针刀疗法对肩周炎模型兔肩关节囊局部组织中基因蛋白表达的影响

目的:研究针刀疗法对肩周炎兔肩关节囊中白细胞介素6(IL-6)、高迁移率族蛋白1(HLGB1)、酸敏感离子通道蛋白3(ASIC3)蛋白和基因表达的影响。方法:健康雄性新西兰大白兔30只,按照随机数字表法分为空白组、模型组、针刀组,每组各10只。采用机械加冰敷制造肩周炎模型。密切关注造模前后各组肢体功能活动变化; 采用HE染色观察局部组织形态学变化; 采用Western blot法检测局部IL-6、HLGB1、ASIC3蛋白水平; 采用RT-PCR技术检测各组关节囊滑膜中IL-6、HLGB1、ASIC3的mRNA表达水平。结果:针刀松解法能改善局部病理状态,减少滑膜和肌间质纤维素渗出、粘连和机化,促进组织的修复; 与空白组比较,模型组兔肩关节滑膜IL-6、HLGB1、ASIC3基因和蛋白表达水平显著增加(均P<0.05); 与模型组相比,针刀组兔肩关节滑膜IL-6、HLGB1、ASIC3基因和蛋白表达水平显著降低(均P<0.05)。模型组IL-6、HLGB1、ASIC3蛋白含量显著增多,基因表达水平明显上调,与空白组相比有统计学差异(均P<0.05); 针刀组上述指标蛋白含量显著降低,且对上述基因表达水平具有明显抑制作用,与模型组、空白组相比有统计学差异(均P<0.05)。结论:针刀疗法可降低肩关节囊滑膜中IL-6、HLGB1、ASIC3蛋白表达水平,并能抑制其基因过度表达,这可能是针刀治疗肩周炎有效作用机制之一。     

肩关节轴向拔伸法对兔肩周炎模型炎症因子表达的影响

目的 实验以肩关节轴向拔伸法为干预手段，制作兔肩周炎模型，观察其炎症因子的表达，探讨该手法对肩周炎的疗效机制。方法 把40只实验家兔随机分为4组，每组10只，编入空白组、模型组、对照组、实验组。兔肩周炎模型采用持续劳损加模拟风寒湿邪的方法制作。空白组常规饲养不予造模，也不予干预；模型组常规喂养，造模但不予手法干预；对照组给予肩周炎推拿常规手法；实验组给予肩关节轴向拔伸法，干预20 d后分别取材，取兔耳缘静脉血，检测血清TNF-α、IL-6含量；取模型兔肩周炎局部软组织匀浆，检测PGE-2、TGF-β1含量。结果 肩关节轴向拔伸法通过干预兔肩周炎模型炎症因子表达，从而明显降低肩周炎模型兔静脉血清TNF-α、IL-6含量(P<0.01),同时也可降低局部滑膜及肌肉中的PGE-2、TGF-β1含量，起到较好的抑制炎症作用(P<0.01)。结论 肩关节轴向拔伸法对兔肩周炎模型耳缘静脉血清和患肩局部软组织中的炎症因子有抑制作用，说明可改善局部炎症反应，促进组织修复。     

森登-4味汤对膝骨性关节炎家兔关节滑膜组织IL-1、TNF-α和TGF-β水平变化的影响

目的:探讨蒙药森登-4味汤对家兔膝骨性关节炎的作用机制。方法:实验分为正常组、模型组和森登-4味汤高、中、低剂量组,每组16只家兔。改良Hulth法建立膝关节骨性关节炎家兔模型。各组分别给与相应处理28 d后,取家兔膝关节滑膜组织,ELISA检测滑膜组织白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、转化生长因子β(TGF-β)等细胞因子水平。结果:模型组家兔膝关节滑膜组织IL-1β、和TNF-α水平明显高于正常组,组间比较有显著性差异(P 0. 01);森登-4味汤组家兔膝关节滑膜组织IL-1β、和TNF-α水平均明显低于模型组,差异有统计学意义(P 0. 05或P 0. 01);模型组家兔膝关节滑膜组织TGF-β水平明显低于正常组,组间差异有显著统计学意义(P 0. 01);森登-4味汤组家兔膝关节滑膜组织TGF-β水平均上调,差异有统计学意义(P 0. 05或P 0. 01)。结论:蒙药森登-4味汤能通过抑制IL-1β及TNF-α、上调TGF-β的分泌,有效减轻膝骨性关节炎家兔的炎症。     

