五味子冻干粉改善睡眠剥夺果蝇睡眠作用的实验研究

目的：探讨五味子冻干粉改善睡眠剥夺果蝇睡眠的作用。方法：在恒温、恒湿、自动光控条件下,以7日龄果蝇作为观察对象,分别采用光照和机械刺激两种不同的方法,复制果蝇的睡眠剥夺模型。利用果蝇活动监测仪（DAMS）,以静止时间持续5min以上作为睡眠标准,观察以8%五味子冻干粉连续给药6天（雌果蝇）或给药4天（雄果蝇）后,果蝇睡眠时间的变化。结果：两种方法均可剥夺果蝇的睡眠,与正常果蝇相比,睡眠剥夺果蝇的睡眠时间明显缩短（P<0.01）。给予五味子冻干粉后,无论光照刺激还是机械刺激所致睡眠剥夺果蝇的睡眠时间均明显增加,与睡眠剥夺模型对照组比较,具有显著性差异（P<0.01）。结论：8%五味子冻干粉对睡眠剥夺果蝇的睡眠有一定改善作用。     

五味子冻干粉改善果蝇睡眠作用的量效与时效关系研究

目的 :探讨五味子冻干粉改善果蝇睡眠作用的量效与时效关系。 方法 :在恒温、恒湿、自动光控条件下,以7日龄果蝇作为观察对象,分别给以含药浓度为0.25％,0.5％,1％,2％,4％,8%的培养基(每只培养指管分别含冻干粉30,60,120,240,480,960 mg),利用果蝇活动监测仪(DAMS),以静止时间持续5 min以上作为睡眠标准,观察并分析24 h内睡眠总时间的变化,探讨量效关系;在此基础上以不同时长给药,观察其24 h内睡眠总时间变化,探讨时效关系。 结果 :雌果蝇在8％药物培养基、给药6 d情况下睡眠延长最明显;而雄果蝇在8％药物培养基、给药4 d情况下睡眠延长最明显。 结论 :五味子冻干粉可以改善果蝇睡眠,并在一定范围内呈现量效和时效关系。     

夜间重复光照刺激建立果蝇睡眠剥夺模型的研究

目的 建立一种简单易行的果蝇睡眠剥夺模型.方法 以5～7日龄野生型Canton S果蝇为实验对象,通过夜间重复光照刺激干扰果蝇睡眠,采用睡眠时间、睡眠次数和睡眠深度指数等为果蝇睡眠评价指标,分别观察光照刺激对雌、雄果蝇睡眠的影响.结果 夜间重复光照刺激可显著减少雌果蝇的夜间睡眠时间(P＜0.01),显著降低了雌果蝇的睡眠强度(P＜0.01);夜间重复光照刺激可显著减少雄果蝇的夜间睡眠时间(P＜0.01),显著降低了雄果蝇的睡眠强度(P＜0.01).结论 通过夜间重复光照刺激可成功建立野生型Canton S果蝇的睡眠剥夺模型.     

刺五加对果蝇睡眠剥夺模型睡眠及全基因表达谱的影响

目的:探讨刺五加对睡眠剥夺果蝇睡眠的改善作用,并进行差异基因表达谱初步分析。方法:在恒温、恒湿、自动光控条件下,选取7日龄野生型Canton S品系黑腹果蝇为试验对象,采用光照刺激的方法复制果蝇睡眠剥夺模型,利用自动红外果蝇活动监测系统,以果蝇24h总睡眠时间和睡眠指数为观察指标,进行刺五加改善睡眠剥夺果蝇睡眠作用的量-效与时-效关系研究;在此基础上,采用果蝇表达谱芯片技术进行刺五加改善果蝇睡眠的差异基因表达谱初步分析。结果:刺五加浓度1%、给药3天以上,对果蝇睡眠的改善作用最明显;与模型组相比,刺五加组共有差异表达基因685个,上调基因188个,下调基因497个。结论:刺五加对果蝇睡眠剥夺模型的睡眠具有明显的改善作用,其作用机制涉及免疫反应和多细胞生物过程等相关基因表达的变化。     

睡眠剥夺动物模型及其在中医药改善睡眠研究中的应用

整理国内外常用的睡眠剥夺模型建立方法,并探讨其在中医药改善睡眠研究中的应用,为从中医药角度建立新型且更可靠的睡眠剥夺模型做好理论基础。查阅近15年内睡眠剥夺模型建立及应用的相关文献,归纳总结国内外主要的睡眠剥夺模型及其原理和优缺点并给出模型的改进方法,并结合其在中医药改善睡眠相关研究中的应用,比较模型在中医证型方面中各自的不同之处。结果表明啮齿类动物睡眠剥夺模型主要有水平台剥夺模型、应激剥夺模型、强迫运动剥夺模型、化学刺激剥夺模型、轻柔刺激剥夺模型等;果蝇睡眠剥夺模型主要有机械剥夺模型、夜间重复光照剥夺模型、基因修饰法等;中医药改善睡眠研究中的睡眠剥夺动物模型主要包括阴虚失眠模型、肝郁失眠模型、心肾不交失眠模型等。不同动物睡眠剥夺模型有各自优缺点,在进行中医药改善睡眠研究时需根据具体情况灵活选择,其与中医证型结合方面有待完善;现有的睡眠剥夺模型大多在准确性和稳定性方面均有欠缺,影响实验结果的可靠性;睡眠剥夺模型致力于结合基本模型与中医失眠证型表现,而睡眠剥夺模型在中医药方面的应用尚不十分广泛,建立符合中医药研究思路的睡眠剥夺模型应是中医药改善睡眠研究中的重点。     

