当归拈痛汤加味膏剂对佐剂性关节炎大鼠促炎因子分泌及关节滑膜细胞凋亡的调节作用

目的观察当归拈痛汤加味制成膏剂对佐剂性关节炎（Adjuvant Arthritis,AA）大鼠滑膜细胞凋亡及血清细胞因子的影响。方法建立AA大鼠模型,将wistar大鼠随机分成空白组、模型组、治疗组（甲氨蝶呤＋当归拈痛汤加味膏剂）、对照组（甲氨蝶呤＋双氯芬酸二乙胺乳）。检测各组大鼠足跖肿胀程度及疼痛指数,滑膜细胞凋亡及血清细胞因子浓度。结果治疗组能显著抑制注射足跖肿胀程度,显著提高滑膜细胞的凋亡率,并降低大鼠血清中IL-17、TNF-α的水平,与对照组效果相当。结论当归拈痛汤加味膏剂可能通过促进AA大鼠滑膜细胞的凋亡,抑制某些炎性因子的释放,达到治疗的作用。     

当归拈痛汤加味膏外敷对AA大鼠关节中HIF-1α、滑膜细胞凋亡的影响

目的 探讨当归拈痛汤加味膏外敷在佐剂性关节炎(AA)大鼠关节中对低氧诱导因子-1α(HIF-1α)的表达及滑膜凋亡的影响.方法 40只wistar大鼠随机分为正常组、模型组、治疗组及对照组.建立AA模型,给药后18d,取踝关节行HE染色及HIF-1α免疫组化染色,流式细胞仪检测滑膜细胞的凋亡变化.分析HIF1α、滑膜凋亡在AA中的相关性及与节炎活动指标、滑膜病理之间的关系.结果 给药18d后,治疗组HE染色显示明显减轻滑膜增殖以及炎症反应,免疫组化显示治疗组HIF-1α明显表达降低,流式细胞仪检定显示治疗组滑膜细胞凋亡率明显升高.结论 HIF-1α的表达与滑膜细胞凋亡率呈明显负相关,该膏剂通过抑制HIF-1α活性,从而调控一系列下游靶基因,如滑膜细胞凋亡等,此可能是其抑制滑膜增生的作用机制之一.     

当归拈痛汤对急性痛风性关节炎大鼠血清白细胞介素1β和肿瘤坏死因子α的影响

目的:观察当归拈痛汤对急性痛风性关节炎大鼠血清白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的影响。方法:将60只雄性Wistar大鼠随机均分为空白组、模型组、秋水仙碱组、当归拈痛汤高、中、低剂量组共6组,每组各10只,采用向大鼠踝关节腔注射微晶型尿酸钠(MSU)混悬液方法建立急性痛风性关节炎模型,将当归拈痛汤用于模型的治疗,并与秋水仙碱做组间对照,采用双抗夹心ABC-ELISA法检测各组大鼠血清IL-1β和TNF-α的含量。结果:与空白组比较,模型组大鼠血清IL-1β和TNF-α水平明显升高(P0.05),说明模型组大鼠炎性反应明显;与模型组比较,秋水仙碱组和当归拈痛汤高、中、低剂量组大鼠IL-1β和TNF-α水平均明显降低(均P0.05)。结论:当归拈痛汤降低炎症因子IL-1β和TNF-α的水平可能是其治疗急性痛风性关节炎的机制之一。     

当归拈痛汤治疗类风湿性关节炎的实验研究

当归拈痛汤出自金·张元素所著的《医学启源》,功能清热利湿,祛风止痛。我们在临床上常以此方为主方,进行加减,治疗类风湿性关节炎、每获殊效。为此,我们对当归拈痛汤治疗类风湿性关节炎进行了药效学实验研究。现将结果报告如下:1 实验材料1.1 实验动物 Wistar大白鼠;雄性,体重200±20g。许可证号:医动字第09—3—3号。昆明种小白鼠;雌雄各半,体重20±2g。许可证号:医动字第09一2—2号。以上动物均由黑龙江中医药大学实验动物中心提供。     

当归拈痛汤对佐剂性关节炎大鼠肿瘤坏死因子α的影响

目的通过观察当归拈痛汤对佐剂性关节炎大鼠肿瘤坏死因子(TNF-α)的影响,评价当归拈痛汤治疗类风湿关节炎(RA)的疗效。方法将60只雄性Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、高剂量组、中剂量组和低剂量组,采用弗氏完全佐剂造模,观察不同时间点各组大鼠的疼痛指数、肿胀指数等;在灌服当归拈痛汤18 d后,用ELIASA法检测血清TNF-α的水平。结果致炎后不同时间点各组关节肿胀度、疼痛指数比较均有显著性差异;与模型组比较,各用药组的TNF-α水平显著降低(P0.05和0.01)。结论当归拈痛汤可抑制RA大鼠过高的炎性细胞因子TNF-α分泌,能明显抑制大鼠佐剂性关节炎病变。     