虎杖醇提物通过NLRP3/ASC/caspase-1轴干预小鼠急性痛风性关节炎的作用研究

通过NLRP3/ASC/caspase-1轴探讨虎杖醇提物(ethanolic extract of Polygonum cuspidatum, PCE)对C57BL/6小鼠急性痛风性关节炎的干预作用及机制。采用PCE高、中、低3个剂量,以秋水仙碱为阳性对照,小鼠采用踝关节注射尿酸钠晶体(MSU)造模。动物模型通过PCE干预后,采用HE染色观察滑膜组织形态学变化;采用ELISA法测定踝关节滑膜组织分泌的IL-1β,IL-6和TNF-α浓度;蛋白印迹(Western blot)法测定滑膜组织中NLRP3,ASC,caspase-1蛋白表达情况;RT-PCR法测定滑膜组织中NLRP3,ASC,caspase-1 mRNA表达情况。结果表明,与正常组比较,模型组小鼠踝关节肿胀度明显增加,滑膜组织IL-1β,IL-6,TNF-α表达水平显著升高,NLRP3,ASC,caspase-1蛋白表达和mRNA水平显著升高;与模型组比较,虎杖醇提物组能够显著降低小鼠踝关节肿胀度,关节滑膜IL-1β,IL-6和TNF-α水平以及NLRP3/ASC/caspase-1轴蛋白和mRNA表达均显著降低。该研究初步探明虎杖醇提物能防治小鼠急性痛风性关节炎,其机制可能是调控NLRP3/ASC/caspase-1轴在基因和蛋白水平上的表达。     

基于NF-κB信号通路探讨散寒化痰方外敷对兔模型膝骨关节炎的影响

目的基于NF-κB信号通路探讨散寒化痰方外敷对兔模型膝骨关节炎的影响。方法以改良Hulth法制备兔KOA模型。将36只新西兰兔随机分为正常组、模型组、阳性对照组(扶他林软膏)及散寒化痰方低、中、高剂量组,每组6只,外敷给药6周。HE染色、MASSON染色法及电镜分别观察家兔膝关节软骨组织形态学及软骨细胞超微结构变化;ELISA法测兔血清IL-1β、TNF-α水平;Western blot及RT-PCR检测MMP-3、MMP-13、ADAMTS-5、CollagenⅡ蛋白及mRNA表达;免疫组化法检测NF-κB p65入核表达。结果与正常组比较,模型组兔膝关节软骨细胞结构破坏严重;血清IL-1β、TNF-α水平上升(P0.01),MMP-3、MMP-13、ADAMTS-5蛋白及mRNA表达上调(P0.05,P0.01),CollagenⅡ蛋白及mRNA表达下调(P0.01),NF-κB p65入核表达升高(P0.05)。与模型组比较,散寒化痰方各剂量组兔膝关节软骨细胞结构仅轻度损伤,血清IL-1β、TNF-α水平降低(P0.01),MMP-3、MMP-13、ADAMTS-5蛋白及mRNA表达下调(P0.05,P0.01),NF-κB p65入核表达降低(P0.05,P0.01);散寒化痰方低、高剂量组兔膝关节软骨组织中CollagenⅡ蛋白及mRNA表达均上调(P0.05,P0.01)。结论散寒化痰方可能通过抑制膝关节软骨细胞NF-κB p65入核表达,阻止NF-κB信号通路激活,下调MMP-3、MMP-13、ADAMTS-5及上调CollagenⅡ表达,抑制兔血清IL-1β、TNF-α水平升高,进而保护膝骨关节软组织,延缓KOA发生与发展。     

