B等位基因调控区突变可能导致弱B表型

目的 :对1例血清学血型鉴定困难的患者进行ABO基因分型,分析引起血型鉴定困难的原因及其突变基因。方法:采用微柱凝胶法及全自动血型鉴定系统,对该例患者进行血清学血型鉴定及抗人球蛋白试验和抗体筛查,采用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增结合Sanger测序及PCR产物克隆的方法,分析该患者及其父母ABO基因的增强子、启动子、第1~7外显子区及其侧翼序列,寻找变异位点。结果:该例患者的血清学正定型为ABweak,ABO基因外显子分型结果为A102/B101,其B等位基因增强子CBF/NF-Y微卫星区比正常的4个43 bp串联多了一个串联,B等位基因启动子缺少-35~-18的18 bp序列。结论:该患者B等位基因调控区内的变异很可能是引起其B抗原弱表达的原因。     

ABO基因调控区变异对其表型的影响

目的探讨ABO基因调控区增强子、启动子变异对ABO表型的影响。方法对4名来自上海儿童医学中心血型鉴定正反不符的患儿标本,采用ABO-Rh血型确认卡(DG Gel Confirm)、中性卡(DG Gel Neutral)、抗球蛋白检测卡(DG Gel Coombs)在全自动血型检测系统上做血清学血型鉴定、抗球蛋白试验和抗体筛查,采用PCR结合直接测序法检测患儿及其中1个家系的ABO基因增强子、启动子、第1—7外显子及其邻近内含子序列。结果 4名患儿的红细胞分别与凝胶卡中抗-A、抗-B试剂反应出现弱阳性或双群现象(DP),其表型分别为AB_(weak)、A_(weak)、A_(weak)、A_(weak)B型。DAN测序:4名患儿基因型分别为ABO~*A1.02/B.01、ABO~*A1.02/O.01.02、ABO~*A1.01/O.01.02、ABO~*A1.02/B.01/O.01.04,同时ABO基因调控区增强子或启动子分别存在变异现象;2例为增强子微卫星拷贝数异常、其中1例伴启动子变异,2例为血型嵌合体引起增强子突变而导致的血型抗原弱表达。病例3患儿父母表型分别为A和B型,基因型分别为ABO~*A1.02/O.01.01和ABO~*B.01/O.01.02。结论 ABO基因调控区对ABO血型的正常表达起着非常重要的作用,增强子异常或启动子的变异将导致ABO血型抗原的表达减弱;检测增强子序列也可以发现可能存在的ABO血型嵌合体。     

3例ABO血型鉴定正反不符患者基因序列分析——附1个新的ABO等位基因突变点位的发现

目的 探讨导致3例ABO血型正反定型不符的分子机制。方法 采用血型血清学方法对ABO正反定型不符标本进行亚型鉴定;采用PCR方法扩增ABO基因的6、7外显子;采用测序方法对ABO6、7外显子进行直接测序。结果 血型血清学试验结合基因测序证实3例标本为分别为：AwB(1例)、Ael(2例)。基因直接测序发现先证者1在A等位基因第7外显子发生了476C>T、595C>T突变,在B等位基因第7外显子526C>G、657C>T、703G>A、796C>A、803G>C、930G>A突变;先证者2、3在A等位基因第7外显子发生了476C>T和767C>T突变,两标本突变点符合Ael₀₅。以上的基因位点改变均导致了ABO血型的血清学表型变化,表现为ABO亚型。先证者3的母亲及女儿都携带Ael₀₅等位基因。结论 本研究揭示了3例ABO亚型的分子遗传背景,并发现1个新的ABO血型等位基因,即：c.595C>T单基因位点突变。     

ABO*BEL.11 等位基因突变致红细胞B 抗原弱表达的家系血型血清学及分子机制研究

目的 探讨由ABO*BEL.11 等位基因导致的ABO 正反定型不符样本及家系的血清学和分子生物学特性,研究其遗传方式。方法 常规血型血清学方法和吸收放散试验鉴定样本的ABO 血型表型;PCR 方法扩增ABO 基因7 个外显子及其侧翼内含子,对扩增产物进行直接测序和克隆测序分析,并对先证者的亲属进行家系调查。结果 先证者血型血清学结果为B弱;测序显示:存在ABO*B.01/O.01.01 杂合且伴c.586C/T 突变;克隆测序:c.261delG,297A>G,c.526C>G,c.586T>C,c.657C>T,c.703G>A,c.796C>A,c.803G>C 和c.930G>A 共9 个突变,基因型结果为ABO*BEL.11/O.01.01。家系调查显示先证者父亲、母亲、妻子和女儿血型血清学结果分别为B 型、O 型、A 型及B 弱,其中先证者父亲及女儿的ABO 基因存在ABO*BEL.11 等位基因。结论 ABO*B.01 等位基因上c.586T>C 的突变产生ABO*BEL.11 等位基因,从而导致红细胞上B 抗原的弱表达,且能够稳定遗传突变。     