基于果蝇基因芯片技术研究刺五加改善睡眠作用的分子机制

本研究以果蝇为模式生物,应用果蝇全基因组表达谱芯片技术研究刺五加对果蝇睡眠-觉醒相关基因表达的影响,并通过生物信息学中数据分析技术探讨刺五加改善睡眠的机制.研究结果表明,刺五加改善果蝇睡眠的作用是以dco、slo、Nos和DopR2等基因为主要参与者的多基因参与的过程和多基因共同调节的结果.     

四逆散冻干粉改善果蝇睡眠作用的量效时效关系研究

目的:研究四逆散冻干粉改善果蝇睡眠作用的量-效与时-效关系。方法:选取野生型Canton S品系黑腹果蝇为试验对象,利用自动红外果蝇活动监测系统,以果蝇24 h总睡眠时间为观察指标,分别进行四逆散冻干粉改善睡眠作用的量-效与时-效关系的研究。结果:雌雄果蝇的24 h总睡眠时间随着给药剂量的增加而增加,具有一定的剂量依赖关系,雌果蝇的最大有效剂量是4%,而雄果蝇的最大有效剂量为2%,雌果蝇连续给药4 d果蝇24 h总睡眠时间最长,而雄果蝇连续给药7 d,其24 h总睡眠时间最长。结论:四逆散冻干粉能促进果蝇的睡眠,但对雌、雄果蝇睡眠的影响程度不同。雌果蝇给药高浓度短时间效果较好,雄果蝇给药低浓度长时间效果好。     

芳香开窍滴鼻剂抗睡眠剥夺作用研究

目的:观察芳香开窍滴鼻剂的抗睡眠剥夺作用.方法:用小平台水环境法(flower pot technique)对大鼠进行连续72h快速动眼相睡眠剥夺,建立睡眠剥夺(sleep deprivation,SD)病理模型.芳香开窍滴鼻剂鼻粘膜给药,观察其对大鼠疲倦程度、学习能力、运动功能的影响.结果:高、中、低剂量组大鼠每日落水次数与模型组比较有显著性差异.高、中剂量组大鼠学习记忆测试及运动功能与模型组比较有显著性差异.结论:芳香开窍滴鼻剂可改善大鼠疲倦程度,提高学习能力,改善运动协调性,具有抗睡眠剥夺的作用.     

双夏汤改善老年果蝇片段式睡眠的药效学研究

目的：本文主要探究双夏汤水煎液冻干粉对正常雌性老年果蝇片段式睡眠活动的改善作用。方法：以果蝇为模式生物,使用果蝇自主活动监测软件对果蝇的自主活动进行监测,探究双夏汤对老年果蝇片段式睡眠的调节。结果：双夏汤冻干粉的最佳给药浓度为2.5%,最佳给药天数为4天。相比于正常对照组,双夏汤给药组、阳性药组的35日龄处女蝇睡眠时间均有所延长。但阳性药主要影响其白天的睡眠行为,双夏汤则显著影响其夜晚的睡眠行为,延长片段睡眠时间。结论：双夏汤水煎液冻干粉能有效改善年老果蝇的片段式睡眠,相比于阳性药,在治疗夜间间歇性失眠的同时,并未显著影响果蝇白天的活动,双夏汤可能更有助于果蝇睡眠-觉醒节律的调节。     

睡眠剥夺的机制及中药对抗的研究述略

睡眠剥夺(sleep deprivation，SD)是指人因环境需要丧失正常所需睡眠量的状态。短时间SD一般不会产生明显的不良影响，而长时间睡眠剥夺(prolonged sleep deprivation，PSD，一般指机体在24h或更长的时间内维持清醒的一种状态)则会产生较大的不良影响。本文将对相关文献作如下综述。     

