三氧化二砷对激素非依赖性前列腺癌PC-3细胞株Bc1-2、Bax表达的影响

目的了解三氧化二砷对激素非依赖性前列腺癌PC-3细胞株细胞增殖、细胞凋亡及bcl-2、bax基因表达的影响。方法分别以1、2、3、6、10μmol／L的三氧化二砷作用于PC-3细胞，48h后对细胞增殖活性、细胞凋亡及细胞bcl-2、bax基因表达的变化进行检测。结果各浓度的三氧化二砷均可抑制PC-3细胞增殖，并具有剂量依赖性。3、6、10μmol／L的三氧化二砷还可诱导PC-3细胞凋亡，计算细胞凋亡率分别为11．8％、12．7％、29．6％。逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测PC-3细胞中bcl-2、bax表达的相对强度，发现bcl-2的表达强度随三氧化二砷浓度的升高而逐渐降低（P〈0．01），而bax表达强度变化不明显（P〉0．05）。结论三氧化二砷可有效抑制PC-3细胞增殖，诱导PC-3细胞凋亡，这一过程与三氧化二砷抑制PC-3细胞中bcl-2的表达有关。     

复方丹参注射液对体外循环后大鼠肺组织Bcl-2和Bax表达的影响

目的探讨复方丹参注射液对体外循环（CPB）后大鼠肺组织凋亡调控基因Bcl-2和Bax表达的影响。方法成年健康雄性SD大鼠24只,年龄12～16周龄,体重400～450 g,随机分为3组（n=8）：对照组、CPB组和丹参组。对照组行假手术,CPB组和丹参组建立体外循环,丹参组在停机前5 min经储血器加入复方丹参注射液1 ml/kg。CPB结束后60 min取肺组织提取总RNA,用RT-PCR方法测定凋亡调控基因Bcl-2、Bax的mRNA表达。取肺组织用多聚甲醛固定,制作石蜡切片,用免疫组织化学方法测定肺组织中Bcl-2、Bax的蛋白表达。结果与对照组相比,CPB组和丹参组肺组织Bcl-2和Bax的mRNA和蛋白表达均增加（P＜0．05或0．01）,CPB组Bax/Bcl-2比值升高（P＜0．05）。与CPB组相比,丹参组肺组织Bax的mRNA表达及Bax/Bcl-2比值均降低（P＜0．05）,肺组织Bcl-2蛋白表达增高,Bax蛋白表达降低（P＜0．01）。结论体外循环可上调凋亡调控基因的表达,复方丹参注射液能下调促凋亡基因Bax的表达,抑制大鼠肺组织的细胞凋亡因而可减轻肺损伤。     

肝门胆管癌中bcl-2的表达及临床意义

目的 探讨bcl-2表达在肝门胆管癌发生、发展中的作用，评价其在肝门胆管癌预后判断中的价值。方法 免疫组织化学法检测36例肝门胆管癌和10例正常胆管石蜡切片标本中bel-2表达，分析其与肝门胆管癌临床病理参数和术后生存率的关系，生存率计算采用Kaplan-Meier法，Log-rank检验比较生存曲线。结果 肝门胆管癌中bcl-2阳性表达率为55．6％（20／36），正常胆管bcl-2阳性率10．0％（1／10），两者差异有统计学意义（P〈0．05）；bcl-2阴性组术后1、3、5年存活率分别为82％，55％和25％，阳性组分别为33％和9％，无5年生存者，两组差异有统计学意义（P〈0．05）。结论 肝门胆管癌中bcl-2有较高阳性表达率，bcl-2表达在肝门胆管癌发生、发展中可能起促进作用；bcl-2表达可能是肝门胆管癌预后因素之一，阳性表达多提示预后不良。     

胰炎合剂对大鼠急性坏死性胰腺炎细胞凋亡水平的影响

目的：探讨中药胰炎合剂对大鼠急性坏死性胰腺炎（ANP）的治疗作用机制及凋亡基因Bax、bcl-2在ANP发病中的作用。方法：健康Wistar大鼠胆胰管内逆行注射5％牛磺胆酸钠制成ANP模型，用生理盐水、单味大黄、善宁及胰炎合剂进行干预治疗，每组大鼠30只，测定血淀粉酶、观察胰腺组织病理形态学变化并检测胰腺细胞凋亡率及Bax、bcl-2基因的表达量。结果：各组血淀粉酶明显上升，但胰炎合剂组及善宁组血淀粉酶下降较快，单味大黄组下降较慢，生理盐水组下降最慢（P〈0．05或P〈0．01）。病理形态学显示胰炎合剂组及善宁组较单味大黄及生理盐水组病变明显减轻。胰炎合剂组及善宁组细胞凋亡率及凋亡基因表达量明显高于其他两组（P〈0．05或P〈0．01）。胰腺腺细胞凋亡率变化与Bax、bcl-2基因表达量有成正比表现趋势。结论：胰炎合剂、善宁及大黄对大鼠ANP有一定的治疗作用。     