ABO基因转录调控机制研究进展

ABO血型抗原不仅表达于红细胞表面,在多种组织的上皮细胞、内皮细胞中也有表达。在细胞发育、分化、成熟过程中ABO抗原表达状态发生一系列变化,在一些疾病,如血液系统疾病、恶性实体瘤的进程中,红细胞及组织中ABO抗原的表达水平也会发生改变。为弄清ABO抗原表达变化的调节机制,本文综述了ABO抗原表达相关的转录调控分子基础,包括ABO基因上游、下游和内含子中的转录调控元件及这些区域结合的转录因子的调控作用,以及与ABO基因转录相关的表观遗传调控机制,反义RNA的调控机制,为系统性的认识调控ABO基因转录的分子机制提供参考。     

弱血型抗原致ABO正反定型不符3例

ABO血型系统具有其他血型系统所没有的独特性质。一是血清中常存在反应强的抗体,而红细胞上缺乏相应的抗原;二是许多组织细胞上有规律地存在着A、B、H抗原,以及分泌型的分泌液中也存在A、B、H物质;这两种独有的性质,使ABO血型系统成为临床输血和器官移植中最重要的血型系统。保证受血者和献血者ABO血型的正确性是安全输血的前提。但由于人类血型系统的复杂性,日常工作中常常有许多原因可引起ABO正反定型不符,使ABO血型难以确定。     

白血病致ABO血型抗原减弱4例

<正>2007~2009年入我院血液科治疗的4名白血病患者,均为男性,年龄20~51岁,平均年龄35岁,入院时诊断为慢性粒细胞性白血病(急变期)2例,急性非淋巴细胞性白血病2     

PCR-SSP法在ABO疑难血型鉴定中的应用

目的 采用PCR-SSP法检测ABO基因型.方法 ABO血型血清学正反定型不符样本10个,用PCR-SSP法检测其基因型.结果 10个疑难血型标本PCR-SSP法均得出明确的ABO血型结果.结论 PCR-SSP法检测ABO血型方法可靠,可应用于临床输血.     

455例ABO正反定型不符原因分析

目的探讨ABO血型正反定型不一致原因,并提出解决方法。方法分析血液标本正反定型不一致的原因,采用血型血清学方法进一步试验,ABO基因分型方法辅助验证。结果 ABO血型正反定型不一致标本455份,采用试管法后正反定型一致213例,不一致的242例中冷凝集素108例、ABO亚型55例、抗体缺失或减弱48例、ABO以外的同种抗体20例、补体致敏7例、AB抗原性减弱2例、假凝集及直抗阳性各1例。结论对ABO血型正反定型不一致的血液标本,应根据原因加做血型血清学或分子生物学试验,以确保ABO定型结果的准确。     

白血病ABO血型抗原改变的2例报告

血型具有遗传特性,一般认为一个人的血型终身不变,但在某种特定情况下,血型抗原可发生改变。国外于50年代就有血型抗原改变的报道。至今此种改变仅属表现型的改变,未见有基因型的变异。现就本院两例血型抗原改变的病例报告如下。     

恶性肿瘤和血液病患者ABO血型抗原弱表达及输血对策

目的对恶性肿瘤及血液病患者ABO血型抗原弱表达进行系统性分析并对其输血对策进行探讨。方法随机抽取恶性实体肿瘤及血液病患者198例,查阅诊断和输血情况,并对抗原弱表达的病例进行吸收放散、唾液中和等试验鉴定正确血型,同时将两种病情结果进行对照分析。结果发现两种病情均有呈现ABO血型抗原弱表达情况,分别为1.65%、20.78%,血液病患者抗原弱表达明显高于恶性实体肿瘤病例（χ2=18.58,P〈0.05）。因贫血而导致的血液病输血病例中,输注同型血与输注洗涤红细胞后血红蛋白值相比差异无统计学意义（t=1.76,P〉0.05）。结论采用血清学正反定型试验、吸收放散试验和唾液血型物质检测的方法可以更为准确对ABO血型抗原弱表达的病例进行血型鉴定,输血时以输注正确鉴定的同型血为原则,特殊情况下输O型洗涤红细胞更为安全。     

ABO血型中的一个新变异O1等位基因的鉴定

目的 鉴定中国人群的ABO血型新等位基因。 方法 ABO血清学定型、PCR-SSP基因定型、基因克隆和测序分析。结果 一个血型血清学为A2亚型、PCR-SSP基因定型为A201的健康捐血者,其O1基因单倍体的2个碱基发生了缺失突变,即第6外显子区域中261位G缺失和第7外显子区域中496位A缺失。该等位基因与ABO*0101基因序列的差异在于496位A缺失。 结论该等位基因是一个与O1基因相关的新变异等位基因,GenBank的注册号为AY374123。     

