基质金属蛋白酶-2在人慢性牙周炎肥大细胞上表达的研究

目的观察基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)在慢性牙周炎牙龈组织中肥大细胞上的表达,探讨MMP-2-tryptase双阳性肥大细胞(mast cells,MCs)在慢性牙周炎发病机制中的作用。方法将45例参试者依据慢性牙周炎的病变程度分成3组:健康对照组15例;轻度牙周炎组15例;重度牙周炎组15例。牙龈标本经10%福尔马林液固定48 h;制作牙龈组织连续切片,HE染色,光学显微镜下观察组织学改变;采用免疫荧光双染色法,荧光显微镜下观察牙龈组织中MMP-2-tryptase双阳性MCs的表达情况。结果与健康对照组相比,轻度和重度慢性牙周炎组牙龈组织MMP-2-tryptase双阳性MCs密度均显著升高(P<0.01);重度慢性牙周炎组牙龈组织MMP-2-tryptase双阳性MCs密度显著高于轻度牙周炎组(P<0.05)。结论慢性牙周炎牙龈组织MMP-2-tryptase双阳性MCs密度与牙周炎病变程度的趋势相一致,MMP-2-tryptase双阳性MCs在牙周炎的进展中可能有促进作用。     

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目的    探讨半胱氨酸丰富蛋白Kazal基元（RECK）及基质金属蛋白酶-2（MMP-2）的表达与口腔鳞癌发生、发展及侵润、转移的关系。方法     选择中国医科大学附属口腔医院病理科存档中2008年9月至2009年10月石蜡包埋的口腔鳞癌术后标本68例为实验组,对应的远端正常口腔黏膜组织68例为对照组。应用免疫组化SP法检测RECK及MMP-2蛋白表达,并在显微镜下观察阳性细胞所占百分比及着色深浅进行结果判定。结果    癌组织中RECK蛋白的阳性表达率为40.4%,明显低于正常口腔黏膜组织83.8% （χ2 =11.284,P < 0.01）。RECK的表达与组织学分级、侵润深度、淋巴结转移相关（P均 < 0.05）。癌组织中MMP-2蛋白的阳性表达率为76.5%,明显高于正常口腔黏膜组织27.9%（P < 0.01）。MMP-2蛋白阳性表达随着组织学分级、侵润深度级别的增加逐渐升高（P均 < 0.05）;有淋巴结转移的MMP-2蛋白阳性表达率高于无淋巴结转移组（P < 0.05）。RECK蛋白表达与MMP-2蛋白表达呈负相关关系（r=-0.5426）。结论    RECK和MMP-2在口腔鳞癌的侵润、转移过程中具有重要作用,RECK及MMP-2的联合检测可望成为口腔鳞癌早期诊断和判断预后的分子指标。     

涎腺腺样囊性癌中RECK、MMP-2的表达及与临床预后的关系

目的:研究抑癌基因RECK和MMP-2在涎腺腺样囊性癌中的表达及其相关性,探讨RECK基因的表达在涎腺腺样囊性癌的诊断和预后判断中的价值。方法:应用免疫组化SP染色法检测RECK、MMP-2在涎腺腺样囊性癌、涎腺多形性腺瘤、正常组织中的表达。结果:RECK在涎腺腺样囊性癌中表达明显降低,MMP-2表达明显升高,RECK的阳性表达率和表达强度与病理分型、神经侵犯、TNM分期有关,与患者的年龄和性别无关,RECK与MMP-2的表达呈负相关性,多因素COX回归分析表明RECK的表达及病理类型为判定预后的独立因素。结论:RECK在涎腺腺样囊性癌中明显存在表达降低,RECK的检测可辅助预测患者预后及为患者的综合治疗提供参考。     

