API_(0134)对LDL诱导单核细胞表达PDGF-B、bFGF及平滑肌细胞增殖的抑制作用

目的和方法：应用免疫细胞化学方法，观察穿心莲成分ＡＰＩ０１３４对轻度氧化低密度脂蛋白（ｍｍＬＤＬ）诱导人血单核细胞表达血小板源生长因子Ｂ链蛋白（ＰＤＧＦ－Ｂ）和碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）的影响；并进行平滑肌细胞（ＳＭＣ）有丝分裂试验，观察ＡＰＩ０１３４作用后的单核细胞条件培养基（ＣＭ）对３Ｈ－ＴｄＲ掺入ＳＭＣＤＮＡ的影响。结果：ｍｍＬＤＬ可显著促进单核细胞表达ＰＤＧＦ－Ｂ和ｂＦＧＦ，ｍｍＬＤＬ作用后的ＣＭ亦可显著增加３Ｈ－ＴｄＲ的掺入量。ｍｍＬＤＬ的上述作用可被不同剂量的ＡＰＩ０１３４和ＡＰＩ０１３４作用后的ＣＭ所抑制。结论：ＡＰＩ０１３４的作用可能是抗动脉粥样硬化的机理之一。     

黑木耳多糖对动脉粥样硬化血管平滑肌细胞表型转化及bFGF和PDGF表达变化的研究

目的通过黑木耳多糖对血管平滑肌细胞表型转化及bFGF和PDGF表达变化的影响,探讨黑木耳多糖降血脂和抗氧化以外的抗动脉粥样硬化形成作用。方法将30只新西兰白兔随机分为正常对照组、模型组和实验组3组,分别给予普通饲料（正常组）、高胆固醇饲料（模型组）以及高胆固醇加黑木耳多糖饲料（实验组）喂养。第12周末处死动物。取主动脉行组织形态学观察及用透射电镜和免疫组织化学方法分析平滑肌细胞表型转化及bFGF和PDGF表达变化。结果实验组主动脉斑块面积明显小于模型组,模型组和实验组分别为（0．44±0．10）和（0．30±0．83）,两组比较差异有统计学意义（P〈0．01）;透射电镜和免疫组化结果显示：模型组动脉粥样硬化斑块的平滑肌细胞内内质网、线粒体增多,主要为合成表型;而实验组平滑肌细胞内内质网、线粒体少．主要为收缩表型,并且斑块内bFGF和PDGF的表达减少。结论黑木耳多糖可抑制动脉粥样硬化过程中血管平滑细胞从收缩表型向合成表型的转化,从而抑制平滑肌细胞合成和分泌bFGF、PDGF和其他细胞外基质的能力,从而减少动脉粥样硬化形成中血管平滑肌细胞参与的过程。     

核因子-κB活化参与Ox-LDL诱导人肾小球系膜细胞表达单核细胞趋化蛋白-1(英文)

目的：研究核因子-κB(NF-κB)在氧化低密度脂蛋白(Ox-LDL)诱导的体外培养的人肾小球系膜细胞表达单核/巨噬细胞趋化蛋白-1(MCP-1)中的作用。方法： 采用凝胶迁移率变动分析检测NF-κB的DNA结合活性变化，以免疫组化观测细胞内REL P65的核转位，用细胞ELISA法检测细胞内MCP-1及IκBα蛋白含量变化。结果： 不同浓度(10、25、50、100 mg/L)Ox-LDL刺激肾小球系膜细胞均可引起细胞NF-κB的DNA结合活性增强，50 mg/L Ox-LDL活化MCs效果最明显(8.50±1.14，P＜0.01 vs control； P＜0.05 vs 10, 25和100 mg/L Ox-LDL)。Ox-LDL刺激MCs 30-240 min均可以活化NF-κB，60 min时相点活性最强(11.0±2.11，P＜0.01 vs control； P＜0.05 vs 30 min or 240 min)。以50 mg/L Ox-LDL刺激MCs 1 h后，细胞内IκBα蛋白水平最低(0.050±0.006，n=5,P＜0.01 vs control)，作用24 h MCP-1表达水平最高(0.331±0.016， n=5,P＜0.01 vs control)。NF-κB活化的同时伴有REL P65核转位。上述效应可被NF-κB特异性抑制剂吡咯二硫氨基甲酸酯(PDTC)所抑制。结论： Ox-LDL刺激人肾小球系膜细胞产生MCP-1是由NF-κB调控，NF-κB参与了脂质肾损害的发病过程。     

