瓜蒌薤白半夏汤对心肌梗死后大鼠的心肌保护作用研究

目的:观察瓜蒌薤白半夏汤对心肌梗死后大鼠不同时间的心肌保护作用。方法:结扎大鼠左冠状动脉前降支建立心肌梗死模型,随机分为心肌梗死模型组和瓜蒌薤白半夏汤组,每批次每组10只。心肌梗死模型组给予生理盐水2 m L/次,1次/d,瓜蒌薤白半夏汤组给予浓煎中药2 m L/次,1次/d灌胃。分别干预1 d、5 d、10 d、15 d共4个批次。检测CK-MB、CTn I、hs CRP、BNP,并获取心脏,固定,行梗死部位Masson染色。结果:与心肌梗死模型组大鼠相比,给予瓜蒌薤白半夏汤干预1 d、5 d、10 d、15 d 4批次大鼠的CK-MB、CTn I均显著性下降(P0.01);hs CRP显著下降(P0.01);BNP也显著下降(P0.01)。结论:瓜蒌薤白半夏汤具有一定的心肌细胞保护作用,其机制可能与减轻炎症反应有关。     

血脂康对血管紧张素Ⅱ诱导新生大鼠心肌成纤维细胞增殖的影响

心肌纤维化是导致心室顺应性和收缩功能下降而发生泵衰竭的一个重要因素,心肌纤维化主要是因为心肌成纤维细胞(card iac fibroblasts,CFs)的活化、增殖及其所分泌的胶原增多与沉积所致。血脂康是从特制的中药红曲中经提炼精制而成的血脂调节剂,被称为中国人的”天然他汀”。现有文献证明,血脂康具有诸多调脂以外的作用,如抗氧化、减轻血管炎症、抑制血管平滑肌增殖、稳定动脉粥样斑块、改善血管内皮功能、减轻左室质量[1]等,被     

瓜蒌薤白半夏汤的心肌保护机制研究进展

本文系统总结了瓜蒌薤白半夏汤近10年的基础药理研究资料,分别从组织器官、细胞、分子等层次梳理了该方对心肌损伤的保护作用及其机制,认为瓜蒌薤白半夏汤对心肌缺血及缺血再灌注损伤,及其伴随发生的心肌炎症损伤、心肌细胞凋亡、心肌纤维化等保护作用明显。     

4种活血化瘀中药有效成分对血管紧张素Ⅱ诱导的血管外膜成纤维细胞增殖及胶原合成的影响

目的:体外观察盐酸川芎嗪、葛根素、丹参酮Ⅱ_A、丹皮酚对血管紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)诱导的大鼠血管外膜成纤维细胞(VAF)的增殖及胶原蛋白合成的影响。方法:MTT法检测细胞增殖活性;羟脯氨酸比色法测定细胞培养上清液中胶原蛋白含量。结果:4种中药成分能够显著降低ANG-Ⅱ诱导的VAF增殖及细胞培养上清液中羟脯氨酸含量。结论:盐酸川芎嗪、葛根素、丹参酮Ⅱ_A、丹皮酚能够抑制ANG-Ⅱ诱导的VAF增殖和胶原合成。     

