缺氧对肺动脉内皮细胞和平滑肌细胞5-羟色胺转载体基因表达的影响

目的：探讨无氧（Ｏ％Ｏ２＋９５％Ｎ２＋５％ＣＯ２）和低氧（２５～３％Ｏ２＋９２％Ｎ２＋５％ＣＯ２）对新生小牛肺动脉内皮细胞（ＰＡＥＣ）和肺动肺平滑肌细胞（ＰＡＳＭ）５－羟色胺转载体基因表达的影响。方法：应用细胞培养，核酸分子杂交技术。结果：无氧组和低氧组（１５ｈ、３ｈ、６ｈ）ＰＡＥＣ５－羟色胺转载体ｍＲＮＡ表达显著高于常氧组（Ｐ＜００５），而无氧和低氧１２ｈ至４８ｈ对ＰＡＥＣ５－羟色胺转载体ｍＲＮＡ表达无明显影响。无氧和低氧（３ｈ、６ｈ、１２ｈ、２４ｈ）组ＰＡＳＭ５－羟色胺ｍＲＮＡ表达均显著高于常氧组（Ｐ＜００１），结论：推测缺氧早期通过促进ＰＡＥＣ５－羟色胺转载体基因表达，加强ＰＡＥＣ对５－羟色胺的摄取和降解，随缺氧时间的延长，ＰＡＥＣ的此功能受损。缺氧ＰＡＳＭ５－羟色胺转载体基因表达的持续增加，则可能参与缺氧肺动脉高压的形成。     

缺氧与复氧对培养的肺动脉内皮细胞功能的影响

缺氧与复氧均可引起肺血管收缩和损伤，本研究观察肺血管内皮细胞活力和血管紧张素转换酶（ＡＣＥ）释放在其中的作用。培养的新生小牛肺动脉内皮细胞（ＰＡＥＣ）在缺氧条件下（０％Ｏ２－９５％Ｎ２）培养６～２４ｈ，其上清液ＡＣＥ活性无显著变化，而细胞活力于缺氧１２～２４ｈ显著增加（与常氧组相比增加２０％～３３％，Ｐ＜０．０５）。ＰＡＥＣ在缺氧条件下培养２４ｈ，复氧培养３～６ｈ后其上清液ＡＣＥ活性显著增加（与常氧组和缺氧组相比Ｐ＜０．０１），于１２ｈ恢复至复氧前的水平。细胞活力的变化与ＡＣＥ的变化类似，复氧３～６ｈ显著高于常氧水平（Ｐ＜０．０１与常氧组相比），１２ｈ恢复至正常。上述结果表明ＰＡＥＣ的ＡＣＥ和细胞活力的变化可能对肺动脉壁本身ＲＡＳ功能的调节及缺氧性肺血管收缩的发生起一定作用。     

缺氧对肺动脉内皮细胞和平滑肌细胞5—羟色胺转载体基因表达 …

目的：探讨无氧（０％Ｏ２＋９５％Ｎ２＋５％ＣＯ２）和低氧（２．５￣３％＋９％Ｎ２＋５％ＣＯ２）对新生小牛肺动脉内皮细胞（ＰＡＥＣ）和肺动脉平滑肌细胞（ＰＡＳＭ）５－羟色胺转载体基因表达的影响。方法：应用细胞培养，核到分子杂交技术。结果：无氧组和低氧组（１．５ｈ、３ｈ、６ｈ）ＰＡＥＣ５－羟色胺转载体ｍＲＮＡ表达显著同于常氧组（Ｐ〈０．０５），而无氧和低氧１２ｈ至４８ｈ对ＰＡＥＣ５－羟色胺转载体ｍＲＮ     

缺氧,缺血及再灌注山羊血浆对血管内皮细胞和中性粒细胞的影响

为了探讨缺氧，缺血及再灌注损伤的发生的机制，我们分别观察了缺氧（模拟海拔４０００ｍ高原）２４ｈ山羊血浆（ＨＰ），缺血１ｈ（在上述条件下于缺氧２４ｈ末放血使血压维持在６．０ｋＰａ１ｈ）山羊血浆（ＩＰ）和再灌注回输放出血液后２４ｈ）山羊血浆（ＲＰ）对中性粒细胞（ＰＭＮ）及培养的肺动脉内皮细胞（ＰＡＥＣ）的作用，ＰＭＮ在分别含ＨＰ、ＩＰ和ＲＰ的培养中温育１ｈ末，细胞活力明显升高（Ｐ〈０．００１），其升高     

