兔中性粒细胞防御素对HL—60细胞毒性及对病毒的直接灭活作用

本研究从新西兰家兔腹腔渗出中性粒细胞溶酶体内提取酸溶性组分，经制备性ＡＵ－ＰＡＧＥ获得纯化的防御素（ＮＰ１和ＮＰ２），ＳＤＳ－ＰＡＧＥ测定分子量为３ｋｄ左右。以ＨＬ－６０细胞作靶细胞，当ＮＰ１或ＮＰ２在１００μｇ／ｍｌ浓度时，可杀死６０％以上的ＨＬ－６０细胞。ＮＰ１（２６０μｇ／ｍｌ）还可直接灭活单纯疱疹病毒Ｉ型和乙型流感病毒，分别使病毒感染滴度降度９８．２％和９０％。本研究结果提示，中性粒细胞可     

烧伤早期中性粒细胞对内皮单层通透性影响及CD11／CD18的作用

目的和方法：本实验应用体外灌注内皮细胞（ＥＣ）单层通透性测定方法观察了烧伤早期中性粒细胞（ＰＭＮ）对ＥＣ形态及通透性的影响。结果：烧伤早期ＰＭＮ可使ＥＣ变形，细胞收缩，细胞间间隙增大，ＥＣ单层通透性增大，应用ＣＤ１１ａ／ＣＤ１８单抗和ＣＤ１１ｂ／ＣＤ１８单抗阻断ＰＭＮ与ＥＣ粘附后，可明显减轻ＰＭＮ对ＥＣ的损伤和通透性的增高。结论：烧伤早期ＰＭＮ可引起ＥＣ损伤，ＣＤ１１／ＣＤ１８参与了此损伤     

PMA对人外周血T细胞和CD4^＋细胞表型影响的研究

本研究采用双色免疫荧光染色技术，用流式细胞计观察了经Ｅ花环法分离的正常人外周血Ｔ细胞和经补体介导的细胞毒方法用ＯＫＴ８单克隆抗体分离的人外周血ＣＤ４＾＋细胞在佛波酯活化早期细胞表型的变化情况，我们已研究了ＰＭＡ对人儿胸腺细胞表型变化的影响，发现ＰＭＡ可明显下调胸腺ＤＰ亚群ＣＤ４，ＣＤ８和ＣＤ３分子表达，但能明显促进ＣＥ２５和ＨＬＡ－Ｉ类抗原表达，本文旨在通过研究ＰＭＡ对人外周血Ｔ细胞和ＣＤ４＾＋亚     

胃癌患者外周血CD4^＋ CD25^high Foxp3^＋调节性T细胞的检测及临床意义

目的:研究CD4+CD25highFoxp3+调节性T细胞(Treg)在胃癌患者外周血单个核细胞(PBMC)的比例变化,探讨其在抗肿瘤免疫调节中的作用及临床意义.方法:采用流式细胞术检测37例胃癌患者治疗前后PBMC中CD4+CD25+/CD4+、CD4+CD25high/CD4+T细胞比例,以及 CD4+CD25+及CD4+CD25highT细胞中Foxp3+T细胞的比例,并与30例正常人对照组的上述指标进行比较.结果:胃癌患者治疗前PBMC中CD4+CD25+/CD4+、CD4+CD25high/CD4+T细胞比例以及CD4+CD25+及CD4+CD25highT细胞中Foxp3阳性表达细胞的水平较正常人对照组明显增高(P＜0.05),治疗后上述指标较治疗前明显减低(P＜0.05), 虽仍高于正常对照组,但差异无显著性(P＞0.05).结论:胃癌患者外周血调节性T细胞比例增高,可能是其免疫功能异常的主要原因之一.     

艾滋病患者外周血CD127^＋T细胞的检测

目的探讨艾滋病患者外周血CD8^＋CD127^＋T细胞的变化情况。方法选择艾滋病患者58例和正常人18例，采用流式细胞分析方法检测CD127在CD8阳性细胞上的表达情况。结果在艾滋病患者外周血中，CD4^＋细胞比例（7．98％）明显低于正常人（53．5％），CD8^＋细胞比例（86．22％）明显高于正常人（36．02％），CD4／CD8比值（0．10）明显低于正常人（1．52），CD127^＋CD8^＋CD3^＋细胞比例（20．53％）明显低于正常人（67．85％）。结论CDl27在CD8阳性T细胞上表达的减少可能是导致艾滋病患者免疫功能缺陷的原因之一。     

