三磷酸腺苷诱导人白血病细胞U937凋亡的电镜观察

目的 为探讨三磷酸腺苷（ＡＴＰ）对人白血病细胞Ｕ９３７的促凋亡作用。方法 应用ＡＴＰ（０．２３ｇ／Ｌ）作用于人白血病细胞Ｕ９３７（ｈｕｍａｎ ｈｉｓｔｏｃｙｔｉｃ ｌｙｍｐｈｏｍａ）,⑴用白细胞计数器每日计数器细胞和计算抑制率;⑵用流式细胞分析仪检测ＡＴＰ对Ｕ９３７细胞周期改变和凋亡的影响;⑶苏木精－伊红以和电子显微镜检测凋亡小体的形成过程;⑷用苯胺黑染色检测凋亡小体的生命本性。结果 ⑴ＡＴＰ对Ｕ     

三磷酸腺苷对N9小胶质细胞的损伤作用及其机制

目的:研究三磷酸腺苷(ATP)对N9小胶质细胞的损伤作用及其机制。方法:取对数生长期N9小胶质细胞,随机分为3组:(1)正常对照组:常规培养,不进行ATP处理;(2)ATP组:接种24 h后行ATP处理;(3)KN-62(P2X₇受体阻断剂)干预组:KN-62孵育30 min后行ATP处理,且KN-62存在于ATP作用整个过程。XTT法测各组N9小胶质细胞的活力;倒置相差显微镜观察细胞形态变化;流式细胞术检测细胞周期及凋亡;细胞免疫荧光检测P2X₇受体表达;Western blotting检测细胞P2X₇受体蛋白水平;ELISA检测细胞上清液中白细胞介素1β(IL-1β)含量。结果:500 μmol/L ATP和1 mmol/L ATP对细胞活力损伤程度较小,作用24 h后,细胞活力仍可达88.5%±5.5%和88.2%±8.4%。当ATP浓度达到或高于2 mmol/L时,细胞活力迅速降低,细胞发生皱缩,且随ATP作用时间延长,细胞活力逐渐降低,细胞密度逐渐减少,细胞皱缩程度加重,而KN-62干预后细胞活力较ATP组明显增多,细胞密度及形态明显好于ATP组。细胞周期及凋亡检测结果显示,ATP可使细胞周期阻滞于S期,细胞凋亡比例明显较对照组增多(P<0.01),KN-62干预可显著减轻ATP引起的细胞周期阻滞,细胞凋亡比例显著减少(P<0.01)。免疫荧光显示,ATP及KN-62干预对N9小胶质细胞上P2X₇受体的表达分布没有影响。Western blotting显示,正常对照组、ATP组及KN-62干预组间P2X₇受体蛋白水平没有明显差异(P＞0.05)。ELISA结果显示,ATP及KN-62干预对IL-1β的释放没有作用。结论:高剂量ATP可诱发N9小胶质细胞损伤,其机制可能与P2X₇受体介导的细胞周期阻滞和细胞凋亡有关,而与小胶质细胞的炎症反应无关。     

外源性三磷酸腺苷对人胃腺癌SGC-7901细胞的生物学效应

本文报道外源性三磷酸腺苷(ATP)对人胃腺癌SGC-7901细胞系增殖的抑制效应。在SGC-7901细胞的培养基质内加入ATP后,细胞生长明显受阻抑,4天以后,抑制率可达80％以上;癌细胞质膜上的3′,5′环腺苷酸磷酸二酯酶(cAMP-PDEase)活性明显下降,而细胞内的cAMP和纤维粘连蛋白的免疫荧光强度却明显增强。癌细胞多呈梭形,微绒毛减少,表面较光滑,呈现癌细胞向正常方向逆转的表型特征。本文还就ATP作用的机理进行了讨论。     