慢性牙周炎与健康牙龈组织中MMP-1的表达和意义

目的:通过检测基质金属蛋白酶-1(MMP-1)在慢性牙周炎牙龈组织中的表达和分布特征,探讨MMP-1在慢性牙周炎发病中的作用和临床意义。方法:收集8例因非牙周疾病而需拔牙患者健康牙龈及24例慢性牙周炎患者牙龈组织,按健康对照、牙周袋深度≤4mm、4~6mm、>6mm分A、B、C、D四组,利用免疫组化方法检测其中MMP-1的表达。结果:正常牙龈组织上皮及固有层MMP-1弱表达,慢性牙周炎患者牙龈组织MMP-1表达明显增高,两者间有显著性差异(P<0.05)。并且MMP-1表达与牙周袋深度间显著正相关(r=0.623,P<0.01)。结论:MMP-1参与慢性牙周炎病变牙周组织的破坏过程,并且其表达随牙周袋深度加深有增加趋势。     

IL-1β与IL-10mRNA在牙龈组织中的表达

目的:检测IL-1β与IL-10mRNA在正常牙龈及牙周炎患者牙龈组织中的表达,探讨二者与炎症的关系及内源性抗炎因子IL-10对致炎因子IL-1β是否有拮抗作用。方法:采集14例成人牙周炎患者炎症区牙龈组织,6例正常牙龈组织,利用逆转录-聚合酶链反应检测其中IL-1β与IL-10mRNA的表达及其强弱程度。结果:成人牙周炎组牙龈组织IL-1βmRNA的阳性表达率为92.86%,IL-10mRNA阳性表达率为71.43%,二者与正常对照组相比均有显著性差异;两者之间无明显相关性;两者与临床指标间亦无明显相关性。结论:致炎性和抗炎性细胞因子均可在牙龈组织中表达;机体自身IL-10水平不足以完全拮抗IL-1β活性;IL-10对致炎性细胞因子IL-1β的调控作用有待进一步研究。     

RECK在成釉细胞瘤中的表达及其与基质金属蛋白酶-2的关系

目的:研究RECK(reversion-inducing cysteine rich protein with Kazal motifs)和基质金属蛋白酶-2(matrixmetalloproteinase-2,MMP-2)在成釉细胞瘤(ameloblastoma,AB)中的表达及其相关性,探讨两者与成釉细胞瘤临床生物学行为的关系.方法:应用免疫组化EliVisionTM plus法,检测69例成釉细胞瘤(原发AB 45例,复发AB 24例)、6例成釉细胞癌和16例牙源性角化囊性瘤(keratocystic odontogenic tumor,KCOT)中RECK、MMP-2蛋白的表达,采用SPSS13.0软件包对数据进行统计学分析.结果:RECK在KCOT、AB和成釉细胞癌中的阳性表达率依次降低,组间比较差异均有统计学意义(P<0.05),且复发AB的RECK表达显著低于原发AB(P<0.01).MMP-2在AB和成釉细胞癌中的阳性表达率均显著高于KCOT(P<0.05),且MMP-2的表达在AB与成釉细胞癌以及原发AB与复发AB间均无显著性差异(P>0.05).RECK与MMP-2在AB中的表达呈负相关(r=-0.431,P<0.001).结论:RECK与AB的临床生物学行为密切相关,可能通过调控MMP-2参与AB的浸润、复发和恶性转化过程.     