针刀干预对膝骨关节炎兔滑膜纤维化的影响

目的：探讨针刀干预对膝骨关节炎(KOA)兔滑膜纤维化的影响。方法：新西兰兔随机分为空白组、模型组、针刀组、电针组,各8只。采用改良Videman左后肢伸直位固定法制动4周,制备模型。空白、模型组不干预,针刀、电针组各干预3周。测量被动活动范围(PROM)；天狼猩红染色观察滑膜胶原沉积的情况；Western Blot法检测膝关节滑膜组织TGF-β1、α-SMA、COL-Ⅰ蛋白表达情况。结果：与模型组比较,针刀、电针组PROM明显增大(P＜0.01),针刀组大于电针组(P＜0.05)。与模型组比较,针刀、电针组滑膜组织胶原沉积减轻。模型组TGF-β1、α-SMA、COL-Ⅰ蛋白表达显著高于正常组(P＜0.01)；针刀、电针组可明显抑制TGF-β1、α-SMA、COL-Ⅰ的表达(P＜0.01)；与电针组比较,针刀组TGF-β1、α-SMA、COL-Ⅰ蛋白表达明显降低(P＜0.05或P＜0.01)。结论：针刀通过调控TGF-β1的表达,从而下调α-SMA和COL-Ⅰ的表达,减轻滑膜纤维化达到治疗KOA的目的。     

骨炎消对KOA家兔滑膜组织病理学形态及炎性因子表达的影响

目的:通过熏蒸疗法对KOA家兔滑膜组织治疗前后的病理学形态变化及其相关因子炎性表达的分析,探讨苗药验方骨炎消对膝关节滑膜炎的治疗作用。方法:采用膝关节腔内注射碘乙酸钠的方法建立家兔膝骨性关节炎的炎症模型,正常组和模型组正常饲养,不做干预;阳性组施予扶他林软膏外用;早期苗熏组为造模后第一天给予苗药熏蒸治疗;苗药熏蒸组为造模2周后给予熏蒸治疗。固定兔膝关节,熏蒸30min,1次/d,持续6周。治疗结束后取家兔膝关节滑膜组织进行HE染色观测其病理学形态变化;免疫组织化学法检测滑膜组织中白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的炎性表达;蛋白免疫印迹法(Western-blot)检测NF-κB和p38的蛋白表达水平。结果:与模型组相比,光镜下观察其余各组治疗后的滑膜组织,其病理学形态均有明显改善;与正常组相比,模型组家兔滑膜组织IL-1β与TNF-α的炎性表达显著升高,且NF-κB和p38蛋白的表达水平显著升高,差异均具有统计学意义(P0.05);与模型组相比,阳性组、早期苗熏组和苗药熏蒸组的IL-1β与TNF-α的炎性表达明显降低,且NF-κB和p38蛋白的表达水平明显降低,差异均具有统计学意义(P0.05)。结论:熏蒸疗法可使验方骨炎消改善KOA家兔滑膜组织的病理学形态,且有效抑制滑膜组织中相关因子的炎性表达,从而减轻炎症反应,延缓膝骨性关节炎的发病进程,具有一定的运用和推广价值。     