当归拈痛汤对佐剂性关节炎大鼠T淋巴细胞亚群CD4的影响

目的：通过观察当归拈痛汤对佐剂性关节炎大鼠T淋巴细胞亚群CD4的影响。评价当归拈痛汤治疗类风湿性关节炎（RA）的疗效。方法：将60只雄性Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、高剂量组、中剂量组和低剂量组,采用弗氏完全佐剂造模,观察不同时间点各组大鼠的疼痛指数、肿胀指数等;在灌服当归拈痛汤18d后,用ELIASA法检测血清CD4的水平．结果：致炎后不同时间关节肿胀度、疼痛指数采用重复测量资料的方差分析（P〈0．01）;与模型组比较,各用药组的CIN水平显著减少（P〈0．05,P〈0．01）。结论：当归拈痛汤能抑制大鼠过高的CD4水平,当归拈痛汤能提高外周血T淋巴细胞免疫功能。     

不同剂量当归拈痛汤抗炎镇痛作用的实验研究

目的：观察当归拈痛汤高、中、低剂量对大鼠佐剂性关节炎（adjuvant arthritis,AA）的抗炎镇痛作用。方法：Wistar大鼠60只,随机分成正常组、模型组、当归拈痛汤高、中、低剂量组;造模2周后,所有大鼠均采取灌胃给药,共给药18天;检测血沉,C反应蛋白等指标的变化情况。结果：致炎后不同时间关节肿胀度、疼痛指数采用重复测量资料的方差分析（P〈0.01）;与低剂量组比较,高、中剂量组CRP及ESR明显降低（P〈0.01）;治疗后高、中剂量组病理损害程度较低剂量组轻。结论：当归拈痛汤高、中剂量具有较好的抗炎镇痛作用。     

当归补血汤加味抗深部真菌感染作用的实验研究

目的：探讨中药当归补血汤加味(白术、山药)抗深部感染白色念珠菌的作用。方法：①监测中药当归补血汤加味对正常及免疫功能低下小鼠腹腔巨噬细胞吞噬白色念珠菌功能的影响；②建立免疫功能低下动物模型，通过尾静脉注入白色念珠菌，使小鼠发生白色念珠菌深部感染，观察中药当归补血汤加味对正常及免疫功能低下小鼠发生深部感染白色念珠菌后存活时间的影响。结果：中药当归补血汤加味能提高小鼠腹腔巨噬细胞吞噬白色念珠菌的吞噬率(PP)和吞噬指数(PI)；有延长发生深部感染白色念珠菌后的小鼠存活时间的作用。结论：在本实验条件下，当归补血汤加味可增强小鼠的免疫功能，对小鼠具有全身保护作用。     

当归补血汤加味抗深部真菌感染作用的实验研究

目的 :探讨中药当归补血汤加味 (白术、山药 )抗深部感染白色念珠菌的作用。方法 :①监测中药当归补血汤加味对正常及免疫功能低下小鼠腹腔巨噬细胞吞噬白色念珠菌功能的影响 ;②建立免疫功能低下动物模型 ,通过尾静脉注入白色念珠菌 ,使小鼠发生白色念珠菌深部感染 ,观察中药当归补血汤加味对正常及免疫功能低下小鼠发生深部感染白色念珠菌后存活时间的影响。结果 :中药当归补血汤加味能提高小鼠腹腔巨噬细胞吞噬白色念珠菌的吞噬率 (PP)和吞噬指数 (PI) ;有延长发生深部感染白色念珠菌后的小鼠存活时间的作用。结论 :在本实验条件下 ,当归补血汤加味可增强小鼠的免疫功能 ,对小鼠具有全身保护作用。     

当归拈痛汤加味治疗糖尿病足42例临床观察

目的:观察当归拈痛汤加味治疗糖尿病足的临床疗效。方法:将85例患者随机分为2组,对照组43例采用降糖、胰岛素外敷换药、抗生素治疗;治疗组42例在对照组治疗的基础上采用当归拈痛汤加味治疗。主要观察2组临床疗效及创面愈合时间。结果:治疗组治愈率为80.95%,愈显率为97.62%;对照组治愈率为39.53%,愈显率为67.44%,2组比较,差异均有显著性意义(P<0.05)。治疗组较对照组可缩短起效时间。结论:当归拈痛汤加味治疗糖尿病足可提高创面愈合率,缩短治疗时间。     

