白细胞介素-1β与地塞米松对成纤维细胞分泌角质细胞生长因子的影响

目的 检测在体外培养的人正常口腔黏膜及口腔扁平苔藓(OLP)黏膜成纤维细胞中加入不同浓度的人白细胞介素-1β(IL-1β)和地塞米松(DEX)后,对成纤维细胞分泌和表达角质细胞生长因子(KGF)的影响.方法 将IL-1β和DEX配制成3个浓度梯度,分别加入到体外培养的人正常口腔黏膜和OLP黏膜成纤维细胞中,收集培养72 h后各组细胞上清液,应用酶联免疫吸附剂测定(ELISA)技术检测每组细胞上清液中KGF蛋白浓度的变化.提取各组细胞RNA,用聚合酶链反应(PCR)法检测KGF mRNA表达量的变化.结果 ELISA及PCR结果显示:加入IL-1β的正常口腔黏膜及OLP黏膜成纤维细胞培养上清液中,KGF蛋白浓度较自身对照组均升高,同时KGF mRNA表达量较对照组有较明显的上升趋势.正常口腔黏膜及OLP黏膜成纤维细胞加DEX的上清液中,KGF蛋白浓度较自身对照组均降低,KGFmRNA表达量较对照组则有降低的趋势.结论 IL-1β对正常口腔黏膜成纤维细胞及OLP黏膜成纤维细胞分泌及表达KGF有促进作用;而DEX对正常口腔黏膜成纤维细胞及OLP黏膜成纤维细胞分泌和表达KGF有抑制作用.     

LL37多肽及其mRNA在口腔扁平苔藓病损表达研究

目的:探讨LL37在口腔扁平苔藓(oral lichen planus, OLP)病损中的表达及在OLP疾病机制中的作用.方法:采用免疫组织化学技术(IHC)和逆转录聚合酶链式技术(RT-PCR)检测25 例OLP患者的病变黏膜组织和7 例健康对照黏膜组织中LL37蛋白及其mRNA的表达.结果:IHC结果显示,LL37在所有样本中均呈阳性胞质染色,主要表达于棘层和淋巴细胞.25 例OLP组口腔病损黏膜均呈强阳性染色,较之健康口腔黏膜组中LL37为弱阳性染色,差异具有显著性(P<0.05);RT-PCR 检测结果显示,所有样本均检测出LL37的cDNA电泳条带,健康口腔黏膜组中仅呈微弱表达,而OLP组病损黏膜上皮LL37表达明显增强.结论: LL37可能因炎性诱导呈上调表达而参与OLP的发生发展过程.     

口腔扁平苔藓中细胞角蛋白19的表达及意义

目的:探讨细胞角蛋白19(keratin 19,CK19)在口腔扁平苔藓(OLP)中的表达以及其病理意义.方法:采用免疫组化法检测17例OLP和14例正常颊黏膜中CK19的表达,采用RT-PCR方法分别在OLP患者和正常人颊黏膜中比较CK19 mRNA的表达.结果:正常颊黏膜中CK19均在基底细胞胞浆内呈强阳性表达,只有5例(29.4%)OLP基底细胞呈弱阳性表达,其余为阴性表达;RT-PCR结果显示在OLP组织中CK19 mRNA表达显著高于正常黏膜(P＜0.05).结论:CK19的表达下调与颊部OLP黏膜上皮更新能力下降密切相关.     

半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶8、受体作用蛋白及核因子-κBp65在口腔扁平苔藓中的表达及意义

