非程控降温,—80℃冻存自体外周血干细胞的研究

目的：观察非程控降温、－80℃冻存的方法对自体外周血十细胞（APBSC）的保存效果。方法：以6％羟乙基淀粉（HES）、5％二甲基亚砜（DMSO）及4％人血白蛋白（ALB）的混合物为冷冻防护剂，将APBSC直接置于－80℃下保存，冻存前反复苏后测定APBSC的CFU－GM、BFU－E；观察移植后造血功能重建情况。结果：13例患者白细胞在十3～＋7天下降至（0．0～0．1）×10／L，白细胞（0．0～0．2）×109／L持续时间3～6天，于＋9～＋11天恢复至1．0X109／L以上．中性粒细胞绝对值（ANC）于＋9～＋11天达到0．5X109／L。血小板在＋3～＋7天下降至（2．0～21）×109／L，于＋8～＋15天恢复至20×109／L以上。CFU－GM、BFU－E回大率分别为76．5％、78．4％。结论：非程控降温、－80℃冻存是一简便、经济、有效的自体外周血于细胞保存方法。     

5—羟色胺抗独特型单克隆抗体的功能鉴定

对5-羟色胺（5-HT）抗独特型单克隆抗体的功能进行鉴定．方法：细胞培养法，免疫组织化学ABC法和形态计量法．结果：培养平滑肌细胞显示5-HT受体免疫反应阳性，在正常培养基培养的平滑肌细胞的平均长度为（18．8±35．4）μm．培养基中含不同浓度的5-HT抗独特型单克隆抗体（分别为0．01％，0．03％，0．10％，0．30％，1％抗体原液），平滑肌细胞的平均长度分别缩短为（175．6±43．3）μm，（16．2±46．2）μm，（116．9±25．8）μm，（89．5±22．8）μm，（79．9±21．6）μm，除含0．01％抗体原液组外均比正常组有非常显著的差别（P＜0．01）．结论：该抗独特型单克隆抗体具有与5-HT相类似的诱导平滑肌收缩的功能，5-HT受体可能介导了这种功能．     

液相色谱-串联质谱法测定尿中乳果糖、甘露醇和乳糖含量

目的建立液相色谱-串联质谱法（LC-MS／MS）测定人尿中乳果糖、甘露醇和乳糖含量。方法尿样用水和乙腈直接稀释后，以LunaNH2（100×2．0mm，5μm）为分析柱，乙腈-水（80：20，v／v）为流动相，0．3mL／min流速进行色谱分离。采用负离子化电喷雾、多反应监测（MRM）扫描方式进行质谱定量分析，离子通道选择m／z为：甘露醇181．1／88．9，乳果糖和乳糖341．3／160．9，内标353．4／166．9。结果甘露醇、乳果糖、乳糖和内标的保留时间分别为2．9、4．1、4．7和4．7min。在0、1～40μg／mL浓度范围内线性关系良好（r≥0．9980）。最低定量限分别为0．1μg／mL（甘露醇、乳果糖）和0．2μg／mL（乳糖）。日内、日间精密度（CV％）分别为0．60％～4．31％、2．55％～7．71％，准确度分别为86．4％～107．6％、95．9％～102．9％。回收率为84．7％～105．5％。结论该方法的样品处理简单快速，检测专一灵敏、准确可靠，可用于肠通透性评价中甘露醇及乳果糖的含量测定。     

冠心病患者妊娠相关血浆蛋白A含量与血管内皮功能关系探讨

 【目的】探讨冠心病患者血循环妊娠相关血浆蛋白A（PAPP—A）水平与内皮功能的关系。【方法】64例冠心病患者，其中稳定型心绞痛组34例，急性冠脉综合征组30例，分别检测其相关内皮功能，包括肱动脉血流介导的血管舒张反应（FMD）和高敏C-反应蛋白（hs—CRP）、内皮素（ET）、一氧化氮（NO）水平，并用酶联免疫法检测血清PAPP—A。【结果】稳定型心绞痛组患者同急性冠脉综合征组相比PAPP—A[（6×10^-3±5×10^-1U／L与（19×10^-3±13×10^-3）U／L，P〈0．05]、hs-CRP[（0．5±0．3）mg／L与（3．6±2．2）mg／L，P〈0．01]、NO[（57±4）μmol／L与（45±5）μmol／L，P〈0．05]和FMD（6．0％±0．8％与3-3％±1．2％，P〈0．05）的差异有统计学意义。逐步选择多重回归分析，按α=0．10水准，发现PAPP—A与hs—CRP和FMD存在直线关系，Lnhs—CRP的偏相关系数为0．333（95％置信区间：0．138-0．527，P〈0．01），FMD的偏相关系数为-0．623（95％CI：-1．144—0．102，P〈0．051，其中常数项为5．570。高PAPP—A（〉11．094×10^-3U／L）患者hs—CRP明显增高[（5．3±4．2）mg／L与（1．3±0．6）mg／L，P〈0．01），FMD则降低（3.3％±2．4％与6．2％±3．6％，P〈0．05）。【结论】PAPP-A可作为间接评估冠心病患者血管内皮功能的指标之一。     

