脑缺血大鼠脑血流量和微血管形态的定量分析

用生物微球法和图象分析法分别测量了大鼠脑缺血三小时和重灌流30分钟的脑血流量和脑微血管某些形态学参数。实验结果表明,重灌流后脑血流量只恢复到缺血前的80%,脑微血管壁增厚、管腔面积缩小。提示缺血后重灌流时脑微血管的这些变化是脑血流量不能完全恢复的一个原因。     

颈动脉引流复制大鼠脑缺血再灌流模型

缺血性脑血管病的实验研究越来越受到临床及有关基础医学工作者的重视，而一个理想的动物模型是实验研究能否取得顺利进展的决定性因素之一。文献上有多种脑缺血实验模型，各有其特点和局限性。目前，应用较多的是电凝双侧椎动脉，同时夹闭双侧颈总动脉法［１］，操作复杂...     

大鼠脑缺血再灌流时即早基因c-fos在脑组织表达的免疫组织化学研究

为了研究 c-fos在大鼠缺血性脑损伤中的作用 ,本研究利用阻塞大鼠大脑中动脉 2 h后再灌流 0 .5～ 48h制成的局灶性脑缺血模型 ,用免疫组织化学技术观察了 c-fos的表达特点。结果证明 ,正常组、假性手术组 c-fos在神经元的表达呈阴性或弱阳性 ;再灌流 0 .5～ 48h组 ,胞核呈强阳性 ( +++)的神经元主要位于非大脑中动脉供血区 ,而缺血中心区的皮质、纹状体和视前区呈阴性 ( -)。缺血周边区 ,神经元胞核呈弱阳性 ( +)。正常组未发现 c-fos阳性的胶质细胞 ,假性手术组脑实质内胶质细胞团和侧脑室壁的胶质细胞 c-fos呈强阳性 ,再灌流 3h组脑室壁及深层的室管膜下区和皮质浅层、髓质等处胶质细胞为阳性 ,再灌流2 4～ 48h组缺血周边区和脑实质内的巨噬细胞、活化小胶质细胞呈强阳性 ;再灌流 48h组 ,白质如胼胝体内大量的反应性星形胶质细胞呈强阳性。本文结果提示 ,脑缺血时 c-fos对神经元具有神经保护作用 ,并且这种保护作用可能与小胶质细胞和星形胶质细胞的活化有关     

不同时程脑缺血再灌流大鼠行为及海马形态学变化的比较

采用四血管阻塞全脑缺血模型,分析比较了大鼠5分钟、10分钟、20分钟三种缺血时程相同再灌流期动物的行为学表现及海马锥体细胞形态学变化.结果显示:5分钟脑缺血所造成的海马CAI迟发性神经元死亡(DND)不完全;20分钟脑缺血可导致较高的致抽搐率,因此,认为该模型的脑缺血时间以控制在10分钟左右为宜.本文还详细观察了脑缺血致抽搐发作与DNA的关系,发现抽搐发生与DND的出现在时间上是密切相关的,认为两者是脑缺血再灌流同一病理机制的不同表现.     

高压氧对脑缺血动物脑微循环及脑皮质血流量的影响

高压氧对脑缺血动物脑微循环及脑皮质血流量的影响１蔺世龙２刘景昌２冶建宏２近年来，国内外学者在缺血性脑损伤的研究方面进行了不少探讨，其中临床使用高压氧治疗缺血性脑损伤已经取得明显疗效［１］，同时对缺血性脑损伤机理的研究亦取得了有意义的结果［１～６］。本...     

