O6-苄基鸟嘌呤增强1，3-二（2-氯乙基）-亚硝基脲对人肝癌细胞及其移植瘤的抗肿瘤作用

应用噻唑蓝（MTT）法检测O⁶-苄基鸟嘌呤(O⁶-BG)与1,3-二（2-氯乙基）-亚硝基脲（BCNU）合用的细胞毒作用及透射电镜检测凋亡细胞的方法研究了O⁶-BG对O⁶-烷基鸟嘌呤-DNA烷基转移酶（O⁶-AGT）阳性的人肝癌细胞SMMC-7721对BCNU细胞毒作用敏感性的影响及其与BCNU合用治疗移植瘤的协同效果. 结果显示：1.5-6.0 mg·L^-1的O⁶-BG预先作用2 h后,SMMC- 7721细胞对BCNU的敏感性明显增加;0.75-6.0 mg·L^-1的O⁶-BG可完全快速地抑制肿瘤细胞的AGT活性并持续12 h; ip 90 mg·kg^-1的O⁶-BG预处理2 h后给予25 mg·kg^-1的BCNU治疗,可使动物sc接种的人肝癌移植瘤生长延迟38.6 d, 诱导肿瘤细胞凋亡,并且可明显抑制肿瘤组织的转移酶活性. 说明O⁶-BG与BCNU合用于AGT阳性的肿瘤将具有明显的治疗效果.     

以DNA修复蛋白AGT为靶向的PET显像剂前体O^6-苄基鸟嘌呤类似物的体外初步生物评价

合成一系列O^6-苄基鸟嘌呤（O^6-BG）类似物，并且采用MTT法评价其体外对DNA修复蛋白AGT的抑制作用，探讨其作为潜在的正电子发射断层成像技术（PET）显像剂前体的可能性。以鸟嘌呤作为起始原料分别合成了O^6-BG及其类似物HMBG，MOBG，MOMOBG，BABP和PEG。采用MTT方法，通过测定合成产物增强HeLa细胞对1，3-双（2-氯乙基）亚硝基脲（BCNU）药物敏感性的强弱来评价其对AGT的抑制作用。合成产物对AGT抑制活性强弱排序为HMBG≥O^6-BG≥MOBG≥MOMBG，而BABP和PEG基本未表现出任何的AGT抑制活性。HMBG，MOBG和MOMBG具有良好的体外活性，其正电子核素标记物可能成为有前景的用于肿瘤AGT显像的PET显像剂。     

新型γ-环糊精衍生物Aom0498-1和Aom0498-3的肌松拮抗作用(英文)