RECK基因和基质金属蛋白酶-2在成釉细胞瘤的表达及相关性研究

目的探讨RECK和基质金属蛋白酶-2（MMP-2）的表达与成釉细胞瘤（AB）临床生物学行为的关系及相关性。方法应用免疫组化EliVision^TM plus法检测69例AB（原发45例,复发24例）、6例成釉细胞癌和16例牙源性角化囊性瘤（KCOT）中RECK、MMP-2蛋白的表达,同时采用RT-PCR方法检测22例AB（原发12例,复发10例）、2例成釉细胞癌和16例KCOT中RECK、MMP-2mRNA的表达水平。所有数据采用SPSS13．0统计软件包进行统计学分析。结果RECK蛋白的阳性表达率在KCOT、AB和成釉细胞癌中依次明显降低（P〈0．05）,且复发AB显著低于原发AB（P〈0．01）;AB和成釉细胞癌的MMP-2蛋白阳性表达率均显著高于KCOT（P〈0．05）：RECK蛋白与MMP-2蛋白在AB中的表达呈负相关（r=-0．431,P〈0．001）。RECKmRNA在AB、KCOT中均见表达,但在AB的表达较KCOT显著降低（P〈0．001）．成釉细胞癌中则无表达：MMP-2mRNA在KCOT、AB和成釉细胞癌中均见表达,但在AB的表达水平较KCOT显著增高（P〈0．001）,在成釉细胞癌中均呈高水平表达：复发AB的RECKmRNA表达水平较原发AB显著降低（P〈0．05）,但复发与原发AB的MMP-2mRNA表达之间差异无统计学意义：RECKmRNA与MMP-2mRNA在AB中的表达水平无相关性（P〉0．05）。结论RECK表达降低或缺失及MMP-2表达增高与AB的临床生物学行为密切相关。RECK可能通过转录后水平调控MMP-2参与AB的侵润、复发和恶性转化过程。     

Wnt5a 参与慢性牙周炎的炎症过程和骨破坏

目的:探讨Wnt5a在慢性牙周炎患者牙龈组织中的表达及意义。方法:选择20例慢性牙周炎患者和正常对照组20例,分别用RT-PCR和Western-Blot检测牙龈组织中Wnt5a的表达。结果:慢性牙周炎患者的炎症性牙龈组织中Wnt5a的表达水平显著高于正常牙龈组织(P<0.05);并且,附着丧失的程度与牙周炎患者牙龈组织中Wnt5a的表达呈高度正相关。结论:Wnt5a在慢性牙周炎的炎症发展和牙槽骨的破坏中发挥了一定的作用。     

慢性牙周炎牙龈组织细胞凋亡及凋亡相关蛋白Caspase-3的表达

目的:研究慢性牙周炎牙龈组织中细胞凋亡的发生情况和Caspase-3蛋白的表达,探讨其在慢性牙周炎病变发生中的意义。方法:应用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的原位缺口末端标记法(TUNEL法)、免疫组织化学方法检测21例慢性牙周炎牙龈组织和21例健康牙龈组织中的细胞凋亡指数(apoptosis index,AI)及Caspase-3蛋白的表达。结果:慢性牙周炎组牙龈组织中细胞凋亡指数明显高于正常对照组(P<0.05)。与正常组相比,慢性牙周炎组牙龈组织中细胞caspase-3表达明显增强,两组间有显著性差异(P<0.05)。结论:慢性牙周炎病人牙龈组织细胞发生凋亡,且通过激活细胞凋亡信号传导途径中的Caspase-3而导致慢性牙周炎发生。     

MMP-2在吸烟牙周炎患者牙龈组织中的表达

目的:从MMP-2的酶活性和mRNA水平探讨吸烟与牙周病的关系。方法:利用明胶酶活性分析(zymog-raphy)和RT-PCR方法,分别检测6例吸烟牙周病、6例不吸烟牙周病、6例吸烟正常人、6例不吸烟正常人的牙龈组织中MMP-2的酶活性和mRNA表达。结果:吸烟和牙周病牙龈组织中MMP-2酶活性都较正常组有增加,但吸烟牙周病组的MMP-2的酶活性与吸烟无牙周病组和不吸烟牙周病组有明显差异(P<0.01),吸烟牙周病患者牙周组织中MMP-2的mRNA水平较正常组明显增加(P<0.01)。结论:MMP-2在吸烟牙周炎牙周组织的破坏中起重要作用。     