脑缺血再灌流过程中沙土鼠脑组织和血浆SOD、MDA含量的变

复制沙土鼠实验性脑缺血再灌流模型,测定了在缺血及再灌流不同阶段血清及脑组织中超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）的活性和脂质过氧化反应最终产物（ＭＤＡ）的含量变化,结果发现单纯缺血组与再灌流各组脑组织ＭＤＡ的含量均高于正常对照组,且再灌流１ｈ、６ｈ组的ＭＤＡ含量明显高于单纯缺血组（Ｐ＜０．０５）,并有随再灌时间延长不断升高的趋势,但三个再灌流组之间比较无明显差异。单纯缺血组与再灌流各组比较脑组织ＳＯＤ的活性均较正常对照组降低,以再灌１ｈ、６ｈ最为明显,与单纯缺血组比较Ｐ＜０．０５。实验各组与正常对照组比较血浆ＳＯＤ的活性无显著差异。表明单纯缺血和再灌流后均发生了脂质过氧化反应,并认为自由基引起的损伤,在缺血后再灌流中比单纯缺血更为严重。     

活脉通络饮对大鼠脑缺血再灌注脑组织caspase-3表达的影响

目的观察活脉通络饮对脑缺血再灌注大鼠脑组织Caspase-3表达的影响,探讨活脉通络饮对脑组织保护作用的机制。方法 Wistar大鼠随机分为正常对照组、缺血再灌注组、活脉通络饮低剂量组、活脉通络饮中剂量组、活脉通络饮高剂量组和尼莫地平阳性对照组。采用改良的线栓法,建立大鼠大脑中动脉栓塞(MCAO)脑缺血再灌注模型。采用HE染色观察大鼠脑组织形态改变,免疫组织化学法和Western Blot定性和定量法检测脑组织中Caspase-3的表达。结果缺血再灌注组大鼠脑组织Caspase-3的表达水平较正常对照组明显增加(<0.01),活脉通络饮组与缺血再灌注组比较Caspase-3蛋白表达明显减少(<0.01),而与尼莫地平阳性对照组相比没有明显差异。结论活脉通络饮的脑保护作用的机制之一可能与其下调Caspase-3表达相关。PP     

大鼠脑缺血-再灌注损伤时脑组织谷氨酸转运体功能变化及地塞米松的影响

目的：探讨大鼠脑缺血-再灌注损伤时脑组织谷氨酸转运体功能及超氧化物歧化酶（SOD）活性、脂质过氧化物丙二醛（MDA）含量变化及地塞米松对其的影响。方法：采用大鼠三血管夹闭、松夹制作大鼠完全性脑缺血-再灌注损伤的模型。测定假手术对照组、脑缺血-再灌注损伤（l-R）组和I－R 地塞米松组的皮层、海马、纹状体的谷氨酸转运体功能及SOD活性、MDA含量的变化。结果：脑缺血-再灌注损伤时3个部位的谷氨酸转运体的功能均明显降低（P＜0.05．P＜0．01）、SOD活性显著降低（P＜0．05,P＜0．01）,MDA含量明显升高（P＜0．05,P＜0.01）,1－R 地塞米松组的3部位谷氨酸转运体功能与I-R组相比有明显恢复（P＜0.05,P＜0．01）,与对照组已无明显差异（P＞0.05）SOD活性回升（P＜0.05,P＜0．01）、MDA含量回降（P均＜0.05）。结论：大鼠脑缺血-再灌注损伤时脑组织三部位的谷氨酸转运体功能降低,且可能与自由基效应有关;而地塞米松则可能通过抗自由基效应使谷氨酸转运体功能恢复而发挥其抗损伤作用。     

沙土鼠缺血再灌流中脑组织血流量和NO的变化

目的探讨沙土鼠缺血再灌流中脑组织血流量和NO的变化。方法蒙古沙土鼠 ,夹闭双侧颈总动脉造成单纯脑缺血模型 ,再灌流后30min～6h ,激光血流量计测定脑组织血流量及血中的NO。结果阻断沙土鼠双侧颈总动脉后 ,脑组织血流量严重减少 ,为正常的11.98 %。再灌后30min～6h软脑膜血流量为正常的62.0 % ,没有恢复到正常水平。缺血后15～30min脑组织中的NO含量明显下降 ,再灌后30min脑组织NO开始回升 ,再灌1～6hNO的含量回到缺血前的水平。血浆中NO含量在缺血后15min明显升高 ,再灌后30min血浆中NO含量明显上升 ,持续到再灌后6h。结论沙土鼠结扎颈总动脉阻断脑的血液供应后脑组织严重缺血 ,内皮产生NO的不足 ,再灌1～6h脑组织、血浆中NO的含量回到缺血前的水平     