云芝多糖B抑制ox-LDL诱导巨噬细胞株单核细胞趋化蛋白-1mRNA表达的调控机制

目的：探讨云芝多糖（CVPS）-CVPS-B对氧化修饰低密度脂蛋白（ox-LDL）诱导的巨噬细胞(RAW264.7)单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）mRNA表达的影响，及对核因子-κB（NF-κB）和细胞内谷胱甘肽（GSH）的调控作用。方法:应用反转录聚合酶链反应（RT-PCR）测定RAW264.7细胞MCP-1 mRNA的表达；凝胶滞留法（EMSA）测定NF-κB的结合活性；荧光分光光度法测定细胞内GSH的活性。结果:CVPS-B呈剂量依赖性抑制ox-LDL诱导的RAW264.7细胞MCP-1 mRNA的表达。应用GSH 特异性消耗剂buthionine-［S，R］-sulfoximine （BSO），ox-LDL不能诱导RAW264.7细胞MCP-1 mRNA的表达。CVPS-B抑制ox-LDL诱导RAW264.7细胞内GSH活性下降。CVPS-B呈剂量依赖性抑制 ox-LDL诱导的RAW264.7细胞NF-κB活性；在完全消耗GSH的RAW264.7细胞，ox-LDL不能诱导NF-κB的活性。结论:CVPS-B可抑制ox-LDL诱导RAW264.7细胞MCP-1 mRNA的表达；其抑制作用可能通过GSH/NF-κB的调控。     

凝集素美洲商陆对人单核细胞及白血病细胞的HLA—DR分子表达的…

通过流式细胞仪的方法，报道了凝集互不美洲商陆（ＰＷＭ）对人单核细胞和白血病细胞表面的ＨＬＡ－ＤＲ分子表达的影响，实验结果显示：ＰＷＭ可以直接与单核细胞和白血病Ｕ９３７细胞及Ｒａｊｉ细胞相结合，而且这３种细胞均表达ＨＬＡ－ＤＲ分子，经ＰＷＭ处理２４ｈ后，正常人单核细胞ＨＬＡ－ＤＲ分子的表达不受影响。而Ｕ９３７细胞和Ｒａｊｉ细胞上的ＨＬＡ－ＤＲ分子均被下调，而且这各下调作用与ＰＷＭ的剂量有关，其他凝集     

氧化高密度脂蛋白对单核细胞膜脂流动性及淋巴细胞功能相关抗原-1表达的影响

目的:研究氧化高密度脂蛋白(oxHDL)对单核细胞膜脂流动性及淋巴细胞功能相关抗原-1(LFA-1)表达的影响。方法:采用荧光探针DPH检测膜脂流动性,用流式细胞术间接免疫荧光法检测人单核细胞株THP-1细胞表面LFA-1的表达水平。结果:100 μg protein/mL的oxHDL和oxLDL(氧化低密度脂蛋白)作用20 h后可显著降低THP-1细胞膜脂流动性(LFU),分别较对照组低45%和52%(P＜0.01);oxHDL作用24 h可明显促进LFA-1的表达,阳性细胞率和平均荧光强度分别较对照组高39%和45%(P＜0.01)。结论:oxHDL可能通过促进单核细胞表达LFA-1而使更多的单核细胞粘附于内皮,它还可降低单核细胞膜脂流动性,这将使单核细胞在进入内皮下层后难于重新返回循环血中,从而促进动脉粥样硬化的发生。     

血栓素A2,肿瘤坏死因子和地塞米松对兔气道平滑肌细胞增？…

目的；探讨血栓素Ａ２（ＴＸＡ２）、肿瘤坏死因子（ＴＮＦ－α），地塞米松（Ｄｅｘ）对气管平滑肌细胞（ＡＳＭＣ）增生的影响。结论：ＴＸＡ２、ＴＮＦ－α在ＡＳＭＣ增生中起重要作用，Ｄｅｘ在治疗哮喘过程中，有可能加重ＡＳＭＣ的增生。     

