5种免疫透射比浊法试剂盒检测特定蛋白钩状效应的性能评估

目的评估5种免疫透射比浊法试剂盒在生化分析仪上检测特定蛋白钩状效应的性能。方法应用北京九强生物技术股份有限公司(A)、四川迈克生物科技股份有限公司(B)、深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司(C)、宁波美康生物科技股份有限公司(D)和北京利德曼生化股份有限公司(E)5种市场占有率较高的免疫透射比浊法试剂盒,分别测定6个特定蛋白项目,在分析测量范围已知的前提下,配制一系列浓度梯度样品进行检测,比较不同厂家试剂盒钩状效应的性能。结果 5种试剂盒中,B和C测定链球菌溶血素O(ASO)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)和β2-微球蛋白(β2-MG)3个项目抗原过量的安全范围上限较大,浓度分别在10 000IU/mL、1 000mg/L和226mg/L左右未出现钩状效应。血清胱抑素C(CysC)试剂盒中上限最大的是C和E试剂盒,均大于112mg/L。除D试剂盒外,其他厂家试剂检测视黄醇结合蛋白(RBP)的安全范围上限均在700mg/L以上。尿微量清蛋白(mALB)试剂盒抗原过量安全范围上限最大的是D,浓度达43 560mg/L左右仍未出现钩状效应。结论不同厂家免疫透射比浊法试剂盒钩状效应性能不同,实验室在使用之前应进行钩状效应性能验证,选择防范钩状效应最好的试剂盒。     

免疫透射比浊法定标方式的探讨

目的研究不同的定标方式对免疫透射比浊法测定免疫球蛋白、补体结果的影响。方法使用OLYMPUS AU640自动生化分析仪和立德曼免疫透射比浊法试剂,采用不同的定标方法对40例血清的IgG,IgA,IgM,C3和C4进行测定。结果使用多标准POLYGONAL和SPLINE方法拟合定标曲线后测定结果表现良好的一致性,多点定标与单点定标测定结果具有显著性差异。结论免疫透射比浊测定,应当根据仪器情况,选择适当的非线性曲线拟合方式建立标准工作曲线。     

透射比浊法转铁蛋白试剂盒的性能评价

[目的]了解免疫透射比浊法转铁蛋白试剂盒的性能指标。[方法]测定该试剂盒的检测下限、精密度、准确度、线性范围。[结果]免疫透射比浊法转铁蛋白试剂盒的检测下限为0mg／dl，批内CV4、于3％，批间CV4、于5％，准确度为99.9％，线性范围为0-700mg／dl。[结论]免疫透射比浊法转铁蛋白试剂盒可以满足临床检测的需要。     

一种免疫透射比浊法前白蛋白试剂盒的性能评价

[目的]了解免疫透射比浊法前白蛋白试剂盒的性能指标。[方法]测定该试剂盒的检测下限、精密度、准确度、线性范围。[结果]免疫透射比浊法转铁蛋白试剂盒的检测下限为2．79mg／dl，批内及批间CV均小于10％，准确度为94．65％，线性范围为0～100mg／dl。[结论]免疫透射比浊法前白蛋白试剂盒可以满足临床检测的需要。     

免疫透射比浊法检测血清铁蛋白的性能评价

目的对免疫透射比浊法定量测定血清铁蛋白(FER)进行方法学评价。方法参照美国临床和实验室标准化协会推荐的评价方法,对免疫透射比浊法测定血清FER的精密度、线性范围、比对试验、回收试验、干扰试验、参考范围验证等进行评价。结果免疫透射比浊法测定血清FER的批内、批间变异系数均5.0%,精密度良好;免疫透射比浊法测定血清FER水平在10～1 000ng/mL,检测线性良好;免疫透射比浊法测定血清FER与化学发光法比较,结果相关性良好(r2=0.998 1),检测结果差异无统计学意义(P0.05);回收率为96.02%～102.74%;当标本中BIL≤498.40μmol/L、TG≤9.90mmol/L、Hb≤500mg/dL时,对免疫透射比浊法无干扰,参考范围验证通过。结论免疫透射比浊法用于定量检测血清FER,精密度良好,线性范围广,结果准确,干扰因素小,操作简单,能直接在全自动生化分析仪上使用,满足临床检测需求。     