目的 探讨口腔扁平苔藓(oral lichen planus,OLP)中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶8(caspase-8)、受体作用蛋白(receptor interacting protein,RIP)、核因子-KB(nuclear factor-kB,NF-kB)p65的表达及其与细胞凋亡的关系.方法 采用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的原位缺口末端标记法(TUNEL)、SP免疫组化法检测30例OLP及15例正常口腔黏膜(正常黏膜组)中caspase-8、RIP、NF-kBp65的表达及细胞凋亡情况.结果 OLP中上皮细胞凋亡指数(6.76±2.32)明显高于正常对照组(2.10±0.42),而固有层的凋亡指数(1.75±0.74)明显低于正常对照组(6.10±0.96),差异均有统计学意义(P<0.05).OLP的上皮层角质细胞caspase-8、RIP、NF-kBp65的阳性率分别为97%(29/30)、87%(26/30)及93%(28/30),均显著高于正常黏膜组(P<0.01).固有层淋巴细胞caspase-8、RIP、NF-p65的阳性率分别为100%(30/30)、90%(27/30)及80%(24/30),均明显高于正常黏膜组(P<0.01).OLP的上皮角质细胞和固有层淋巴细胞caspase-8、RIP、NF-kB065表达水平分别与其自身凋亡指数(apototic index,AI)正相关.OLP上皮层中RIP、NF-kBp65和caspase-8的表达均互为正相关关系,三者在固有层的表达亦互为正相关关系,固有层淋巴细胞NF-kB阳性表达强弱与上皮细胞AJ呈正相关.结论 OLP中同时存在角质细胞凋亡亢进及固有层淋巴细胞凋亡的减少,这种凋亡的异常可能与OLP的发生、发展密切相关.OLP中caspase-8、RIP和NF-kBp65高表达,提示caspase-8、RIP和NF-kB065在口腔扁平苔藓的发病中起一定作用.     

口腔扁平苔藓病损区B7抗原及CD28的表达及意义

目的 :探讨B7/CD2 8共刺激旁路在口腔扁平苔藓 (OLP)病损形成及发展中的作用。方法 :采用免疫组化方法对 46例OLP病损区B7抗原 (B7-1/CD80 ,B7-2 /CD86)及其配体CD2 8的表达情况进行检测 ,并与其局部病变、临床病程及病变类型相联系。结果 :①CD2 8阳性细胞见于所有OLP病损固有层淋巴细胞浸润带中 ,占总浸润细胞数的 45 % -80 %。②CD86低水平表达于正常口腔黏膜上皮及固有层的部分树突状细胞 ,但在不同病程及病变类型OLP病损中均有表达上调 (t =3 4.3 5 ,P <0 .0 1) ;CD86阳性细胞数在有基底层破坏的OLP病损中更多 ,差异有显著性 (t =2 .72 ,P <0 .0 5 )。③OLP病损中CD86阳性细胞与CD2 8阳性细胞之间存在数量上的正相关关系 (γ =0 .946,P <0 .0 1) ;④CD80 低水平表达于 80 .43 %的OLP病损上皮及邻近的结缔组织中 ,但在正常黏膜无表达。结论 :CD2 8-B7共刺激信号涉及OLP病损的形成及发展过程 ;其中 ,口腔黏膜上皮抗原呈递细胞上的CD86与存在于T细胞上的CD2 8分子间的结合及产生的效应 ,在OLP局部破坏性病损的形成中可能起重要作用 ,而CD80 则可能与OLP病损的慢性迁延状态有关。     

口腔扁平苔藓病损区细胞间黏附分子1、干扰素γ表达及意义

目的:探讨细胞间黏附分子1(ICAM-1)和干扰素γ(IFN-γ)在口腔扁平苔藓(OLP)病损形成及发展中的作用和意义.方法:55 例OLP和10 例正常口腔黏膜石蜡包埋组织,采用免疫组化SP法检测ICAM-1和IFN-γ蛋白表达情况,分析两者的相关性及其与OLP临床病理特征的关系.结果: ICAM-1 和IFN-γ在OLP病损中的表达高于正常口腔黏膜中的表达,差异均有统计学意义(P<0.05).OLP上皮组织中ICAM-1的表达与IFN-γ的表达存在正相关关系(P<0.05).IFN-γ和上皮ICAM-1的阳性表达率与OLP基底细胞液化程度存在正相关关系(P<0.05).结论:OLP病损中ICAM-1异常高表达可能与IFN-γ有关,两者协同参与了口腔扁平苔藓病理过程,可能在OLP病损形成中起重要作用.     