IL-6对大鼠血管平滑肌细胞TWEAK受体Fn14表达及功能的影响

目的:观察白介素-6(IL-6)对Wistar大鼠血管平滑肌细胞肿瘤坏死因子样凋亡微弱诱导剂(TWEAK)受体-人成纤维细胞生长因子诱导14(Fn14)表达及功能的影响。方法:将含有不同浓度IL-6(20ng/ml、50ng/ml)的培养液培养平滑肌细胞,用RT-PCR半定量检测各组平滑肌细胞Fn14mRNA的表达,用Westernblot检测各组平滑肌细胞Fn14蛋白的表达。在20ng/mlIL-6组中,用抗Fn14抗体阻断Fn14作用后,用ELISA观察各组血管平滑肌细胞单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)表达的变化。结果:与空白对照组相比,20ng/mlIL-6组和50ng/mlIL-6组Fn14mRNA和蛋白表达均显著升高(P0.01);50ng/mlIL-6组显著高于20ng/ml组(P0.01)。20ng/mlIL-6可显著增加平滑肌细胞表达MCP-1,其水平显著高于抗Fn14单克隆抗体组(P0.05)和空白对照组(P0.01)。结论:IL-6可诱导血管平滑肌细胞表达TWEAK受体Fn14,阻断Fn14的作用可减少IL-6诱导的MCP-1的表达,提示TWEAK/Fn14参与IL-6诱导的动脉粥样硬化形成。     

脑缺血过程中B细胞淋巴瘤—2基因家族基因的表达及与细胞死亡？…

为了了解Ｂ细胞淋巴瘤－２基因家族基因在脑缺血后表达规律及其调节细胞死亡的作用，通过阻塞大鼠双侧颈总动脉和椎动脉建立了全脑缺血模型，观察了Ｂａｘ，ｂｃｌ－ｘＬ及ｂｃｌ－２基因表达变化以及与细胞死亡的关系。     

白藜三醇对氧自由基致兔血管平滑肌细胞NF-κB活化及MCP-1表达的影响

目的:探讨白藜三醇(RES)对X/XO致血管平滑肌细胞内核转录因子NF-κB活性和单核细胞趋化蛋白-1表达(MCP-1)的影响。方法:以培养幼兔主动脉平滑肌细胞为研究对象,分别给予不同剂量的X／XO和／或RES,采用MTT法、电泳迁移率改变分析法、免疫组织化学和原位杂交技术检测不同处理组平滑肌细胞增殖及NF-κB活性和MCP-1蛋白及其mRNA表达的变化。结果:不同浓度的X／XO所产生的氧自由基可明显增加体外培养SMC增殖及NF-κB的活性和MCP-1蛋白及其mRNA的表达水平,RES呈剂量依赖性地抑制氧自由基对体外培养SMC的增殖作用和NF-κB的活性,并下调MCP-1的表达水平;其中以终浓度100μmol/L的RES对氧自由基介导的NF-κB活性的抑制作用最强;终浓度200μmol/L的RES对SMC的增殖作用及MCP-1表达的抑制作用最强。结论:RES具有抑制X／XO产生氧自由基对NF-κB的诱导合成和MCP-1表达的效应。     

β—榄香烯,丝裂霉素C及热休克对小鼠H22肝癌细胞HSP70表达？…

为了进一步阐明肿瘤２疫苗的特异性主动免疫治疗机理，采用β－榄香烯，丝裂霉素及热休克在体外单独及复合处理小鼠Ｈ２２肝癌细胞，经间接免疫荧光染色，流式细胞仪分析，结果显示，上述处理因素均能明显地诱导Ｈ２２细胞表达ＨＳＰ７０，在单因素中，以β－榄香烯效果最佳，阳性率为６９．１６％，ＭＭＣ次之，在复合因素中，以β－榄香烯与ＭＭＣ复合处理的效果最佳，阳性率为９５．１３％；三种因素联合处理的效果为８５．３４％     