缺氧时肺动脉内皮细胞与肺动脉平滑肌细胞相互作用对细胞内环核苷酸的影响

目的：观察了培养的小牛肺动脉内皮细胞（ＰＡＥＣ）和肺动脉平滑肌细胞（ＰＡＳＭ）于缺氧时对细胞内环核苷酸的影响。结果：ＰＡＥＣ和ＰＡＳＭ共培养２４ｈ，ＰＡＥＣ细胞内ｃＡＭＰ含量显著降低（Ｐ＜００１），而ＰＡＳＭ细胞内ｃＡＭＰ含量显著增加（Ｐ＜００１），二种细胞内ｃＧＭＰ含量均显著降低（Ｐ＜００１）。缺氧对二种细胞内ｃＡＭＰ含量无显著影响，但能增加ＰＡＳＭ的ｃＧＭＰ含量（Ｐ＜００１），降低ＰＡＥＣ的ｃＧＭＰ含量（Ｐ＜００１）。ＮＯ合酶抑制剂硝基精氨酸对二种细胞的ｃＡＭＰ含量均无显著影响，但能使常氧培养的ＰＡＥＣ和缺氧培养的ＰＡＳＭ细胞内的ｃＧＭＰ含量显著降低（Ｐ＜００１）。结论：ＰＡＥＣ和ＰＡＳＭ的相互作用可引起第二信使系统传递的变化；缺氧可抑制ＰＡＥＣ的ＮＯ合酶活性而诱导ＰＡＳＭ的ＮＯ合酶活性     

缺氧时肺动脉内皮细胞与肺动脉平滑肌细胞相互作用对细胞内 …

目的：观察了培养的小牛肺动脉内皮细胞（ＰＡＥＣ）和肺动脉平滑肌细胞（ＰＡＳＭ）于缺氧时对细胞内环核苷酸的影响。结果：ＰＡＥＣ和ＵＰＡＳＭ共培养２４ｈ，ＰＡＥＣ细胞内ｃＡＭＰ含量显著降低（Ｐ〈０．０１），而ＰＡＳＭ细胞内ｃＡＭＰ含量显著增加（Ｐ〈０．０１），二种细胞内ｃＧＭＰ含量显著增加（Ｐ〈０．０１）。缺氧对二种细胞内ｃＧＭＰ含量无显著影响，但能增加ＰＡＳＭ的ｃＧＭＰ含量（Ｐ〈０．０１），降低ＰＡ     

血小板源生长因子在低氧性肺动脉平滑肌细胞增殖中的作用

运用流式细胞仪及细胞原位杂交方法测定低氧对培养的新生牛肺动脉平滑肌细胞（ＰＡＳＭＣ）生长的影响，并探讨血小板源生长因子（ＰＤＧＦ）在其中的作用，结果表明：培养的ＰＡＳＭＣ的低氧１２ｈ时，由Ｇ０／Ｇ１期进入Ｓ斯的细胞数明显增多，为对照组的１５７．７％（Ｐ〈０．０５）；ＰＤＧＦ可进一步促进低氧状态下ＰＡＳＭＣ的增殖，Ｓ期细胞为对照组的２４２．３％（Ｐ〈０．０１），原位杂交结果显示：低氧（１２ｈ）条件下     

氧化砷诱导食管癌细胞凋亡线粒体形态改变

通过研究食管癌细胞株ＳＨＥＥＣＩ细胞凋亡早期线粒体的形态改变和ｂｃｌ－２ｂａｘ的表达,以了解三氧化二砷（Ａｓ２Ｏ３）作用于食管癌细胞的机制。方法食管癌细胞株ＳＨＥＥＣ１用１、２、３μｍｏｌ／Ｌ Ａｓ２Ｏ３作用２、４、６、１２、２４ｈ。用Ａｎｎｅｘｉｎ－Ｖ荧光探针,流式细胞仪和ＤＮＡ组方图检早期凋亡细胞;光镜和电镜检测凋亡细胞的形态学改变;用罗达明（Ｒｈｏｄａｍｉｎ１２３）荧光探针检查活细胞线粒体的     

