聚合酶链反应技术诊断念球菌的进展

多聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测无菌源（血液、脑脊液、腹腔液）标本诊断念球菌病方面发展迅速。本文简述了念球菌的引物设计、破壁和ＤＮＡ提取技术，ＰＣＲ及其产物检测方法，ＰＣＲ的注意事项等方面的研究进展。     

利用聚合酶链反应快速检测结核杆菌

利用聚合酶链反应快速检测结核杆菌黄士猷，黄锋庆，杨平目前，聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术在结核菌检测方面已得到了应用，它具有快速，特异性高，敏感性强等优点。现仅就我们利用ＰＣＲ检测患者标本中结核杆菌的研究报告于下：－、材料与方法１．材料：（１）标本来源：...     

PCR检测乙型肝炎患者血清HBV DNA

ＰＣＲ检测乙型肝炎患者血清ＨＢＶＤＮＡ湖南省儿童医院（４１０００７）李梨平湖南中医学院第一附属医院（４１０００７）王伟华本文应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术直接检测病毒性肝炎患者血清中的ＨＢＶＤＮＡ，以探讨ＰＣＲ技术在ＨＢＶ感染诊断中的应用以及ＨＢＶＤ...     

PCR法检测乙肝病毒携带者与ELISA法的比较

ＰＣＲ法检测乙肝病毒携带者与ＥＬＩＳＡ法的比较吴新科（滁州市医学科学研究所２３９００１）聚合酶链反应（ＰＣＲ）是模拟天然ＤＮＡ复制过程的体外基因扩增技术，具有高度的特异性、选择性和敏感性，现已广泛用于临床诊断。本文通过ＰＣＲ检测乙肝病毒（ＨＢＶ－ＤＮ...     

多聚酶链反应技术及其临床应用

多聚酶链反应技术及其临床应用江西省九江市传染病医院（江西３３２０００）魏孟贵，陈春晖１多聚酶链反应（ＰＣＲ）技术原理分子探针技术相当敏感，可以测到Ｐｇ水平；但是，最近发展起来的ＰＣＲ更为敏感，可以使ＤＮＡ检测的灵敏度达到Ｆｇ水平。ＰＣＲ扩增ＤＮＡ的过...     

PCR技术应用于霍乱监测的效果探讨

为探讨ＰＣＲ 检测技术在霍乱监测中的应用价值，应用ＰＣＲ 技术与培养法平行检测各类标本８６４ 份，结果ＰＣＲ 检出阳性率为７．４１ ％ ，明显高于培养法的４．５１ ％ （χ２ ＝ ５．９５ ，Ｐ＝ ０．０１４７ ＜ ０．０５） 。其中健康接触者ＰＣＲ检出率为１３．７３ ％ ，明显高于培养法的１．９６ ％ （χ２ ＝ ４．８８ ，Ｐ＜ ０．０５） ；水标本ＰＣＲ检出率９．２３ ％ ，也明显高于培养法的４．７６ ％ （χ２ ＝ ４．４８ ，Ｐ＜ ０．０５） 。表明ＰＣＲ 法既特异又敏感、快速，在霍乱监测中有很好的应用前景，可在有条件的地方和单位推广应用     

PCR技术用于尘肺合并结核分子流行病学研究

本工作研究了灵敏度极高的聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术在结核杆菌基因诊断中的可靠性，以及尘肺者中结核杆菌感染率，经动物标本ＰＣＲ检测与尸体病理解剖结果对照研究，结核杆菌ＰＣＲ诊断技术特异性可达１００％，敏感性约６２．５％，准确度为８２．４％，９７例尘肺患者痰标本ＰＣＲ检测，发现结核杆菌感染率为２４．７％。     

