七氟醚对乳腺癌细胞侵袭、迁移能力的影响及作用机制

目的:探究七氟醚与乳腺癌MDA-MB-231细胞侵袭、迁移的关系以及作用机制。方法:采用不同浓度七氟醚处理MDA-MB-231细胞6 h,分为对照组、1.7%给药组、3.4%给药组、5.1%给药组,划痕实验和Transwell小室法观察细胞的迁移、侵袭能力,采用Western印迹法检测基质金属蛋白酶-2(matrix metalloprotease-2,MMP-2)、MMP-9、钙黏蛋白E(E-cadherin)、β-连环蛋白(β-catenin)的水平。结果:与对照组相比,七氟醚处理MDA-MB-231细胞迁移率和侵袭细胞数随着浓度的增加而降低(P0.05)。MDA-MB-231细胞经七氟醚干预后,细胞中MMP-2,MMP-9,E-cadherin,β-catenin蛋白水平显著降低(P0.05),且随着浓度的增加逐渐降低;Wnt/β-catenin信号通路激活剂LiCl作用于5.1%七氟醚干预6h的细胞,细胞中β-catenin和E-cadherin蛋白水平明显增加,侵袭、迁移能力显著提高。结论:七氟醚可能是通过调控Wnt/β-catenin信号通路影响MMP-2,MMP-9蛋白水平,抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞的侵袭、迁移能力。该效应具有浓度依赖性,为乳腺癌的治疗提供新的理论基础。     

沉默wee1基因对卵巢癌细胞增殖、迁移和侵袭的作用机制

目的探讨沉默wee1基因对卵巢癌细胞增殖、迁移和侵袭的作用机制。方法将卵巢癌细胞分为Blank组、小干扰RNA(siRNA)阴性对照(siRNA-NC)组和携带wee1基因片段(siRNA-wee1)组,利用siRNA技术在卵巢癌细胞中沉默wee1基因,采用实时荧光定量PCR、免疫印迹法(WB)检测3组卵巢癌细胞wee1 RNA及蛋白表达水平,采用细胞划痕试验、Transwell试验观察卵巢癌细胞平板集落形成数及卵巢癌细胞迁移、侵袭能力,采用WB观察卵巢癌细胞Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白Wnt3a、β-连环蛋白(β-catenin)、细胞周期蛋白D1(Cyclin-D1)、基质金属蛋白酶7(MMP-7)的表达情况。结果siRNA-wee1组卵巢癌细胞wee1 RNA和蛋白表达水平均低于siRNA-NC组和Blank组(P<0.05),卵巢癌细胞集落形成数少于Blank组和siRNA-NC组(P<0.05),卵巢癌细胞迁移、侵袭能力低于Blank组和siRNA-NC组(P<0.05),Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白Wnt3a、β-catenin、Cyclin-D1和MMP-7表达水平均低于siRNA-NC组和Blank组(P<0.05)。结论沉默wee1基因可抑制Wnt/β-catenin信号通路的激活,进而抑制卵巢癌细胞增殖、迁移和侵袭能力。     