免疫透射比浊法与免疫散射比浊法检测特定蛋白的比较

目的对免疫透射比浊法与免疫散射比浊法两种方法检测特定蛋白进行比较。方法应用Olymous-AU2700全自动生化分析仪与DadeBehring BNProspec特定蛋白仪对IgG、IgM、IgA、C3和C45种血清蛋白进行初步的方法学比较。结果免疫透射比浊法与免疫散射比浊法的批内精密度均较好,CV<3.3%。免疫透射比浊法与免疫散射比浊法在医学决定水平浓度从低检测范围到高检测范围,均有良好的线性回归,相关系数分别为:0.96、0.96、0.90、0.98、0.84。结论免疫透射比浊法具有较好的精密度及较宽的检测范围,与免疫散射比浊法相关性良好,且透射比浊法成本低,收费低,便于基层及常规实验室开展。     

免疫透射比浊法与免疫散射比浊法检测特定蛋白的比较研究

目的 对免疫透射比浊法测定血清特定蛋白的方法学性能进行初步评价,并与免疫散射比浊法进行比较.方法 应用Roche Modular P全自动生化分析仪与Dade Behring BN ProSpec(现为SIEMENS西门子)特定蛋白测定仪对IgG,IgA,IgM,C3,C4,CRP和hs-CRP 7种血清蛋白进行初步的方法学评价,包括透射比浊法与散射比浊法的精密度分析,相关性及线性回归试验.结果 ①免疫透射比浊法无论是批内精密度还是批间精密度都非常好,CV均＜5%.免疫透射比浊法的精密度要优于免疫散射比浊法.②免疫透射比浊法与免疫散射比浊法从低检测范围到高检测范围,均有着良好的线性回归,斜率均接近于1,截距均接近于0.两法的r均＞0.975.③全自动生化分析仪上的线性检测功能可发现特殊样本的抗原过剩问题.④免疫透射比浊法还具有成本低,收费低,速度快等优点.结论 免疫透射比浊法具有优良的精密度及分析灵敏度和检测范围,与免疫散射比浊法相关良好,系统误差较小,且更加实用和便利.     

免疫透射比浊法检测CRP部分性能指标评价

目的 对免疫透射比浊法测定C反应蛋白(CRP)部分性能指标进行评价.方法 用免疫透射比浊法测定血清CRP,依据美国临床实验室标准化协会(CLIS)文件要求进行精密度、线性范围评价,并与免疫散射比浊法进行比较.结果 CRP在3.14、6.70 mg/L时,总不精密度分别为3.45%和2.21%,均小于CLIA′88规定的允许误差范围的1/2(10%);免疫透射比浊法测定血清CRP在0.12～410 mg/L范围内线性良好,相关方程为Y＝1.010 9X-0.086 1;与西门子BNII全自动特定蛋白分析仪免疫散射比浊法比较,回归方程为Y=0.968 1X+0.600 6,r=0.993 3(P<0.01).结论 免疫透射比浊法检测CRP重复性好、线性范围宽,与免疫散射比浊法具有很好相关性,操作简单,检测速度快,完全符合急诊检测的需要.     

免疫透射比浊法检测糖化血红蛋白的方法评价

目的评价免疫透射比浊法检测糖化血红蛋白（HbAlc）方法的可靠性。方法应用免疫透射比浊法与离子交换高效液相色谱（HPLC）法分别测定糖尿病者及健康人（共计60例）的HbAlc水平,比较两种方法的相关性,并进行不精密度分析。结果两种检测方法的结果呈显著相关性（r=0．99,P〈0．05）,不精密度分析显示免疫比浊法的变异系数（CV）〈5％。回收实验显示该方法的平均回收率在98．9％。结论运用免疫透射比浊法检测HbAlc完全能够满足临床需求,且标本处理简便,不需额外的仪器,具有良好的应用前景,适合于大中型医院检验科的项目开展。     

免疫比浊法检测血清D-二聚体参考范围的探讨

目的对表面健康人群的血清D-二聚体水平和分布作初步探讨。方法用免疫透射比浊法在日立7020全自动生化分析仪上检测。结果测定338例表面健康人群血清D-二聚体水平,=1．37mg/L,95％的参考范围0．1—2．64mg／L,呈正态分布;其中男165例,=1．28mg／L,95％的参考范围0．15—2．41mg／L;女173例,=1．46mg／L,95％的参考范围0．04—2．88mg／L;男女血清D-二聚体水平比较,P〈0．05,差异有统计学意义;17—30岁年龄段血清D-二聚体水平：1．33mg／L;31～65岁年龄段血清D．二聚体水平=1．40metE,两年龄段血清D-二聚体水平比较,P〉0．05,差异无统计学意义;血清与肝素抗凝血浆D-二聚体结果比较,P〈0．01,差异有统计学意义,直线回归与相关分析显示：Y=1．0689X＋1．464,r=0．9967;用日本血清管与国产血清管比较,P〈0,01,差异有统计学意义。结论通过对国内338例表面健康人群血清D-二聚体浓度的测定和分析,初步界定国内人群血清D-二聚体浓度95％的参考范围为0．1～2．64mg／L,呈正态分布;血清与肝素抗凝血浆D-二聚体的参考范围不能共用,但相关性良好。     