动脉粥样硬化血管组织中的巨细胞病毒感染

为探讨巨细胞病毒（Ｃｙｔｏｍｅｇａｌｏｖｉｒｕｓ，ＣＭＶ）感染与动脉粥样硬化的相关性，应用聚合酶链反应（ＰｏｌｙｍｅｒａｓｅＣｈａｉｎＲｅａｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ）技术及二次ＰＣＲ法对病例组２６例动脉粥样硬化血管组织石蜡标本和对照组２３例正常血管组织石蜡标本进行检测。结果：应用传统ＰＣＲ技术检测到病例组１７例ＣＭＶＤＮＡ阳性，阳性率为６５４％（１７／２６），对照组５例阳性，阳性率为２１７％（５／２３）；应用二次ＰＣＲ法检测到病例组２０例阳性，阳性率７６９％（２０／２６），对照组８例阳性，阳性率３４８％（８／２３）。结果表明，ＣＭＶ潜伏感染与动脉粥样硬化具有密切联系     

PCR与快速免疫法用于沙眼衣原体检测的比较

目的 探讨多聚酶链式反应（ＰＣＲ）在检测泌尿生殖道沙眼衣原体（ＣＴ）的应用价值。方法 １０３例病人分为症状组（７３例）和无症状组（３０例）应用ＰＣＲ和快速免疫法对其进行ＣＴ检测。结果 症状组２种检测结果差异无显性（Ｐ〉０．０５），而无症状组ＰＣＲ法阳性率显高于快速免疫法（Ｐ〈０．０５）。结论 ＰＣＲ可用于无症状患的沙眼衣原体检测。     

一步单管反转录PCR检测水中甲型肝炎病毒

以往甲型肝炎病毒（ＨＡＶ）的检测主要依赖细胞培养法，但此法所需时间长、敏感性低、特异性不强。虽然反转录ＰＣＲ等技术已被用于粪便或食品中ＨＡＶ的检测，但常规反转录ＰＣＲ操作繁琐、污染环节多，极易造成污染，致使实验结果不稳定或出现假阳性结果。为克服ＰＣＲ检测ＨＡＶ的缺点和不足，我们在实验基础上建立了一步单管反转录ＰＣＲ技术检测水中的ＨＡＶ，采用热裂解法提取样品中ＨＡＶ病毒的总ＲＮＡ，反转录与ＰＣＲ反应一步进行，整个反应在一个反应管中进行，操作方法较简单，中间可能污染的环节较少，因此，最大限度的减少了由环境造成的可能污染。我们设计合成的引物（Ｈ１—Ｈ２）在ＨＡＶ病毒核酸的ＶＰ１区，只特异地扩增ＨＡＶ核酸片断，具有较强的特异性。改进后的反转录ＰＣＲ的敏感性与常规反转录ＰＣＲ比有所提高，可检测到细胞培养悬液或水中１０个ＴＣＩＤ＿（５０）的ＨＡＶ。     

肠道病毒感染的快速诊断技术

肠道病毒（ＥＶ）感染的临床表现多样，用聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测ＥＶ具有快速、敏感和特异的优点，因此适用于ＥＶ感染的早期诊断。本文介绍的逆转录ＰＣＲ、套式ＰＣＲ、竞争性ＰＣＲ等方法在检测ＥＶ中各有特点，而且ＰＣＲ结合特异性ＥＶ引物、抗原捕获、限制性片断长度多态性分析及基因测序等方法还可进行ＥＶ分型。     

多基因PCR检测产毒性大肠杆菌和志贺氏菌的研究

为了提高普通的单基因ＰＣＲ检测致病性肠道杆菌的时效，采用ＥＴＥＣ４４８１３（ＬＴ）、ＥＴＥＣ１９４４９（ＳＴ）和福氏２ａＴ３２（ｉｐａＨ）３个标准株为模板，建立了检测产毒性大肠杆菌（ＬＴ，ＳＴ）和志贺氏菌的三基因ＰＣＲ方法。并分别用相应单基因ＰＣＲ方法标记的探针斑点杂交标准株ＥＴＥＣ４４８１５（ＬＴ）、工程株ＰＳＬＭ００４（ＳＴ）和标准株４８０２５１１（ｉｐａＨ）。杂交的结果都是阳性，证实了这个多基因ＰＣＲ扩增是特异的。并用此三基因ＰＣＲ反应系统检测１１３株ＥＴＥＣ和志贺氏菌，结果是ＬＴ２５株、ＳＴ１６株、ＬＴ和ＳＴ共３０株及ｉｐａＨ４２株。在几种病原体可能共存的样本中，用一次ＰＣＲ就能解决病原体的检测和鉴别问题，比单基因ＰＣＲ更快速、经济。     