痛风宁对急性痛风性关节炎模型大鼠IL-1β,TNF-α及NALP3炎性体的影响

目的:从核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NALP3)炎性体角度探讨痛风宁的抗炎作用机制。方法:将48只SD大鼠随机分为造模大鼠36只、正常大鼠12只。造模大鼠采用踝关节局部注射0.2 mL尿酸钠(monosodium urate,MSU)混悬液建立急性痛风性关节炎(acute gouty arthritis,AGA)模型,正常大鼠予相同部位注射生理盐水。造模成功后,随机分为模型组、痛风宁组、秋水仙碱组,分别用生理盐水、痛风宁药液、秋水仙碱混悬液灌胃,每天2次,共3 d。正常大鼠为正常组,同时予等量生理盐水灌胃。造模成功后72 h,行腹腔注射麻醉后取踝关节液及滑膜组织。采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测大鼠踝关节液白细胞介素-1β(IL-1β),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量;蛋白免疫印迹法(Western blot)及实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测滑膜组织NALP3炎性体相关蛋白与mRNA表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠踝关节液IL-1β,TNF-α含量显著升高,滑膜组织NALP3,半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(Caspase-1),凋亡相关斑点样蛋白(ASC)蛋白及mRNA表达均显著增加(P0.01);与模型组比较,痛风宁组与秋水仙碱组大鼠踝关节液IL-1β,TNF-α含量显著下降,且滑膜组织中NALP3,Caspase-1,ASC蛋白及mRNA表达均显著降低(P0.01);与秋水仙碱组比较,痛风宁组大鼠踝关节液IL-1β,TNF-α含量仍较高(P0.05),但滑膜组织中NALP3,Caspase-1,ASC蛋白及mRNA表达均较低(P0.05,P0.01)。结论:痛风宁对AGA的抗炎作用机制可能是通过抑制NALP3炎性体相关蛋白及mRNA表达,从而减少IL-1β,TNF-α的生成,减轻关节炎症反应。     

舒筋止痛水治疗肩周炎模型兔对血清中炎症因子IL-1β、TNF-α、COX-2的影响研究

目的:观察舒筋止痛水对肩周炎兔血清中炎症因子IL-1β、TNF-α、COX-2的影响。方法:将12只新西兰兔随机分为空白组(清水治疗)、治疗组(舒筋止痛水治疗)各6只,持续机械劳损加冰敷造模3天后对两组模型兔行血清标本取材,造模成功后治疗组进行舒筋止痛水外用涂擦治疗,空白组则进行清水外用涂擦,14天后分别对两组模型兔进行血清标本取材,采用Tripure提取血清中的RNA,并用逆转录试剂盒对mRNA逆转录为cDNA用于荧光定量分析。结果:造模后,血清中各指标的相对表达量均有所上升,其中IL-1β和COX-2分别为未处理前的5.87倍和7.85倍,且二者与未处理相比差异有统计学意义,而TNF-α仅增加0.8倍,差异无统计学意义;治疗后空白组血清中炎症因子IL-1β、TNF-α、COX-2均未见明显改变,而治疗组血清中炎症因子IL-1β、TNF-α、COX-2均有下降,其中COX-2下调最显著,与舒筋止痛水治疗肩周炎兔疗效相符,为最佳指标。结论:舒筋止痛水外用治疗肩周炎模型兔,可通过抑制炎症因子IL-1β、COX-2表达进而减轻炎症,具有治疗肩周炎的作用。     

平衡针对家兔肩周炎的抗炎镇痛作用研究

目的:探讨平衡针对肩关节周围炎的治疗作用及作用机制.方法:30只雄性新西兰家兔,随机分为空白组、模型组和平衡针组,每组10只.持续机械劳损加冰敷建立肩周炎模型,平衡针组针刺“肩痛穴”,空白组与模型组不予干预.观察家兔关节活动、病变肩关节周围组织病理变化,检测血浆和肩关节周围组织白细胞介素-1β(IL-1β)、5-羟色胺(5-HT)及冈上肌腱中脱氧核糖核酸(DNA)的含量.结果:平衡针组血浆中5-HT[(18.16±4.44) ng/mL]较模型组[(23.28±5.89)ng/mL]明显降低(P＜0.05),IL-1β无明显差异(P＞0.05);患侧肩关节组织IL-1β、5-HT和冈上肌腱DNA平衡针组较模型组有不同程度的降低(P＜0.01,P＜0.05).结论:平衡针通过减少病变肩关节组织中致痛因子、炎性因子及DNA的表达,从而减轻肩周炎模型兔的局部病变组织的机化和粘连,有效地改善肩周炎所导致的局部和全身的病理状态.     

