylglucosamine:beta-galactose betal, 3-N-acetylglucosaminyltransferases,β3GnTs)及O-连接乙酰氨基葡萄糖转移酶家族(O-linked GlcNAc transferase,OGnT)的表达情况,研究全反式维甲酸(All-transretinoic acid,ATRA)培养对不同糖基转移酶表达水平的影响。方法采用Real time RT- PCR方法从mRNA水平上研究ppGalNAcTs、β3GnTs、OGnT的表达以及加入ATRA后表达水平的变化,用3H掺入试验检测加入ATRA对细胞增殖的影响,流式细胞仪观察细胞周期情况,激光共聚焦显微镜观察细胞形态的变化。结果加入ATRA 后HL60细胞株中β3GnT1、ppGalNAcT2表达量急剧增加,细胞阻滞在G2／M期,细胞的生长增殖受到抑制,细胞向粒系分化。结论加入分化诱导剂后细胞发生显著变化,提示β3GnT1、ppGalNAcT2与白血病细胞株的分化可能有一定关系。     

三阴性乳腺癌中AQP8的表达及其与血管生成、增殖和预后的相关性

目的探讨水通道蛋白8(AQP8)在三阴性乳腺癌(TNBC)中的表达及其与血管生成、增殖和预后的关系。方法通过免疫组织化学法在2010年1月至2013年1月在首都医科大学附属复兴医院接受TNBC根治性手术治疗的127例患者的肿瘤和癌旁组织石蜡切片中检测AQP8的表达情况。同时,采用免疫组织化学法检测TNBC组织中血管内皮生长因子(VEGF)和Ki-67的表达,分析TNBC组织中VEGF、Ki-67的表达与AQP8的关系。结果与癌旁组织相比,TNBC组织中AQP8表达显著增加。这种现象伴随着Ki-67和血管生成相关标志物VEGF的异常表达。此外,AQP8高表达与侵袭性临床病理因素、低总体存活时间(OS)和低无病生存时间(DFS)相关。多变量分析结果显示,AQP8表达可能是TNBC患者低OS、DFS的独立预测因子。结论 AQP8高表达与TNBC患者的血管生成、增殖和预后不良有关。     

Effect of unfolded protein response on the immune infiltration and prognosis of transitional cell bladder cancer

Background: Bladder cancer (BC) is one of the most common human malignancies worldwide. Previous researches have shown that the unfolded protein response (UPR) pathway could contribute to the tumorigenesis of BC. However, the role of UPR in the immune infiltration, progression, and prognosis of BC is unclear.Methods: The GSVA and ssGSEA methods were used for assessing the UPR score and immune cells infiltration score in three BC public datasets, respectively. The relationship between the UPR pathway and clinicopathological characteristics was analyzed by the Kruskal-Wallis, Wilcox test, and log-rank test. The association of the UPR pathway with various tumor-infiltrating immune cells was evaluated with the correlation analysis. Univariate Cox regression analysis was performed to identify risk factors significantly associated with prognosis. The predictive models were built based on risk factors and visualized with nomograms. The performance of our models was evaluated with the calibration curve, Harrell''s concordance index (c-index), and receiver operating characteristic (ROC) analysis.Results: We found that the UPR pathway and many UPR-related genes were significantly associated with the pathologic grade, tumor type, and invasive progression of transitional cell bladder cancer (TCBC), and a high UPR score predicted a poor prognosis in patients. The UPR score was positively correlated with the infiltration abundance of many tumor immune cells in TCBC. Besides, we constructed predictive models based on the UPR score, and good performance was observed, with c-indexes ranging from 0.74 to 0.87.Conclusions: Our study proved that the UPR pathway may have an important impact on the progression, prognosis, and tumor immune infiltration in TCBC, and the models we built may provide effective and reliable guides for prognosis assessment and treatment decision-making for TCBC patients.     

乳腺癌患者人表皮生长因子受体2及p53表达对生存期和预后的影响

目的:研究乳腺癌人表皮生长因子受体α(HER2),p53与生存期的关系,探讨其成为乳腺癌临床康复预后指标的可行性。方法:采用免疫组化法检测185例乳腺癌标本的HER2和p53的表达,并对其生存时间随访。结果:①有10年内预后随访资料者120例,其中死亡28例,失访65例。②HER2,p53的阳性总表达率分别为:57.8%和47.6%。③HER2和p53各级生存率曲线比较,统计学上有显著性差异,P值均小于0.01。0～Ⅲ级均数得分为:11.9286,6.5500,-5.5556,-7.2273和9.6604,-8.0625,-27.9167,-4.0000。④HER2或p53过度表达均与生存期负相关(P<0.05,OR=1.566和P<0.01,OR=1.581)。⑤HER2联合p53过度表达与生存期负相关(P<0.05,OR=1.374和P<0.01,OR=1.566)。结论:乳腺癌患者HER2或p53阴性表达的生存率高于阳性表达者,无论是单独或者联合高表达都降低乳腺癌患者的生存时间,是乳腺癌预后不良的指标。     

联合治疗方案对晚期非小细胞肺癌患者预后及免疫功能的影响

目的 探讨树突状细胞-细胞因子诱导杀伤细胞(DC-CIK)过继免疫治疗及多西他赛联合顺铂(DP)化疗方案对晚期非小细胞肺癌患者预后及免疫功能的影响.方法 选取60例晚期非小细胞肺癌患者为研究对象,随机分为DP化疗组(化疗组,n = 30)及DC-CIK细胞过继免疫治疗联合DP化疗组(联合组,n=30).2个疗程后,评估...     