LGR5对宫颈癌细胞上皮间质转化的影响及潜在机制研究

目的探讨富含亮氨酸重复序列的G蛋白偶联受体5(LGR5)对宫颈癌细胞上皮间质转化的影响及潜在机制。方法采用前瞻性研究,以宫颈癌细胞Hela为研究对象,构建过表达和敲低LGR5的细胞株,RT-PCR和Western blot检测LGR5表达。将转染pc DNA3.1-LGR5的Hela细胞作为LGR5组,以转染pc DNA3.1空载体的细胞记为pc DNA3.1组;将转染LGR5 siRNA细胞作为si LGR5组,以转染阴性对照siRNA细胞记为NC组。Western blot分别检测各组细胞中上皮间质标记物钙黏附蛋白E(E-cadherin)、钙黏附蛋白N(N-cadherin)、波形蛋白(vimentin)及Wnt/β-cadherin通路蛋白β链蛋白(β-catenin)和下游蛋白c-Myc、细胞周期蛋白(Cyclin D1)表达变化。Transwell实验检测各组细胞迁移侵袭能力变化。结果 Hela细胞中成功过表达和敲低了LGR5;与pc DNA3.1组相比,Hela细胞转染pc DNA3.1-LGR5后细胞中上皮标志物E-cadherin表达显著降低(P0.05),间质标记物vimentin、N-cadherin表达显著增加(P0.05)。与NC组相比,Hela细胞转染si LGR5后细胞中E-cadherin表达明显增加(P0.05),vimentin、Ncadherin表达明显下降(P0.05)。与pc DNA3.1组相比,Hela细胞过表达LGR5后细胞迁移侵袭能力、Wnt/β-catenin通路蛋白β-catenin及其下游基因c-Myc、Cyclin D1表达均显著增加(P0.05);而Hela细胞沉默LGR5后较NC组细胞迁移侵袭能力、Hela细胞中β-catenin、c-Myc和Cyclin D1表达均明显降低(P0.05)。结论过表达LGR5能够促进宫颈癌细胞Hela上皮间质转化和侵袭迁移,而干扰LGR5则抑制了细胞上皮间质转化和迁移侵袭,其中机制可能与LGR5调控Wnt/β-catenin信号转导有关。     

和厚朴酚通过降低Wnt/β-catenin信号通路活性抑制前列腺癌细胞的上皮-间充质转化过程

目的:检测和厚朴酚对前列腺癌细胞PC3的上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)过程的影响并探讨其作用机制。方法:将不同浓度的和厚朴酚(0,10,20,40μmol/L)作用于PC3细胞24 h后,通过细胞划痕试验和Transwell小室试验检测和厚朴酚对细胞的迁移和侵袭能力的影响;将不同浓度的和厚朴酚(0,10,20,40μmol/L)作用于PC3细胞48 h后,采用蛋白质印迹法检测和厚朴酚对PC3细胞内E-cadherin,N-cadherin,vimentin及β-catenin蛋白质表达的影响,RT-RCR检测和厚朴酚对细胞β-catenin和MMP-9 mRNA相对表达量的影响。结果:经和厚朴酚作用后的PC3细胞与对照组(和厚朴酚0μmol/L)相比迁移与侵袭能力显著降低,细胞内N-cadherin,vimentin及β-catenin蛋白表达显著下降,E-cadherin蛋白表达显著升高,β-catenin和MMP-9 mRNA相对表达量显著降低,且上述结果呈剂量依赖性。结论:和厚朴酚能抑制PC3细胞的迁移和侵袭,该作用可能是通过抑制Wnt/β-catenin信号通路的活性,从而降低EMT活性而产生的。     

YB-1对卵巢癌细胞EMT标志蛋白表达及黏附能力的影响研究

目的研究Y-box结合蛋白(YB-1)对卵巢癌细胞上皮间质转化(EMT)标志蛋白表达及细胞黏附能力的影响。方法在卵巢癌细胞中转染p Genesil-1.1/YB-1 shRNA和p Genesil-1.1/shRNA control,筛选稳定转染的细胞记为YB-1 shRNA组和shRNA-NC组,把没有转染的细胞作为对照组。以Realtime PCR和Western blot方法检测细胞中YB-1表达水平。用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)方法分别检测细胞增殖和黏附能力,用Western blot检测EMT标志蛋白上皮钙黏附素(E-cadherin)、神经型钙粘素(N-cadherin)和迁移侵袭相关蛋白基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)水平,Transwell小室测定细胞侵袭和迁移情况。结果 YB-1 shRNA组细胞中的YB-1表达水平明显低于对照组和shRNA-NC组(P0.05)。YB-1 shRNA组细胞增殖率和黏附率低于对照组和shRNA-NC组(P0.05)。YB-1 shRNA组细胞中E-cadherin蛋白水平高于对照组和shRNA-NC组,N-cadherin、MMP-2、MMP-9蛋白水平低于对照组和shRNA-NC组,差异具有统计学意义(P0.05)。YB-1 shRNA组细胞侵袭和迁移数目低于对照组和shRNA-NC组(P0.05)。结论下调YB-1促进卵巢癌细胞E-cadherin表达,抑制N-cadherin表达,抑制细胞EMT,降低细胞黏附、侵袭、迁移能力。     