大建中汤对脾阳虚腹痛大鼠大脑皮质三磷酸腺苷含量和三磷酸腺苷酶活性的影响

目的:通过观察大建中汤对脾阳虚腹痛大鼠皮质ATP含量以及钠钾ATP酶和钙镁ATP酶活性的影响,探讨大建中汤对脾阳虚腹痛大鼠的镇痛机制。方法:将大鼠随机分为正常对照组,模型对照组,大建中汤大、小剂量组。用饮食失调、劳倦过度加苦寒泻下的方法,建立脾阳虚腹痛大鼠模型后分别给予相应治疗。取大脑皮质处理后,采用高效液相色谱法测定各组大鼠皮质ATP含量的变化;采用无机磷法测定钠钾-三磷酸腺苷酶和钙镁-三磷酸腺苷酶活性。结果:与正常对照组相比,脾阳虚腹痛模型组大鼠大脑皮质ATP含量明显升高,钠钾ATP酶和钙镁ATP酶活性显著降低;与模型组相比,大建中汤能显著减少脾阳虚腹痛大鼠大脑皮质ATP含量,增加钠钾ATP酶和钙镁ATP酶活性。结论:脾阳虚腹痛症能使大脑皮质ATP含量升高,钠钾ATP酶和钙镁ATP酶活性降低,大建中汤能下调脾阳虚症动物大脑皮质ATP及上调钠钾ATP酶和钙镁ATP酶活性,这可能是其治疗脾阳虚腹痛的作用机制之一。     

三磷酸腺苷对人横纹肌肉瘤细胞系诱导分化作用的研究

为了探讨三磷酸腺苷（ＡＴＰ０对人横纹肌肉瘤细胞增殖和分化的影响，用ＡＴＰ作用于人横纹肌肉瘤细胞亚系（ＲＤＬ６）细胞，观察到ＡＴＰ可抑制ＲＤＬ６细胞的增殖，使其生长速度明显减慢，作用第５ｄ时增殖抑制率为８１％，流式光度术检测；观察到ＡＴＰ ＲＤＬ６细胞Ｓ期的细胞数明显增多，说明细胞停滞在Ｓ期，用罗氏黄荧光染料传法实，ＡＴ家恢复ＲＤＬ６细胞间隙加接通讯功能的作用。用 光细胞化学方法观察到经ＡＴＰ处理后     

病毒性肝炎患者用三磷酸腺苷-氯化镁前后免疫球蛋白变化

目前,国外关于三磷酸腺苷氯化镁(ＡＴＰＭｇＣｌ2)对休克、肝及肾功能不全的实验研究和临床试用已有文献报道,国内也有个别方面的报道,但未见用ＡＴＰＭｇＣｌ2后免疫球蛋白变化情况。本文从1996年2～9月间选择了86例病毒性肝炎,测定了ＡＴＰＭｇＣｌ2前后免疫球蛋白ＩｇＧ、Ｉ     

线粒体三磷酸腺苷敏感钾通道介导脑保护作用的机制

目的 :线粒体ATP敏感性钾通道 (mitoKATP)是存在于许多组织细胞线粒体内膜上的一种可调节线粒体代谢活动的钾离子通道。研究表明 ,mitoKATP在脑细胞的保护中具有重要作用 ,mitoKATP活动的调控是研究缺血脑保护的重要环节。氧自由基作为线粒体活动的一种重要中间产物 ,参与包括心肌细胞在内的组织细胞的mitoKATP活动的调节 ,但是其是否参与脑细胞mi toKATP开放对缺血脑的保护作用尚无报道。方法 :大鼠海马脑片为实验模型 ,以无糖 -无氧人工脑脊液灌流作为模拟缺血处理 ,细胞外记录海马CA1区的群体锋电位 (PS)和缺血去极化电位 (I…     

三磷酸腺苷对人胃癌细胞系MGC—803影响的电镜观察

用透射电镜和扫描电镜方法观察了三磷酸腺苷（ＡＴＰ）对人胃癌细胞系ＭＧＣ－８０３影响，结果表明，ＡＴＰ能使ＭＧＣ－８０３细胞的核仁由网状向环状改变，微丝的组装得改善，细胞表面微绒毛减少。提示ＭＧＣ－８０３细胞的恶性表型ＡＴＰ作用下可向正常方向逆转。     