宫颈癌患者外周血CD2^＋细胞表达的检测及意义

目的：探讨宫颈癌患者外周血CD2^＋细胞表达水平及临床意义。方法：应用流式细胞术检测40例宫颈癌患者及30例宫颈上皮内瘤变（cervical intra-epithelial neoplasia,CIN）患者外周血CD2^＋细胞百分率,以30例子宫肌瘤患者作为正常对照。结果：宫颈癌患者外周血CD2^＋细胞百分率水平明显低于CIN组及正常对照组,差异均具有统计学意义（P〈0.05）。结论：CD2^＋的表达与宫颈癌的发生、发展有关,可作为宫颈癌患者治疗及评价预后的参考指标。     

尼古丁对中性粒细胞活化及细胞间粘附分子基因表达的影响

目的:观察尼古丁对中性粒细胞(PMNs)的活化,PMNs与内皮细胞的粘附及内皮细胞表达ICAM-1mRNA,有助于阐明尼古丁在慢性阻塞性肺疾患(COPD)炎症发病中的作用。方法:测定β-葡萄糖醛酸苷酶及溶菌酶活性,以反映PMNs的活化;培养人脐静脉内皮细胞,观察PMNs与内皮细胞的粘附;制备探针,提取总RNA,Northern杂交测细胞间粘附分子-1(ICAM-1)mRNA。结果:尼古丁可活化PMNs,增加PMNs－内皮细胞粘附;增强ICAM-1mRNA表达,764-3可明显抑制尼古丁的上述作用。结论:尼古丁通过活化PMNs,促进PMNs－内皮细胞粘附,在COPD慢性炎症发病中起重要作用。而这种粘附作用的增加与粘附分子表达增强有关;抑制尼古丁的上述作用可能是764-3抗炎作用的部分机理。     

早期作用造血因子对人脐血CD34^＋细胞的体外扩增作用

为了观察早期作用造血细胞因子ＳＣＦ、ＦＬ、ＩＬ－３、ＩＬ－６、ＴＰＯ单独及联合应用,对脐血ＣＤ３４＋细胞的体外扩增作用。我们用吸附单克隆抗体一磁珠分离系统富集人脐血ＣＤ３４＋细胞,在体外液体培养体系中加入不同的细胞因子扩增４周,每周取样计数有核细胞总数及集落形成细胞（ＣＦＣ）数。结果表明：用磁性细胞分离议富集脐血ＣＤ３４＋细胞纯度为８０％～８７％;一些细胞因子有明显的协同效应,其联合应用的扩增作用显著高于单因于作用：ＳＣＦ＋ＦＬ存在下,ＩＬ－３是有效扩增有核细胞总数及ＣＦＣ的关键因子了;细胞因子ＳＣＦ＋ＦＬ＋ＩＬ－３和ＳＣＦ＋ＦＬ＋ＩＬ－３＋ＩＬ－６组合对有核细胞总数及ＣＦＣ均有良好的扩增效应,培养２周时对ＣＦＣ的扩增倍数分别为３８．３±４．４和２９．６±２．７倍,可满足成人移植及基因治疗等的需要。     

CD4^＋CD25^＋调节性T细胞在α-GalCer预防T1D中的作用机制探讨

目的：研究CD4^＋CD25^＋调节性T细胞在α-GalCer预防NOD小鼠T1D中的作用机制。方法：流式细胞仪分析反复注射α-GalCer的NOD小鼠胰腺引流淋巴结（PLN）CD4^＋CD25^＋T细胞频率,CD4＋CD25＋T细胞中FoxP3＋细胞的比例,CD4＋CD25＋FoxP3^＋T细胞的FoxP3平均荧光强度（MFI）;检测CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的抑制功能。用Anti-CD25阻断CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的功能。结果：α-GalCer处理过的小鼠的CD4^＋CD25^＋T细胞中FoxP3^＋细胞的比例增加,CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋T细胞的FoxP3平均荧光强度（MFI）增强,CD4^＋CD25^＋Treg细胞的抑制功能增强。采用CD4^＋CD25^＋调节性T细胞功能阻断剂后,α-GalCer不能预防T1D的发生。结论：CD4^＋CD25^＋调节性T细胞在α-GalCer预防NOD小鼠T1D中数量增加、功能增强,且是必需的。     

尖锐湿疣患者皮损及外周血CD4^＋和CD8^＋细胞免疫功能的检测

目的通过对尖锐湿疣（CA）患者皮损及外周血CD4^＋和CD8^＋细胞免疫功能检测的分析,探讨尖锐湿疣患者细胞免疫功能的变化及其对CA的影响。方法通过流式细胞仪（FCM）对40例CA患者及20名正常人外周血进行反映细胞免疫功能的T淋巴细胞亚群的检测,实验采用免疫组化的方法对40例CA皮损样本中CD4^＋和CD8^＋细胞的数目进行检测。结果CA患者外周血及皮损较正常对照组中的CD8^＋细胞百分率增加．CD4^＋细胞百分率及CD4^＋／CD8^＋比值降低。结论CA患者存在全身和局部的细胞免疫功能低下,而且局部皮损细胞免疫功能低下可能在CA的发病中具有重要作用。     