目的寻找并筛选可选择性地逆转甾类非去极化肌松药的肌松拮抗剂。方法应用一锅法合成了2种6-脱氧-6-硫醚乙酰基甘氨酸-γ-环糊精衍生物Aom0498-1和Aom0498-3。采用3种动物模型测定Aom0498-1和Aom0498-3对罗库溴铵导致的神经-肌肉阻滞的逆转作用:①小鼠体外神经-膈肌标本模型中的肌张力恢复比率。将小鼠随机分成5组:生理盐水(正常对照组),γ-环糊精1.8,3.6,5.4μmol·L-1,Aom0498-1 1.8,3.6,5.4μmol·L-1,Aom0498-3 1.8,3.6,5.4μmol·L-1以及舒格麻坦(sugammadex)1.8,3.6,5.4μmol·L-1(阳性对照)组;②豚鼠体内模型中的4个成串刺激比恢复50%及75%的时间。将豚鼠随机分为5组:生理盐水(正常对照),γ-环糊精2 mg·kg-1,Aom0498-1 2 mg·kg-1,Aom0498-3 2 mg·kg-1以及舒格麻坦2 mg·kg-1(阳性对照)组;③家兔体内模型中的捏耳反射恢复时间。将动物随机分为5组:生理盐水(正常对照组),γ-环糊精6 mg·kg-1,Aom0498-1 6 mg·kg-1,Aom0498-3 6 mg·kg-1以及舒格麻坦6 mg·kg-1(阳性对照)组。同时,对Aom0498-1以及Aom0498-3的单次给药毒性也进行了初步的检测,并与舒格麻坦进行了比较。将小鼠随机分为生理盐水组,Aom0498-1 2,4和8 g·kg-1组,Aom0498-3 2,4和8 g·kg-1组以及舒格麻坦2,4和8 g·kg-1组。结果①在小鼠神经-膈肌标本模型中,Aom0498-1 1.8,3.6和5.4μmol·L-1组肌张力恢复比例分别为(2.5±1.0)%,(6.9±2.6)%和(24.5±9.1)%,同浓度Aom0498-3组分别为(17.4±1.7)%,(65.5±0.6)%及(100.0±8.9)%,均显著高于同浓度γ-环糊精组的(1.1±0.5)%,(2.6±0.7)%和(10.3±6.1)%(P<0.05)。Aom0498-3 1.8,3.6和5.4μmol·L-1组肌张力恢复比例显著高于相应同浓度的舒格麻坦组(P<0.05),Aom0498-1 1.8,3.6和5.4μmol·L-1组肌张力恢复比例则显著低于相同浓度的舒格麻坦组(P<0.05)。②在豚鼠模型中,Aom0498-3 2 mg·kg-1组4个成串刺激比恢复至50%及75%的时间显著低于γ-环糊精2 mg·kg-1组(P<0.05),与舒格麻坦2 mg·kg-1组相当;Aom0498-1 2 mg·kg-1组恢复至50%时间显著低于γ-环糊精2 mg·kg-1组,Aom0498-1 2 mg·kg-1组恢复至75%时间显著高于舒格麻坦2 mg·kg-1组。③在家兔模型中,Aom0498-1 6 mg·kg-1组和Aom0498-36 mg·kg-1组恢复时间显著低于γ-环糊精6 mg·kg-1组(P<0.05)。Aom0498-3 6 mg·kg-1组恢复时间显著低于舒格麻坦6 mg·kg-1组。单次给药毒性检测结果显示,舒格麻坦2,4及8 g·kg-1组中出现一过性或中等程度副作用的小鼠数多于Aom0498-1以及Aom0498-3对应浓度组。结论合成的Aom0498-1和Aom0498-3具有较高的逆转罗库溴铵活性的作用,提示该系列γ-环糊精衍生物可作为候选药物用于选择性肌松拮抗剂的开发。     

吗啡对增殖细胞核抗原(PCNA)基因表达的影响

目的 :研究吗啡对培养的大鼠胶质细胞瘤C6的增殖抑制作用及其机制。方法 :3H -TdR掺入法测定吗啡对细胞增殖的影响 ;RT -PCR方法观察吗啡对细胞PCNA基因表达的影响。免疫组织化学法观察吗啡对细胞PCNA蛋白质水平的影响。结果 :不同浓度吗啡 (0 0 0 1- 10 0mg·L- 1 )作用于培养C6细胞 2 4h后 ,3H -TdR掺入量剂量依赖性降低。不同浓度吗啡 (0 0 0 1- 10 0mg·L- 1 )作用于培养C6细胞 2 4h后 ,细胞PCNAmRNA的相对含量与对照组相比均明显减少 (P <0 0 1)。 10mg·L- 1 吗啡作用细胞 6 - 4 8h后 ,不同时间点吗啡组细胞的PCNAmRNA的相对含量与对照组相比均明显减少 (P <0 0 1)。10mg·L- 1 吗啡作用细胞 2 4h后 ,与相邻吗啡组比较细胞内PCNA蛋白质水平明显降低 (P <0 0 1)。结论 :吗啡对胶质细胞瘤C6的增殖具有抑制作用 ,其机理可能与吗啡使细胞中PCNA的基因表达水平降低有关。     