瓜蒌薤白半夏汤对心肌梗死后大鼠Gal-3蛋白表达的影响

目的:观察瓜蒌薤白半夏汤对心肌梗死后大鼠心功能及心肌纤维化的影响。方法:将36只雄性SD大鼠随机分为空白组、假手术组和手术组;空白组和假手术组每组各6只;手术组采用冠状动脉左前降支结扎联合高脂饮食法复制大鼠心肌梗死痰浊壅盛模型,将造模成功的大鼠随机分为模型组、瓜蒌薤白半夏汤组(GXBT)和雅施达组,假手术组只穿线不结扎。空白组、假手术组和模型组给予10 mL·kg-1·d-1的生理盐水灌胃,GXBT组2. 68 g·kg-1·d-1水煎液灌胃,雅施达组0. 36 mg·kg-1·d-1灌胃。造模4周后行心脏超声检测心功能以验证模型成功;8周后再次行心脏超声检测大鼠心梗后心功能变化,之后处死大鼠取材;苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠心肌组织的病理变化;Masson染色观察大鼠心肌纤维化程度;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测大鼠血清中B型钠尿肽(BNP)和半乳糖凝集素-3(Gal-3)的变化;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠心肌中Gal-3,Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)和Ⅲ型胶原(Col-Ⅲ)蛋白表达的变化。结果:与空白组和假手术组比较,模型组大鼠的左室射血分数(EF)和短轴缩短率(FS)显著减小(P0. 01),心肌组织有炎性细胞浸润,心肌胶原纤维增多,血清中BNP和Gal-3的含量明显升高(P0. 05),心肌中Gal-3,Col-Ⅰ和Col-Ⅲ的蛋白表达显著增多(P0. 01);与模型组比较,GXBT组EF值和FS值明显升高(P0. 05),心肌细胞形态结构改善,胶原纤维减少,血清中BNP和Gal-3的蛋白表达明显降低(P0. 05),心肌组织中Gal-3,Col-Ⅰ和Col-Ⅲ的含量明显减少(P0. 05)。结论:瓜蒌薤白半夏汤能够改善心肌梗死后大鼠的心功能,减轻心肌纤维化,减缓心肌梗死后心力衰竭的进程,其作用机制可能与降低Gal-3的表达有关。     

丹酚酸B抑制血管紧张素Ⅱ诱导心肌成纤维细胞增殖与分化的作用

目的:研究丹酚酸B(salvianolic acid B,Sal-B)对血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)诱导的新生SD大鼠心肌成纤维细胞(cardiac fibroblasts,CFs)增殖与分化的影响,探讨Sal-B是否具有对抗心肌纤维化的作用。方法:胰酶消化,差速贴壁分离纯化CFs,抗波形蛋白免疫细胞化学法鉴定CFs。建立AngⅡ诱导的CFs增殖分化模型。实验分为空白组(无血清DMEM),模型组(1×10~(-6)mol·L~(-1)AngⅡ),Sal-B低剂量组(2.5×10~(-5)mol·L~(-1)Sal-B+1×10~(-6)mol·L~(-1)AngⅡ)及Sal-B高剂量组(5×10~(-5)mol·L~(-1)Sal-B+1×10-6mol·L~(-1)AngⅡ)共4组。Sal-B预保护1 h,加入AngⅡ共同作用24 h后,采用噻唑蓝(MTT)法分析Sal-B对AngⅡ诱导CFs增殖的细胞存活率,采用试剂盒(消化法)测定羟脯氨酸含量,蛋白质免疫印迹(Western blot)分析α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA),Ⅰ型胶原(collagenⅠ,ColⅠ)的表达情况。结果:MTT结果显示,与空白组比较,模型组AngⅡ显著诱导CFs异常增殖(P0.01),与模型组比较,Sal-B低、高剂量显著抑制AngⅡ诱导的CFs增殖(P0.01);羟脯氨酸含量测定结果显示,与空白组比较,模型组羟脯氨酸含量显著升高(P0.01),与模型组比较,Sal-B低、高剂量组含量均显著降低(P0.01);Western blot结果显示,与空白组比较,模型组α-SMA,ColⅠ蛋白表达显著上调(P0.01),与模型组比较,Sal-B低、高剂量组α-SMA,ColⅠ蛋白表达明显下调(P0.05,P0.01)。结论:Sal-B可抑制AngⅡ诱导的CFs增殖,减少α-SMA,ColⅠ蛋白的表达,对AngⅡ体外诱导心肌纤维化进程具有抑制作用。     