基于NLRP3炎性体轴探讨土茯苓总黄酮对痛风性关节炎的作用和机制

目的:研究土茯苓总黄酮(TFSG)对急性痛风性关节炎小鼠的抗炎作用,并初步探讨其作用机制。方法:将90只雄性C57BL/6小鼠随机分为正常组,模型组,秋水仙碱组(0.65 mg·kg-1),土茯苓总黄酮低、中、高剂量组(100,300,500 mg·kg-1),每组15只。除正常组外,其余各组采用尿酸钠结晶复制小鼠痛风性关节炎模型,测定小鼠踝关节肿胀度;酶联免疫吸附法(ELISA)检测不同组别滑膜组织中白细胞介素-1β(IL-1β),IL-6,肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,蛋白免疫印迹法(Western blot)测定滑膜组织中核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3),凋亡相关斑点样蛋白(ASC),半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)的蛋白表达,实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测NLRP3,ASC,Caspase-1 mRNA水平的表达。结果:与正常组比较,模型组小鼠踝关节肿胀度明显增加(P0.01),模型组小鼠滑膜组织中IL-1β,IL-6,TNF-α水平显著升高(P0.01),NLRP3,ASC,Caspase-1蛋白表达和mRNA水平显著升高(P0.01);与模型组比较,土茯苓总黄酮组能够显著降低小鼠踝关节肿胀度(P0.01),滑膜组织中IL-1β,IL-6,TNF-α水平以及NLRP3,ASC,Caspase-1蛋白水平和mRNA水平显著降低(P0.01)。结论:土茯苓总黄酮具有一定的抗痛风性关节炎作用,其作用机制与NLRP3炎性体轴有关。     

马铃薯外敷药膏对兔膝关节创伤性滑膜炎IL-1β和TNF-α的影响

目的观察马铃薯外敷药膏对兔膝关节创伤性滑膜炎关节液中白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的影响。方法将40只新西兰大白兔随机分为正常组、模型组、马铃薯外敷药膏组和扶他林乳胶剂组,每组10只。除正常组外其余三组采用电针造模法建立膝关节创伤性滑膜炎兔模型,马铃薯外敷药膏组和扶他林乳胶剂组给予相应的药物,每天2次,连续5d。模型组、正常组不给予处理。实验结束后,苏木精—伊红染色法(HE染色)观察滑膜的变化,酶联免疫吸附法(Elisa法)检测关节液中IL-1β和TNF-α的表达。结果与正常组相比,模型组IL-1β和TNF-α的表达明显升高;与模型组相比,马铃薯外敷药膏组和扶他林乳胶剂组IL-1β和TNF-α的表达明显降低。HE染色可见模型组细胞肥大,排列混乱,大量炎性细胞浸润,马铃薯外敷药膏组和扶他林乳胶剂组不明显。结论马铃薯外敷药膏可能通过抑制IL-1β和TNF-α的表达来减轻滑膜组织的增生和炎性细胞的浸润。     