健胎液对人脐静脉内皮细胞分泌血管活性物质的影响

目的：探讨健胎液防治胎儿宫内生长迟缓的机理，应用血清药理学方法研究健胎液对缺氧人脐静脉内皮细胞（ＨＵＶＥＣ）分泌血管活性物质内皮素（ＥＴ）、前列环素（ＰＧＩ_２）、一氧化氮（ＮＯ）的影响，以及该方药对缺氧ＨＵＶＥＣ形态结构上的保护作用。方法：将ＨＵＶＥＣ随机分成四组：正常组、缺氧组、血清组、健胎液组，观察细胞形态的改变；检测内皮素（ＥＴ）、前列环素（ＰＧＩ_２）和一氧化氮（ＮＯ），进行统计学处理。结果：健胎液可显著提高缺氧ＨＵＪＶＥＣ合成分泌ＰＧＩ_２、ＮＯ（Ｐ ＜ ０．０５～０．０１），同时，ＥＴ的释放显著降低（Ｐ_４ｈ＜ ０．０５）。从超微结构上观察，健胎液能明显减轻缺氧对ＨＵＶＥＣ的细胞器和细胞核的损伤，尤以保护线粒体免受缺氧损伤的作用更显著。结论；通过增强血管内皮细胞对缺氧的耐受性，调节血管性物质的分泌是健胎液防治胎儿宫内生长迟缓的机制之一。     

新生儿缺氧缺血性脑病细胞因子的变化及临床意义

目的：研究新生儿缺氧缺血性脑病（ＨＩＥ）患儿细胞因子ＩＮＦ－α、ＩＬ－１β和ＩＬ－６的变化及其与ＨＩＥ严重程度的关系和临床意义。方法：用ＥＬＩＳＡ方法测定了５０例ＨＩＥ患儿血浆及外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）体外培养产生的细胞因子ＴＮＦ－α、ＩＬ－１β和ＩＬ－６的水平。结果：ＨＩＥ患儿血浆及ＰＢＭＣ体外培养产生的ＴＮＦ－α、ＩＬ－１β水平均显著高于对照组；而且重度ＨＩＥ患儿急性期血浆及ＰＢＭＣ体外培养产生的ＴＮＦ－α、ＩＬ－β和ＩＬ－６水平均显著高于对照组和轻度ＨＩＥ组，其恢复期血浆ＴＮＦ－α、ＩＬ－１β则显著降低，但血浆ＩＬ－６水平仍明显高于对照组。结论：ＨＩＥ患儿血浆及激活的ＰＢＭＣ产生的ＴＮＦ－α和ＩＬ－１β水平与ＨＩＥ的严重程度有关，ＩＬ－６的产生可能与脑损伤后的修复机制有关，测定这些细胞因子对病情的监测具有一定意义。     

环孢霉素A对大鼠单个核细胞雄激素和雌激素受体的影响及意义

研究了环孢霉素Ａ（ＣａＡ）、环磷酰胺（ＣＴＸ）及甲基强的松龙（ＭＰ）对大鼠单个核细胞（ＭＮＬ）雄激素受体（ＡＲ）及雌激素受体（ＥＲ）的影响。结果表明：静注ＣｓＡ２０ｍｇ／ｋｇ，ＥＲ明显降低，３ｈ作用达高峰，持续低水平达８ｈ；而ＡＲ无明显影响。静注ＣａＡ１００ｍｇ／ｋｇ用ＣＴＡ和ＭＰ使ＡＲ、ＥＲ均明显降低。而ＣＴＸ和ＭＰ使ＥＲ降低，也使ＡＲ降低，故ＣｓＡ免疫抑制作用优于ＣＴＸ和ＭＰ。     

ConA诱导小鼠脾淋巴细胞上清对下丘脑-垂体-肾上腺轴的影响

目的：探讨免疫对神经内分泌系统的上行调节通路。方法：采用ＣｏｎＡ诱导淋巴细胞培养上清液给小鼠腹腔注射，测定不同时间（０５，１，２，４，６ｈ）的小鼠血浆中ＣＲＨ，ＡＣＴＨ，皮质酮（ＣＯＲＴ）产生的动力学，同时在体外用ＣｏｎＡ诱导上清液分别与下丘脑，垂体，肾上腺组织共同培养后观察ＣＲＨ，ＡＣＴＨ，ＣＯＲＴ分泌情况。结果：在体内ＣｏｎＡ诱导上清可在２ｈ内明显促进ＣＲＨ，ＡＣＴＨ和ＣＯＲＴ的产生（Ｐ＜００５）。体外培养６ｈ可明显增加ＣＲＨ分泌，１６ｈ时ＡＣＴＨ和ＣＯＲＴ明显增加（Ｐ＜００５）。结论：ＣｏｎＡ诱导上清可在下丘脑－垂体－肾上腺轴（ＨＰＡＡ）三个不同的层次上进行调节。     