合用盐酸黄连素前后环孢素A的健康人体药动学研究

目的 :研究健康受试者合用盐酸黄连素 (Ber)前后环孢素A(CsA)的动力学过程 ,以分析两药相互作用发生的部位。方法 :6名健康男性志愿者在单剂口服CsA (6mg·kg-1)后开始连续服用Ber 13d(30 0mg·bid-1) ,然后再单剂口服CsA (6mg·kg-1) ,每次口服CsA后即按时采血 ,并用FPIA法测定全血CsA浓度 ,并计算出药动学参数。结果 :合用Ber前后CsA的主要药动学参数Ka 分别为 0 .91± 0 .30h-1和 1.0 9± 0 .35h-1;T1 2 β分别为 6.18± 0 .94h和6.86± 1.2 7h ;AUC0 -2 4 分别为 11.0± 1.6和 10 .6±1.6mg·h-1·L-1;CL(s)分别为 34.3± 6.7L·h-1和36.6± 9.3L·h-1;Tpeak均为 1.5± 0 .6h ;Cmax分别为1.8± 0 .4mg·L-1和 1.9± 0 .3mg·L-1。结论 :在健康志愿者合用Ber前后CsA的药动学参数没有显著差异 ,推测Ber对CsA的影响部位可能主要在肠道。     

20(R)-人参皂苷Rg3人体药代动力学研究

目的　研究 2 0 (R) 人参皂苷Rg3(GRg3)人体药代动力学。 方法　高效液相色谱 -紫外检测法。结果8名健康志愿者单剂量口服 3 2mg·kg-1GRg3 ,其药时曲线符合口服吸收有滞后时间的二房室模型 ,Tmax为 (0 6 6± 0 10 )h ,Cmax为 (16± 6 )ng·mL-1,T1/ 2α为 (0 46± 0 12 )h ,T1/ 2 β为 (4 9± 1 1)h ,T1/ 2 (Ka) 为 (0 2 8± 0 0 4)h ,AUC0 -∞ 为 (77± 2 6 )ng·mL-1·h ;6名健康志愿者单剂量口服 0 8mg·kg-1GRg3 ,由于血药浓度低 ,可测数据点少 ,未进行模型模拟 ;两组给药剂量与相应Cmax实测值比较 ,二者成正比关系。结论　本品口服吸收快 ,消除也较快 ,但血药浓度很低。在所试剂量范围内 ,GRg3属一级动力学吸收、消除过程。     

3-氯-1,2-丙二醇在大鼠体内的毒代动力学

目的　为了全面了解 3 氯 1 ,2 丙二醇 ( 3 MCPD)的毒理作用性质。方法　采用毛细管气相色谱 质谱 (GC MS)联用法测定大鼠血液中 3 MCPD的含量。结果　一次性给大鼠ig 75和 3 0 0mg·kg-1的3 MCPD后 ,血药浓度 时间的动力学符合一级吸收一室模型 ,t1/ 2kα 分别是 ( 1 .61± 0 .1 6)和 ( 1 .0 3±0 .1 9)h ,t1/ 2kβ是 ( 3 .40± 1 .0 1 )和 ( 7.3 8± 2 .76)h,tp为 ( 3 .2 4±0 .2 6)和 ( 3 .3 3±0 .3 9)h ,cmax为 ( 3 1±9)和( 2 1 5± 3 2 )mg·L-1,Cl是 ( 0 .2 7± 0 .1 0 )和 ( 0 .1 0±0 .0 4)mg·kg-1·h-1,V为 ( 1 .3 1± 0 .5 0 )和 ( 1 .0 1±0 .0 5 )L·kg-1。结论　结果表明 3 MCPD经胃肠道吸收入血快 ,在动物体内分布广泛。     