当归拈痛汤对佐剂性关节炎大鼠血清中MMP-3表达的影响

目的 探讨当归拈痛汤高、中、低剂量对佐剂性关节炎大鼠血清中基质金属蛋白酶-3(MMP-3)表达的影响及其治疗作用.方法 将60只雄性Wistar大鼠随机分为正常组、模犁组、当归拈痛汤高剂量组、中剂量组和低剂量组,采用弗氏完全佐剂造模,观察不同时间点各组大鼠的疼痛指数、肿胀指数等.在灌服当归拈痛汤18d后.用ELISA法检测MMP-3在血清中的表达.结果 各组致炎后不同时间关节肿胀度、疼痛指数差异显著;与模型组比较,各用药组的MMP-3表达显著减少.结论 当归拈痛汤高、中剂量对大鼠佐剂性关节炎有较好的治疗作用,其降低血清MMP-3含量可能是治疗类风湿关节炎的机制之一.     

当归拈痛汤对类风湿性关节炎大鼠滑膜MMP-9的影响

目的研究当归拈痛汤对类风湿性关节炎大鼠的滑膜组织中MMP-9的影响,进一步探讨该药物的作用机制。方法用Mtb诱导实验性类风湿性关节炎大鼠模型,并随机分为4组,空白对照组、当归拈痛汤组、模型组以及作为阳性对照的雷公藤组。经过实验阶段的干预后,检测各组大鼠关节滑膜组织的MMP-9水平。结果与阳性对照组和模型对照组相比,当归拈痛汤组显著降低模型大鼠关节滑膜中MMP-9水平(P0.05)。结论当归拈痛汤可以下调模型大鼠关节滑膜组织中的MMP-9水平,提示其作用机制可能与调控MMP-9水平相关。     

当归拈痛汤防治类风湿性关节炎大鼠滑膜病变的蛋白质组学研究

目的 观察当归拈痛汤干预类风湿性关节炎(RA)大鼠滑膜病变的蛋白质改变,分析当归拈痛汤治疗RA可能的作用机制。方法 将SD大鼠随机分为空白对照组、模型组、当归拈痛汤组3组,每组10只。双向电泳(2-DE)分离滑膜组织蛋白质,用PDQuest7.1.0软件包进行差异表达蛋白质组分析,基质辅助激光解吸附离子化飞行时间质谱(MALDI-TOF)鉴定蛋白质。选择2个差异蛋白用实时荧光定量PCR(Q-PCR)和蛋白质印迹法(Western-blot)进行验证。结果 获得8个差异表达的蛋白:Myosin regulatory light chain 2,40S ribosomal protein SA,Mimecan,Heat shock protein beta-1,Vimentin,Peroxiredoxin-2,Interleukin-1 receptor antagonist protein,Lamin A。Q-PCR和Western-blot验证Hsp27 Peroxiredoxin-2表达水平变化与2-DE结果一致。结论 当归拈痛汤可能通过以下机制抑制RA滑膜组织的炎症反应:(1)抑制组织局部的炎症反应信号通路;(2)保护细胞结构;(3)抑制氧化应激反应。     

当归拈痛汤对急性痛风性关节炎模型大鼠步态和关节肿胀度的影响

目的:观察当归拈痛汤对急性痛风性关节炎大鼠步态和关节肿胀度的影响。方法:采用向大鼠踝关节腔注射微晶型尿酸钠(MSU)混悬液方法建立急性痛风性关节炎模型,将当归拈痛汤用于模型的治疗,并与秋水仙碱做组间对照,观察造模24h后大鼠步态并进行行为学评分,并用足爪容积测量仪测定造模后不同时间大鼠的踝关节肿胀度。结果:当归拈痛汤能明显改善急性痛风性关节炎大鼠的步态异常,并能显著降低其踝关节肿胀度。结论:当归拈痛汤对急性痛风性关节炎大鼠有显著的治疗作用。     

当归拈痛汤的临床应用

当归拈痛汤为金元时期的医学家李东垣所创制,载于《兰室秘藏》一书。“拈”是用指取物的意思,极言本方止痛效果之佳,如同信手拈来。全方的药物组成:羌活、茵陈、炙甘草各15 g,猪苓、泽泻、防风、当归各9 g,,升麻、葛根、苍术、白术、苦参、人参、黄芩、知母各6 g。原方本是煮散     

当归拈痛汤的临床应用与实验研究

当归拈痛汤是清利湿热的著名方剂,临床广泛运用于痛风,各种关节痛,痤疮、扁平疣等多种皮肤病,以及糖尿病周围神经病变等疾病的治疗.笔者从临床应用和实验研究两个方面对当归拈痛汤的研究现状进行综合概述,并提出展望,旨在引起众多学者的广泛关注,以便进一步研究开发利用.     