脂质过氧化在老化大鼠急性胆源性肝细胞线粒体损害中的作用及维生素E的影响

目的：探讨脂质过氧化在老化大鼠胆源性肝细胞线粒体受损中及维生素Ｅ（ＶＥ）的保护作用。结果：老化大鼠非ＶＥ处理组（ＮＶＥＧ）肝细胞线粒体丙二醛（ＭＤＡ）含量明显高于非老化组，超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）和谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＰＤ）活性明显低于非老化组，过氧化氢酶（ＣＡＴ）无明显变化。１８和２４月龄ＶＥ处理组（ＶＥＧ）ＭＤＡ显著低于ＮＶＥＧ，ＳＯＤ和ＧＰＤ显著高于ＮＶＥＧ，并以１８月龄组为明显。急性梗阻性左肝胆管炎（ＡＯＬＨ）后ＭＤＡ水平明显高于对照组，间接致伤肝叶（ＩＡＬ）较直接致伤肝叶（ＤＡＬ）为明显；ＩＡＬ线粒体ＳＯＤ和ＣＡＴ活性均显著高于对照组，ＤＡＬ显著降低；各叶ＧＰＤ活性均显著低于对照组，ＩＡＬ和ＤＡＬ均无显著差别；以上改变以２４月龄组为明显。各月龄ＶＥＧＡＯＬＨ２４ｈ时ＩＡＬＭＤＡ含量明显低于ＮＶＥＧ；１８月龄ＶＥＧＡＯＬＨ后ＳＯＤ水平均明显高于ＮＶＥＧ；各月龄ＶＥＧ组ＡＯＰＨ后ＧＰＤ和ＣＡＴ活性与ＮＶＥＧ比较均无明显差异。结论：脂质过氧化是老化大鼠胆源性肝细胞线粒体受损的重要机制，ＶＥ具有明显的保护作用。     

缺氧对肺动脉内皮细胞和肺动脉平滑肌细胞5-羟色胺转载体基因表达的影响

缺氧对肺动脉内皮细胞和肺动脉平滑肌细胞５－羟色胺转载体基因表达的影响第三军医大学新桥医院心内科（重庆６３００３７）；１第三军医大学病理生理教研室刘健王培勇１何作云目的：观察肺动脉内皮细胞（ＰＡＥＣ）和肺动脉平滑肌细胞（ＰＡＳＭ）在无氧（０％Ｏ２＋９...     

脑缺血／再灌注后大鼠海马GABA,AchE水平和迟发性神经元损害…

为探讨海马ＧＡＢＡ，ＡｃｈＥ和迟发性神经元损害的关系，观察了脑缺血／再灌注后大鼠海马亚区ＧＡＢＡ含量，ＡｃｈＥ活性和海马组组织病理改变。发现再灌注５ｍｉｎ，海马亚区ＧＡＢＡ含量显著升高，再灌注１ｈ和６－１２ｈ，ＧＡＢＡ含量明显降低，ＣＡ１区更明显。再灌注５ｍｉｎ至１ｈ，海马亚区ＡｃｈＥ活性明显长高。再注４８ｈ后，光镜下见海马ＣＡ１区神经元出现缺血性改变，提示：（１）再灌注后，ＧＡＢＡ含量减少，海马     

皮质醇导致脓毒症大鼠TNF-α释放增加

目的：探讨皮质醇对脓毒症大鼠ＴＮＦ－α、ＩＬ－６释放的影响及其临床意义。方法：ＳＤ大鼠５８只,分为５组,Ａ、Ｃ组于盲肠结扎穿孔ＣＬＰ后每１２ｈ皮下注射氢化可的松（３０ｍｇ／ｋｇ）,Ｂ、Ｄ组于ＣＬＰ后同时点注等量生理盐水,Ｅ组为对照组。Ａ、Ｂ组于４８ｈ,Ｃ、Ｄ组于２４ｈ处死,测定血及腹水中ＴＮＦ－α、ＩＬ－６含量和血中皮质醇水平。结果：Ａ组死亡３例,余各组无死亡。Ａ组血浆皮质醇和ＴＮＦ含量均显著高于Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ组（Ｐ＜００５）。Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ组腹腔液中ＴＮＦ－α含量显著高于Ｅ组（Ｐ＜００５）。所有大鼠腹腔液中ＴＮＦ－α、ＩＬ－６含量均显著高于血浆（Ｐ＜００５）。结论：脓毒症时,应用皮质醇可使血浆ＴＮＦ－α含量升高,且随作用时间延长ＴＮＦ－α升高愈显著,并伴有动物死亡率增加。但对血浆及腹腔液中ＩＬ－６含量无显著影响。     