新风胶囊对佐剂性关节炎大鼠Beclin1/PI3K-AKT-mTor的影响

目的观察佐剂性关节炎(AA)大鼠滑膜中自噬相关基因5、7、12(Atg5,7,12)mRNA、微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ(LC3-Ⅱ)、自噬标志物Beclin1、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(AKT)、哺乳动物雷帕霉素靶向蛋白(m Tor)及血清细胞因子IL-1β、TNF-α、IL-4、IL-10的表达水平变化及新风胶囊对其的影响。方法将48只雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组、西药组(来氟米特,5.0 mg/kg)和中药组(新风胶囊,3.0 g/kg),每组12只。干预30天后,观察各组大鼠体质量、足趾肿胀度(E%)、关节炎指数(AI)及踝关节病理及超微结构变化;检测大鼠滑膜中Atg5、7、12 mRNA表达;检测滑膜LC3-Ⅱ、Beclin1、PI3K、AKT、m Tor蛋白表达;检测大鼠血清IL-1β、TNF-α、IL-4、IL-10含量。结果与正常组比较,模型组E%、AI、IL-1β、TNF-α升高,体重、IL-4、IL-10、Atg5 mRNA、Atg12 mRNA、LC3-Ⅱ、Beclin1蛋白表达降低(P0.01,P0.05),PI3K、AKT、m Tor蛋白表达升高(P0.01)。与模型组比较,两个给药组E%、AI、IL-1β、TNF-α、Atg12 mRNA、PI3K、AKT、m Tor蛋白表达降低(P0.01,P0.05),IL-4、IL-10、LC3-Ⅱ、Beclin1蛋白表达升高(P0.01,P0.05);西药组Atg5降低(P0.01),Atg7 mRNA升高(P0.05)。与西药组比较,中药组体重、IL-4、Atg5 mRNA、Atg12 mRNA、PI3K、m Tor蛋白表达升高(P0.01,P0.05)。结论AA大鼠滑膜细胞自噬水平下降,导致滑膜细胞的过度增生,引起关节肿胀,致炎因子上升,抑炎因子下降,引起关节的炎症反应。中药新风胶囊可以改善关节炎指数、足趾肿胀度,改善滑膜自噬相关基因及蛋白表达。     

豨莶醇对佐剂性关节炎大鼠血清细胞因子及滑膜细胞凋亡蛋白的影响

目的探讨豨醇(奇任醇)对佐剂性关节炎(AA)大鼠血清细胞因子白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)及滑膜细胞Bcl-2、Fas-L蛋白表达的影响。方法采用弗氏完全佐剂建立SD大鼠AA模型,分别给予奇任醇、氢化可的松、阿司匹林 环磷酰胺治疗;ILISA法测定实验大鼠血清IL-1β、TNF-α、IL-6水平;踝关节滑膜细胞进行Bcl-2、Fas-L免疫组化染色,运用计算机图像分析系统对染色结果进行分析。结果与正常组相比,模型组大鼠血清IL-1β、TNF-α、IL-6水平显著升高(P<0.01),滑膜细胞Bcl-2蛋白表达显著升高(P<0.05),Fas-L表达显著降低(P<0.05);与模型组比较,奇任醇组大鼠血清IL-1β、TNF-α、IL-6水平显著降低(P<0.01、0.05);滑膜细胞Bcl-2蛋白表达显著下调(P<0.05),Fas-L蛋白水平显著升高(P<0.05)。结论奇任醇可降低AA大鼠血清细胞因子IL-1β、TNF-α、IL-6水平,下调滑膜细胞Bcl-2蛋白表达、促进Fas-L蛋白表达。     

基于Notch2/TGF-β1通路探讨针刀疗法对颈椎病兔颈后肌纤维化的影响

目的 基于Notch2/TGF-β1信号通路观察针刀疗法对颈型颈椎病家兔颈后肌纤维化的影响，探讨针刀治疗颈型颈椎病的分子机制。方法 12只新西兰兔适应性喂养1周，采用随机数字表法分为空白组、模型组和针刀组，每组4只。空白组予正常饲养，不做任何造模和干预；针刀组和模型组采用长期低头位法建立兔颈型颈椎病动物模型。模型建立后模型组不进行干预，针刀组基于弓弦网眼理论应用针刀松解颈后肌，每周1次，共干预4次。超声多模态评估3组家兔颈后肌形态学和弹力变化；HE和Masson染色观察颈后肌组织病理变化；qPCR检测颈后肌组织神经源性位点缺口同源蛋白2(Notch2)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、Ⅰ型胶原蛋白（Collagen I）mRNA表达水平；Western blot法检测颈后肌组织Notch2、TGF-β1、α-SMA、CollagenⅠ蛋白表达量。结果 超声结果显示，模型组颈后肌超声声像肌纤维排列紊乱，肌束膜、肌外膜轮廓模糊，弹性成像为高弹性图；针刀组颈后肌超声声像为肌纤维排列、肌束膜和肌外膜轮廓趋于正常，弹性成像为中弹性图。HE和Masson染色结...     