恶性血液病ABO抗原减少与ABO基因表达异常的相关性

ABO血型系统是人类发现的第一个血型系统,具有基因核苷酸序列高度保守性。自Van Loghem等首次报道恶性血液病中ABH抗原减少现象以来,在恶性血液病中时常有此改变,其分子生物学机制表明与ABO基因启动子甲基化抑制基因表达有一定相关性。     

ABO血型正反定型不一致26例原因分析

目的通过对26例ABO血型正反定不一致的血型鉴定结果进行分析，找到原因及纠正方法，从而避免因假阳性和假阴性出现所造成的血型鉴定差错。方法分别采用普通试管法、洗涤红细胞法、自身抗体吸收法及热放散法进行试验。结果25例试管法ABO血型正反定不一致的标本经进一步鉴定后7例与正定结果一致，19例与反定结果一致。结论血液病患者及重症感染患者易发生ABO血型正反定不一致的现象。     

ABO疑难血型的基因型鉴定与序列分析

目的 研究20例ABO疑难血型标本的基因型并鉴定其分子生物学特性。方法 应用标准血型血清学鉴定技术分析标本的血清学表型。应用聚合酶链反应(polymerase chain reaction, PCR)扩增标本ABO基因7个外显子,对PCR产物进行直接测序,分析ABO疑难血型的基因分型和序列。结果 20例ABO疑难血型标本的血清学表型分别为：A抗原减弱5例、A抗原减弱合并抗-A15例、A抗原正常合并抗-A12例、B抗原减弱8例,基因型分别为：Ax02/O01 3例、Ael07/O01 2例、B313/O01 2例、A204/O02、A220/O01、Ael07/O02、Ael02/O01、Ael02/O02、Ax03/O01、Ax03/O02、B313/O02、B302/O01、B302/O02、Bw19/O02、A102/B313、A101/Bw37各1例。结论 ABO基因分型技术可精准鉴定疑难标本的血型,提供明确的血型遗传学信息,保障临床用血安全。     

常见ABO血型鉴定错误原因分析

正确的ABO血型鉴定是临床安全输血必不可少的前提,而错误血型的血液一旦输入,则直接危及患者的生命。笔者对多年工作中所观察的53例造成ABO血型定型错误的原因和结果进行分析,报道如下。     

ABO血型正反定型不符43例原因分析

输血是现代临床治疗疾病不可替代的手段,而输血的前提是正确的判断患者的血型,因此,只有快速准确鉴定ABO血型,解决正反定型不符的问题,才能保障输血的安全及时有效.现对我院2006年以来ABO正反定型不一致的情况进行分析原因及解决方法.     

ABO血型正反定型不一致原因分析及对策探讨

目的探讨ABO血型定型中正反定型不一致的原因和解决方法。方法对正反定型不一致血液标本进行不同的血型血清学试验,对存在疑问的标本进行基因分型、测序,分析正反定型不一致的原因,进行正确的红细胞分型。结果共检查ABO血型正反定型不一致标本45例,其中冷自身抗体5例、亚型11例、抗体缺失及减少7例、抗原性减弱10例、因输血或妊娠发生同种抗体5例,自身免疫性贫血7例。对其中9例血型血清学难鉴定标本和亚型标本进行PCR扩增,测序,确定其基因型。结论对ABO血型正反定型不一致无法定型的血液标本,可以采用基因分型及其他辅助手段正确鉴定ABO血型,以保证输血安全性和有效性。     

ABO*cisAB.03.1.1/ABO*0.02.01.1基因型患者的血型检测及分析

目的 明确ABO血型血清学实验发现的患者正反定型不符情况的血型基因型.方法 因贫血申请输注红细胞悬液的糖尿病患者,ABO血型检测发现其正反定型不符,应用血型血清学实验A1和A2亚型的分型、T抗原检测以及血清不规则抗体检测方法判定其血清学表型,ABO基因分型及测序技术判定其血型基因型.结果 患者红细胞与花生血凝素不发生凝集反应,血清不规则抗体筛查阴性;患者红细胞与抗-A凝集,与抗-A1不凝集,患者血清与A1标准红细胞呈现较强凝集反应,与A2标准红细胞不发生凝集;EXON6 1条等位基因存在261G的缺失,EXON7序列非O等位基因出现700T/C,EXON7测序结果显示突变点为526C/G,646A/T,657C/T,700C/T,703G/A,771C/T,796A/C,829G/A,803G/C,930G/A.结论 我们发现该患者血清学方法表现为A2B血型,基因分型为少见的ABO*cisAB.03.1.1/ABO*0.02.01.1.