脑创伤对大鼠学习记忆功能的影响

目的：观察ＴＢＩ后大鼠主动性条件回避反应（ＡＣＡＲ———穿梭箱实验，ｓｈｕｔｌｅｂｏｘｔｅｓｔ）及被动性条件回避反应（ＰＣＡＲ———步入与步下实验，ｓｔｅｐｔｈｒｏｕｇｈａｎｄｓｔｅｐｄｏｗｎｔｅｓｔ）的变化。方法：用２０ｇ重物从不同高度垂直坠落至大鼠一侧暴露的硬脑膜复制脑创伤（ＴＢＩ）模型。结果：重度ＴＢＩ后大鼠ＡＣＡＲ的习得率和保持率均出现下降，ＰＣＡＲ的步入和步下潜伏期缩短；轻度ＴＢＩ后仅表现出ＡＣＡＲ的习得率降低。结论：ＴＢＩ易导致脑高级功能障碍，其受损程度与原发伤情有关。     

应用YAC探针进行荧光原位杂交检测慢性粒细胞白血病BCR基因重排

为检测慢性粒细胞白血病（ＣＭＬ）中ＢＣＲ基因重排，采用酵母人工染色体（ＹＡＣ）ＤＮＡ的Ｉｎ－ｔｅｒ－Ａｌｕ－ＰＣＲ产物为探针进行荧光原位杂交（ＦＩＳＨ）研究了１０例ＣＭＬ，其中包括初诊患者２例，ＣＭＬ急变并接受化疗２例，α干扰素治疗２例，自体骨髓移植术（ＡＢＭＴ）后３例和Ｐｈ染色体阴性ＣＭＬ１例。同时进行细胞遗传学和ＲＴ－ＰＣＲ检测。结果：９例ＣＭＬ的４６％～１００％的可分析核型显示ｔ（９；２２）易位，其中携带ｔ（９；２２）细胞最少者为１例自体骨髓移植术后８个月的患者，其６４％的分裂相存在ｔ（９；２２），３６％为正常核型；１例Ｐｈ（－）ＣＭＬ未见ＢＣＲ基因易位，而ＲＴ－ＰＣＲ（＋），提示ＡＢＬ基因片段插入２２ｑ１１，造成隐匿性Ｐｈ染色体。结果表明：应用ＹＡＣ探针进行原位杂交的定位明确。ＦＩＳＨ检测微小残留病（ＭＲＤ）比常规细胞遗传学方法更敏感，而且可以完成ＰＣＲ方法不易进行的定量分析。     

大鼠心肌缺血及再灌时血浆蛋白C的变化

复制大鼠心肌缺血再灌模型，观察血浆抗凝因子蛋白Ｃ（ＰＣ）的活性变化及血浆ＰＡＩ和ｔ－ＰＡ的活性，同时监测心电图、血清ＬＤＨ、ＳＧＯＴ和心脏病理学改变。结果表明，心肌缺血时ＰＣ活性明显降低（与对照组比Ｐ＜０．０５），随着缺血时间延长，ＰＣ活性呈现进一步下降。此外，ｔ－ＰＡ活性的变化规律与ＰＣ相同，ＰＡＩ则与ＰＣ相反。缺血再灌后ＰＣ、ｔ－ＰＡ和ＰＡＩ活性都略有恢复。提示，ＰＣ活性降低参与急性心肌梗塞（     

细胞内Retinoid结合蛋白mRNA水平在生精过程中的周期性变化

目的 研究大鼠睾丸细胞内视黄醇结合蛋白－Ｉ（ＣＲＢＰ－Ｉ）及细胞内视黄酸结合蛋白－Ⅱ（ＣＲＡＢＰ－Ⅱ）ｍＲＮＡ水平与曲细精管生精上皮周期的相关关系。方法 分别以地高辛标记的大鼠ＣＲＢＰ－Ｉ及ＣＲＡＢＰ－ⅡｃＤＮＡ探针在ＳＤ大鼠睾丸冰冻切片上进行原位杂交,应用激光密度扫描系统对阳性信号进行定量。结果 ＣＲＢＰ－Ｉ及ＣＲＡＢＰ－Ⅱ ｍＲＮＡ在支持细胞（ｓｅｒｔｏｌｉ ｃｅｌｌ,ＳＣ）中表达。ＣＲＢＰ－     