苓桂术甘汤对慢性心衰模型大鼠心肌组织TNF-α及血清NF-κB和IL-1β的影响

目的 观察苓桂术甘汤对慢性心力衰竭模型大鼠心肌组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)蛋白及mRNA表达、血清核因子-κB (NF-κB)、白细胞介素-1β(IL-1β)水平的影响,探讨苓桂术甘汤防治慢性心衰的作用机制.方法 采用冠状动脉结扎法制备慢性心衰大鼠模型,造模4周后将模型大鼠随机分为模型组,卡托普利(4.375 mg/kg)阳性对照组,苓桂术甘汤低、中、高剂量(生药2.1、4.2、8.4 g/kg)组,另设假手术组,每天给药1次,连续给药4周.Westem blotting、RT-PCR法分别检测各组大鼠心肌组织TNF-α蛋白及mRNA的表达,ELISA法检测血清中NF-κB、IL-1β水平.结果 与假手术组相比,模型组大鼠心肌组织TNF-α蛋白及mRNA表达增强,血清NF-κB、IL-1β水平显著升高(P＜0.01);与模型组相比,苓桂术甘汤及卡托普利均能显著抑制模型大鼠心肌组织TNF-α蛋白及mRNA表达、降低模型大鼠血清NF-κB、IL-1β水平(P＜0.05、0.01).结论 苓桂术甘汤干预慢性心衰的机制与其调节细胞因子网络有关.     

紫苏子汤对哮喘小鼠TNF-α、白细胞介素-8、白介素-1β表达的影响

目的:探究紫苏子汤对哮喘小鼠肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-8(IL-8)、白介素-1β(IL-1β)表达的影响。方法:取60例Wistar小鼠,随机分为实验组和空白模型组,建立哮喘小鼠模型。实验组小鼠给予紫苏子汤,空白模型组小鼠给予生理盐水。使用Western blot法检测TNF-α蛋白、IL-8蛋白、IL-1β蛋白表达,使用RT-PCR法检测TNF-αmRNA、IL-8mRNA、IL-1βmRNA表达,使用全自动血液细胞分析仪检测中性粒细胞(Neutrophil)、淋巴细胞(Lymphocyte)、嗜酸性粒细胞(Eosinophil)计数,使用肺功能检测仪检测一秒用力呼气容积(FEV1)、25-75%间强迫肺活量时用力呼气量(FEF25-75)、呼气流量峰值(PEF)值。结果:实验组小鼠TNF-α蛋白、IL-8蛋白、IL-1β蛋白表达水平均显著低于空白模型组小鼠(P<0.05);实验组小鼠TNF-αmRNA、IL-8mRNA、IL-1βmRNA表达水平均显著低于空白模型组小鼠(P<0.05);实验组小鼠中性粒细胞数显著高于空白模型组小鼠(P<0.05),实验组小鼠淋巴细胞数及嗜酸性粒细胞数明显低于空白模型组小鼠(P<0.05);实验组小鼠FEV1、FEF25-75、PEF均明显高于空白模型组小鼠(P<0.05)。结论:紫苏子汤可以有效降低哮喘小鼠TNF-α、IL-8、IL-1β水平,升高哮喘小鼠中性粒细胞数,降低哮喘小鼠淋巴细胞数及嗜酸性粒细胞数,修复哮喘小鼠受损肺功能。     