Wnt/β-catenin通路及uPA在子宫内膜癌中的作用机制研究

目的探究Wingless/β-连环蛋白(Wnt/β-catenin)通路及尿激酶型纤溶酶原激活剂(uPA)在子宫内膜癌(EC)中的作用机制。方法将人EC细胞KLE分为5组,即对照组、阴性对照组、Wnt-1组、si-uPA组和Wnt-1+si-uPA组,其中Wnt-1组通过转染Wnt-1 pcDNA 3.1质粒上调Wnt-1的水平;si-uPA组通过转染si-uPA质粒敲低uPA的水平。Wnt-1+si-uPA组共同转染Wnt-1 pcDNA 3.1以及si-uPA;空质粒被用于阴性对照组。检测转染后各组细胞Wnt-1、β-catenin、uPA m RNA和蛋白表达水平,以及细胞活力、细胞迁移和侵袭能力。结果 Wnt-1组的Wnt-1、β-catenin、uPA水平均显著高于对照组和阴性对照组,并且Wnt-1的水平会影响uPA mRNA和蛋白的表达。si-uPA组的Wnt-1、β-catenin表达水平变化不显著,而uPA mRNA和蛋白的水平显著降低。Wnt-1+si-uPA组的Wnt-1和β-catenin也无显著变化且uPA mRNA和蛋白水平显著低于Wnt-1组。培养48 h后,Wnt-1组细胞活力、细胞迁移率和侵袭率升高而si-uPA组细胞活力、细胞迁移率和侵袭率降低。并且Wnt-1+si-uPA组细胞活力、细胞迁移率和侵袭率显著低于Wnt-1组。Wnt-1组MMP2、MMP9、N-cadherin mRNA水平升高而si-uPA组降低,并且Wnt-1+si-uPA组MMP2、MMP9、N-cadherin mRNA水平显著低于Wnt-1组。结论在EC细胞中,Wnt/β-catenin的过表达会通过促进uPA的表达促进EC的迁移和侵袭。     

MiR-144调控Wnt4/β-catenin信号通路抑制多发性骨髓瘤细胞恶性生物学行为的研究

目的:探讨miR-144对多发性骨髓瘤细胞生物学行为的影响及机制。方法:RT-PCR检测miR-144在多发性骨髓瘤细胞及多发性骨髓瘤(MM)患者血浆中的表达情况;MTT法检测miR-144模拟物转染至骨髓瘤细胞后细胞的增殖情况及细胞克隆形成能力;流式细胞术检测过表达miR-144的骨髓瘤细胞周期分布情况;Tunel法检测过表达miR-144的骨髓瘤细胞的凋亡情况;Transwell细胞侵袭实验与迁移实验检测过表达miR-144的骨髓瘤细胞的侵袭及迁移能力;Western blot法检测过表达miR-144的骨髓瘤细胞的MMP-9、MMP-2的蛋白表达水平及Wnt4/β-catenin信号通路相关蛋白的表达水平。结果:MM细胞株及MM患者血中miR-144表达水平明显低于正常对照组(P0.05)。过表达miR-144的骨髓瘤细胞的增殖、侵袭、迁移能力明显降低(P0.05),细胞凋亡水平增加(P0.05)。过表达miR-144的骨髓瘤细胞的MMP-9、MMP-2、Wnt4/β-catenin信号通路相关蛋白的表达水平均明显低于对照组(P0.05)。结论:MiR-144能抑制多发性骨髓瘤细胞的增殖、迁移和侵袭,诱导其凋亡,其具体机制可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路的活性有关。     