逆行灌注心脏不停跳双瓣膜置换术围术期心肌细胞凋亡及Bcl-2,Bax的表达

目的观察逆行灌注心脏不停跳双瓣膜置换术围术期心肌细胞凋亡及Bcl-2，Bax蛋白表达的变化。方法将26例风湿性心脏病患者分为两组，实验组：14例，阻断主动脉后浅低温逆行灌注持续给予氧合血，使心脏缓慢跳动（40～50次／分）；对照组：12例，中度低温阻断主动脉后根部灌注高钾含血停搏液，待心脏停搏后改为逆行灌注。术中多时点检测血浆肌酸激酶同工酶（CK-MB）、心肌肌钙蛋白T（cTnT）的含量；分别于体外循环（CPB）前，CPB后30min留取右心房标本，检测心肌凋亡细胞及免疫组化法测定心肌细胞Bcl-2和Bax蛋白表达。结果与CPB前比较，主动脉阻断30min时两组CK-MB、cTnT和心肌细胞凋亡数明显升高（P〈0．01），Bax表达明显降低（P〈0．01），实验组Bcl-2表达降低不明显（P〉0．05），而对照组Bcl-2表达降低明显（P〈0．01）。与对照组比较，主动脉阻断30min后实验组CK-MB、cTnT和心肌细胞凋亡数明显降低（P〈0．05），Bcl-2表达明显升高（P〈0．01）。结论逆行灌注心脏不停跳双瓣膜置换术与心脏停搏手术相比较，对心肌细胞凋亡的影响较小，可能与维持Bcl-2蛋白表达水平，抑制Bcl-2／Bax基因向Bax偏移等因素有关。     

益气化瘀方对椎间盘软骨细胞凋亡相关因子的作用

目的：探讨益气化瘀方对椎间盘软骨细胞凋亡状态下Bax、Bcl-2及Caspase-8表达的调控作用。方法：清洁级雄性1月龄SD大鼠20只，酶消化法获取椎间盘软骨细胞，用抗Fas抗体诱导其发生凋亡，通过益气化瘀方及其拆方益气方、化瘀方药理血清干预，免疫组化法（SP）检测分析大鼠椎间盘软骨细胞不同状态下Bax、Bcl-2及Caspase-8的表达。结果：相对正常组，凋亡模型组的Bax和Caspase-8表达明显，而Bcl-2轻度表达，有显著差异（P〈0．01）。益气化瘀方、益气方和化瘀方均能降低椎间盘软骨细胞的Bax、Caspase-8的表达，而上调Bcl-2的表达，3种中药组与诱导凋亡组相比有显著差异（P〈0．01）。结论：中药益气化瘀方、益气方和化瘀方都可以调控凋亡的大鼠椎间盘软骨细胞内Bax、Bcl-2、Caspase-8的表达，其治疗颈椎病的机制与其对凋亡相关因子的调控有关。     

肝糖原贮备对热缺血再灌注大鼠肝细胞凋亡的影响

目的探讨肝糖原贮备对热缺血再灌注肝细胞凋亡及肝损伤的影响。方法建立大鼠肝热缺血模型。实验分组：术前24h静脉注射25％葡萄糖组，2ml／只，每6h1次，高糖饮食（H组）；术前禁食24h，饮水不限（L组）；正常饮食对照组（N组）和假手术组（S组）。缺血45min，再灌注2、24h取材。流式细胞术检测细胞凋亡及Bcl-2、Bax蛋白。同时进行肝酶学检测、肝组织形态学观察。结果1．细胞凋亡及蛋白表达：（1）24h细胞凋亡百分率。s组〈H组〈N组〈L组（P〈0．01），各组24h凋亡率均高于2h（P〈0．01，S组除外）。（2）Bcl-2、Bax蛋白表达量。①再灌注24hBcl-2表达量：H组明显高于其余3组（P〈0．01），L组〈N组（P〈0．05），与2h比较H组表达升高（P〈0．01）；②再灌注24hBax表达量：S组明显低于其余3组（P〈0．01），L组〉N组（P〈0．01）。2．肝酶学指标：各时相点4组间比较差异有统计学意义（P〈0．05），S组〈H组〈N组〈L组。3．肝脏病理组织学改变：再灌注24hH组明显轻于N组及L组，并接近S组，L组最严重。结论预防性增加肝糖原贮备可抑制热缺血再灌注过程中肝细胞凋亡，减轻肝损伤，并可能通过影响Bcl-2、Bax的表达发挥作用。     