乳腺癌发生及其5年生存率与 bag-1基因的表达

背景bag-1是一种抗凋亡基因,其分泌蛋白是一种已经被确认的多功能结合蛋白.目前bag-1被认为可以作为早期诊断乳腺癌的一种生物标记,但其对乳腺癌预后的评估是否有意义?目的探讨抗凋亡基因bag-1在乳腺癌组织中的表达及与预后的关系.设计以乳腺癌、乳腺良性肿瘤及正常乳腺组织为研究对象的对照性实验.单位解放军第四军医大学西京医院血管内分泌外科.材料选择1995-05/2000-05手术切除的乳腺癌石蜡包埋组织块100例及2000-03/2000-05手术切除的10例乳腺良性肿瘤和10例正常乳腺组织石蜡标本作对照,以上均来自解放军第四军医大学西京医院病理科存档标本.方法采用免疫组化链霉素-抗生物素-生物素-过氧化酶复合物法观察100例乳腺癌与10例乳腺良性肿瘤及10例正常乳腺组织的石蜡标本切片中bag-1的表达.主要观察指标①乳腺癌、乳腺良性肿瘤及正常乳腺组织中bag-1表达水平.②不同bag-1表达水平乳腺癌患者的5年生存率.结果bag-1在乳腺癌组织中、乳腺良性肿瘤中、正常乳腺组织中阳性表达率分别为85%,10%,10%,差异有显著性(x2=29.98,P=0 00);在Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期的乳腺癌组织中bag-1阳性表达率分别为88%,82%,88%,差异无显著性(x2=0.61,P=0.75);在导管癌、小叶癌及特殊型癌中bag-1阳性表达率分别为86%,85%,80%,差异无显著性(x2=0.16,P=0.95).对94例获随访的乳腺癌患者中,bag-1阳性表达者5年生存率为79%,bag-1阴性表达者5年生存率为9%,两者差异有显著性(x2=0.07,P=0.04).结论bag-1在乳腺癌组织中高表达,bag-1在乳腺癌组织中的表达与肿瘤的临床分期,病理分型无关;bag-1可以作为乳腺癌预后的一个生物指标.     

Effect of early diagnosis on the prognosis of metastatic breast cancer

Between 1980 and 1986 676 patients with primary breast cancer were operated on with curative intent at the Department of Surgery of the Hanusch Hospital in Vienna. Of these 133 developed recurrences. The patients were closely followed up at our outpatient clinic. We have retrospectively analysed this patient collective to evaluate the impact of routine technical and chemical-pathological follow-up programmes on the detection rate of subclinical distant metastases and on improvement of prognosis. There was no difference in the outcome with respect to survival after recurrence and to overall survival between patients with early detection of recurrence at an asymptomatic stage, who received general antitumor therapy immediately and a second group where therapy was initiated only upon clinical manifestation of metastasis. The results are discussed in relationship to screening costs. We would like to emphasize the importance of follow-up programmes in the timely detection of local recurrence and also of cancer of the contralateral breast, as well as benefitting the psychological aspect of the doctor-patient relationship.     

nm23基因表达对乳腺癌患者生存期等预后指标的影响

目的:探讨nm23基因表达对乳腺癌患者预后的影响。方法:选择哈尔滨医科大学附属第二医院普外科1997-06/1998-12行根治性治疗的乳腺癌患者60例。均为女性,年龄2663岁。有腋淋巴结转移30例,无腋淋巴结转移30例。依国际抗癌协会临床分期标准,Ⅰ期30例,Ⅱ期16例,Ⅲ期14例,无Ⅳ期患者。随机选取同期乳腺囊性增生症患者20例作对照。应用免疫组织化学SP法检测两组患者标本中nm23基因的表达情况,观察nm23阳性表达与临床病理参数、远处转移及生存率的关系。nm23基因表达以细胞浆呈棕黄色为阳性。结果:乳腺癌患者60例,乳腺囊性增生症患者20例,均进入结果分析。①nm23基因在乳腺癌及乳腺囊性增生症中的阳性表达:乳腺癌中nm23阳性表达显著高于乳腺囊性增生症中nm23阳性表达(60.0%,30.0%,P<0.05)。②nm23阳性表达与临床病理参数的关系:临床Ⅰ～Ⅱ期患者nm23阳性表达率著性高于Ⅲ期患者(67.4%,35.7%,P<0.05);无淋巴结转移者nm23的阳性表达率显著高于有淋巴结转移者(86.7%,33.3%,P<0.05);雌激素受体(+)者nm23的阳性表达率显著高于雌激素受体(-)者(72.7%,25.0%,P<0.05);孕激素受体(+)者nm23的阳性表达率显著高于孕激素受体(-)者(75.0%,30.0%,P<0.05)。③nm23阳性表达与远处转移及生存率的关系:无远处转移者nm23的阳性表达率显著高于有远处转移者(73.4%,14.3%,P<0.05);nm23阳性表达者5年生存率显著高于nm23阴性表达者(94.4%,50.0%,P<0.05)。结论:检测乳腺癌组织中nm23基因对评价乳腺癌患者的预后和指导临床治疗有重要价值。     