ATP清除剂三磷酸腺苷双磷酸酶对实验性矽肺的干预作用

 目的:观察三磷酸腺苷双磷酸酶(apyrase,Apy)对实验性矽肺小鼠肺纤维化的干预作用及可能机制。方法:160只雄性C57BL/6小鼠,随机分为对照组、矽肺组、Apy组及溶剂组,采用经口咽吸入法给予SiO₂悬浊液(50 mg/kg)建立小鼠实验性矽肺模型,对照组给予等量生理盐水。Apy组在造模的同时及造模后4 h采用经口咽吸入法给予Apy(40 mg/kg),溶剂组给予等体积的无菌生理盐水。分别于术后3 h、7 d、14 d和28 d处死小鼠,计算各组小鼠肺指数,采用生物发光法检测小鼠肺组织的ATP含量,采用HE染色和苦味酸-天狼星红染色观察肺组织的病理学变化,采用real-time PCR法检测各组肺组织中Ⅰ型胶原(Col Ⅰ)、Ⅲ型胶原(Col Ⅲ)和转化生长因子β1(TGF-β1)的mRNA表达水平,采用ELISA法测定肺泡灌洗液TGF-β1的蛋白水平。结果:与对照组相比,模型组和溶剂对照组小鼠的肺指数和胶原含量明显升高,证明矽肺模型制备成功。Apy组与溶剂组相比,肺组织的ATP含量下降,肺组织炎症表现明显减轻,炎症评分显著下降;同时肺指数、胶原容积分数及Col Ⅰ和Col Ⅲ的 mRNA表达水平均显著下降。Apy可以明显下调肺组织中TGF-β1的mRNA表达水平和肺泡灌洗液中TGF-β1蛋白表达水平。结论:Apy可以明显减轻实验性矽肺小鼠肺组织的炎症反应和纤维化,该作用可能与Apy减少肺组织ATP的浓度、下调TGF-β1的表达有关。     

雷公藤多甙对正常人外周血淋巴细胞内环磷酸腺苷水平及其代谢的影响

本文观察了雷公藤多甙粉剂(T_Ⅱ)在体外对正常成人外周血淋巴细胞内环磷酸腺苷(Cyclic AMP,cAMP)水平的影响,进而比较了体外给药前后腺苷酸环化酶(Adenylate Cyclase,Ac)和环磷酸腺苷磷酸二酯酶(Cycli.AMPPhosphodiesterase,cAMP-PDE)的活性的改变。结果发现,在体外雷公藤多甙使正常人淋巴细胞内环磷酸腺苷的水平有明显升高,并显著抑制环磷酸腺苷磷酸二酯酶的活性,但对腺苷酸环化酶的活性基本无影响。以上结果反映了雷公藤产生免疫抑制作用的一条可能途径。     

角膜细胞外基质及其生物学作用

用膜细胞外基质包括糖蛋白和蛋白聚糖两大类。它们在细胞的迁移、识别和损伤修复过程中起重要作用。病理情况下角膜外细胞基质的某些成份常缺失或增加。本文综述角膜细胞外基质的组织化学、细胞化学及分子生物学的研究概况。     

肌球蛋白三磷酸腺苷酶的染色技术

肌球蛋白三磷酸腺苷酶(mlyosin ATPase)定位于骨骼肌,ATP酶染色是鉴别肌纤维类型及分布的最理想的应酶,对神经性肌萎缩和肌源性肌萎缩的诊断有重要的价值。目前要用钙激活法,该方法较为轻典,但其染色效果受多种因素影响;没有一定的经验,每次实验并不一定都能成功。笔者经过多年的实践与摸索,获得较为稳定且满意的结果,现介绍如下。     

细胞凋亡的形态代谢特点及生物学意义

细胞凋亡的形态代谢特点及生物学意义苏长青综述龚西审校细胞凋亡（ａｐｏｐｔｏｓｉｓ）的概念最早由Ｋｅｒｒ等［１］于１９７２年提出，亦称细胞程序性死亡（ｐｒｏｇｒａｍｍｅｄｃｅｌｌｄｅａｔｈ）。长期以来，有关细胞凋亡的发生机制及生物学意义一直未受重视。近...     