过表达RECK基因对成釉细胞瘤hTERT＋_AM永生化细胞株MMPs表达及侵袭能力的影响

目的：观察转染RECK基因对人成釉细胞瘤（ameloblastoma,AM）细胞株hTERT-AM的MMPs表达及细胞侵袭力的影响。方法：利用RECK基因慢病毒载体Lenti—RECK—eGFP／puro转染hTERTAM细胞株．Puro筛选和镜下挑单克隆纯化细胞。CCK8检测细胞活性,Transwell实验检测细胞迁移、侵袭能力,qRT—PCR检测细胞中RECK的mRNA的表达情况。Western蛋白印迹检测细胞中RECK、MMP2、MMP9的表达情况。采用SPSS13．0软件包对数据进行统计学分析。结果：转染RECK基因后,hTERT~AM细胞中RECK的mRNA和蛋白的表达均显著增高（P均〈0．01）,细胞活性无显著变化（P均〉0．05）,细胞迁移、侵袭能力均显著下降（P均〈0．01）,MMP2、MMP9蛋白表达均显著下降（P均〈0．05）。结论：RECK基因参与人成釉细胞瘤局部侵袭的调节,过表达RECK基因后,MMP2、MMP9下调,抑制AM细胞迁移和侵袭。RECK有望成为人成釉细胞瘤侵袭防治的新靶点。     

牵张应力对人牙周膜细胞MMP-2表达的影响及相关信号通路的研究

目的：探讨NF-κB通路对牵张应力介导的人牙周膜细胞（HPDLCs）中MMP-2表达的影响.方法：按胶原酶消化法培养HPDLCs,分为5组：非加力对照组（A组）;12％形变率,3h组（B组）;12％形变率,6h组（C组）;12％形变率,12h组（D组）;12％形变率＋PDTC干预,12h组（E组）,通过细胞牵张应力加载系统施加机械牵张应力,结束后收集细胞提取蛋白,用蛋白印迹法检测MMP-2蛋白表达的变化.结果：B、C、D组MMP-2表达大于A组,差异有统计学意义（P＜0.05）,且随着作用时间的延长蛋白表达增加;NF-κB通路抑制剂PDTC可抑制机械牵张应力作用下牙周膜细胞MMP-2表达的增加.结论：持续机械牵张应力可诱导人牙周膜细胞MMP-2表达的增加,从而影响牙周组织细胞外基质代谢,机械牵张应力可通过NF-κB通路影响MMP-2蛋白的表达.     

硝苯地平对静态拉伸下牙周膜细胞MMP-1及MMP-8的表达影响

目的：研究静态机械拉伸作用下,硝苯地平对人牙周膜成纤维细胞（human periodontal ligament fibro-blasts,HPLFs）中基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinase）MMP-1及MMP-8的调节作用。方法：体外培养HPLFs,按弹性形变将细胞随机分为4组（0%、8%、12%、16%）,每组再按硝苯地平（nifedipine,NIF）药物浓度随机分为4个亚组（0μm、10μm、30μm、50μm）。用机械力装置使细胞持续静态拉伸12 h后,免疫组化检测硝苯地平对HPLFs胞浆中MMP-1和MMP-8的表达所产生的影响。结果：弹性形变0%时,各浓度硝苯地平对MMP-1和MMP-8表达均无明显影响（P〉0.001）;形变8%、12%、16%,硝苯地平0μm时,二者表达随形变增大而增强;加入硝苯地平后,随药物浓度的升高,二者表达逐渐减弱（P〈0.001）。结论：硝苯地平可以抑制静态机械拉伸诱导的HPLFs中MMP-1和MMP-8的表达。     

周期性张应力对牙周膜细胞内基质金属蛋白酶-8和13表达的影响

目的：观察周期性张应力作用下牙周膜细胞（human periodontal ligament cells,HPDLC）中基质金属蛋白酶（MMPs）的表达变化。方法：通过建立体外应力加载系统,对培养在弹性膜六孔板的HPDLC施加0.1Hz,硅胶膜形变率分别为6%、12%、18%的周期性张应力,分别在加载2、6、12h后利用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）和Western Blot技术检测HPDLC的MMP-8,MMP-13的表达变化。结果：HPDLC在加载周期性牵张力后,细胞生长方向顺应力方向而发生改变,MMP-8和MMP-13的表达明显增加。结论：周期性循环张力可诱导HPDLC中MMP-8、MMP-13表达增强,为MMP-8、MMP-13可能参与正畸力下牙周组织的改建提供了依据。     