活血及补气中药对脑缺血再灌注大鼠脑细胞凋亡的影响

目的:探讨活血药（水蛭）、补气药（人参）对脑缺血再灌注后的大鼠脑细胞凋亡的影响,并探讨二者是否具有协同作用。方法:将Wistar大鼠分为正常对照组、缺血对照组、活血组、补气组和补气活血组,用插线法制备大鼠大脑中动脉梗塞再灌注模型,用流式细胞仪检测缺血2h再灌注22h的脑细胞凋亡率。结果:正常对照组凋亡率很低（0.8％±1.02％）,缺血对照组的凋亡率显著增高（13.8％±1.41％）,活血组（10.2％±1.34％）.补气组（10.4％±1.02％）和补气活血组（9.40％±2.30％）的凋亡率均低于缺血对照组。补气活血组的凋亡率与活血组和补气组无显著差异。结论:活血药（水蛭）,补气药（人参）均能减轻脑缺血再灌注动物脑细胞的凋亡,补气活血复合制剂的协同作用不明显。     

中枢八肽胆囊收缩素对大鼠局部脑缺血/再灌注损伤的影响

目的:探讨八肽胆囊收缩素(CCK-8)对局部脑缺血/再灌注损伤的影响及其可能机制。方法:采用线栓法大鼠局部脑缺血再灌注模型,观察侧脑室(icv)注射CCK-8或其受体拮抗剂-丙谷胺对脑缺血1h再灌注24h大鼠脑梗死体积、局部脑血流量(rCBF)、不同脑区一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)含量的影响。结果:(1)脑缺血前给予不同剂量的CCK-8均可缩小脑梗死体积,但只有CCK-8剂量为1.0μg、2.0μg时这种差别才有显著性(均P＜0.05)。预先给予丙谷胺可完全拮抗CCK-8的作用;单纯给予丙谷胺可加重脑缺血损伤。(2)CCK-8可显著抑制脑缺血/再灌注损伤引起的梗死区、半暗区NO水平的升高;抑制梗死区MDA含量的增加(P＜0.05);再灌注24h时,CCK-8组rCBF显著高于正常值(P＜0.05)。结论:中枢内、外源性CCK-8均具有减轻局部脑缺血/再灌注损伤的作用,其机制可能和抑制脑缺血或再灌注时的自由基损伤及增加rCBF有关。     

等容血液稀释对大鼠局灶性脑缺血作用的研究

以血液稀释治疗血栓栓塞性脑缺血为目的,采用大脑皮层局部血流量(rCBF)、脑组织含水总量以及脂质过氧化物含量(LPO)为重要指标,共71只大鼠的实验研究,结果表明:大脑局灶性缺血24小时后经血液稀释治疗2小时,血细胞压积由49.4±3.5%降至39.3±3.77%,rCBF增加19.95%(n=16,P<0.005),脑组织含水量及LPO含量,对照组与稀释组分别为81.39±1.56%(n=12),79.00±1.08%(n=13,P<0.001);645.57±106.72nmol/100mgpro(n=11),360.47±117.46nmol/100mgpro,(n=14,P<0.001)。提出血液稀释可增加rCBF,减轻脑水肿,降低LPO。     