当归拈痛汤对佐剂性关节炎大鼠T淋巴细胞亚群CD4的影响

目的:通过观察当归拈痛汤对佐剂性关节炎大鼠T淋巴细胞亚群CD4的影响.评价当归拈痛汤治疗类风湿性关节炎(RA)的疗效.方法:将60只雄性Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、高剂量组、中剂量组和低刑量组,采用弗氏完全佐剂造模,观察不同时间点各组大鼠的疼痛指数、肿胀指数等;在灌服当归拈痛汤18d后,用ELIASA法检测血清CD4的水平.结果:致炎后不同时间关节肿胀度、疼痛指数采用重复测量资料的方差分析(P＜0.01);与模型组比较,各用药组的CD4水平显著减少(P＜0.05,P＜0.01).结论:当归拈痛汤能抑制大鼠过高的CD4水平,当归拈痛汤能提高外周血T淋巴细胞免疫功能.     

当归拈痛丸对尿酸钠致大鼠急性足肿胀的影响研究

目的考察当归拈痛丸对尿酸钠诱导的大鼠急性足肿胀模型肿胀度的影响,探讨其治疗痛风性关节炎的药理学基础。方法大鼠右后足垫部75%医用酒精消毒后,皮下注射尿酸钠溶液致大鼠急性足肿胀,测定造模致炎后1、2、4、6 h大鼠右后足容积,计算肿胀度。结果当归拈痛丸大、中剂量组与模型组比较在1 h、4 h、6 h有显著性差异(P<0.05,P<0.01);当归拈痛丸小剂量组与模型组比较在6 h有显著性差异(P<0.01)。结论当归拈痛丸能减轻模型大鼠足肿胀程度,具有明显的抗炎作用,为进一步研究其治疗痛风性关节炎提供药效学依据。     

当归拈痛汤及拆方对类风湿性关节炎大鼠血清IL-6的影响

目的:研究当归拈痛汤及其拆方对类风湿性节炎大鼠血清IL-6的影响,进一步深入探讨该药物的作用机制。方法:建立大鼠类风湿性关节炎实验模型,检测血清中相关炎性细胞因子IL-6的水平。结果:当归拈痛汤及其各拆方组可显著抑制SD大鼠过高的炎性细胞因子IL-6分泌,其中全方组明显强于拆方组,拆方1组作用强于拆方两组。结论:当归拈痛汤及拆方在类风湿性关节炎大鼠中具有下调致炎因子IL-6的作用,提示这与该药抑制实验性类风湿性关节炎病情进展密切相关。     

基于定量蛋白质组学研究当归拈痛汤对风湿热痹佐剂性关节炎大鼠的作用机制

目的 应用定量蛋白质组学研究当归拈痛汤对风湿热痹佐剂性关节炎（AA）大鼠的作用机制。方法 60只SD大鼠随机分为正常组、模型组、当归拈痛汤低、中、高剂量组及甲氨蝶呤（MTX）组,每组10只,大鼠尾根部皮下注射灭活结核分支杆菌佐剂（Mtb）进行AA的造模,人工气候箱干预16 d建立风湿热痹证模型,造模当天开始给药干预,持续干预28 d。提取大鼠滑膜组织蛋白质,使用4D非标记定量（4D-LFQ）蛋白质组学研究当归拈痛汤中剂量组与风湿热痹证模型组之间的差异蛋白情况,采用免疫组化及蛋白免疫印迹法（Western blot）验证与线粒体途径细胞凋亡相关的差异蛋白。结果 从滑膜组织中检测出4 756个蛋白质,其中4 234个蛋白质包含定量信息。当归拈痛汤与模型组差异蛋白为814个。基因本体（GO）和京都基因与基因组百科全书（KEGG）分析显示,当归拈痛汤对风湿热痹证AA大鼠的滑膜蛋白质组确有影响,且差异蛋白集中在对免疫系统的调控、急性炎症的反应和凋亡水平的调节。免疫组织化学与蛋白免疫印迹法验证发现,与模型组比较,当归拈痛汤各剂量组及MTX组滑膜组织中B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）相关X蛋白（Bax）及细胞色素Ｃ（Cyt C）蛋白表达水平明显升高（P<0.05,P<0.01）,Bcl-2的表达水平明显下降（P<0.05,P<0.01）,剪切型胱天蛋白酶-9（cleaved Caspase-9）/胱天蛋白酶-9（Caspase-9）显著升高（P<0.01）,磷酸化蛋白激酶B（p-Akt）/蛋白激酶B（Akt）明显下降（P<0.05,P<0.01）。结论 当归拈痛汤对风湿热痹证类风湿关节炎的治疗涉及多靶点,其可能通过调节Akt/Bax/Bcl-2通路,促进线粒体途径细胞凋亡,从而发挥其对风湿热痹证类风湿关节炎的防治作用。