DNA修复蛋白MGMT基因的克隆及转导脐血CD23^＋细胞后耐药特征的研究

目的：增强脐血ＣＤ３４＾＋造血细胞对化疗药物的耐药表型,探讨逆转录病毒介导的基因转移效率和耐药基因特性,以及在脐血造血干细胞保护性基因治疗中的作用和意义。方法：应用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）从人肝细胞中获得编码六氧甲基鸟嘌呤－ＤＮＡ－甲基转移酶（Ｏ＾６－ｍｅｔｈｙｌｇｕａｎｉｎｅ－ＤＮＡ－ｍｅｔｈｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ,ＭＧＭＴ）ｃＤＮＡ;利用基因重组技术,将其克隆于ｐＧＥＭ－Ｔ质粒载体并构建了逆转录病毒载体Ｇ１Ｎａ－ＭＧＭＴ;应用脂质体ＬｉｐｏｆｅｃｔＡＭＩＮＥ基因转移法将后者导入ＧＰ＋Ｅ８６和ＰＡ３１７病毒包装细胞,以卡氮芥１,３－Ｂｉｓ（２－Ｃｈｌｏｒｏｅｔｈｙｌ）－１－Ｎｉｔｒｏｓｏｕｒｅａ（ＢＣＮＵ）加压筛选后的阳性克隆上清经乒乓效应后继而感染脐血ＣＤ３４＾＋细胞。应用ＰＣＲ,Ｓｏｕｔｈ     

Iloprost对内皮细胞抗血栓功能的影响

以体外培养的猪主动脉内皮细胞（ＥＣ）为模型研究Ｉｌｏｐｏｓｔ对ＥＣ抗血栓功能的影响。用放免法、发色底物法测定培养液中６－酮－ＰＧＦ１α（６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦ１α），血栓素Ｂ２（ＴＸＢ２）含量，纤溶酶原激活物（ＰＡ），纤溶酶原激活物抑制物（ＰＡＩ）活性及ＥＣ环磷酸腺苷（ｃＡＭＰ）含量。结果表明：Ｉｌｏｐｒｏｓｔ中以使ＥＣ生成６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦ１α，ｃＡＭＰ含量显著增多，ＴＸＢ２含量显著减少，并使Ｐ     

人B7-1(CD80)逆转录病毒表达载体的构建及其在人肿瘤细胞系的表达

应用分子克隆技术，构建了含全长人Ｂ７－１ｃＤＮＡ（８６７ｂｐ）的逆转录病毒表达载体ｐＬＮＣ－ｈＢ７－１。以ｐＣＤＭ８－ｈＢ７－１为模板，５＇引物为：ＡＣＣＣＴＡＡＧＣＴ，ＴＣＴＧＡＡＴＴＣＡＴＧＧＧＣＣＡＣＡＣ，内含ＨｉｎｄⅢ切点及起始密码ＡＴＧ，３’引物为：ＣＴＴＣＴＧＣＧＴＴＡＡＣＴＧ－ＴＴＡＴＡＣＡＧＧＧＣＧＴＡＣ，内含ＨｐａＩ切点和终止密码ＴＡＡ，经ＰＣＲ扩增及电泳回收后得到纯化ＰＣＲ产物，用内切每ＨｉｎｄⅢ和Ｈｐａｌ消化后，定向插入经同样内切酶消化的ｐＬＮＣＸ载体，获得含人Ｂ７－１ｃＤ…     

结核性淋巴结炎的“结节病”样变型

对１２例经病理学专家会诊、从病变上认定的淋巴结“结节病”石蜡包埋组织，应用结核杆菌ＤＮＡ特异性序列片段的聚合酶链反应（Ｍ．ＴＢ－ＰＣＲ）技术、ＢＣＧ免疫组化（ＢＣＧ－ＩＨＣ）技术和抗酸染色（ＡＦ）进行了分支杆菌／结核杆菌检测。在这１２例考虑为“结节病”的病例中：有１例呈ＢＣＧ－ＩＨＣ和Ｍ。ＴＢ－ＰＣＲ两项阳性；另１例呈ＡＦ、ＢＣＧ－ＩＨＣ和Ｍ．ＴＢ－ＰＣＲ三项阳性。研究结果提示：（１）某些结核性淋巴结炎可呈结节病样病变；（２）淋巴结结节病很可能与分支杆菌／结核杆菌感染有关。     