新型硫—卤玻璃的形成和性质

研究了新型Ａｓ＿２Ｓｅ＿３－ＧｅＴｅ－Ｃｕｌ系统玻璃形成区，制备了一系列不同ＣｕＩ或ＧｅＴｅ含量的玻璃，并测定其转变温度、密度、显微硬度、断裂韧性、膨胀系数、红外透过率和反射率。结果表明：该系统玻璃的形成范围很大，玻璃转变温度在１７０～２３０℃，显微硬度在１３０～１９０ｋｇ／ｍｍ￣２，断裂韧性在０．３０～０．５０ＭＮ／ｍ￣（３／２），膨胀系数在１４５×１０￣（－７）～２１５×１０￣（－７）℃，红外透过截止波长超过１９μｍ，反射率在２０％左右。并初步从结构的观，或讨论了玻璃性质变化的规律。     

豚鼠、兔气管壁淋巴管的分布

为观察豚鼠和兔气管淋巴管的分布特征及超微结构，本文应用淋巴管间接注射、光镜和电镜观察及计算机图像分析的方法进行了研究。结果表明，两种动物气管淋巴管结构、分布相似。粘膜层仅存在丰富的毛细淋巴管，粘膜下层、肌层、外膜层有毛细淋巴管和淋巴管分布。在320张组织切片中，淋巴管检出李豚鼠为36％；兔为23％（P＜0．01）。淋巴管的平均最大直径豚鼠为22．6±14．1μm（x±s）；兔为23．7±14．9μm（x±s）。体密度豚鼠为2．05±0．49μm3／μm3×10－3（x±Sx）；兔为1．29±0．40μm3／μm3×10－3（x±Sx）。截面密度豚鼠为5．89±1．20Ly／mm2（x±Sx）；兔为2．32±0．58Ly／mm2（x±Sx）。豚鼠气管淋巴管比兔的丰富。超微结构，毛细淋巴管的壁均由一层内皮细胞围成，基膜不完整或缺乏，无周细胞和孔窗。内皮细胞间连接形式可分为端端、重叠和嵌合连接。内皮细胞胞质内有大量囊泡。     

BALB／c鼠自身免疫性睾丸炎动物模型的制作

 【目的】探讨BALB／c鼠睾丸炎动物模型的建立方法，观察睾丸炎形成后到生殖功能恢复的时间间隔，以及该动物模型的稳定性。【方法】BALB／c小鼠（10周）背脊皮下注射睾丸混悬液0．1mL，浓度2×10^7／mL，1次/周，共4次。同种睾丸混悬液（组1）、同种睾丸混悬液加完全免疫佐剂（组2）、异种睾丸混悬液（组3）、异种睾丸混悬液加完全免疫佐剂（组4）、空白对照（组5）。【结果】组3建模成功率80％，第5、8、11周按Johusen评分为5．2±1．44、6．2±0．79、8．1±0．87，组1、2、5评分均在9．0以上，组3生精功能明显降低（P〈0．05）。组4小鼠于第2次注射后3～5d，全部死亡。组3第5周生精上皮细胞减少至2～3层，曲细精管管腔中有稀疏的精子，间质出现水肿，淋巴细胞浸润约10％～25％。第5周组3附睾尾精子浓度为（11．0±6．2）×10^6，精子存活率（10．73±8．14）％，精子活动率（7．3±6．1）％，明显低于组1、2、5（P〈0．05），于第11周组3恢复至正常水平。睾丸炎生精障碍持续21～28d。【结论】异种小鼠生殖细胞可诱导建立BALB／c小鼠的EAO模型．模型有一定的持续稳定性，可用于精子发育生物学研究。     