聚合酶链反应斑点杂交技术在临床乙型肝炎病毒检测中的应用

利用半抗原地高辛配基（ｄｉｇｉｘｉｇｅｎｉｎ）制备非同位素标记探针技术，分别标记乙型肝炎病毒全基因作者单位：１１０００６沈阳市传染病院中心研究室（孙峥嵘、郑志红、刘桂荣、胥婧、鲁润铭）；中国医科大学微生物教研室（刘兵、王桂珍）探针（ＤＩＧ－ＨＢＶＤＮＡ）及乙型肝炎病毒ＰＣＲ产物Ｃ区探针〔ＤＩＧ－ＨＢＶ（Ｃ／ｐｒｅＣ）〕，经斑点杂交检测血清ＨＢＶＤＮＡ及血清聚合酶链反应（ＰＣＲ）产物，与ＰＣＲ平行检测１２２份血清标本。实验中以ＤＩＧ－ＨＢＶ（Ｃ／ｐｒｅＣ）为探针，即ＰＣＲ－斑点杂交方法直接标记纯化…     

关于聚合酶链反应（PCR）产物凝胶检测的体会

关于聚合酶链反应（ＰＣＲ）产物凝胶检测的体会广西壮族自治区卫生防疫站（南宁５３００２１）刘巍，古绍文，王树声自从１９８５年ＫａｉｖＭｕｌｌｉｓ等［１］创立聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术以来，此种基因研究的新方法已经在许多科学领域得到广泛应用，目前许多资料...     

应用PCR技术对我院环境HBVDNA的调查

应用ＰＣＲ技术对我院环境ＨＢＶＤＮＡ的调查文细毛，徐秀华，任南，王曼平为了解我院环境乙型肝炎病毒（乙肝病毒）污染情况，我们于１９９４年１０月采用聚合酶链反应（Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ）技术检测和寻找我院环境中存在的乙型肝...     

PCR－SSCP：一种检测突变的方法

聚合酶链反应－单链构象多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）分析是建立在ＰＣＲ技术基础上的用于检测突变的简便、灵敏的方法。本文综述了这项技术的原理、方法及最新进展，并与现在广泛使用的其它检测基因突变的方法进行了比较。     

用Logistic回归模型预测血清中HBV—DNA的活动性

多聚酶链反应（简称ＰＣＲ）技术检测血清中ＨＢＶ－ＤＮＡ的活动性具有很高的敏感性，但因自身的特点，应用受到限制。结合乙肝三系检测结果，用Ｌｏｇｉｓｔｉｃ回归模型配合ＰＣＲ检测结果具有较好的配合适度，在没有条件开展ＰＣＲ检测项目的情况下根据乙肝三系检测结果用Ｌｏｇｉｓｔｉｃ回归模型预测血清中ＨＢＶ－ＤＮＡ的活动性。     

PCR—SSCR：一种检测突变的方法

聚合酶链反应－单链构象多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）分析是建立在ＰＣＲ技术基础上的用于检测突变的简便、灵敏的方法。本综述了这项技术的原理、方法及最新进展，并与现在广泛使用的其它检测基因突变的方法进行了比较。     

PCR在诊断结核病中的应用

用几种方法对２０例结核病人进行检测。结果：ＰＣＲ阳性率９０％（１８／２０），ＥＬＩＳＡ６５％（１３／２０），结核杆菌培养２５％（５／２０），而痰涂片阳性率仅２０％（４／２０）。表明ＰＣＲ技术敏感性高，特异性强、快速、简便、有很高的临床诊断价值。     

PCR技术在卫生微生物检测中的应用

ＰＣＲ技术在卫生微生物检测中的应用叶怀庄，吴丽丽浙江医科大学公卫学院卫生检测中心杭州多聚酶链式反应（ＰｏｌｙｍｅｒａｓｅＣｈａｉｎＲｅａｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ）［１］是近年来分子生物学领域中一项具有革命性的技术突破，是基于天然ＤＮＡ复制的规律而设计的一种...