血清和卵泡液中抗精子抗体对体外受精——胚胎移植的影响

目的 评价女性抗精子抗体对体外受精－－胚胎移植（ＩＶＦ－ＥＴ）的影响。方法 采用ＥＬＩＳＡ法测定施行ＩＶＦ－ＥＴ的妇女的血清和卵泡液中抗精子抗体（ＡｓＡｂ）。Ａ组：血清ＡｓＡｂ阳性１３例;Ｂ组：血清及卵泡液ＡｓＡｂ均阳性２９例;Ｃ组：ＡｓＡｂ阴性１５８例。分析３组受精率、卵裂率、胚胎发育情况及临床妊娠率和流产率的关系。结果：Ａ、Ｂ组受精率、卵裂率明显低于Ｃ组（Ｐ〈０．０１）。移植日,Ａ、Ｂ组Ⅰ－Ⅱ级胚胎率较Ｃ组低,Ⅳ级胚胎及２原核受精细胞增加（Ｐ〈０．０５）。各组妊娠率及流产率无显著差异（Ｐ〉０．０５）。结论 ＡｓＡｂ对ＩＶＦ和早期胚胎发育有损害,体外培养不能完全清除ＡｓＡｂ对ＩＶＦ－ＥＴ的影响。     

中年自发性高血压大鼠主动脉α1肾上腺素受体亚型的改变

目的：研究１２月龄Ｗｉｓｔａｒ大鼠与同龄自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）主动脉α１肾上腺。素受体（α１－ａｄｒｅｎｏｃｅｐｔｏｒ，α１－ＡＲ）亚型的分布。方法：采用离体灌流血管收缩功能实验和逆转录－多聚酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ）方法，结果：ＳＨＲ与同龄Ｗｉｓｔａｒ大鼠相比，ＢＭＹ７３７８拮抗去甲肾上腺素（ＮＥ）缩血管效应的ｐＡ２值显著增大，ｓｅｒｔｉｎｄｏｌｅ的ｐＡ２值显著减小，而ＷＢ４１０１的ｐＡ２值无显著变化。ＣＥＣ预处理引起ＮＥ累积浓度－收缩效应曲线右移的作用显著增大。主动脉α１－ＡＲ３种亚型的ｍＲＮＡ稳态水平无明显改变。提示１２月龄ＳＨＲ主动脉中介导ＮＥ缩血管效应的α１－ＡＲ由对照组的α１Ａ－ＡＲ与α１Ｄ－ＡＲ亚型变为以α１Ｄ－ＡＲ亚型为主，这种改变不发生在ｍＲＮＡ表达水平     

多重PCR检测急性非淋巴细胞白血病IgH及TCRVγI—Jγ基因重排

目的：为进一步了解急性非淋巴细胞白血病病人基因重排情况。方法：应用多重ＰＣＲ技术检测４１例ＡＮＬＬ病人ＩｇＨ及ＴＣＲＶγＩ－Ｊγ基因重排。结果：２６．８％（１１／４１）ＡＮＬＬ病人存在ＩｇＨ或／和ＴＣＲＶγＩ－Ｊγ基因重排,３例病人同时存在ＩｇＨ和ＴＣＲＶγＩ－Ｊγ基因重排;基因重排阳性ＡＮＬＬ治疗缓解率低于重排阴性ＡＮＬＬ病人。     

大鼠脊髓后角浅层初级伟入C纤维内μ阿片受体的免疫组织化学？…

目的 在光镜及电镜下观察大鼠脊髓后角内μ阿片受体（ＭＯＲ）与Ｃ纤维的关系，为进一步揭示阿片镇痛的突触机制提供形态学证据。方法 根据辣椒素对初级传入神经中Ｃ纤维的特异性神经毒性，在大鼠蛛网膜下腔注射辣椒素以毁损Ｃ纤维，用免疫组织化学ＡＢＣ法比较脊髓后内ＭＯＲ免疫反应性的变化，根据西非单叶豆同工凝集素Ｉ－Ｂ４（ｇｒｉｆｆｏｎｉａ ｓｉｍｐｌｉｃｉｆｏｌｉａ ｉｓｏｌｅｃｔｉｎ Ｉ－Ｂ４，Ｉ－Ｂ４）与初     

失血性休克再灌注损伤时血浆磷脂酶A2及其水解产物的变化

目的和方法：采用家兔失血性休克／再灌注（Ｓ／Ｒ）模型，以放射免疫法分析了动物血清中磷脂酶Ａ２及其活性产物血栓素（ＴＸＢ２）、前列环素（ＰＧＩ２）在损伤过程中的变化规律，同时观察了氯喹及其同类化合物磷酸萘酚喹、抗氧化剂黄芪酮对Ｓ／Ｒ损伤后上述ＰＬＡ２活性产物的影响。结果：氯喹可明显降低ＰＬＡ２，使ＴＸＢ２／ＰＧＩ２比值恢复于接近正常；磷酸酚喹和黄芪酮也可明显降低ＰＬＡ２，使ＴＸＢ２／ＰＧＩ２比值显著低于Ｓ／Ｒ损伤组：ＨＣＯ－３和ｔＣＯ２也得以接近于正常水平。结论：Ｓ／Ｒ过程中ＴＸＢ２的增高导致的ＴＸＢ２／ＰＧＩ２比值改变可能对循环有重要影响；氯喹类化合物及环氧化物酶抑制剂可能通过抑制ＰＬＡ２活性及降低ＴＸＢ２／ＰＧＩ２比值，促进全身循环和呼吸系统功能恢复正常     