慢性局灶脑缺血区小胶质细胞/巨噬细胞呈持续性反应

目的:观察小胶质细胞/巨噬细胞对慢性局灶脑缺血的反应。方法:运用局灶脑缺血模型和免疫组织化学染色方法对36只成年雄性SD大鼠的大脑皮质缺血区和尾壳核区的ED1和OX42阳性细胞的反应时程、分布形式和细胞形态变化进行了探查。结果:在脑缺血3d,ED1阳性细胞呈圆形,大多数分布于大脑皮质缺血区周围和缺血侧的尾壳核,仅有少量ED1阳性细胞位于缺血区中央。阳性细胞明显多于对照组。脑缺血2周,ED1阳性细胞数量最多,主要分布于大脑皮质缺血区中央和尾壳核外侧部。脑缺血6周,其数量稍有下降,细胞形态无明显变化。脑缺血3d时,OX42阳性细胞呈"星状",胞体肥大,数量增加,分布于皮质缺血区的外周和尾壳核。缺血中央区的阳性细胞数量少。脑缺血2周,OX42阳性细胞胞体明显增大,分支增粗。在大脑皮质缺血区中央出现大量圆形的没有明显突起的OX42阳性细胞。此时,尾壳核外侧部的阳性细胞的数量和胞体明显增加。脑缺血6周,阳性细胞的数量稍有下降。结论:小胶质细胞/巨噬细胞对局灶脑缺血发生持续性的反应,此可能与迟发性神经元损伤和脑缺血区的自我修复有关。     

依达拉奉联合灯盏花素对脑缺血大鼠大脑皮质MCP-1的影响

目的　观察大鼠脑缺血（MCAO）后大脑皮质MCP-1的表达变化以及用依达拉奉联合灯盏花素干预后对MCP-1表达的影响。 方法　复制大鼠大脑中动脉闭塞（MCAO）模型,应用RT-PCR、Western blot和免疫荧光技术检测大鼠MCAO及药物干预后MCP-1的表达变化。 结果　RT-PCR显示大鼠MCAO后大脑皮质MCP-1 mRNA的表达比对照组显著上升（P<0.05）,12 h达高峰,与1 d、3 d及1周组比有显著差异（P<0.05）;给予两种药物联合处理后,mRNA表达显著降低,与对照组及单独用药组相比均有显著差异（P<0.05）。 Western blot显示MCAO 1 d、3 d、1周大脑皮质MCP-1蛋白的表达显著增强,与对照组比有显著差异（P<0.05）;两种药物联合处理后,MCAO大鼠大脑皮质MCP-1蛋白表达明显减少,与对照组及单独用药相比均有显著差异（P<0.05）。免疫荧光染色显示MCAO大鼠缺血半暗带有大量激活小胶质细胞,一部分与MCP-1免疫阳性细胞有共表达,其中MCAO后1周组最明显。 结论　大鼠局灶性脑缺血（MCAO）后,依达拉奉联合灯盏花素治疗能有效减少大脑皮质MCP-1的表达,效果优于两种药物单独使用。     

MK-801对大鼠局灶性脑缺血损伤时的脑保护作用

目的：在大脑中动脉闭塞后,血脑屏障通透性的改变,脑水肿和脑梗塞是最常见的病理变化。本实验观察了MK－801（dizocilpine,一种高效非竞争性NMDA受体拮抗剂）在大鼠大脑中动脉闭塞时的脑保护作用。方法：用插线法制作局灶性脑缺血模型后,测定血脑屏障通透性,脑含水量,缺血损伤面积和体积。结果：缺血组梗塞侧皮质EB含量为：（8．82±1．35）μgweiht,在缺血前30min加入MK－801组梗塞侧皮质伊文思蓝（EB）含量下降为：（5．14±1．20）μg／gweight（P＜0．01）,在缺血后30min加入MK－801组梗塞侧皮质EB含量下降为：（6．44±1．09）μg／gweight（P＜0.05）;缺血组梗塞侧脑含水量为：（80．29±2．44）％,在缺血前对30min加入MK－801组梗塞侧脑含水量下降为：（75．62±1．84）％（P＜0．01）,在缺血后30min加入MK-801组梗塞侧脑含水量下降为：（76．39±2．20）％（P＜0．01）;缺血组梗塞体积为：（495.75±55．91）mm3,在缺血前30min加入MK-801组梗塞体积下降为：（180．65±9．67）mm3（P＜0．01）,在缺血后则30min加入MK-801组梗塞体积下降为：（316.08±．93）mm3（P＜0．05）。结论：MK-801不仅可防止脑梗塞体积扩大,还可改善血脑屏障通透性和降低脑水肿,而具有脑保护作用。     

Uridine 5′-triphosphate (UTP) protects against cerebral ischemia reperfusion injury in rats