侧柏中的抗血小板活化因子pinusolidic酸

作者等多年来从事于筛选韩国产药用植物中的血小板活化因子（PAF）抑制剂。曾从柏科植物侧柏Biotaorientalis（L．）Endl．中分得pinusolide和雪松醇（cedrol）2个化合物。其抑制PAF和免血小板受体结合的IC50分别为2．5×10－7mol／L[（0．87±0．009）μg／mL]和1．3×10－5mol／L[（2．9±0．79）μg／mL]。又经活性跟踪从该植物的枝叶中分得pi－nusolide的水解物pinusolidic酸（I，图1）。I为无色针状物，C20H28O4，mp132℃～133℃，[α]23＋54．5°（c，0．1，CHCl3）。作者认为这不是人为的产物，因为在CHCl3的总提取物和T…     

粗壮女贞的降压作用

粗壮女贞叶提取物静脉注射0．098、0．140和0．200g／kg可使麻醉大鼠的血压显著下降，峰值下降37．7％、38．6％和50．2％：灌胃给药（ig）1．36g／kgqd×3d，不影响清醒大鼠的血压。清醒自发性高血压大鼠ig1．08和2．16g／kgqd×5d，血压由24．3±0．5和24．3±0．6降至18．1±0．9和16．6±0．7kPa，降压作用显著（P＜0．001，＜0．001）；对清醒二肾-夹型高血压大鼠，ig粗壮女贞0．5g／kgqd×7d，血压由20．3±3．9降至16．2±3．9kPa，血压下降20％。以上结果提示具有降压作用。昆明小鼠急性毒性试验，ig49g／kg10d内动物生长良好，未出现死亡；腹腔注射5个剂量组（每组10只）按简化机率单位法测得LD502．64±0．21g／kg（P＝0．95）。     

染料车间废水中β－萘磺酸的室温磷光光度法测定

目的：测定工业废水中β－萘磺酸的含量。方法：支持物衬底室温磷光光度法。结果：方法的相对标准偏差为２．７１％，检测下限为４．２３×１０（－６）ｍｏｌ／Ｌ，检测线性范围为４．２３×１０（－６）～６．３２×１０（－５）ｍｏｌ／Ｌ。结论：本法可选择性地测定工业废水中β－萘磺酸的含量。     

白细胞介素—2测定对诊断结核性胸腹水的价值

用放射免疫分析法（ＲＩＡ）检测了６９例结核性和非结核性（癌性及漏出液）胸腹水中的白细胞介素—２（ＩＬ—２）。结果显示：结核组ＩＬ—２水平明显增高（７．２０±３．２６μｇ／Ｌ），与癌性胸腹水组（３．５２±２．５８μｇ／Ｌ）及漏出液组（１．６９±１．４１μｇ／Ｌ）比较差异有极高度显著性（Ｐ＜０．００１）。与胸腹水中腺苷脱氨酶（ＡＤＡ）呈正相关［ｒ＝０．３４，Ｐ（单侧）＜０．０５］，敏感度为８５．１９％，特异度为８５．３３％。提示用本法检测胸腹水中的ＩＬ—２水平对结核性胸腹水的诊断及鉴别诊断有重要意义。     

细胞凋亡及Bcl—2蛋白表达在胃癌发生中的意义

了解细胞调亡和Bcl－2蛋白表达在慢性胃炎、胃溃疡、胃粘膜不典型增生、胃癌中的规律和可能作用。方法：采用原位末端标记法（TUNEL法）检测细胞凋亡，采用免疫级化检测Bcl－2蛋白的表达。结果：慢性活动性胃炎、胃溃疡、轻度不典型增生、重度不典型增生、早期胃癌和进展期胃癌的凋亡指数分别为16．8±12．3％、24．1±20．0％、19．3±16．4％、15．7±15．2％、10．1±9．1％和6．3±6．0％，进展期胃癌显著低于早期胃癌和不典型增生（P＜0．05）。而Bcl－2蛋白阳性率分别为9．4％、27％．6％、52．9％、75．0％、83．3％和46．7％，早期胃癌显著高于进展期胃癌。在Lauren分型中，杨型和弥散型胃癌的细胞凋亡指数、Bcl－2蛋白的表达分别为8．3±7．2％、38．9％和5．1±4．9％、58．3％，两型比较，细胞调亡指数及Bcl－2蛋白表达均有显著差异（P＜0．05）。结论：在胃粘膜不典型增生、早期胃癌到进展期胃癌的发展中，细胞凋亡逐渐受到抑制。胃癌的形成与Bcl－2的高表达有关，而且主要的作用阶段可能在癌变早期。胃癌的Lauren分型与细胞凋亡指数及BcL－2蛋白表达密切相关。     