解热药YL2000中小檗碱在正常和发热大鼠体内的药物动力学比较

目的　探讨解热药YL2 0 0 0中小檗碱在正常和发热大鼠体内的药物动力学。方法　采用高效液相技术分别测定正常大鼠和干酵母致发热大鼠血浆中小檗碱的含量 ,使用3P87软件处理小檗碱的时量数据 ,计算各药代动力学参数。结果　在正常和发热大鼠体内 ,小檗碱的达峰时间分别为(3 4± 0 3)h和 (0 3± 2 1)h(P <0 0 5 ) ,峰值血药浓度分别达 (0 15 4± 0 0 2 3)mg·L-1和 (0 2± 0 6 )mg·L-1,T1/ 2(ke)分别长达 (6± 3)h和 (6± 5 )h ,T1/ 2 (ka)分别为 (1 2±0 4 )h和 (0 1± 2 8)h ,CL/F(s)值分别为 (4 0± 1 9)mg·kg-1·h-1/ (mg·L-1)和 (6± 6 )mg·kg-1·h-1/ (mg·L-1) ,AUC( 0～T) 值分别为 (1 8± 0 3)mg·L-1·h-1和 (0 7± 0 5 )mg·L-1·h-1(P <0 0 5 )。结论　发热降低小檗碱在体内的AUC( 0～T) 。     

甘草甜素对大鼠体内苦参碱药动学的影响

目的:研究甘草甜素对大鼠体内苦参碱药动学的影响。方法:采用高效液相色谱法测定大鼠血浆中苦参碱的含量,色谱柱为Diamonsil C1(8250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%H3PO(4三乙胺调pH值至8;35∶65),流速为1mL·min-1,柱温为30℃,检测波长为220nm。实验分为2组,A组灌胃苦参碱(70mg·kg-1),B组灌胃苦参碱(70mg·kg-1)和甘草甜素(70mg·kg-1)。应用3p97软件处理苦参碱的血药浓度-时间数据。结果:A组Cmax=(6.861±0.635)mg·L-1,AUC0～t=(47.105±7.062)mg·h·L-1,tmax=(1.471±0.438)h;B组Cmax=(4.122±0.965)mg·L-1,AUC0～t=(35.507±5.024)mg·h·L-1,tmax=(1.158±0.175)h。经统计学分析,2组之间Cmax、AUC、CL、t1/2α、t1/2β、K21均有显著性差异(P<0.05)。结论:苦参碱与甘草甜素合用,与其单独给药比较,甘草甜素对其在大鼠体内的吸收、分布、代谢及排泄都有不同程度的影响。     

Pharmacokinetics and bioavailability of R-phencynonate in Beagle dogs

Objective To evaluate the pharmacokinetics(PK)properties and bioavailability of R-phencynonate(L-8021)in Beagle dogs.Methods Fifteen healthy Beagle dogs were randomly divided into three groups,each group was orally given single dose of 0.1 mg·kg-1,0.4 mg·kg-1 and 1.2 mg·kg-1 R-phencynonate respectively.After one week cleaning,the middle dose group was injected 0.4 mg·kg-1 dose.Blood samples(about 2 mL)were collected in heparinized tubes before dosing and at 0.033,0.083,0.25,0.5,0.75,1,2,4,6,8,12 h after administration,and were then immediately centrifuged at 2000 g for 15 min.The pharmacokinetics(PK)properties and bioavailability of the drugs was evaluated using the liquid chromatographic-tandem mass spectrometric(LC-MS/MS)method.Results After p.o.administration of 0.1,0.4 and 1.2 mg·kg-1 R-phencynonate,tmax ranged within 0.65-1.2 h;t1/2z ranged within 2.84-3.36 h;CLz/F ranged within 5.00-9.32 L·h-1·kg-1;Cmax ranged within 1.87-70.34 ng·mL-1;AUC(0-t)ranged within 9.80-250.12 μg·L-1·h;After i.v.administration of 0.4 mg·kg-1,t1/2z was 2.52 h;AUC(0-t)was 238.11 μg·L-1·h.Conclusions L-8021 was dose-dependent within the range of 0.1-1.2 mg·kg-1 in Beagle dogs and the blood drug concentration-time curves were all best fitted to first order absorption two-compartment open model after via po administration of three different dosages.Following oral administration to Beagle dogs,the absolute bioavailability of L-8021 was 17.82%,which was very low and resulted from poor absorption.     

