沙眼衣原体室间质量控制质控品的制备及其应用

目的 制备可模拟真实临床样本的沙眼衣原体室间质量评价（EQA）质控品,以客观评价上海地区临床实验室沙眼衣原体检测能力。方法 选用HELA-299细胞株培养沙眼衣原体血清型E,制备成沙眼衣原体EQA质控品,通过均匀性和稳定性验证后,用于上海市临床检验中心EQA计划。结果 制备的沙眼衣原体EQA质控品均匀性和稳定性均通过验证。对上海市54家临床实验室进行EQA,有51家回报结果,所有回报结果的实验室EQA成绩均为100分。结论 成功制备了可模拟临床样本的沙眼衣原体EQA质控品。上海地区临床实验室沙眼衣原体检测质量良好。     

沙眼衣原体单克隆抗体的制备及应用研究进展

沙眼衣原体是人类眼部和生殖道感染的主要致病体，由于其普遍的流行性和高度的危害性，受到了人们的重视。自从沙眼衣原体单克隆抗体问世以后，广泛应用于沙眼衣原体感染的临床诊断、流行病学分型鉴定以及沙眼衣原体诸膜抗原结构分型，致病机理探讨等方面，并且取得了许多重大的进展。本文就沙眼衣原体单克隆抗体的制备，以及单抗在上述诸方面的应用做一综述。     

TaqMan PCR技术同步检测沙眼衣原体及肺炎衣原体的DNA

我们自行设计了针对沙眼衣原体、肺炎衣原体的特异性引物、Taq Man荧光探针,对这2种病原体核酸进行双重扩增荧光探针杂交检测,取得满意结果。     

沙眼衣原体聚合酶链反应测定质控物的构建及其应用研究

目的 研制能够模拟真实临床样本且无生物传染危险性的沙眼衣原体(chlamydia trachomatis,CT)PCR检测质摔物,并进行稳定性研究.方法 在充分查阅文献的基础上,明确国内外已有文献报道的CT:PCR检测的靶序列,选择最普遍应用的CT质粒序列,采用重叠(overlap)PCR、分子克隆等技术构建含有所选择的常用检测目的 CT质粒序列的重组真核表达载体,即pTARGETTM-CT 质粒.然后,将载体以脂质体转染的方式转染入宫颈上皮细胞(HTB-SiHa细胞)中,收集细胞,经含20%小牛血清的细胞培养液稀释,即成为能模拟CT检测临床样本的细胞质控物.最后观察得到的质控物对目前国内常用商品试剂盒的适用性及在4℃、37℃及室温条件下的稳定性.结果 成功构建了含CT质粒(178-610)、(1219-1993)、(2471-3260)、(5239-5864)、(6722-7499)等5个片段的重组真核表达载体,并转入HTB-SiHa细胞中,得到了可模拟临床样本的CT PCR检测的质控物.采用深圳匹基生物工程有限公司、中山大学达安基因股份有限公司商品CT PCR检测试剂盒对转染后样本进行检测,得到阳性结果;定量为3.21×108拷贝/ml;倍比稀释后较高浓度样本检测结果呈梯度下降、10倍稀释循环阈值相差约3.3;对不同浓度稀释后在4℃、37℃及室温条件下保存1个月的样本的检测结果进行随机区组的两因素方差分析后发现,在各温度下保存的样本经检测后的结果问差异无统计学意义,所构建的质控样本至少可以稳定保存1个月.结论 利用重叠PCR与双酶切的方法,建立了一种将多间隔片段连接并构建入同一载体的简便有效的方法.成功地得到了可模拟临床标本的CT PCR检测质控物.     

沙眼衣原体单克隆抗体的制备及应用研究进展

沙眼衣原体是人类眼部和生殖道感染的主要致病体，由于其普遍的流行性和高度的危害性，受到了人们的重视。自从沙眼衣原体单克隆抗体问世以后，广泛应用于沙眼衣原体感染的临床诊断，流行病学分型鉴定以及沙眼主有原体诸膜抗原结构分型，致病机理探讨等方面，并且取得了许多重大的进展。     

荧光定量PCR检测沙眼衣原体（CT）DNA及临床应用

沙眼衣原体(CT)是一类介于细菌和病毒之间的微生物,是重要的性传播疾病之一,虽然在某些人群中没有症状,但它可引起严重的后遗症,临床确诊比较困难。 我们于2001年5月开展荧光定量PCR检测工作以来,共检测501倒尿(阴)道分泌物中CT-DNA的含量,同时与金     