用反向点杂交法对广东地区35例重型β地中海贫血患儿及双亲的基因突变研究

为探讨临床对β地中海贫血（β－地贫）的快速基因诊断方法，应用ＰＣＲ反向点杂交（ｒｅｖｅｒｓｅｄｏｔｂｌｏｔ，ＲＤＢ）技术，对广东地区３５例重型β地贫患儿及其双亲的基因突变特征进行了研究。结果显示：（１）广东重型β地贫基因突变可见７种类型：ＣＤ４１－４２（－ＴＣＴＴ），ＩＶＳ２ｎｔ６５４（Ｃ→Ｔ）。ＴＡＴＡｂｏｘ－２８（Ａ→Ｇ），ＣＤ１７（Ａ→Ｔ），βＥ（２６）（Ｇ→Ａ），ＣＤ７１－７２（＋Ａ）及ＣＤ１４－１５（＋Ｇ），其结构比依次为：４０％，２８．６％，１１．４％，７．１％，７．１％，７．１％，４．３％及１．４％，和１３种基因组合形式；（２）基因突变类型不同致临床表型不同，β°纯合子临床多表现重症，发病早（３～６个月），靠输血维持生命；β°／β－（Ｅ或－２８）双重杂合子多表现中间型或重型，发病年龄较晚，贫血较轻，输血较少，ＰＣＲ－ＲＤＢ技术不需依赖同位素、操作简便、快速，宜于临床推广应用。     

TGF—β上调在Wistar大鼠抑制EAMG发生中的重要作用

用ＡＣｈＲ加ＣＦＡ免疫大鼠后，Ｌｅｗｉｓ大鼠出现典型的临床肌无力，而ＷｉｓｔａｒＦｕｒｔｈ（Ｗ．Ｆ）大鼠不出现任何症状。为阐明Ｗ．Ｆ大鼠对ＡＣｈＲ耐受的机制，检测了表达ＩＦＮ－γ、ＩＬ－４和ＴＧＦ－βｍＲＮＡ的ＭＮＣ和肌肉ＡＣｈＲ。结果表明，Ｗ．Ｆ大鼠免疫后第５、７周ＰＩＬＮ中ＡＣｈＲ诱导的ＩＦＮ－γｍＲＮＡ表达细胞数比Ｌｅｗｉｓ大鼠低，ＴＧＦ－βｍＲＮＡ表达细胞数比Ｌｅｗｉｓ大鼠高，肌肉ＡＣｈＲ含量比Ｌｅｗｉｓ大鼠高。提示ＩＦＮ－γ和ＴＧＦ－β与ＥＡＭＧ的发生有关，ＴＧＦ－β上调可抑制ＩＦＮ－γｍＲＮＡ表达，减少肌肉ＡＣｈＲ丢失，进而预防和抑制ＥＡＭＧ发生     

12月龄自发性高血压大鼠心脏α1肾上腺素受体亚型的改变

目的和方法：采用１２５Ｉ－ＢＥ２２５４放射配基结合实验和离体灌流左心房收缩功能实验，观察１２月龄自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）心脏α１肾上腺素受体（α１－ＡＲ）３种亚型的分布及其介导的正性变力效应的改变。结果：ＳＨＲ与年龄匹配的Ｗｉｓｔａｒ大鼠相比，（１）心脏α１－ＡＲ最大结合容量显著增加；去甲肾上腺素（ＮＥ）通过激动α１－ＡＲ引起的累积浓度－收缩效应曲线显著左移；（２）ＢＭＹ７３７８和ＷＢ４１０１的高亲和性位点所占百分比显著增大，而（＋）ｎｉｇｕｌｄｉｐｉｎｅ不变；（３）经ＣＥＣ预处理引起ＮＥ累积浓度－收缩效应曲线右移的程度显著增加，ＢＭＹ７３７８和ＷＢ４１０１拮抗ＮＥ介导正性变力效应的ｐＡ２值均显著增大。结论：ＳＨＲ较同龄Ｗｉｓｔａｒ大鼠心脏α１－ＡＲ总数增多，对ＮＥ的敏感性显著增高，α１Ｄ－ＡＲ不仅数量增多，而且在介导收缩效应中的作用亦显著增大。     