京尼平苷调控Wnt/β-cantenin信号通路抑制胃癌转移的机制研究

目的 探讨京尼平苷（GEN）抑制人胃癌SGC-7901细胞转移的作用及其可能机制。方法 培养人胃癌SGC-7901细胞,使用GEN处理细胞,通过CCK8法检测GEN对SGC-7901细胞增殖的影响,运用Transwell实验检测GEN对SGC-7901细胞迁移和侵袭能力的作用,运用Westernblot和q-PCR检测GEN对SGC-7901细胞β-catenin、E-cadherin、Vimentin和Snail蛋白及mRNA表达的作用;运用Wnt通路激活剂（LiCl）和GEN联合处理SGC-7901细胞后,观察对SGC-7901细胞迁移和侵袭能力的影响,对β-catenin、E-cadherin、Vimentin和Snail蛋白及mRNA表达的影响。结果 Transwell实验结果显示,GEN能够抑制SGC-7901细胞的迁移和侵袭能力下降,差异有统计学意义（P<0.05）。Westernblot和q-PCR结果表明,GEN能够促进E-cadherin的表达,抑制β-catenin、Vimentin和Snail的表达,差异有统计学意义（P<0.05）。与GEN组比较,W...     

SOX4调控Wnt信号通路影响骨肉瘤细胞增殖侵袭的实验研究

目的探讨性别决定区Y框蛋白4(SOX4)调控Wnt信号通路对骨肉瘤细胞增殖侵袭能力的影响。方法RT-PCR和Western blot检测收集的骨肉瘤组织及对应的瘤旁组织中SOX4的表达水平。体外培养骨肉瘤细胞F5M2,细胞转染SOX4小干扰RNA1(干扰1组)和SOX4小干扰RNA2(干扰2组)、小干扰RNA阴性对照(siRNA-NC组),同时以未转染的细胞为对照组。RT-PCR和Western blot检测各组细胞中SOX4表达水平,筛选出干扰效果较好的干扰2组继续研究。噻唑蓝(MTT)检测细胞存活率,Transwell小室检测细胞侵袭能力,Western blot检测细胞中β-连环蛋白(β-catenin)、磷酸化的糖原合成激酶3β(pGSK-3β)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)表达水平。结果骨肉瘤组织中SOX4的表达水平明显高于瘤旁组织(P0.05)。干扰1组和干扰2组细胞中SOX4的表达水平明显低于对照组(P0.05),后续选用干扰2组细胞继续研究。干扰2组细胞存活率、侵袭细胞数目及细胞中MMP-2、β-catenin表达水平均明显低于对照组(P0.05),而pGSK-3β表达水平明显高于对照组(P0.05)。siRNA-NC组细胞中SOX4表达水平、细胞存活率、侵袭细胞数目及细胞中MMP-2、β-catenin、pGSK-3β表达水平与对照组比较均无显著差异(P0.05)。结论干扰SOX4后能够抑制骨肉瘤细胞的增殖和侵袭,作用机制可能与抑制Wnt信号通路有关。     

miR-577对胶质瘤细胞上皮-间质转化的调控作用及机制

目的探讨miR-577调控胶质瘤细胞上皮-间质转化活性的机制。方法将人源性胶质瘤细胞U87细胞分为miR-577类似物组、miR-577抑制物组和空白对照组,分别转染miR-577 mimic、miR-577 inhibitor和miR577-NC。转染24 h后,采用划痕实验检测各组细胞迁移距离,采用Transwell小室实验检测各组细胞侵袭细胞数,采用反转录PCR法检测各组细胞β-catenin mRNA表达水平,采用Western blot法检测各组细胞vimentin、E-cadherin蛋白相对表达量。结果 miR-577抑制物组、空白对照组、miR-577类似物组细胞迁移距离[(3.44±0.55)、(2.13±0.21)、(1.04±0.14)mm]、侵袭细胞数[(128.50±8.11)、(84.60±4.20)、(39.80±6.01)个]、细胞β-catenin mRNA相对表达量(0.80±0.06、0.61±0.04、0.45±0.06)和vimentin蛋白相对表达量(0.82±0.06、0.67±0.08、0.31±0.02)均依次降低(P0.05),E-cadherin蛋白相对表达量(0.44±0.04、0.76±0.05、0.89±0.08)依次增高(P0.05)。结论 miR-577可能作为抑癌基因,通过阻断Wnt/β-catenin信号通路的活性,降低人源性胶质瘤U87细胞上皮-间质转化活性,从而抑制肿瘤发展。     