丹参酮ⅡA通过下调CTGF抗血管紧张素Ⅱ诱导的心肌成纤维细胞Ⅰ型、Ⅲ型胶原合成

目的 观察丹参酮ⅡA对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的心肌成纤维细胞Ⅰ型、Ⅲ型胶原合成的影响及可能的机制下调CTGF水平.方法 采用AngⅡ诱导和建立心肌成纤维细胞纤维化模型,采用不同浓度的丹参酮ⅡA处理纤维化细胞,观察其对Ⅰ型、Ⅲ型胶原mRNA的影响,同时采用Western blot和RT-PCR检测CTGF和CTGF mRNA水平.结果 (1)AngⅡ处理后的心肌成纤维细胞的Ⅰ型、Ⅲ型胶原的mRNA水平高于DMSO组,且给予丹参酮ⅡA处理后,Ⅰ型、Ⅲ型胶原mRNA水平呈浓度依赖的方式下降,且在50μmol/L的浓度下,恢复正常;(2)AngⅡ处理后的心肌成纤维细胞的CTGF和CTGF-mRNA水平高于DMSO组,且50mol/L丹参酮ⅡA可降低CTGF和CTGF-mRNA水平;(3)给予外源性的CTGF处理后,丹参酮ⅡA抑制成纤维细胞胶原合成的作用减弱,且10 μmol/L的CTGF可完全减弱丹参酮ⅡA的作用,外源性CTGF处理未改变CTGF-mRNA水平.结论丹参酮ⅡA具有降低血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的心肌成纤维细胞Ⅰ型、Ⅲ型胶原合成的作用,可能的机制是下调CTGF水平.     

广枣总黄酮对血管紧张素Ⅱ所致大鼠心肌纤维化的影响

目的：探讨广枣总黄酮（total flavones of fructus chorspondiatisTFFC）对大鼠心肌纤维化的作用及其机制。方法：采用差速贴壁法培养新生大鼠CFs,在体外建立AngⅡ诱导CFs增殖模型成功后,将模型随机分为空白组（control）：未加药物;AngⅡ组：AngⅡ（100nmol／L）;TFFC＋AngⅡ组：加入AngⅡ（100nmol／L）和不同浓度（25、50、100mg／L）的TFFC）组。采用MTT实验方法检测心肌成纤维细胞增殖,羟脯氨酸试剂盒检测胶原合成。结果：100nmol／L的AngⅡ组明显促进CFs增殖（P〈0．05）,（50、100mg／L）的TFFC组明显抑制100nmol／LAngⅡ诱导的大鼠心肌成纤维细胞增殖（P〈0．05）与胶原合成（P〈0．05）。结论：广枣总黄酮抑制血管紧张素Ⅱ诱导的心肌成纤维细胞增殖及胶原合成,并成浓度依赖性。     

蜈蚣酸性蛋白对血管紧张素-Ⅱ诱导心肌成纤维细胞增殖和胶原合成的影响

目的:研究蜈蚣酸性蛋白(centipede acidic protein,CAP)对血管紧张素-Ⅱ(AngⅡ)诱导培养心肌成纤维细胞(cardiac fibroblasts,CFb)增殖和胶原合成的影响,探讨其抑制心肌纤维化的机制。方法:建立AngⅡ诱导乳鼠CFb纤维化模型,噻唑蓝(MTT)法检测CAP对CFb增殖的影响;羟脯氨酸测定CFb胶原合成量;硝酸还原酶法测定细胞培养液中NO含量;半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法测定相关基因c-myc mR-NA表达。结果:AngⅡ模型组与空白对照组比较,CFb增殖及胶原合成显著增加、NO含量显著降低、c-mycmRNA的表达显著增加(P<0.01);CAP高、低剂量组与AngⅡ模型组比较,CFb增殖及胶原合成显著降低、NO含量显著升高、c-myc mRNA的表达显著下调(P<0.05或P<0.01)。结论:CAP具有明显的抑制心肌纤维化作用,其机制与提高NO含量及下调c-myc mRNA表达有关。     