条形码在临床免疫学检验项目和标本管理中的应用

目的　建立一种临床免疫学检验项目和标本的信息管理方法。方法　利用条形码检验信息管理系统 ,编制检验项目和标本管理模块。结果　通过标本和检验信息对应关系的程序管理 ,实现了每天按“工作清单”指令完成测定项目 ,按“清库单”丢弃过期标本。结论　该模块可使检测过程有序规范 ,避免了手工管理标本造成的项目漏检、报告不及时等现象 ,提高了工作效率和管理水平。     

血清甲状腺球蛋白及其自身抗体在化学发光免疫分析时的相互影响

目的探讨血清甲状腺球蛋白(Tg)及其自身抗体(TgAb)在化学发光免疫分析时的相互影响。方法在高浓度Tg血清中加入不同浓度TgAb血清,测定Tg回收率;在高浓度TgAb血清中加入不同浓度Tg血清,测定TgAb回收率。结果加入低、高浓度TgAb血清后,Tg回收率分别为93%~112%和17%~40%,Tg回收率和TgAb浓度呈负相关(rs=-0.877,P=0.001);加入低、高浓度Tg血清后,TgAb回收率分别为76%~108%和66%~98%,TgAb回收率和Tg浓度呈负相关(rs=-0.881,P=0.004)。结论血清Tg和TgAb在化学发光免疫分析时存在相互影响,导致结果偏低并呈浓度依赖性,其中TgAb在低浓度时即对Tg产生显著干扰,而Tg在较高浓度时才对TgAb测定产生明显影响。     

血清甲状腺球蛋白及其自身抗体在化学发光免疫分析时的相互影响

目的探讨血清甲状腺球蛋白（Tg）及其自身抗体（TgAb）在化学发光免疫分析时的相互影响。方法在高浓度Tg血清中加入不同浓度TgAb血清,测定Tg回收率;在高浓度TgAb血清中加入不同浓度Tg血清,测定TgAb回收率。结果加入低、高浓度TgAb血清后,Tg回收率分别为93%-112%和17%-40%,Tg回收率和TgAb浓度呈负相关（rs=-0.877,P=0.001）;加入低、高浓度Tg血清后,TgAb回收率分别为76%-108%和66%-98%,TgAb回收率和Tg浓度呈负相关（rs=-0.881,P=0.004）。结论血清Tg和TgAb在化学发光免疫分析时存在相互影响,导致结果偏低并呈浓度依赖性,其中TgAb在低浓度时即对Tg产生显著干扰,而Tg在较高浓度时才对TgAb测定产生明显影响。     

颗粒增强透射比浊法测定胱抑素C方法学评价

目的用颗粒增强透射比浊法(PETIA)测定血清中胱抑素C(CysC)水平,评价该法用于检测血清中CysC水平的可行性。方法用PETIA检测试剂盒在Cobas 8000全自动生化分析仪上测定血清CysC水平,对方法的不精密度、灵敏度、线性范围等进行评价,并与CysC颗粒增强散射比浊法检测结果进行相关性分析,同时对其参考区间进行验证。结果低值样本和高值样本的批内不精密度CV分别为3.67%,1.15%,批间不精密度CV分别为4.08%,1.53%;准确度的测定偏差仅为-1.25%;此试剂盒检测CysC灵敏度为0.07mg/L;CysC浓度在0.2~8.0mg/L范围内检测线性良好;与西门子德灵颗粒增强散射比浊法(PENIA)比较有良好的相关性Y=0.945 8 X+0.048 6,r2=0.991 3,r=0.995 6,40例健康体检者样本的检测值仅有2例在厂家提供的参考区间之外,90%以上的观测值在待验证区间之内。结论颗粒增强透射比浊法用于定量检测人血清CysC水平,具有简便易行、快捷价廉、准确可靠的优点,适用于在日常临床检测中推广应用。     