不育男性生殖道沙眼衣原体感染对精子核DNA碎片化指数的影响

目的探讨不育男性生殖道沙眼衣原体感染对精子核DNA碎片化指数的影响。方法选择2017年1月至2017年5月在成都市锦江区妇幼保健院生殖医学中心(成都西囡妇科医院)门诊初诊的117例生殖道沙眼衣原体感染的不育男性(感染组)和92例体检正常的男性(对照组),对两组的精液常规参数及精子核DNA完整性(以精子核DNA碎片化指数DFI表示)检测结果进行回顾性分析。结果⑴感染组的精子浓度低于对照组,但差异无统计学意义(P>0.50);感染组的前向运动精子百分比低于对照组,但差异无统计学意义(P>0.20);⑵与对照组相比,感染组的精子DFI值显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论生殖道感染沙眼衣原体的男性不育患者的精子核DNA损伤程度明显高于未感染者。精子核DNA碎片化指数可能是评估男性精液质量的独立指标。     

荧光定量PCR检测生殖道内沙眼衣原体感染的分析

目的 :评价DNA定量测定技术在生殖器衣原体感染诊断中的应用价值。方法 :比较DNA定量测定与传统检测手段对衣原体感染的检测结果。结果 :用DNA定量测定法检测衣原体感染 ,其敏感性和特异性均比传统的方法高。定量测定结果显示 ,衣原体感染者最高 2× 10 8copy/ml,最低 2× 10 2 copy/ml。结论 :CTDNA定量测定标本取材要求不是很严格 ,不宜用作短期判愈 ,在CT诊断中有巨大的潜力     

沙眼衣原体诊断试剂盒临床实验评价

目的对该公司开发的沙眼衣原体诊断试剂盒(免疫荧光法)进行临床实验,评价其检测效果。方法采用Trinity试剂盒(免疫荧光法)和沙眼衣原体诊断试剂盒(免疫荧光法)对1 100例样本进行检测。采用拟验证试剂与对比试剂进行平行检测,并以Trinity试剂盒检测结果为对照,计算两种试剂盒检测结果的总符合率及阴、阳性符合率。结果检测临床实验样本1 100例的结果显示,对比两种试剂盒的总符合率97.18%,阳性符合率92.72%,阴性符合率97.89%。结论迈科龙试剂盒检测快速、简便、经济、准确,可用于沙眼衣原体的快速诊断。     

广东省沙眼衣原体抗原检测的室间质量评价结果分析

目的评价广东省性病实验室检测沙眼衣原体抗原的能力。方法每年进行一次室间质量评价,2004年发放衣原体标本57份,2005年475份,2006年675份。要求各性病实验室按照常规方法,在规定的时间内检测并回报结果、所用检测方法、试剂和仪器资料。广东省皮肤性病防治中心对各实验室的结果进行统计分析。结果2004年19家实验室参加质量评价,总符合率为75．4％;2005年71家,总符合率为93．5％;2006年135家,总符合率为91．0％。2004与2006年沙眼衣原体抗原检测的总符合率比较,差异有统计学意义。试剂种类分析,2004年参加质量评价的实验室全部使用进口试剂,2005年进口试剂占98．6％,2006年占80．7％。国产试剂所占比例显著提高,但国产试剂的符合率显著低于进口试剂。酶联免疫法和免疫层析法为沙眼衣原体的主要检测方法,2004～2006年所占比例分别为94．7％、98．5％、98．6％。结论通过衣原体抗原检测的室间质量评价,可及时发现参评实验室检测中存在的问题,促进实验室提高检测质量。     

Diagnosis of Chlamydia trachomatis infection

Important progress in the diagnosis of Chlamydia trachomatis (C. trachomatis) includes the development of nucleic acid amplification techniques such as polymerase chain reaction (PCR) and ligase chain reaction (LCR). Commercial kits are available, but they are costly, sporadic in availability, must be imported, and are economically beyond the reach of common people. To overcome this limitation, most research laboratories have standardized their in-house-developed PCR methods for diagnosing this infection. However, each laboratory has to spend a great deal of time and money to accomplish this. Published reports do not always elaborate the steps involved in standardizing a test so that it can immediately be reproduced in another setting. In the present study we attempted to elaborate the steps involved in standardizing a sensitive and specific PCR technique followed by hybridization with specific C. trachomatis probe to diagnose this infection in cervical, introital, and urine specimens, and used it to determine the infection rate in a clinical population.     