乙型肝炎病毒感染者外周血CD4＋T细胞CD25-CD127-表达的检测及临床意义

目的 检测乙型肝炎病毒（ HBV）感染者外周血CD4＋T细胞表面CD25 - CD127 -的表达情况及临床意义.方法 用流式细胞术比较分析53例慢性乙肝患者、53例HBV携带者和26例正常对照人群CD4＋T细胞表面CD25 - CD127 -的表达情况,并对20例用干扰素治疗的HBV-DNA阳性慢性乙肝患者随访.结果 ①与正常对照组比较,慢性乙肝患者、HBV携带者CD4＋ CD25 -CD127 -T细胞均显著升高,两者比较有统计学差异（Q =4.559,P＜0.05;Q=6.230,P＜0.05）;②HBV- DNA阳性患者（n=77） CD4＋ CD25 - CD127 -T细胞显著低于HBV- DNA阴性患者（n=29）,两者比较有统计学意义（t =2.290,P=0.024）;③与治疗前比,慢性乙肝患者干扰素治疗12周后CD4＋CD25- CD127 -T细胞显著降低,两者比较差异有统计学意义（t =2.469,P=0.024）.结论 乙型肝炎病毒感染者外周血CD4＋ CD25 - CD127 -T细胞与病毒的感染和清除相关,外源性干扰素可降低CD4＋ CD25 - CD127 -T细胞.     

肝癌患者射频消融与手术前后外周血中CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的变化及意义

目的：探讨肝癌患者接受射频消融或手术治疗前后外周血中CD4^＋、CD25^＋调节性T细胞水平的变化及意义。方法：分析35例原发性肝细胞肝癌患者射频消融治疗前和治疗后1周外周血中CD4^＋、CD25^＋调节性T细胞水平变化,并与20例原发性肝细胞肝癌手术切除患者外周血中CD4^＋、CD25^＋调节性T细胞水平进行对比分析。另外检测10例因患胆囊结石行胆囊切除患者手术前后的CD4^＋、CD25^＋调节性T细胞水平作为对照。结果：所有肝癌患者在射频消融治疗后7d外周血中CD4^＋、CD25^＋调节性T细胞水平降低,而手术组明显升高,对照组无明显变化。结论：采用射频消融治疗肝癌,可以改善患者的细胞免疫状态。     

肾小球肾炎患者外周血CD45^-CD146^＋细胞的检测及意义

目的探讨肾小球肾炎患者外周血CD45-CD146 细胞的变化及意义。方法用流式细胞术检测25例肾小球肾炎患者和20例正常人群外周血细胞CD45-CD146 细胞数量。结果与正常对照组(2.07±0.86)个/μl比较,肾小球肾炎患者CD45-CD146 细胞数量(12.25±13.11)个/μl显著升高(t=3.459,P<0.05);②肾小球肾炎患者外周血CD45-CD146 细胞数量与中性粒细胞比例(P=0.00265,r=0.613)、BUN(P=0.00302,r=0.609)、Cr(P=0.00683,r=0.571)均呈正相关。结论CD45-CD146 细胞数量与肾小球肾炎的发生、严重程度密切相关。     

TNFα、IL-1β及IL-6对心脏微血管内皮细胞与中性粒细胞粘附的影响

目的和方法：应用心脏微血管内皮细胞体外培养模型，研究不同浓度的ＴＮＦα、ＩＬ－１β、ＩＬ－６对微血管内皮与中性粒细胞粘附的调节。结果：５×１０４Ｕ／Ｌ的ＴＮＦα和ＩＬ－１β可明显增加内皮细胞与中性粒细胞的粘附（诱导内皮６ｈ），并分别于１０５Ｕ／Ｌ、２×１０５Ｕ／Ｌ浓度时使中性粒细胞粘附数达高峰，但不同浓度的ＩＬ－６均未使粘附增加，免疫组化ＡＢＣ法证实了同样的结果。进一步用抗ＩＣＡＭ－１和抗ＬＦＡ－１单克隆抗体阻断实验表明，两种抗体在５ｍｇ／Ｌ浓度下可显著阻断中性粒细胞与内皮细胞间的粘附。结论：心脏微血管内皮细胞与中性粒细胞的粘附主要通过粘附分子ＩＣＡＭ－１／ＬＦＡ－１介导。     