大鼠脊髓损伤后内皮素含量的变化

将３６例大鼠随机分为６组：对照组、致伤后３０ｍｉｎ、２、４、８和２４ｈ组，以Ａｌｌｅｎ氏法制备中度（５０ｇ·ｃｍ）脊髓损伤（ＳＣＩ）模型，测定各组脊髓组织和血中内皮素（ＥＴ）含量。结果表明，ＳＣＩ后各组伤段脊髓组织ＥＴ明显升高，２ｈ达到高峰，与对照组比较均有显著性差异（Ｐ〈０．００５），血ＥＴ变化与对照组比较无显著性差异（Ｐ〉０．０５）。推测ＥＴ可能通过多种途径参与ＳＣＩ后的继发损伤。     

组织型纤溶酶原激活物单克隆抗体的研制及其特性鉴定

目的：为应用ｔ ＰＡ单克隆抗体建立ＥＬＩＳＡ法检测ｔ ＰＡ含量以及研究ｔ ＰＡ功能和结构的关系。方法：运用杂交瘤技术成功地研制５株ｔ ＰＡ单克隆抗体，并进行较系统的免疫特性的鉴定。结果：５株单抗特异性高，与ｕ ＰＡ、ＰＬＧ、Ｆｇ、Ｆｂ、ＢＳＡ均无交叉反应；亲合力强１Ｈ４＞３Ｃ１０＞５Ｈ１０＞４Ｅ６＞４Ｃ６；腹水效价５×１０－６～１×１０－７；免疫球蛋白亚类为ＩｇＧ１和ＩｇＧ２ａ；５株单抗中，３Ｃ１０和１Ｈ４可明显抑制ｔ ＰＡ活性，而５Ｈ１０、４Ｅ６、４Ｃ６则对ｔ ＰＡ活性无明显影响。结论：为进一步应用这些单抗作为研究手段提供了基础。     

香烟烟雾抽提物对肺动脉内皮细胞环氧合酶，血栓素合成酶mRNA水平及PGI_2，TXA_2生成的影响

本实验应用放免测定及分子杂交技术观察了香烟烟雾抽提物（ＣＳＥ）对培养的猪肺动脉内皮细胞环氧合酶，血栓素合成酶基因表达和ＰＧＩ＿２，ＴＸＡ＿２生成的影响，进一步从分子水平探讨由内皮细胞产生的前列腺素在ＣＳＥ影响肺血管张力和ＨＰＶ中的作用。结果发现：在常氧或缺氧下，ＣＳＥ可促使内皮细胞环氧合酶—１ｍＲＮＡ水平升高于对照组的１．５倍，而环氧合酶—２ｍＲＮＡ则分别比对照组高２倍和１倍。同时在常氧或缺氧时，ＣＳＥ使内皮细胞条件培养基中６—ｋｅｔｏ—ｐＧＦｌａ．明显高于对照组（Ｐ＜０．０５）。然而，不论常氧或缺氧时，ＣＳＥ不影响血栓素合成酶基因表达和ＴＸＡ２的生成。提示在常氧和缺氧时，ＣＳＥ所致的环氧合酶ｍＲＮＡ水平升高及ＰＧＩ２增加介导了猪吸烟时肺血管张力和ＨＰＶ的降低。     

免疫应答期间大鼠脑内乙酰胆碱酯酶活性的变化

用绵羊红细胞（ＳＲＢｃ）免疫大鼠，在免疫后第３天至第６天，使用光电比色法检测大鼠海马、下丘脑、丘脑、中脑和脑桥内乙酰胆碱酯酶（ＡＣｈＥ）活性的变化。结果表明，海马和下丘脑中ＡＣｈＥ活性在免疫后第３天至第６天均显著低于对照组；而丘脑、中脑和脑侨内ＡＣｈＥ活性与对照组比较均无明显差异。由此提示：在体液免疫应答期间，海马和下丘脑中ＡｃｈＥ活性降低，亦即以上两脑区中乙酰胆碱（ＡＣｈ）含量可能增加。我们以往的实验说明，中枢ＡＣｈ可调节体液免疫应答。综合两者结果，可以推测在中枢ＡＣｈ与免疫之间存在着相互作用。