结核性淋巴结炎的组织细胞反应性增性变型

应用结核杆菌ＤＮＡ１２３ｂｐ特异性序列片段为靶序列的多聚酶链反应（Ｍ．ＴＢ－ＰＣＲ）技术，ＢＣＧ免疫组化（ＢＣＧ－ＩＨＣ）技术和抗酸染色（ＡＦ）方法，对３８例呈现组织细胞反应性增生－碎屑样坏死－嗜中性白细胞渗出病变的淋巴结石蜡包埋组织进行了分支杆菌／结核杆菌的回顾性检测。三种方法的综合阳性率为５２．６％（２０／３８例）。ＡＦ，ＢＣＧ－ＩＨＣ和Ｍ．ＴＢ－ＰＣＲ物各自性率分别为０．８％，２６．３％和５     

人朊蛋白基因外显子Ⅰ及其上游序列具有启动子样活性

目的 鉴定朊蛋白（ＰｒＰ）基因转录启动子位置。方法 利用聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增人ＰｒＰ基因外显子Ⅰ及其上游序列，序列鉴定后插入ＣＡＴ报道质粒ｐＢＬ－ＣＡＴ６，分别转染ＨｅＬａ、ＣＯＳ７和Ｓｈ－ｓｙ５ｙ细胞系，检测ＣＡＴ表达值；提取三种细胞蛋白，以条带移动实验检测细胞转录激活因子ＳＰ１含量。结果 人ＰｒＰ基因外显子Ｉ及其上游序列为ＧＣ富含，带有多个ＳＰ１可能性综合位点，但无明显ＴＡＴＡ盒；瞬时转染结果显示这段序列可诱导２～３倍的ＣＡＴ表达增强；定量移动条带实验证明ＨｅＬａ细胞中含有较高浓度的ＳＰ１，而ＣＯＳ７和Ｓｈ－ｓｙ５ｙ细胞中ＳＰＩ含量极低。结论 人ＰｒＰ基因外显子Ｉ及其上游序列具有启动子样功能，为弱的非ＴＡＴＡ盒启动子；不同组织来源的细胞中ＳＰ１含量不同，在神经细胞系Ｓｈ－ｓｙ５ｙ中人ＰｒＰ基因外显子Ｉ     

培养的大鼠血管平滑肌细胞血管紧张素Ⅱ受体的基因表达及调节

在培养的自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）和正常血压ＷＫＹ大鼠的主动动脉平滑肌细胞（ＡＳＭＣ）模型，应用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交和逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术，分别检测ＡＳＭＣ中碱性成纤维细胞生长因子（ｈＦＧＦ）和血管紧张素Ⅱ（ＡＮＧⅡ）Ｉ型受体（ＡＴ１Ｒ）的基因表达。结果表明：ＳＨＲＡＳＭＣ中ｈＦＧＦ基因的基础表达和ＡＮＧⅡ刺激后的表达水平元旦明显高于ＷＫＹ大鼠；ｂＦＧＦ（１０ｎｍ／ｍｌ）对两种     

大鼠β-防御素rBD-1基因在皮肤和肾脏固有表达

设计大鼠β－防御素ｒＢＤ－１ｃＤＮＡ序列一对特异引物：Ｒ１５′→３′ＡＣＴＣＴＧＧＡＣＣＣＴＧＡＣＴＴＴＣＡＣＣＧ;Ｒ２５′→３′ＣＣＣＴＴＧＣＴＴＧＴＣＣＴＴＴＡＴＧＴＣＣ。根据大鼠β－ａｃｔｉｎｃＤＮＡ序列设计一对阳性对照特异引物：Ｂ１５′→３′ＡＧＣＴＧＡＧＡＧＧＧＡＡＡＴＣＧＴＧＣＧ;Ｂ２５′→３′ＧＴＧＣＣＡＣＣＡＧＡＣＡＧＣＡＣＴＧＴＧ。引物由Ｇｉｂｃｏ公司合成。从Ｗｉｓｔａｒ大鼠皮肤、肾脏、气管、子宫颈、膀胱、小肠、脾脏、骨骼肌、骨髓及腮腺组织中提取总ＲＮＡ,行ＲＴ－ＰＣＲ扩增…