通督活血汤对椎动脉型颈椎病模型兔IL-1β、TNF-α的影响

目的观察通督活血汤对椎动脉型颈椎病(cervical spondylosis of vertebal artery type,CSA)模型兔的白介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的影响,探讨其治疗CSA的作用机制。方法采用氢化可的松肌肉注射和硬化剂局部注射联合法建立复合型肾督虚瘀CSA模型兔,并设立正常对照组、模型组、塞来昔布组、颈复康组、通督活血汤高剂量组、通督活血汤中剂量、通督活血汤低剂量组,共7组,连续给药4周。酶联免疫吸附法(ELISA)测定模型兔血清IL-1β和TNF-α的含量;免疫组化法检测模型兔椎间盘组织IL-1β、TNF-α的表达水平。结果模型组血清IL-1β和TNF-α的含量显著高于正常组(P0.05),通督活血汤高、中、低剂量组血清IL-1β和TNF-α含量均低于模型对照组,其中高、中剂量组与模型组比较有显著差异(P0.05)。免疫组化结果显示,模型组椎间盘组织中IL-1β、TNF-α阳性表达较正常组明显升高(P0.05),通督活血汤各剂量组阳性表达均低于模型组,其中高、中剂量组与模型组比较有显著差异(P0.05)。结论通督活血汤可明显减少CSA模型兔血清中IL-1β和TNF-α的含量,降低椎间盘组织中的表达,可能是其治疗CSA的作用机制。     

针刀干预对颈椎病兔软骨终板整合素β1-FAK力学信号通路的影响

目的观察针刀干预对颈椎病兔软骨终板整合素β1-FAK力学信号通路相关因子整合素β1、磷酸化黏着斑激酶(p-FAK)mRNA和蛋白表达的影响,探讨针刀在延缓椎间盘退变恢复颈椎力学平衡过程中的可能作用机制。方法将40只新西兰雄性兔随机分为空白组、模型组、电针组及针刀组,每组10只,空白组不做干预处理,其余建立颈椎病动物模型,持续12周。造模成功后电针组于兔颈肌两侧"天柱""颈百劳""大杼"穴处行毫针干预,隔天治疗1次,每周3次,共3周;针刀组于兔颈肌硬结、条索以及棘突等处行针刀干预,每周1次,共3次。干预结束后1周,采用实时荧光定量PCR法检测椎间盘软骨终板整合素β1、p-FAK的mRNA表达水平,采用Western Blot技术检测椎间盘软骨终板整合素β1、p-FAK的蛋白含量。结果与空白组相比,模型组软骨终板整合素β1 mRNA和蛋白表达水平均明显降低(P<0.01),软骨终板p-FAK蛋白表达水平升高(P<0.05)。与模型组相比,电针组软骨终板整合素β1、p-FAK蛋白表达水平均升高(P<0.05)。针刀组软骨终板整合素β1、p-FAK mRNA和蛋白表达水平均明显升高(P<0.01)。与电针组相比,针刀组软骨终板p-FAK mRNA和蛋白表达水平升高(P<0.05)。结论针刀干预可调节软骨终板整合素β1、p-FAK mRNA和蛋白表达,这可能是针刀减缓椎间盘退变,重建颈椎力学平衡,治疗颈椎病的作用机制之一。     

痛风定胶囊对实验性骨膜组织IL-8和TNF-α影响的研究

目的:观察中汇痛风定胶囊对急性痛风性膝关节炎家兔模型滑膜组织中白细胞介素8(IL-8)和肿瘤坏死因子(TNF-α)表达的影响.方法:按照McCartyDJ[2]造模方法建立急性痛风性膝关节炎家兔模型,进模2 h后取滑膜组织,应用ELISA法测定IL-8和TNF-α含量.结果:①模型组IL-8和TNF-α的水平明显高于正常组(P＜0.01);②痛风定胶囊能够显著抑制急性痛风性膝关节炎家兔模型滑膜组织IL-8和TNF-α的表达,对急性痛风性关节炎具良好的治疗作用.