松果有效成分的研究Ⅳ.红松果多糖中酸性糖的含量测定

用硫酸-咔唑比色法测定了红松果多糖中酸性糖的含量，并考察了浓硫酸与咔唑的用量及反应温度、时间等因素对显色反应的影响，最大吸收波长520nm，测得酸性糖在1．0～7．0μg／ml浓度范围内与吸收度呈线性关系（r＝0．9999，n＝7），平均回收率为99．0％～99．8％，RSD为1．3％～2．3％（n＝6），最低检测浓度为0．05μg／ml。     

小剂量G—CSF对化疗引起的粒细胞减少症的治疗作用

应用小剂量（２μｇ／ｋｇ）粒细胞集落刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ）于１８例肺癌患者化疗中，以观察预防发生中性粒细胞减少症的疗效。其中小细胞肺癌５例，非小细胞肺癌１３例，随机分成Ｇ－ＣＳＦ组及对照组各９例，化疗方案为ＣＥ（卡铂－ＶＰ１６）。结果Ｇ－ＣＳＦ组粒细胞绝对计数（ＡＮＣ）＜２．０×１０９／Ｌ，发生例数５例，持续天数为３．６±３．５天；对照组持续天数１６．８±７．１天，Ｐ＜０．０５。ＡＮＣ最低值至恢复正常（ＡＮＣ＞２．０×１０９／Ｌ）的天数Ｇ－ＣＳＦ组及对照组分别为２．６±１．３天，８．９±５．３天（Ｐ＜０．０５）。Ｇ－ＣＳＦ组化疗后的第２０天ＡＮＣ均已恢复正常，ＡＮＣ为（９．７±６．８）×１０９／Ｌ故可在第２２天顺利接受第二周期化疗。对照组ＡＮＣ（１．６６±０．８）×１０９／Ｌ（Ｐ＜０．０１）。由此可见，小剂量Ｇ－ＣＳＦ能有效地防治肺癌化疗引起的粒细胞减少症     

小剂量粒细胞集落刺激因子联合叶酸治疗粒细胞减少症

目的探讨小剂量粒细胞集落刺激因子联合叶酸治疗粒细胞减少症的疗效。方法62例粒细胞减少症随机分成观察组（31例）和对照组（31例），观察组应用小剂量粒细胞集落刺激因子1μg／（kg·d）联合叶酸（30μg／d），对照组应用传统升粒细胞药物。结果观察组中性粒细胞绝对值由治疗前的0．60×109/L升至1．79×109/L，治愈率达77．24％，并且可以缩短粒细胞减少症临床感染持续时间，较对照组均有显著差异（P＜0．01）。结论小剂量粒细胞集落刺激因子联合叶酸治疗粒细胞减少症的疗效显著，宜于临床上推广应用。     

三羟异黄酮上调肝癌HepG2细胞PTEN基因的表达及其诱导凋亡作用

 【目的】探讨三磷酸肌醇（IB）和PTEN蛋白变化在三羟异黄酮（genistein）诱导肝癌细胞凋亡中的作用。【方法】以肝癌HepG2细胞培养72h为对照组，实验各组以60Ixmol／L三羟异黄酮作用于HepG2细胞不同时间后，应用同位素试剂盒检测细胞嵋含量，Western blot分析细胞PTEN蛋白表达，流式细胞仪检测细胞凋亡率。【结果】对照组Ib含量为（29．2±0．6）pmol／10^6 cells，PTEN蛋白与内参actin蛋白灰度和面积之积的比值V-PTEN／V-actin为0．12±0．00；细胞凋亡率为（2．6±0．1）％。三羟异黄酮作用于肝癌HepG2细胞12、24、48、72h后珉分别为（12．0±1．4）pmol／10^6cells，（7．5±0．8）pmol／10^4 cells，（5．6±0．5）pmol／10^6cells，（3．3±0．6）pmol／10^6 cells；V-PTEN，V-actin分别为13．13±0．20，19．17±1．09，28．51±2．18，41．12±3．80；细胞凋亡率分别为（2.7±0．2）％。（7．4±0．5）％，（20．5±2．0）％，（30．7±1．6）％。与对照组比，三羟异黄酮作用于肝癌HepG2细12h后各时相珉显著降低（P〈0．01），PTEN蛋白表达显著增高（P〈0．01），24h后各时相细胞凋亡率显著增高（P〈0．01）。【结论】三羟异黄酮能减少瑕生成，上调PTEN基因表达，诱导肝癌细胞凋亡。     