Aims: To test the hypothesis that uridine 5′-triphosphate (UTP) had a protective effect on cerebral ischemia reperfusion (IR) injury in rats. Methods: Ischemia was induced by intraluminal suture of middle cerebral artery occlusion (MCAO). UTP solution was delivered through an indwelling tail venous catheter via microinfusion pump 30 min after the occlusion of MCA at a rate of 0.5 ml/100 g/min. Neurological deficit score (NDS) and brain water content were determined 24 h after reperfusion. Infarct volume was determined by 2,3,5-triphenyl-tetrazolium chloride (TTC) staining and magnetic resonance imaging (MRI), and nerve cell death was studied under an electron microscope. Results: There was a dose-dependent relationship among 10, 30 and 90 μg/kg UTP. The 90 μg/kg UTP had the best protective effect among the 3 groups. We compared 90 μg/kg UTP group with normal saline group and found that UTP had a protective effect on cerebral IR by the results of TTC staining (15.9% vs 30.5%, P < 0.01). MRI at 6, 30 and 54 h after reperfusion showed smaller infarct volume in 90 μg/kg group compared with 0 μg/kg group (283.5, 352.1, 367.45 mm³ vs 401.36, 576.75 and 677.11 mm³, respectively), and electron microscope showed less nerve cell death in 90 μg/kg group compared with 0 μg/kg group. Conclusion: UTP has a dose-dependent protective effect on cerebral IR.     

局灶性脑缺血神经细胞DNA损伤与修复机制探讨

目的:观察脑缺血后半胱氨酸蛋白酶3(caspase-3)和脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶(APE/Ref-1)的表达, 探讨脑缺血损伤与修复机制。方法: 采用大鼠大脑中动脉阻塞脑缺血模型, 应用免疫组化染色观察caspase-3和APE/Ref-1的表达, 应用TUNEL染色观察神经细胞DNA损伤, 采用免疫双标染色观察APE/Ref-1与DNA损伤的关系。结果:Caspase-3的活性单位P₂₀蛋白主要在半暗带表达, 表达高峰时间早于DNA损伤最高峰的时间。随着缺血时间延长, 缺血周边区APE/Ref-1免疫阳性细胞数量逐渐减少。结论:脑缺血后半胱氨酸蛋白酶级联反应启动, 促使DNA破坏, 同时, DNA损伤的修复分子表达水平下降, DNA修复失败, 进一步加速了细胞凋亡。     

精胺对急性脑缺血再灌注损伤大鼠的保护作用

目的: 观察外源性精胺对急性脑缺血-再灌注损伤大鼠的作用,并初步探讨其可能机制。方法: 采用线栓法复制大鼠大脑中动脉缺血(2 h)-再灌注(2 h)模型。SD大鼠随机分为5组:假手术组、模型组和低、中、高剂量精胺组。检测指标有神经病学评分、脑梗死面积、皮层脑组织HE染色、电镜超微结构观察、超氧化物歧化酶活性(SOD)及丙二醛(MDA)含量。结果: 与模型组相比,不同浓度精胺均能降低大鼠急性脑缺血-再灌注后神经功能学评分、梗死面积、缺血脑组织MDA含量,减轻脑组织形态学和超微结构损伤,增加缺血区SOD活性。结论: 外源性精胺对大鼠局灶性急性脑缺血-再灌注损伤有保护作用,其机制可能与清除氧自由基有关。     

降钙素基因相关肽对脑缺血大鼠脑血流的影响

大鼠侧脑室注入降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ）或等体积甘露醇为对照，用非损伤阻抗法测定一侧颈总动脉结扎后ＣＧＲＰ对脑血流的影响。结果表明，一侧颈总动脉结扎后，脑血流量降低３４％，此时侧脑室给予ＣＧＲＰ即刻使脑血流图波幅增加，５分钟时达高峰，比注药前平均增加６５％，与甘露醇对照相比差别非常显著（Ｐ＜０．０１），４０分钟时作用开始减弱，１００分钟后作用消失。与颈总动脉结扎前相比，在脑血供不足时，ＣＧＲＰ增