Protection of CHO cells by mutant forms of O6-alkylguanine-DNA alkyltransferase from killing by 1,3-bis-(2-chloroethyl)-1-nitrosourea (BCNU) plus O6-benzylguanine or O6-benzyl-8-oxoguanine.

O6-Benzylguanine (BG) is an inactivator of human O6-alkylguanine-DNA alkyltransferase (AGT) currently undergoing clinical trials to enhance cancer chemotherapy by alkylating agents. Mutant forms of AGT resistant to BG in vitro were expressed in CHO cells to determine if they could impart resistance to killing by the combination of BG and 1,3-bis-(2-chloroethyl)-1-nitrosourea (BCNU). All the BG-resistant mutant proteins tested (P140A, P140K, P138M/V139L/P140K, G156A, P140A/G160R, and G160R) showed a reduced rate of reaction with methylated DNA substrates in vitro. However, when expressed in equal amounts in CHO cells, mutants P140A, P140K, P138M/V139L/P140K, and G160R gave levels of protection from the chloroethylating agent BCNU equivalent to that of wild-type AGT. This indicates that a 10-fold reduction in rate constant did not prevent their ability to repair chloroethylated DNA in the cell. AGT activity was readily lost when CHO cells expressing wild-type AGT were exposed to BG or its 8-oxo metabolite (O6-benzyl-8-oxoguanine), but cells expressing mutants P140A or G160R required 30-fold higher concentrations and cells expressing mutants P140K or P138M/V139L/P140K were totally resistant. When cells were treated with 80 microM BCNU plus BG or 8-oxo-BG, those expressing wild-type AGT were killed when inhibitor concentrations of up to 500 microM were used, whereas cells expressing P140K or P138M/V139L/P140K showed no effect, and cells expressing P140A or G160R showed an intermediate resistance. These results suggest that: (i) appearance of BG-resistant mutant AGTs may be a problem during therapy, and (ii) the P140K mutant AGT is an excellent candidate for gene therapy approaches where expression of a BG-resistant AGT in hematopoietic cells is used to reduce toxicity.     

青天葵甲醇提取物通过ERK通路抑制人肝癌细胞增殖并诱导其凋亡

目的 研究青天葵甲醇提取物（Nervilia fordii methanol extracts，NFME）体外对人肝癌SMMC7721和HepG2细胞的凋亡作用及其作用机制。方法 紫外-可见分光光度法测定青天葵中总黄酮和总多酚的含量；MTT法检测不同浓度（0，0.25，0.5，1，1.5，2 mg·mL^-1）NFME处理24 h对SMMC7721、HepG2和LO2细胞生长抑制率的影响；克隆形成试验观察NFME对SMMC7721和HepG2细胞克隆形成率的影响；Hoechst凋亡染色观察NFME对SMMC7721细胞凋亡的影响；流式细胞术检测NFME对SMMC7721细胞凋亡和细胞周期的影响；Western blotting测试NFME作用下caspase3、PARP、ERK1/2和c-Raf蛋白磷酸化水平的变化。结果 NFME中总多酚含量为（4.25±0.46）mg·g^-1，总黄酮含量为（4.72±0.13）mg·g^-1；MTT试验结果显示，与对照组相比，在给药24 h时0.5 mg·mL^-1的NFME就能抑制SMMC7721和HepG2细胞的增殖（P<0.001）；克隆形成试验表明，0.125 mg·mL^-1的NFME能够抑制SMMC7721和HepG2细胞集落的形成（P<0.001）；Hoechst凋亡染色观察到0.25 mg·mL^-1的NFME作用24 h能够观察到SMMC7721细胞发生凋亡（P<0.05）；流式细胞试验结果证实0.5 mg·mL^-1的NFME能够诱导SMMC7721细胞的凋亡（P<0.01），凋亡率14.43%，阻滞细胞周期于S期；Western blotting结果表明NFME能使SMMC7721细胞中caspase3发生剪切，随着给药浓度增加其剪切作用越明显（P<0.05），活化的caspase3剪切下游PARP的表达；同时NFME能够降低SMMC7721细胞中ERK1/2和c-Raf蛋白的磷酸化水平（P<0.05）。结论 NFME能抑制人肝癌SMMC7721和HepG2细胞的活性并诱导其发生凋亡，其作用机制可能与抑制ERK信号通路从而诱导细胞凋亡有关。     