人白血病细胞裸鼠异种移植模型的建立

我们成功地将人T淋巴细胞白血病细胞（MOLT－4）、人早幼粒细胞白血病细胞（HL-60）移植到裸鼠体内。裸鼠经环磷酰胺（2.5mg／只）预处理后分别将（5～10）×10~6MOLT-4细胞及（2～4）×10~7HL－60细胞移植到动物皮下能形成实体瘤，该肿瘤呈进行性生长。MOLT－肿瘤在裸鼠间连续传代4次，移植成功率为69.2％，HL-60肿瘤连续传代3次，成功率为100％。肿瘤染色体分析属于人体细胞核型，细胞学研究显示裸鼠体内MOLT-4、HL-60细胞与体外培养的细胞具有良好的一致性，故裸鼠体内MOLT-4、HL-60肿瘤模型的建立对于研究人白血病提供了有用工具。     

HPLC法测定抗增生胶囊中丹参素钠的含量

目的：建立抗增生胶囊中丹参素钠的HPLC测定方法。方法：采用Lichrospher E18色谱柱（250mm×4．6mm，5μm）；流动相为甲醇-0．9％乙酸（10：90）；流速为1．0ml／分：检测波长为280nm。结果：丹参素钠浓度在10～48μg／ml，浓度与峰面积线性关系良好（r=0．9997），平均回收率为97．7％，RSD为1．93％，。结论：所用方法简便准确、重现性好，为抗增生胶囊的质量控制提供了方法。     

HPV、HSV2感染及C—cerbB—2表达与宫颈癌关系

目的：探讨汕头地区宫颈癌的发生与HPV，HSV2感染以及C-cerbB-2表达的相关性。方法：采用PCR技术检测宫颈癌（84例）组织与正常宫颈（13例）组织的HPV－DNA，HSV2－DNA，并用免疫组化SP法检测同一宫颈癌组织标本与正常宫颈组织标本的C-cerbB-2表达情况。结果：（1）宫颈癌组织HPV－DNA，HSV2－DNA阳性率为47．6％，46．4％，正常宫颈组织则为7．7％，15．4％，宫颈癌组织的HPV，HSV2感染率均显著高于正常宫颈组织（P＜0．01，P＜0．05）。（2）宫颈癌组织中，HPV，HSV2双阳性24例，经统计学处理，HPV和HSV2间的感染有显著相关性（P＜0．05）。（3）宫颈癌组织的C-cerbB-2表达率为34．5％，显著高于正常宫颈组织（0／13，P＜0．05）。（4）75．9％的C-cerbB-2阳性患者（22／29）与HPV与HPV和（或HSV2）同时呈现阳性。结论：汕头地区宫颈癌的发生与较高的HPV，HSV2感染率和C-cerbB-2表达率密切相关，三者的共同作用可能是宫颈癌发生发展的重要因素。     

肠易激综合征和胶原性结肠炎患者粪便中炎性标志物的检测

目的：与腹痛及腹部不适症状相关的排便习惯改变的长期反复发作是肠易激综合征（IBS）和胶原性结肠炎（CC）的共有症状。该研究旨在明确IBS和CC患排泄物中能否检测到炎性标志物，并探讨此种检测能否作为一种无创性方式用于这些功能紊乱性疾病的鉴别。材料与方法：采集18例CC患、46例IBS患和20例健康对照（HC）的粪便，经处理后留取上清液，采用免疫法测定嗜酸粒细胞蛋白X（EPX）、髓过氧化物酶（MPO）、纤维蛋白溶酶、白介素-1β（IL-1β）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平。结果：与IBS组（中位数0．44μg／g，95％CI0．25～1．8；P〈0．001）和HC组（中位数0．46μg／g，95％CI0．21～1．3；P〈0．001）相比，EPX水平在CC组中有所增加（中位数3．81μg／g，95％CI0．47～16．2）。另外，MPO水平在CC组中也有所增加（中位数11．7μg／g，95％CI2．0～124），显高于IBS患组（中位数1．7μg／g，95％CI0．81～5．2；P〈0．01）和HC组（中位数2．5μg／g，95％CI1．1～6．3；P〈0．05）。