nm23基因表达对乳腺癌患者生存期等预后指标的影响

目的：探讨nm23基因表达对乳腺癌患者预后的影响.方法：选择哈尔滨医科大学附属第二医院普外科1997-06/1998-12行根治性治疗的乳腺癌患者60例.均为女性,年龄26～63岁.有腋淋巴结转移30例,无腋淋巴结转移30例.依国际抗癌协会临床分期标准,Ⅰ期30例,Ⅱ期16例,Ⅲ期14例,无Ⅳ期患者.随机选取同期乳腺囊性增生症患者20例作对照.应用免疫组织化学SP法检测两组患者标本中nm23基因的表达情况,观察nm23阳性表达与临床病理参数、远处转移及生存率的关系.nm23基因表达以细胞浆呈棕黄色为阳性.结果：乳腺癌患者60例,乳腺囊性增生症患者20例,均进入结果分析.①nm23基因在乳腺癌及乳腺囊性增生症中的阳性表达：乳腺癌中nm23阳性表达显著高于乳腺囊性增生症中nm23阳性表达（60.0%,30.0%,P＜0.05）.②nm23阳性表达与临床病理参数的关系：临床Ⅰ～Ⅱ期患者nm23阳性表达率著性高于Ⅲ期患者（67.4%,35.7%,P＜0.05）;无淋巴结转移者nm23的阳性表达率显著高于有淋巴结转移者（86.7%,33.3%,P＜0.05）;雌激素受体（＋）者nm23的阳性表达率显著高于雌激素受体（-）者（72.7%,25.0%,P＜0.05）;孕激素受体（＋）者nm23的阳性表达率显著高于孕激素受体（-）者（75.0%,30.0%,P＜0.05）.③nm23阳性表达与远处转移及生存率的关系：无远处转移者nm23的阳性表达率显著高于有远处转移者（73.4%,14.3%,P＜0.05）;nm23阳性表达者5年生存率显著高于nm23阴性表达者（94.4%,50.0%,P＜0.05）.结论：检测乳腺癌组织中nm23基因对评价乳腺癌患者的预后和指导临床治疗有重要价值.     

CD34表达与乳腺癌浸润和转移关系研究

目的探讨乳腺癌浸润、转移过程中CD34表达及微血管密度的意义。方法采用免疫组织化学方法检测60例乳腺癌患者癌组织、癌旁2cm乳腺组织及距癌组织5cm以上正常乳腺组织中CD34的表达情况,检测3种组织中CD34标记的微血管密度。结果乳腺癌组织的微血管密度值（54．60±10．54）明显高于癌旁组织（33．05±7．70）和正常乳腺组织（25．40±5．71）,差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论CD34阳性表达与乳腺癌血管生成有一定相关性。     

食管癌患者癌组织COX-2、VEGF-C表达水平对其预后生存的影响

目的分析食管癌患者癌组织环氧合酶2(COX-2)、血管内皮生长因子C(VEGF-C)表达水平对其预后生存的影响。方法回顾性分析2015年4月到2016年10月池州市人民医院经病理确诊的60例食管癌患者临床资料,采用免疫组织化学染色法检测其癌组织标本、癌旁正常食管黏膜组织标本中COX-2、VEGF-C蛋白表达水平,分析癌组织COX-2、VEGF-C表达水平的相关性,分析COX-2、VEGF-C表达水平与患者临床病理特征、预后生存的关系。结果食管癌组织标本中COX-2、VEGF-C表达阳性率均高于癌旁正常食管黏膜组织标本,差异有统计学意义(P<0.05);Spearman相关分析显示,食管癌患者癌组织COX-2表达阳性率与VEGF-C表达阳性率呈正相关(r=0.388,P<0.05);食管癌患者COX-2表达水平与性别、年龄、病理类型无关(P>0.05),而与分化程度、TNM分期、淋巴结转移有关(P<0.05),VEGF-C表达水平与性别、年龄、病理类型、TNM分期无关(P>0.05),而与分化程度、淋巴结转移有关(P<0.05);COX-2阳性患者12个月生存率低于COX-2阴性患者,VEGF-C阳性患者12个月生存率低于VEGF-C阴性患者,但差异无统计学意义(P>0.05);不同COX-2、VEGF-C表达水平患者12个月复发率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论食管癌患者癌组织中COX-2、VEGF-C表达水平高,且其与临床病理参数也有一定关联,对预后生存的影响尚不明显,但临床检测COX-2、VEGF-C仍可为食管癌患者的预后评估提供参考。