丹参酮Ⅱ_A对AngⅡ诱导的心肌成纤维细胞增殖及Ⅰ型胶原合成的影响

目的:通过观察丹参酮ⅡA(TSN)对AngⅡ诱导的心肌成纤维细胞(CFs)增殖及Ⅰ型胶原合成的影响,探讨其抗心肌纤维化的作用机制。方法:差速贴壁法提取原代CFs,采用四氮唑盐(MTT)比色法测定细胞数目,ELISA法检测Ⅰ型胶原合成,RT-PCR法半定量检测Ⅰ胶原mRNA表达。结果:①AngⅡ组OD值高于空白对照组,两者比较有显著性差异(P<0.01);AngⅡ+TSN组OD值低于AngⅡ组,两者比较有显著性差异(P<0.01)。②AngⅡ组有促进心肌成纤维细胞分泌Ⅰ型胶原的作用,与空白对照组比较,有显著性差异(P<0.01);AngⅡ+TSN组Ⅰ型胶原含量低于AngⅡ组,两者比较,有显著性差异(P<0.01)。③AngⅡ组Ⅰ型胶原mRNA表达高于空白对照组,两者比较有显著性差异(P<0.05);AngⅡ+TSN组Ⅰ型胶原mRNA表达低于AngⅡ组,两者比较有显著性差异(P<0.05)。结论:AngⅡ可直接诱导CFs的增殖,促进其分泌Ⅰ型胶原,并能显著增加Ⅰ型胶原mRNA的表达;TSN对AngⅡ诱导的CFs增殖及Ⅰ型胶原分泌增加,及Ⅰ型胶原mRNA表达增强均有抑制作用。提示:TSN抗心肌纤维化作用的产生可能与丹参酮ⅡA抑制心脏局部的RAS系统有关。     

瓜蒌薤白半夏汤对缺血性心肌损伤大鼠的心肌内质网应激和细胞凋亡的影响

目的 观察瓜蒌薤白半夏汤对缺血性心肌损伤大鼠的心肌内质网应激和细胞凋亡的影响。方法 建立高脂血症为基础的缺血性心脏病大鼠模型,给予瓜蒌薤白半夏汤水煎液28d,检测血流动力学、肾交感神经活动、心肌酶、氧化应激、心肌组织凋亡和内质网应激变化。结果 瓜蒌薤白半夏汤治疗组的左心室血流动力学水平、血清心肌酶、交感神经活性、心肌氧化应激、心肌凋亡蛋白和内质网应激蛋白水平显著改善。结论 瓜蒌薤白半夏汤可通过改善内质网应激介导的心肌细胞凋亡治疗缺血性心肌损伤。     

高甲状腺激素对大鼠心肌血管紧张素Ⅱ的影响

 目的:研究高甲状腺激素水平下心肌病理改变与心肌血管紧张素Ⅱ的关系。方法:给大鼠口服甲状腺片，平均每只4 mg·d^-1，连续60 d，观察心肌病理变化，检测左心室肌血管紧张素Ⅱ浓度和总含量。结果:实验组大鼠心肌有明显病理损伤；左心室肌血管紧张素Ⅱ浓度和总含量分别为(170.6±33.2)pg·(100 mg)^-1 、(2085.3±175.1)pg，显著高于对照组(130.2±20.1)pg·(100 mg)^-1、(1067.4±154.5)pg(P<0.05)。结论:心肌血管紧张素Ⅱ含量升高是高甲状腺激素水平下心肌损伤的原因之一。     

半夏白术天麻汤对高血压模型大鼠血管紧张素Ⅱ、内皮素、一氧化氮含量的影响

目的：探讨中药半夏白术天麻汤对高血压模型大鼠血清中血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）、内皮素（ET）及一氧化氮（NO）含量的影响。方法：二肾一央法制备肾性高血压模型大鼠（RHR），采用试剂盒测定大鼠血清中AngⅡ、ET及NO的含量。结果：半夏白术天麻汤可降低高血压模型大鼠血清中血管紧张素Ⅱ和ET的含量，提高高血压模型大鼠血清中NO的含量。     

瓜蒌薤白半夏汤对扩张型心肌病患者心功能及血清PICP、PⅢNP的影响

目的探讨瓜蒌薤白半夏汤对扩张型心肌病(DCM)患者心功能及血清Ⅰ型前胶原羧基端肽(PICP)、血清Ⅲ型前胶原羧基端肽(PⅢNP)的影响。方法将98例DCM患者随机分为观察组和对照组各49例,2组均给予常规治疗,在此基础上对照组给予曲美他嗪治疗,观察组在对照组治疗基础上联合瓜蒌薤白半夏汤治疗,均连续治疗12周。观察2组临床疗效及治疗前后左室舒张末期内径(LVEDd)、心排血量(CO)、左室射血分数(LVEF)以及血清PICP、PⅢNP水平。结果观察组总有效率显著高于对照组(P<0.05);治疗后2组LVEDd和血清PICP和PⅢNP水平均显著低于治疗前(P均<0.05),CO、LVEF均显著高于治疗前(P均<0.05),且观察组各指标改善情况显著优于对照组(P均<0.05)。结论瓜蒌薤白半夏汤能够有效改善DCM患者心功能,降低血清PICP和PⅢNP水平,提高治疗效果。     