羟基磷灰石纳米粒子肝动脉灌注对兔VX2肝种植瘤生长和bax/bcl-2蛋白表达的影响

目的 探讨羟基磷灰石纳米粒子（NanoHAP）在体内对兔VX2肝种植瘤生长的抑制作用及对肿瘤细胞bax／bcl-2凋亡蛋白表达的影响。方法 将56只VX2肝荷瘤兔随机分成四组，通过肝动脉灌注NanoHAP溶胶、5-Fu以及5-Fu与NanoHAP的混合液，并与生理盐水组对照。观察各组动物的一般情况，对肿瘤体积进行监测并比较。采用免疫组织化学染色观察bax／bcl-2蛋白的表达。结果 各治疗组对肿瘤生长都有明显的抑制作用。NanoHAP溶胶组肿瘤体积明显小于对照组（P〈0．05），肿瘤生长抑制率达到28．1％；5-Fu组抑瘤率达到43．7％，但动物表现出明显毒副作用；联合治疗组抑瘤率达到51．2％，而且毒副反应明显小于5-Fu组。NanoHAP组及联合治疗组免疫组织化学染色显示bcl-2蛋白表达率分别为41．7％（5／12）、38．5％（5／13），较对照组72．7％（8／11）明显降低；bax蛋白表达率为50．0％（6／12）、61．5％（8／13），明显高于对照组127．3％（3／11）。结论 NanoHAP在体内对兔VX2肝种植瘤生长有明显的抑制作用，而且能明显降低5-Fu的毒性作用。其抑瘤机制可能是通过影响bax／bcl-2的表达加速肿瘤细胞凋亡。     

脓毒症患者外周血CD3+、CD4+、CD8+ T淋巴细胞的凋亡及Bcl-2蛋白表达

目的探讨脓毒症患者外周血淋巴细胞凋亡及其与Bcl-2蛋白表达的关系。方法采集44例脓毒症患者（脓毒症组，年龄19～86岁）和25例健康体检者（正常对照组，年龄29～80岁）的外周静脉血5ml，采用流式细胞仪分别检测CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋T淋巴细胞凋亡率和Bcl-2蛋白表达。分析细胞凋亡率与Bcl-2蛋白表达的相关性。脓毒症诊断标准参考1991年美国胸科医师协会和美国危重病医学会联席会议制定的诊断标准。结果与正常对照组比较，脓毒症组患者CD3^＋、CD4^＋T淋巴细胞凋亡率升高，Bcl-2蛋白表达下降（P〈0．05），CD8^＋T淋巴细胞凋亡率及其Bcl-2蛋白表达差异均无统计学意义（P〉0．05），CD3^＋、CD4^＋T淋巴细胞凋亡率分别与其Bcl-2蛋白表达呈负相关（r=-0．389，P〈0．05；r=-0．689，P〈0．05）。结论脓毒症患者细胞免疫功能异常可能与Bcl-2蛋白表达下调导致淋巴细胞凋亡增加有关。     

胫骨干骨折的手术治疗对策

目的：明确不同固定器械在胫骨干不同骨折类型固定中的特点，以指导临床应用。方法：68例胫骨干骨折，行加压钢板螺钉、交锁髓内钉、单侧外固定架固定后，作临床疗效分析。结果：加压钢板固定组42例，感染5例，骨不连1例，平均愈合时间3．8个月；交锁髓内钉固定组13例，无感染及骨不连，平均愈合时间5．4个月；单侧外固定架组13例，骨不连1例，踝关节背伸受限3例，平均愈合时间4．5个月。结论：胫骨骨折交锁髓内钉固定并发症少，功能恢复好，适用范围广，但要注意及时进行动力加压。加压钢板及外固定架固定应选择各自的最佳适应证，以达到理想的疗效。