南,北五味子的红外光谱鉴别

对南五味子和北五味子药材的石油醚、乙醚和水的提取物进行红外光谱测定，结果南五味子和北五味子分别具有和很好的光谱特征，根据其红外光谱可以准确地鉴别南、北五味子。     

南北五味子中木脂素类成分含量的比较

目的:建立同时测定南、北五味子中5种木脂素成分(五味子醇甲、五味子醇乙、五味子酯甲、五味子甲素和五味子乙素)含量的超高效液相色谱法,并比较不同产地五味子类药材中木脂素类成分含量。方法:Acquity UPLC BEH C18色谱柱(2.1 mm×50 mm,1.7μm),流动相乙腈-水,梯度洗脱,流速0.4 m L·min-1,检测波长235 nm,柱温45℃,进样量1μL。以5种成分含量为评价指标,采用聚类分析法对南北五味子进行种类识别。结果:分析时间内,上述5种木脂素成分在10 min内分离度良好,在0.001~0.222μg线性关系良好,相关系数均0.999 8,平均加样回收率在97.7%~105.1%,RSD均3.0%。南北五味子中5种木脂素类成分含量差异显著,聚类分析结果也表明,南北五味子能完全被区分为两大类。结论:该方法重复性好,准确可靠,灵敏度高,可为五味子类药材的分类和质量控制提供参考。     

五味子炮制研究进展

就近年来有关五味子炮制原理、炮制机理两个方面的研究工作状况作一综述,为五味子的科学炮制与临床应用提供参考。     

五味子药理作用研究进展

通过查阅近年来有关资料，对五味子的药理作用研究进展进行了综述。     

五味子与南五味子药材的DNA条形码鉴定

目的:利用内转录间隔区2(ITS2)序列对五味子及南五味子药材进行DNA条形码鉴定。方法:对五味子和南五味子样品的ITS2序列进行聚合酶链式反应(PCR)扩增和测序。从Gen Bank中下载了五味子属10个近缘种和2个外类群的ITS2序列。利用Codon Code Aligner软件拼接,采用MEGA 5.10计算相关数据,基于K2P模型构建聚类树(NJ树),应用Blast法进行鉴定分析。获取所测样品序列的ITS2二级结构信息,分析各样品间ITS2序列二级结构的差异。结果:五味子、南五味子样品序列长度分别为231,225~227 bp,Blast鉴定五味子药材原植物为五味子Schisandra chinensis,南五味子药材原植物为华中五味子S.sphenanthera。五味子与南五味子药材的种间K2P遗传距离(0.010 4~0.015 7)远大于五味子种内K2P遗传距离(0~0.002 5)和南五味子种内K2P遗传距离(0~0.005 1)。在NJ树模型中,五味子样品被独聚为1支,南五味子样品被独聚为1支,皆表现出单系性,Bootstrap支持率较高,可与五味子属近缘种区分开。结论:以ITS2序列为标准的DNA条形码能够有效地鉴定五味子和南五味子药材。     

五味子在肝病治疗中的应用

五味子具有柔肝养阴功效,可保护肝脏、降低转氨酶。临床应用不宜用于湿热所致转氨酶的升高,待转氨酶复常后应逐渐减量,避免复发。     

五味子配方颗粒工艺研究

目的:优化五味子配方颗粒的制剂工艺。方法:以五味子醇甲、五味子酯甲、五味子甲素、五味子乙素为指标,考察提取溶媒、药材破碎程度对提取工艺的影响,并优选提取工艺参数。结果:五味子药材破碎后以乙醇提取,其活性成分可得到有效提取,优化后提取工艺参数为药材破碎过40目筛,以70%乙醇提取2次,每次提取2 h。结论:五味子配方颗粒工艺经过优化,比目前市售产品工艺合理,质量得到保证。     

五味子红色素抗氧化活性

目的:研究五味子红色素的抗氧化作用.方法:采用紫外-可见分光光度法,以维生素C(VC)和维生素E(VE)作为阳性对照品,通过测定清除二苯代苦味酰基自由基( DPPH·)、超氧阴离子自由基(O2-·)、羟基自由基(·OH)的能力,研究五味子红色素的抗氧化活性.结果:五味子红色素清除3种自由基的EC50分别为:清除DPPH·能力(27.95 mg·L-1)、清除·OH能力(98.03 mg·L-1)、清除O2-·能力(154.270 mg·L-1),其清除自由基能力与VC相差不大,远强于VE.结论:五味子红色素具有较强的抗氧化活性,且成明显的量效关系.     

五味子炮制研究进展

五味子药理作用的变化取决于其内在成分的变化,而五味子内在成分的变化又进一步受其炮制工艺的影响。因此,五味子炮制工艺的确定,需以其化学成分及药理作用为依据。为便于厘清五味子炮制工艺与内在成分和药理作用之间的关联,发现已有炮制工艺存在的问题,现对近10年来与五味子炮制方法、炮制工艺及炮制品化学成分、药理作用、分析方法等相关的文献进行综述,为五味子的科学炮制与临床应用提供参考。通过文献分析发现:在优选五味子各炮制方法的最佳工艺时,常以辅料用量、闷润时间、炮制时间为考察因素,评价指标则不尽相同,目前常见有总木脂素、五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素、安五脂素、襄五脂素、黑润程度、水浸率、醇浸率、色谱峰、总糖类;酒制五味子的理论研究趋于系统化,并给出了相近的炮制工艺,但对于五味子的醋制及蜜制,目前还没有全国统一的炮制技术参数。