OLP组织中Smad7蛋白的表达研究

目的:检测Smad7蛋白在口腔扁平苔藓(OLP)组织中的表达及分布,探讨其在OLP发病机制中的作用。方法:采用免疫组化SABC法,用Smad7兔抗人多克隆抗体检测60例OLP病变组织及10例正常口腔黏膜组织中Smad7蛋白的表达及分布。结果:Smad7在OLP病变组织有明显的阳性表达,而在正常口腔黏膜组织中阴性表达(P<0.05)。结论:Smad7蛋白在OLP病变组织中高表达,其在OLP发病机制中有重要作用。     

口腔扁平苔藓患者血清IFN-γ、IL-10和IL-17表达分析

目的观察口腔扁平苔藓(OLP)患者血清中Th型细胞因子IFN-γ、IL-10和IL-17表达,初步探讨其在OLP发生发展中的作用。方法选择2011—2014年在上海市口腔病防治院口腔内科就诊的OLP患者15例,健康志愿者15例,采集静脉血,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中IFN-γ、IL-10和IL-17含量。结果实验组、对照组OLP患者血清中Th1型细胞因子IFN-γ的含量无显著差异(P>0.05),Th2型细胞因子IL-10含量为(43.3±4.6)、(29.0±5.1)pg/m L,实验组高于对照组(P<0.05)。IFN-γ与IL-10的比值(即Th1/Th2)为0.418、0.712,实验组较对照组的比值减小。两组Th17型细胞因子IL-17含量为(23.6±2.7)、(16.8±3.3)pg/m L,实验组高于正常对照组(P<0.05)。结论 Th型相关细胞因子失衡与OLP的发生发展密切相关。     

表皮生长因子受体在口腔扁平苔藓组织中的表达

目的探讨口腔扁平苔藓(OLP)癌变及发病机制。方法采用免疫组化法检测10例正常口腔黏膜,16例扁平苔藓,10例扁平苔藓伴不典型增生,14例口腔鳞癌上皮组织中表皮生长因子受体(EGFR)的表达水平。结果OLP伴不典型增生组织中EGFR的表达高于正常黏膜(P<0.05)。口腔鳞癌中EGFR的表达高于正常黏膜及OLP(P<0.01)。结论EGFR的过表达在OLP的发生、发展过程中可能起着重要的作用。     

白细胞介素8基因在口腔鳞癌中的表达及意义

目的:探讨IL-8 mRNA在口腔鳞癌和正常口腔黏膜组织中的表达及意义。方法:采用实时荧光定量PCR法对35例口腔鳞癌组织和15例正常口腔黏膜组织中IL-8 mRNA的表达进行定量检测,并分析其与临床特征的相关性。结果:①IL-8 mRNA在口腔鳞癌中的表达为1.02±0.78,明显高于其在正常黏膜中的表达0.51±0.43,两者比较具有统计学意义(P<0.05);②IL-8 mRNA在中低分化和临床III、IV期口腔鳞癌中的表达显著高于其在高分化和临床I、II期口腔鳞癌中的表达(P<0.05)。结论:IL-8 mRNA在口腔鳞癌组织中呈高表达,并与分化程度和临床分期相关。     

IL-2、IL-1O在口腔扁平苔藓发病中的作用

目的：通过对口腔扁平苔藓（OLP）局部组织及外周血中IL-2、IL-10表达进行研究,进-步探讨OLP发病机制。方法：应用免疫组织化学SABC法检测30例OLP中IL-2、IL-10的表达数量及分布,同时用ELISA法检测外周血中IL-2、IL-10的含量。结果：①在病损组织中,OLP组中IL-2、IL-10表达显著高于对照组（P〈0．05）。IL-2主要分布在淋巴细胞浸润带,在基底膜附近较集中;IL-10主要分布在固有层,远离基底膜。②在外周血中,糜烂型OLP组IL-2、IL-10含量明显高于对照组和非糜烂型OLP组（P〈O．05）。结论：①根据IL-2、IL-10在OLP中表达和分布情况,提示IL-2、IL-10在OLP发病机制中参与了机体免疫的调节和介导作用。②外周血中IL-10高表达,提示糜烂型OLP患者全身的免疫反应参与了本病的形成或可能伴有全身免疫系统功能紊乱。     