160例宫颈糜烂患者沙眼衣原体感染检测分析

目的：了解宫颈糜烂患者沙眼衣原体的感染情况及其临床意义.方法：选取在我院进行治疗的宫颈糜烂患者160例作为观察组,宫颈炎患者160例作为对照组.采用clearview衣原体试剂盒对两组患者进行沙眼衣原体检测,比较两组患者沙眼衣原体感染情况.结果：观察组患者沙眼衣原体例数和阳性检出率均明显高于对照组,差异具有统计学意义,P＜0.05.观察组患者中中重度糜烂患者阳性检出率明显高于轻度糜烂患者,差异具有统计学意义,P＜0.05.结论：综上所述,对宫颈糜烂患者进行早期沙眼衣原体检测,及时进行有效的药物治疗,能够有效控制糜烂的发展,保护女性身体健康,使用前景广阔,所以值得在临床推广.     

Detection of antimicrobial-treated Chlamydia trachomatis with Amplicor PCR test kit

A polymerase chain reaction (PCR) method for the detection of Chlamydia trachomatis has been developed and is now available in the clinical setting. However, one of the major problems with this method is possible false-positive detection posttreatment. Nonviable C. trachomatis was established by in-vitro exposure to an antimicrobial agent, and we tried to detect the nonviable cells (NVCs) of C. trachomatis by PCR with variant primer sets. C. trachomatis strains (D/UW-3/Cx) were cultured in a medium containing the antimicrobial agent, at 8×MIC (minimal inhibitory concentration) 15 to 20 h postinfection. Amplicor and two sets of PCR primers were used to detect the DNA of NVCs. Serial passages of NVCs were done five times. All samples were positive on Amplicor, and all except the fourth passage were positive for the two sets of primers. Although the PCR test appears to be valuable, NVCs may possibly be detected by this method, and this may be clinically responsible for the false detection of C. trachomatis after appropriate antimicrobial chemotherapy. Received: March 23, 2000 / Accepted: September 11, 2000     

沙眼衣原体实验室检测技术及筛查策略研究进展

沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis,Ct)生殖道感染是目前发病率较高的性传播疾病之一,高效的实验室检测方法对控制Ct的感染具有重要的影响。该文就沙眼衣原体实验室检测方法及检测策略等方面的研究现状作一概述。     

湖北省特殊人群沙眼衣原体感染情况研究

[目的]对湖北省荆州地区与宜昌地区特殊人群中沙眼衣原体的感染情况进行比较。[方法]分别采集湖北荆州、宜昌特殊人群的宫颈拭子，用PCR方法对其进行检测分析。[结果]荆州、宜昌两地区特殊人群的感染率分别为11.0％、12.3％，两地区阳性率无显著性差异（P〉0.05）。[结论]在文化背景、地理位置相近的地区之间，特殊人群中沙眼衣原体的感染率相近，沙眼衣原体的感染率与人的行为方式之间有一定的关系。     

DADE Moni—Trol临床化学质控品的应用性能评价

目的 了解DADE Moni-Trol临床化学质控品的瓶间差和不同贮存条件下的稳定性，为实验室正确使用提供参考依据。方法 运用连续测定多瓶样品结果的变异表示的总不精密度与用同一瓶样品进行连续测定结果的变异表示的分析不精密度之差计算质控品的瓶间差。对贮存对4℃或－15℃的2种水平质控品的稳定性用t检验进行统计分析。结果 高浓度的水平2的平均瓶间差比低浓度的水平1要小，它们分别为1.0%和2.1%。2个水平的大部分评价项目在4℃和－15℃贮存条件下分别可以稳定7d和30d，但质控品水平1、水平2的TG在4℃保存条件下第4天起测定值有上升趋势，水平2的TBIL在－15℃贮存条件下第29天起测定值有下降趋势。结论 实验室在使用该冻干质控品时必须严格按照说明书复溶要求操作贮存。     

316例不孕症妇女解脲支原体和沙眼衣原体检测结果分析

目的了解不孕症妇女解脲支原体（Uu）和沙眼衣原体（CT）的感染状况及其与不孕症的关系。方法对316例患不孕症的妇女（不孕组）和250例正常生育的妇女（对照组）进行宫颈分泌物的uu和cT检测,比较两组妇女Uu与cT感染率差异,并分析原发性不孕症与继发性不孕症妇女感染率的差异。结果不孕组UU、CT感染检出率分别为30．7％、8．9％,明显高于对照组的9．2％和0．8％（P〈o．05）;原发性不孕妇女宫颈分泌物UU、CT感染检出率分别为11．9％、3．7％,而继发性不孕妇女宫颈分泌物UU、CT感染捡出率分别为40．6％、n．6％,UU感染检出率明显高于原发性不孕妇女（P〈O．05）,CT感染检出率明显高于原发不孕妇女（P〈O．05）。结论Uu和CT与妇女不孕密切相关,建议临床将UU、CT作为女性不孕就诊患者的常规检查项目。