红豆杉细胞提取物对肿瘤细胞SMMC-7721和HEp-2的作用研究

目的　了解红豆杉细胞提取物对肿瘤细胞SMMC 772 1和HEp 2生长的影响及其抑制机制。 方法　运用MTT比色法测定细胞毒性和流式细胞仪分析细胞周期。结果　红豆杉细胞提取物对SMMC 772 1和HEp 2的IC50 分别为 0 1 61 4 gDCW·L- 1 和 0 2 75 6gDCW·L- 1 。细胞周期分析发现两肿瘤细胞G2 ～M期含量均有所增高。结论　红豆杉细胞提取物可以通过诱导SMMC 772 1和HEp 2发生凋亡而抑制肿瘤细胞的生长     

亚硝酸钠对人肝癌细胞增殖与凋亡的影响

目的探讨亚硝酸盐对人肝癌细胞增殖和凋亡作用。方法用不同浓度的亚硝酸钠处理人肝癌SMMC-7721细胞不同时间,用MTT分析细胞增殖,荧光显微镜下观察细胞分裂指数和凋亡率,RT-PCR分析c-myc mRNA变化,Westernblot分析缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)蛋白表达。结果亚硝酸钠诱导SMMC-7721细胞增殖和凋亡呈双相剂量效应,亚硝酸钠在低浓度时(20～200 mg.L-1),刺激细胞增殖,抑制细胞凋亡,在高浓度时(>800 mg.L-1),抑制增殖,促进凋亡。20～200 mg.L-1亚硝酸钠处理细胞可以明显增加c-myc mRNA和HIF-1α蛋白表达。结论亚硝酸钠在一定浓度范围内刺激SMMC-7721细胞增殖,但是超过一定剂量则诱导细胞凋亡。     

香参软胶囊对小鼠肝癌的抑制作用研究

目的：研究香参软胶囊对小鼠H22移植性肝癌腹水及其对SMMC7721荷瘤裸鼠的抗肿瘤作用。方法：昆明种小鼠腹腔注射H22肝癌细胞,建立肝癌腹水模型,观察香参软胶囊高（720mg·kg-1）、中（360mg·kg-1）、低（180mg·kg-1）剂量组灌胃给药对H22移植性肝癌腹水小鼠体征及生命延长率的影响;裸鼠右腋窝皮下接种SMMC7721细胞悬液,待察瘤块成形后给药。观察香参软胶囊高（720mg·kg-1）、中（360mg·kg-1）、低（180mg·kg-1）剂量组灌胃给药对SMMC7721荷瘤裸鼠肿瘤生长及其瘤重的影响。结果：与H22移植性小鼠肝癌腹水模型组比较,香参软胶囊高剂量组显著抑制腹围增长（P<0.01）,延长小鼠生存时间（P<0.01）;香参软胶囊中剂量组显著延长小鼠生存时间（P<0.05）。与SMMC7221荷瘤裸鼠比较,香参软胶囊各剂量组平均瘤重及肿瘤体积均小于模型组;香参软胶囊高剂量组能极显著抑制SMMC7721荷瘤裸鼠肿瘤生长,同时高剂量组对肿瘤生长的抑制作用略优于平消胶囊组。结论：香参软胶囊显著H22肝癌小鼠腹水生长,延长小鼠存活时间;香参软胶囊对裸鼠SMMC7721移植性瘤具有明显抑制作用。结果表明香参软胶囊具有较明显的抗肝癌作用。     