口腔扁平苔藓黏膜成纤维细胞KGF的表达水平检测

目的 检测体外培养的正常口腔黏膜与口腔扁平苔藓黏膜成纤维细胞表达和分泌的角质细胞生长因子(KGF)的量。方法 应用酶联免疫吸附剂测定(enzyme-linked immunosorbnent assay,ELISA)技术检测体外培养的14例口腔扁平苔藓黏膜成纤维细胞和11例正常口腔黏膜成纤维细胞分泌的角质细胞生长因子蛋白的情况。提取各组细胞RNA,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测KGF mRNA表达量的变化。结果 ELISA测定结果显示,扁平苔藓黏膜成纤维细胞分泌角质细胞生长因子蛋白量低于正常口腔黏膜,经检验差异有统计学意义(P0.05)。结论 与正常口腔黏膜相比,口腔扁平苔藓黏膜成纤维细胞分泌的角质细胞生长因子蛋白水平降低,而在基因水平上没有变化。     

KLF-6在口腔扁平苔藓恶变中的表达研究

目的 探讨KLF 6在口腔扁平苔藓发病机制及癌变中的作用。方法 分别采用免疫组化和Western blot方法对10例正常口腔黏膜、30例扁平苔藓患者和22例口腔鳞癌患者的上皮组织中KLF 6蛋白进行t检测,比较其在三者之间的差异。SPSS 14.0对数据进行检验。结果 扁平苔藓患者组织中KLF 6蛋白的表达明显低于正常口腔黏膜,两组之间具有显著性差异;口腔鳞癌患者组织中KLF 6蛋白的表达明显低于扁平苔藓组织,两组之间具有显著性差异。结论 KLF 6的表达异常可能在口腔扁平苔藓的发生发展及癌变的过程中起作用。     

Cutaneous lymphocyte associated antigen (CLA) and αeβ7 integrins are expressed by mononuclear cells in skin and oral lichen planus

The cutaneous lymphocyte associated- (CLA-) positive subset of lymphocytes appears to migrate preferentially into skin by interacting with E-selectin on vascular endothelium: lymphocytes expressing the αeβ7 integrin accumulate preferentially in the epithelium of the gastrointestinal tract. To determine whether the mononuclear cell population of the oral mucosa resembles that of the skin or intestine, and using lichen planus as a model, the proportions of CLA- and αeβ7-positive cells in the epithelium, lamina propria and peripheral blood were compared by immunostaining and flow cytometry. In both skin and oral lichen planus, selective accumulation of CLA-positive cells was seen in the epithelium but not in the lamina propria. In contrast, large numbers of αeβ7-positive intraepithelial cells were found in oral but not in skin lichen planus. These results show that in terms of CLA and αeβ7 expression there are important differences in the mononuclear cell population of oral mucosa and skin.     

热休克蛋白60、70在口腔扁平苔藓中表达的研究

目的　探讨热休克蛋白 (heatshockprotein ,HSP) 60和HSP70在口腔扁平苔藓病变中的作用。方法　对 62例口腔扁平苔藓、1 0例正常口腔粘膜、2 1例慢性盘状红斑狼疮、1 0例粘膜良性淋巴组织增生病 ,46例白斑进行免疫组织化学SP法染色 ,分析HSP60、HSP70在口腔扁平苔藓中的表达 ;对 1 2例口腔扁平苔藓和 5例正常粘膜进行逆转录PCR实验 ,观察HSP60、HSP70mRNA的变化。结果　HSP60在口腔扁平苔藓病损区的表达较其他各组显著增强 ,差异有显著性 (P <0 0 0 1 )。HSP70在糜烂型口腔扁平苔藓病损区的表达下调。RT PCR结果显示 ,HSP60、HSP70mRNA表达增强。结论　HSP60及HSP70在口腔扁平苔藓的发病中起重要作用     

Langerhans cells expressing HLA-DQ, HLA-DR and T6 antigens in normal oral mucosa and lichen planus