白细胞介素-6在大鼠慢性牙周炎合并动脉粥样硬化模型中的表达

目的探讨大鼠慢性牙周炎（CP）合并动脉粥样硬化（As）模型中牙周组织、As斑块中血清白细胞介素-6（IL-6）的表达。方法60只成年Wistar雄鼠随机分为4组：正常对照组（A组）、CP组（B组）、As组（C组）、CP加As组（D组）,每组15只,各组接受相应的建模处理。观察牙周组织及动脉血管病理改变,免疫组织化学方法半定量分析牙周组织及As斑块中IL-6表达,酶联免疫吸附（ELISA）法检测血清IL-6水平。结果牙周病理学观察：B、D组实验牙牙周炎症表现明显,附着丧失（AL）水平较A、C组有明显增加（P〈0.05）。动脉病理学观察：C、D组主动脉形成粥样硬化病变。免疫组化染色：B、D组IL-6在牙周组织及血清中的表达均高于其他组（P〈0.05）,D组As斑块中IL-6表达高于其他组（P〈0.05）。相关性分析显示,D组IL-6在牙周组织与As斑块中的表达呈正相关。结论CP与As的发生发展可能与IL-6表达升高有关。     

可摘局部义齿对老年中重度牙周炎伴2型糖尿病患者牙周状况及全唾液中MMP-8水平的影响研究

目的    探讨戴用可摘局部义齿对老年中重度牙周炎伴2型糖尿病患者牙周状况及全唾液中基质金属蛋白酶（MMP）-8水平的影响。方法    选取2015年7—12月在承德医学院附属医院口腔科行远中游离端铸造支架式可摘局部义齿修复的老年中重度牙周炎伴2型糖尿病患者16例（试验组）和单纯老年中重度牙周炎患者14例（对照组）,分别于可摘局部义齿修复前及戴用义齿1、3个月后检测两组患者基牙临床牙周指标和全唾液中MMP-8含量。 结果    两组患者戴用义齿1、3个月后的各项牙周指标值及全唾液中MMP-8水平均明显高于义齿修复前（P < 0.05）;与戴用义齿1个月后相比较,戴用义齿3个月后牙龈指数（GI）及全唾液中MMP-8水平显著降低（P < 0 .05）;戴用义齿1、3个月两次复查时,两组患者颊舌侧的菌斑指数（PLI）存在显著性差异（P < 0.05）,舌侧PLI明显高于颊侧。两组间比较,患者在修复前、戴用义齿1个月后的各牙周指标值相似,差异无统计学意义（P > 0.05）;戴用义齿3个月后,两组患者的基牙PLI值差异不明显,而基牙GI及全唾液中MMP-8水平的差异有统计学意义（P < 0.05）,试验组明显高于对照组。结论    老年中重度牙周炎伴2型糖尿病患者戴用可摘局部义齿后牙龈炎症较重;戴用可摘局部义齿可引起老年中重度牙周炎伴2型糖尿病患者全唾液中MMP-8表达水平升高。     

基质金属蛋白酶-2和基质金属蛋白酶-3在大鼠牙周炎模型中的表达

目的 研究不同时期、不同严重程度的大鼠牙周炎模型中基质金属蛋白酶-2（MMP-2）和基质金属蛋白酶-3（MMP-3）的表达和分布特征,探讨二者在牙周炎发生发展中的作用。方法 对大鼠牙周组织标本的石蜡切片进行MMP-2和MMP-3的免疫组化染色,并进行图像定量分析。结果 MMP-2和MMP-3在牙龈炎和牙周炎的牙龈上皮中呈强阳性表达,在牙周炎的牙周组织中,主要在牙周膜成纤维细胞、破骨细胞等细胞中呈强阳性表达。MMP-2和MMP-3的变化趋势为在健康牙周组织中呈弱阳性表达,急性龈炎和急性牙周炎中呈强阳性表达,到慢性牙周炎时期,表达较急性期有所降低。结论 MMP-2和MMP-3在牙周炎症组织中,随着炎症进程呈现不同特征的表达,可能直接参与牙周组织的炎性破坏。