韶关市农村留守儿童孤独感状况调查

目的了解广东省韶关市农村地区留守儿童孤独感现状及其影响因素。方法对韶关市某地区两所农村小学3～6年级学生中的489名留守儿童采用儿童孤独量表和自编调查表进行问卷调查。结果17．6％留守儿童存在孤独感，不同性别孤独感发生率无差异性，不同年龄及不同年级间孤独感发生率差异均有极显著性（P〈0.01）；随年级增加，孤独感发生率呈下降趋势（X^2趋势=5．970，P〈0.05）。留守儿童孤独感与健康状况、学习成绩、学习困难程度、父母教育方式、父母间关系和老师教育方式等因素显著相关（P〈0.01～0．05）。结论农村地区留守儿童中存在一定程度的孤独感问题，老师和家长应以正确的态度和方法对待留守儿童，以减少其孤独感的发生。     

产科新生儿不同部位经皮测黄报警预值的可靠性观察

目的对比观察产科新生儿不同部位经皮胆红素（TCB）报警预值的可靠性。方法132例产科新生儿采取随机数字分组法分为正常产组和剖宫产组各66例,新生儿均于产后第4天同一时间点应用KJ8000经皮测黄仪分别测量额、胸、腹、额胸、额胸腹TCB值,TCB〉12．9mg／dl者,取得亲属同意抽取静脉血检测血清胆红素（SB）,对比分析不同部位TCB及其与sB值的差异。结果两组分别有17例或21例达到TCB报警预值。两组TCB或sB相同方法及相同部位比较,差异无统计学意义（P〉0．05）;两组TCB不同部位对比,额部值最低、胸部值最高,且与其他部位同组对比差异均有统计学意义（P〈0．01）;两组sB值对比差异无统计学意义（t=1．53,P〉0．05）,与不同部位TCB对比均以胸部数值差异无统计学意义（P〉0．05）,而与其他部位TCB两组差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论正常产与剖宫产新生儿术后sB对比差异无意义;TCB动态监测以胸部结果更接近SB。     

Determination of loss of quality of life

Physiatrists are a valuable resource in legal settings, where assessment of functional capacity to perform work and of future medical needs must be determined. Physiatrists help determine what future medical care is needed to restore and maintain an individual at the maximum level of life function. This article focuses on the use of a quality of life (QOL) rehabilitation model, rather than a medical model, for enhancing functional performance, modifying environments, and facilitating patient coping. We discuss use of the QOL model to describe and influence a patient's physical, psychological, cognitive, vocational/economic, and social/leisure domains.     

血液透析患者家庭护理提供者的生活质量调查

目的:了解江汉油田血液透析(血液透析)患者家庭护理提供者(护理者)的生活质量。方法:对60例血液透析患者的家庭护理提供者进行一般情况和生活质量综合评定问卷(QOLI-74)调查,并进行相关性和多因素回归分析。结果:家庭护理提供者各维度的主观生活满意度与其客观指标相关,但也与其需求、年龄、文化程度、与患者的关系有关。结论:客观状态是影响主观生活满意度的重要因素,同时应考虑护理者的需求、年龄、文化程度、与患者的关系对护理者主观生活满意度的影响。     

星状神经节阻滞治疗失眠疗效观察

失眠症又称不寐，指入睡困难，或维持睡眠障碍（易醒、早醒和再入睡困难）导致睡眠时间减少或睡眠质量下降，不能满足身体生理需要，明显影响日间社会功能和生活质量。现将星状神经节阻滞治疗失眠疗效观察总结如下。