We compared Langerhans cells (LC) expressing HLA-DQ, HLA-DR and T6 antigens in biopsies from the same oral mucosal site in 12 patients with oral lichen planus and eight healthy volunteers. LC expressing each antigen were observed in all the specimens, but in lichen planus the cells were located in higher levels of the epithelium than in controls. Compared with controls, lichen planus contained significantly more HLA-DQ-positive LC (P = 0.04) and fewer HLA-DR-positive LC (P = 0.05), but there was no such difference in T6-positive LC. In lichen planus specimens, there were significantly more LC expressing HLA-DQ and T6 than HLA-DR (P = 0.0001 and 0.02 respectively); no such differences were found in normal mucosa. Epithelial cells in lichen planus expressed HLA-DR antigen, but not HLA-DQ or T6 antigens. We conclude that in lichen planus there is modulation of HLA-DR and HLA-DQ antigen expression by LC, or differences in the number of LC expressing those antigens.     

端粒酶逆转录酶mRNA在口腔扁平苔藓中的表达

目的 探讨端粒酶逆转录酶(TERT)mRNA在口腔扁平苔藓(OLP)中的表达及临床意义。方法 采用原位杂交(ISH)的方法,检测了20例糜烂型扁平苔藓(erosive oral lichen planus,eOLP)、20例非糜烂型扁平苔藓(non-erosive oral lichen planus,neOLP)和12例正常口腔黏膜TERT mRNA的表达。结果 糜烂型OLP的TERT mRNA阳性率明显高于非糜烂型OLP的TERT mRNA阳性率(P<0.05)。糜烂型OLP与非糜烂型OLP染色强度相比有统计学意义(P<0.05)。结论 糜烂型OLP的上皮细胞可能比非糜烂型OLP的上皮细胞处于更高的增殖状态。     

Immunohistochemical study of oral lesions of lichen planus: diagnostic and pathophysiologic aspects

The immunophenotype of lymphoid cells in the epithelium and lamina propria of the oral mucosa were examined in patients with lichen planus, nondysplastic leukoplakia, leukoplakia with lichen planus, and other unrelated lesions. In all groups T lymphocytes were predominant; however, the T4/T8 lymphocyte ratio was higher with lichen planus than with other groups. This may be of diagnostic value in the histologic evaluation of oral lesions not typical of lichen planus. Finally, a higher percentage of Langerhans cells were observed in lichen planus. An immunologic pathogenesis of lichen planus is proposed.     

Oral lichen planus may enhance the expression of Th17-associated cytokines in local lesions of chronic periodontitis

Objectives

This study aims to compare the expression levels of interleukin (IL)-17 and IL-23 in local periodontal tissues from patients with both chronic periodontitis and oral lichen planus (CP-OLP), patients with chronic periodontitis (CP) only, patients with oral lichen planus (OLP) only, and healthy controls (HC).

Materials and methods

The periodontal tissues were collected from 15 CP-OLP patients, 15 CP patients, 15 OLP patients, and 10 healthy controls. Immunohistochemistry (IHC) and real-time quantitative PCR (qPCR) was performed to investigate the protein and mRNA expression level of IL-17 and IL-23 in periodontal lesions from these four groups.

Results

IHC statistical analysis showed that the expression level of IL-17- and IL-23p19-positive cells significantly increased in CP-OLP group compared with that in CP (P?<?0.01) and OLP groups (P?<?0.05), showing intense staining reaction in local lamina propria lesions. Meanwhile, qPCR result showed higher IL-17 mRNA level in CP-OLP compared with that in CP and OLP groups and demonstrated a significant increase than OLP group (P?<?0.05). Moreover, it was found that IL-17 mRNA expression level in erosive CP-OLP patients was significantly correlated with probing depth and attachment loss (P?<?0.05).

Conclusions

This study indicated that there was an increased expression level of IL-17 and IL-23 in periodontal tissues from periodontitis patients with oral lichen planus, which might aggravate the inflammatory response in local lesions.

Clinical relevance

Oral lichen planus and chronic periodontitis may have interaction in disease pathogenesis, while IL-17 detection in local lesions may be helpful in identifying the disease severity in periodontitis patients with oral lichen planus.