吸烟对多形核白细胞的丙二醛含量及超氧化物歧化酶活性的影响

比较了非吸烟,吸烟,吸烟并慢阻肺者动脉血多形核白细胞的脂质过氧化产物—丙二醛(MDA)含量以及细胞和血清的抗氧化酶—超氧化物歧化酶(SOD)的活性。结果表明:吸烟和吸烟并慢阻肺者多形核白细胞的MDA以及SOD活性高于非吸烟者(P<0.01,P<0.05)。血清SOD则吸烟者低于不吸烟者(P<0.01)。MDA含量与SOD活性间的相关分析提示:吸烟者多形核白细胞的SOD处于相对不足,血清SOD绝对不足,练上所述:长期吸烟可使血中氧化和抗氧化失去平衡。     

胎盘转移因子对荷瘤小鼠脾脏IL－2诱生水平和外周血TNF活性的调节作用

应用ＣＴＬＬ２细胞短期培养３Ｈ－ＴｄＲ掺入法和Ｌ９２９细胞结晶紫染色法，观察ＮＩＨ小鼠接种Ｓ１８０实体瘤细胞前后，分别注射ＨＰ－ＴＦ０．５ｍｌ／鼠连续２０天，其脾细胞ＩＬ－２诱生水平和外周血ＴＮＦ活性的变化。结果显示，预防组和治疗组小鼠脾细胞ＩＬ－２诱生水平（ｃｐｍ值）分别为２１２８．７２±１６４．４２、３２９５．９６±２３０．７１，较荷瘤对照组（１２６０．４３±１４５．５７）明显提高（Ｐ＜０．００１）；而外周血ＴＮＦ活性（％）分别为４５．００±５．１８．５２．２９±５．２１，与荷瘤对照组（２５．８３±５．５２）比较有非常显著性差异（ｐ＜０．００１）。两组的抑瘤率分别为６８．８８％和６５．８２％。提示ＨＰ－ＴＦ能显著提高荷瘤小鼠脾细胞ＩＬ－２诱生水平和外周血ＴＮＦ活性，且能明显抑制Ｓ１８０实体瘤细胞在小鼠体内的生长。木研究结果有助于对ＨＰ－ＴＦ提高荷瘤机体细胞免疫功能的机理的探讨，并为临床应用ＨＰ－ＴＦ治疗肿瘤患者提供了实验依据。     

过继转输TSA诱导的CD4^＋CD25^＋调节性T细胞对不明原因复发性流产的治疗作用

目的观察过继转输TSA诱导的CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（CD4＋CD25＋Treg）对不明原因流产的作用机制及妊娠预后的影响。方法以雌性CBA/J×雄性BALB/c为正常妊娠模型,以雌性CBA/J×雄性DBA/2J为自然流产模型,使用免疫磁珠方法分选雌性CBA/J小鼠脾脏CD4^＋CD25^＋Treg细胞,并使用流式细胞术检测分选纯度。采用TSA对流产孕鼠外周CD4^＋/CD25^-T细胞Foxp3基因特定位点进行表观修饰,以实现Foxp3稳定、持久的表达,并将CD4^＋Treg分别转输至流产模型孕4d（着床期）的雌性CBA/J孕鼠,于孕14d分别观察宿主孕鼠的胚胎吸收率。结果与对照组比较,过继转输TSA诱导的CD4^＋CD25^＋Treg细胞的宿主孕鼠的胚胎吸收率（11.27%）显著下降。结论孕早期过继转输TSA诱导的CD4^＋CD25^＋Treg细胞疗法能诱导宿主母胎免疫耐受,有利于妊娠的维持。     

肾移植患者手术前后外周血CD4＋T淋巴细胞IL-18Rα的表达及意义

目的：探讨外周血CD4^＋T淋巴细胞IL-18Rα表达在肾移植急性排斥反应中的作用及临床意义。方法：采用分别检测肾移植患者手术前、手术后1w及2w外周血CD4^＋T淋巴细胞IL-18Rα表达量，并进行比较分析。结果：肾移植患者手术前外周血CD4^＋T淋巴细胞IL-18Rα表达量明显高于正常对照组（P〈0．01）。急性排斥组手术后1w、2w与手术前比较外周血CD4^＋T淋巴细胞IL-18Rα表达量明显增加（P〈0．01）。稳定组手术后1w与手术前比较外周血CD4^＋T淋巴细胞IL-18Rα表达量明显增加（P〈0．01），手术后2w则下降至手术前水平（P〉0．05）。结论：肾移植患者手术前、手术后存在Th1／Th2失衡，表现为Th1优势应答。肾移植手术前后监测外周血CD4^＋T淋巴细胞IL-18Rα表达量变化对于判断急性排斥反应有一定临床意义。