吐温80合并温热对B16黑色素瘤细胞hsp70,c—fos泛蛋白及S—100蛋？…

目的：研究吐温８０与温热合并的协同抗肿瘤机理及凋亡的关系。方法；用免疫组化方法，观察吐温８０合并４１℃温热作用后抑郁，４小时和７２小时，Ｂ１６肿瘤细胞热休克蛋白７０（ｈｓｐ７０）ｃ－ｆｏｓ泛蛋认及Ｓ－１００蛋白表达的改变，并进行定量分析，结果：ｈｓｐ７０和ｃ－ｆｏｓ蛋白呈中等阳性反应，分别位于Ｂ１６细胞的胞质和胞核；泛蛋白为弱阳性，Ｓ－１００蛋白呈强阳性，分布于胞质，４１℃６０分钟作用可增中ｈｓｐ     

B7／CD28和ICAM—1／LFA—1共刺激信号对T及B细胞功？…

目的 研究共刺激途径Ｂ７／ＣＤ２８和ＩＣＡＭ－１／ＬＦＡ－１对Ｔ细胞活化以及Ｂ细胞效应的作用。方法 在体外建立ＡＰＣ：Ｔ：Ｂ细胞反应系统,用Ｂ７－１单抗和ＩＣＡＭ－１单抗分别阻断Ｂ７／ＣＤ２８和ＩＣＡＭ－１／ＬＦＡ－１共刺激途径,利用＾３Ｈ－ＴｄＲ法检测Ｔ细胞增殖,ＥＬＩＳＡ法测定Ｂ细胞分泌的杭体,用ＲＴ－ＰＣＲ法检测细胞因子基因的表达。结果 Ｂ７－１单抗和ＩＣＡＭ－１单坑均可抑制Ｔ细胞增殖及ＩＬ     

小蘖碱对oxLDL诱导平滑肌细胞泡沫化及LOX-1、NF-κB表达变化的影响

目的:观察小蘖碱对氧化型低密度脂蛋白(oxLDL)诱导的大鼠胸主动脉平滑肌细胞(VSMCs)泡沫化及凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体1(LOX-1)、核转录因子P65(NF-κB P65)表达的影响。方法:将一部分体外培养的VSMCs分为空白对照组,泡沫化模型组(简称模型组),50μM小蘖碱对照组和50μM小蘖碱干预组,油红O染色后,观察各组VSMCs的泡沫化程度。另一部分体外培养的VSMCs同上分为空白对照组、模型组以及25μM小蘖碱干预组和50μM小蘖碱干预组,预刺激后Western-Blotting检测各组VSMCs的LOX-1蛋白和NF-κB P65蛋白表达水平。结果:空白对照组和小蘖碱组VSMCs未泡沫化,LOX-1和NF-κB P65微量表达。模型组VSMCs中的脂滴聚集成团,形成泡沫化,LOX-1及NF-κB P65的表达较对照组明显增加(P0.01),小蘖碱干预组泡沫化明显减轻,两小蘖碱干预组VSMCs LOX-1及NF-κB P65蛋白表达较模型组显著降低(P0.01),高效量组作用更强(P0.05,P0.01)。结论:小檗碱可减轻平滑肌细胞源性泡沫细胞化程度,其作用机制可能与抑制NF-κB和LOX-1蛋白表达有关。     

L7212白血病小鼠IL—2活性,IL—2 mRNA表达及复方中药清毒饮对？…

目的：探讨Ｌ７２１２白血病小鼠及其受体鼠－近交系６１５小鼠ＩＬ－２ ｍＲＮＡ的表达及复方中药清毒饮对其影响。方法：采用ＩＬ－２依赖株ＣＴＬＬ－２及细胞原位杂交的方法检测了由ＣｏｎＡ诱导的脾细胞培养上清中ＩＬ－２活性及脾细胞ＩＬ－２ ｍＲＮＡ表达。结果：发现由ＣｏｎＡ诱导的Ｌ７２１２的白血上鼠脾细胞培养上清中ＩＬ－２活性明显低于６１５小鼠,Ｐ〈０．０５;其脾细胞中ＩＬ－２ ｍＲＮＡ表达也明显低于６１