肝素锂对比浊法检测微量总蛋白的干扰分析

目的证实肝素锂对比浊法检测微量总蛋白的干扰效应,并对其进行相关方法性能评价。方法分别配对检测8份不同浓度微量总蛋白尿液干扰标本,筛查判断肝素锂是否是试验的干扰物;浓度0.172、0.427g/L微量蛋白质标本中分别加入不同量的肝素锂(干扰物试验系列样品,肝素锂浓度分别为0.000、0.025、0.030、0.035、0.040、0.045、0.050mg/L),重复检测4次,进行干扰物剂量效应试验。结果干扰标本检测结果显示,8份含肝素锂与不含肝素锂的配对标本中最大偏倚为159.37%,最小偏倚为11.37%,2组间结果差异有统计学意义(t=17.24,P0.05);浓度为0.025mg/L肝素锂对0.172g/L微量蛋白质标本干扰效果的95%置信区间为0.034~0.062;0.030mg/L肝素锂对0.427g/L干扰效果的95%置信区间为0.043~0.053;肝素锂浓度分别为0.025mg/mL和0.050mg/mL时,0.172g/L微量蛋白质标本的结果偏倚分别为27.33%、58.14%;肝素锂浓度分别为0.030mg/mL和0.050mg/mL时,0.427g/L微量蛋白质标本的结果偏倚分别为11.24%、18.74%;同系列浓度的肝素锂对0.172g/L和0.427g/L微量蛋白质标本的干扰物剂量呈线性相关,其线性方程分别为Y=1.974 X-0.001 03,Y=1.599 X-0.000 5。结论肝素锂是比浊法检测微量蛋白质的外源性干扰物,它对微量蛋白质检测结果为正干扰,特别对低水平微量蛋白质检测的干扰效果更明显,且随着肝素锂浓度升高,干扰效果越强。     

免疫酶染色法检测心肌炎患者柯萨奇B组病毒特异性IgM抗体的研究

目的:研究早期诊断成人病毒性心肌炎柯萨奇 B 组病毒 IgM 抗体(CBVIgM)的检测方法。方法:用免疫酶染色法(酶染玻片法)测定患者血清 CBVIgM,并与病毒分离和微量细胞中和抗体检测相比较。结果:129例住院心肌炎患者血清 CBVIgM 阳性82例(63.5%)、46例心肌炎咽拭子分离出 CBV12例,(其 CBVIgM 阳性11例),病毒分离患者血清(双份26例、单份20例)其 CBVIgM 阳性者32例,中和抗体≥4倍升高和单份血清≥1∶320者共27例。40例健康对照组病毒分离和中和抗体均阴性,CBVIgM 阳性2例。结论:酶染玻片法检测 CBVIgM,方法简单、快速、可靠,其结果与对照组相比有非常显著差异,与病毒分离阳性有91.6%相符,与血清中和抗体阳性有84.3%相符。     

Analytical performance evaluation of a new turbidimetric immunoassay for valproic acid on the ADVIA 1650 analyzer: effect of gross hemolysis and high bilirubin

Valproic acid is an anticonvulsant that requires careful therapeutic drug monitoring. Valproic acid is also used in psychiatric patients. Bayer Diagnostics (Tarrytown, NY) recently marketed a turbidimetric immunoassay for monitoring valproic acid concentrations in serum or plasma using the ADVIA 1650 analyzer. We evaluated the performance of this new assay by comparing it with a widely used fluorescence polarization immunoassay (FPIA) on the AxSYM analyzer (Abbott Laboratories, Abbott Park, IL). The total coefficient of variation (CV) for the low control of this new assay was 6.8% (mean = 30.7, SD = 2.1 microg/mL, n = 44) while the corresponding CVs for the medium and high controls were 3.3% (mean = 81.0, SD = 2.7 microg/mL, n = 44) and 5.9% (mean = 142.9, SD = 8.4 microg/mL, n = 44), respectively. The assay is linear up to a serum valproic acid concentration of 170 microg/mL, and the detection limit is 4.4 microg/mL. We observed an excellent correlation between the FPIA of valproic acid and the turbidimetric assay using specimens from 52 different patients who were receiving valproic acid. Using the valproic acid concentrations obtained by the FPIA as the x-axis, and the corresponding valproic acid concentrations obtained by the turbidimetric assay as the y-axis, we developed the following regression equation: y = 1.03 x+1.55 (r = 0.98). With this new assay, high concentrations of bilirubin (unconjugated 30 mg/dL and conjugated 30 mg/dL) and gross hemolysis (4+, hemoglobin: 1,500 mg/dL) have no effect on measurements of valproic acid concentration. We conclude that the new turbidimetric assay for valproic acid can be used for routine therapeutic drug monitoring of valproic acid in clinical laboratories.