应用生物荧光法检测三磷酸腺苷评估肝细胞功能储备

目的:探索生物荧光定量分析三磷酸腺苷作为评估肝实质功能的可行性。方法:选择2005-2006年入住我院肝胆胰脾外科的32例肝病患者（26例为恶性肝病,6例为良性肝病）作为研究对象, 男27例(84.38%),女5例(15.62%),中位年龄53.87(范围33-76)岁。所有患者均于术前进行谷草转氨酶（AST）和总胆红素（TBIL）常规肝生化检查。术中根据肝脏形态学改变将患者进行分组, 分别为正常组7例 (21.88 %);大结节硬化组9例 (28.12%);小结节硬化组16 例(50.00%)。无菌收集肝手术切除病变旁肝组织标本,经过酶解消化、细胞悬浮、培养、离心、肝细胞计数、ATP的提取和检测等步骤,最后换算出每个肝细胞ATP含量检测;进一步将ATP数据与术前肝功能其它指标(AST、TBIL)进行相关分析。结果:ATP含量在大结节硬化组明显较正常组增高 ［(1 224.66±373.37） mol/cell vs （438.66±186.97） mol/cell, P＜0.01］, 较小结节组也明显升高［(1 224.66±373.37） mol/cell vs （697.39±402.24） mol/cell, P＜0.01］;微小结节硬化组较正常组也明显升高 ［(697.39±402.24） mol/cell vs （438.66±186.97） mol/cell, P＜0.05］。所有患者单个肝细胞ATP（mole/cell）水平与术前生化检查AST (R=0.60933, P<0.01)及TBIL (R=0.61458, P<0.01)呈正相关。 结论:肝细胞ATP检测水平有可能作为评估肝实质储备功能的指标,ATP水平可能用于预测手术风险及术后恢复过程。     

氧自由基对生殖细胞三磷酸腺苷酶和生长抑素的影响

背景：有关细胞自由基的研究,主要集中在动物体内细胞自由基的产生与清除方面。 目的：观察氧自由基对体外培养的睾丸生殖细胞三磷酸腺苷酶(ATPase)和生长抑素含量的影响。 方法：体外分离、纯化小鼠睾丸生殖细胞,培养24 h后,将其分为2组,实验组添加黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶建立氧自由基损伤模型;对照添加生理盐水。继续培养24,48 h,采用酶组化及免疫组化染色观察各组ATPase和生长抑素表达变化。采用LUZEX-F图像分析仪分别测定其灰度值;用酶联免疫检测仪测定492 nm波长的吸光度值。 结果与结论：给药后24,48 h,实验组ATPase、生长抑素灰度值显著高于对照组(P < 0.01),吸光度值显著低于对照组(P  < 0.01)。提示氧自由基可降低ATPase和生长抑素含量,影响生殖细胞在体外培养过程中的生长与增殖。     

环磷酸腺苷在心肌缺血／再灌注心律失常中的作用

本文应用放免法测定Ｗｉｓｔａｒ大鼠离体心脏缺血／再灌注期间心脏灌流液中环磷酸腺苷含量变化，并探讨其与心肌缺血／再灌注心律失常的关系，结果表明，冠脉结扎５ｍｉｎ时，ｃＡＭＰ无显著增加，同时未见心律失常，结扎１０－１５ｍｉｎ时，ｃＡＭＰ含量显著增加，并出现各类室性心律失常，再灌注１ｍｉｎ时ｃＡＭＰ较灌注前非常显著增加，而这１ｍｉｎ内，所有心脏均出现再灌注心律失常，１０ｍｉｎ后心律失常显著减少，此时ｃＡ