DADS体内诱导人胃癌细胞分化作用中组蛋白乙酰化的变化

目的观察二烯丙基二硫(DADS)在体内诱导胃癌细胞分化的作用及对人胃癌细胞移植瘤组蛋白乙酰化的影响。方法裸鼠皮下注入人胃癌细胞MGC803建立人胃癌异种移植模型,采用光学显微镜观察移植瘤细胞形态变化,流式细胞光度术和W estern b lot分析DADS对MGC803细胞移植瘤细胞周期分布的影响及瘤组织中p21WAF1蛋白、组蛋白H3、H4乙酰化的表达情况。结果腹腔注射DADS剂量为100、200 mg.kg-1时对移植瘤有明显生长抑制作用;光学显微镜显示经DADS处理后瘤细胞密度及异型性明显减小。流式细胞仪分析结果显示DADS呈浓度依赖性将移植瘤细胞阻滞在G2/M期。DADS浓度为100 mg.kg-1和200 mg.kg-1作用瘤细胞后,与对照组相比分别可使G2/M期细胞增加2.22和3.37倍。W estern b lot分析表明在G2/M期阻滞同时有组蛋白H3乙酰化表达增加,但组蛋白H4乙酰化表达水平不受DADS作用的影响;瘤组织中的p21WAF1蛋白表达量也随DADS浓度升高而上升。结论DADS对胃癌细胞裸鼠移植瘤的生长有明显抑制和诱导分化作用,这种抑制可能与其阻滞移植瘤细胞周期、上调瘤细胞组蛋白乙酰化及p21WAF1蛋白水平有关。     

蟾酥脂质体注射液的抗肿瘤作用

目的探讨蟾酥脂质体注射液(CS)的抗肿瘤作用。方法体内实验采用小鼠肝癌H22、肉瘤S180荷瘤小鼠模型,考察CS的抑瘤作用;采用小鼠接种肝癌H22后,用环磷酰胺造成免疫低下模型,考察CS提高机体免疫力作用。体外实验采用MTT法,测CS对人宫颈癌HeLa细胞或人肝癌BEL-7402细胞增殖抑制率。结果CS(0.2、0.4、0.8 mg.kg-1)对2种荷瘤小鼠肿瘤增长有显著或非常显著的抑制作用(P<0.05,P<0.01);同时对机体具有明显的免疫调节作用。CS 0.01~3.00 mg.L-1对人宫颈癌HeLa细胞或肝癌BEL-7402细胞增殖有非常显著的抑制作用;CS对人宫颈癌HeLa细胞IC50为0.51 mg.L-1,95%可信限0.213 2~1.214 0 mg.L-1,CS对人肝癌BEL-7402细胞IC50为0.75 mg.L-1,95%可信限0.312 6~1.801 5 mg.L-1。结论蟾酥脂质体注射液体内、体外均有抗肿瘤活性,且具有免疫调节功能。     

蟾蜍灵对肝癌细胞SMMC 7721的细胞毒作用及生长相关基因表达的影响

为探讨蟾蜍灵的抗癌作用机理 ,以肝癌SMMC772 1细胞为靶细胞 ,应用噻唑蓝还原法检测细胞毒作用 ,双荧光染色法和DNA电泳技术检测细胞凋亡与坏死 ;免疫组织化学方法检测细胞生长相关基因p2 1waf1/cip1和增殖细胞核抗原 (PCNA)蛋白表达 .结果表明 ,0 .0 1μmol·L- 1及以上浓度蟾蜍灵对SMMC772 1细胞具有显著细胞毒作用 ,形态学和DNA片段化检测证实蟾蜍灵诱导的细胞死亡以凋亡为主 ;p2 1waf1/cip1在蟾蜍灵诱导下表达上调 ,同时PCNA的表达下降 ,两者呈负相关 (P <0 .0 1) .提示蟾蜍灵通过上调p2 1waf1/cip1表达 ,下调PCNA表达 ,从而抑制肝癌细胞生长