加减瓜蒌薤白半夏汤对大鼠缺血再灌注心肌细胞凋亡的影响

目的:观察加减瓜蒌薤白半夏汤对实验性心肌缺血大鼠细胞凋亡的影响,评价其对心肌的保护作用,为中药在抗心肌缺血方面的开发利用提供科学依据。方法:分别用加减瓜蒌薤白半夏汤(中药组)和生理盐水(对照组)灌胃,以结扎冠脉方法制备心肌缺血模型,应用流式细胞仪(FCM)及免疫组化观察心肌细胞凋亡及凋亡相关基因BCL-2和Bax蛋白的表达,同时监测血清SOD及心肌组织MDA的含量。结果:再灌注4小时中药组与对照组相比缺血心肌细胞凋亡率(4.14%±1.25%、16.78%±1.47%)(P<0.01);Bax蛋白表达明显减少(6.65%±2.06%、17.98%±5.14%)(P<0.01);心肌BCL-2蛋白表达显著升高(14.13%±3.13%、7.11%±2.10%)(P<0.01);Bax和BCL-2的比值亦随之下降(0.62%±0.24%、3.29%±0.11%)(P<0.01);中药组血清SOD含量高于对照组(0.69±0.12、0.32±33.7)(P<0.01);心肌组织MDA含量显著低于对照组(3.15±0.24、4.56±0.54)(P<0.01)。结论:加减瓜蒌薤白半夏汤能减少再灌注损伤导致的细胞凋亡,其机制之一可能与提高血浆SOD活性,减少脂质过氧化反应,下调Bax蛋白表达,上调Bc l-2蛋白表达有关。     

血管紧张素Ⅱ激活肾间质成纤维细胞的实验研究

目的观察血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对正常大鼠肾间质成纤维细胞株NRK-49F功能变化的影响,探讨其参与肾小管间质纤维化的作用机制。方法用不同浓度AngⅡ(10-6,10-7,10-8,10-9mol/L)刺激NRK-49F(6 h,12 h,24 h和48 h)。蛋白免疫印迹法检测α平滑肌动蛋白(α-SMA)、纤维连接蛋白(FN)和TGF-β受体(TβR I)的表达。ELISA方法检测细胞上清液中TGF-β1的浓度。明胶酶谱法检测细胞上清液中MMP2/9的表达量。结果①10-7mol/L AngⅡ能刺激NRK-49F细胞上调FN和α-SMA表达,随着AngⅡ浓度的增加,该细胞表达FN和α-SMA的量亦随之增加,呈明显的剂量依赖性;②10-9mol/L AngⅡ能够上调NRK-49F细胞TβR I的表达,10-7mol/L AngⅡ刺激该细胞6 h后,TGF-β1的表达开始增加,12 h后达到峰值,24 h和48 h仍能维持较高的水平;③10-7mol/L AngⅡ能够刺激NRK-49F细胞表达MMP2和MMP9,其中MMP2的表达量显著多于MMP9的表达量。结论AngⅡ能够激活间质成纤维细胞,并可能以此参与肾小管间质纤维化的发生发展。     

植物黄酮对成纤维细胞增殖和胶原合成的影响

 目的:考察灯盏细辛黄酮Z-1,Z-2对纤维化的作用。方法:结晶紫染色法和³H标记的脯氨酸掺入法测定化合物对成纤维细胞增殖和胶原合成的影响。结果:灯盏细辛黄酮Z-1(50μg·ml^-1)能显著抑制成纤维细胞的增殖,Z-1和Z-2(6.25～50μg·ml^-1)能剂量依赖性地抑制细胞内胶原合成。结论:灯盏细辛黄酮体外有抗纤维化作用。     

瓜蒌薤白半夏汤对冠心病经皮冠状动脉介入术后稳定型心绞痛的影响

目的 探讨瓜蒌薤白半夏汤对冠心病经皮冠状动脉介入(percutaneous coronary intervention, PCI)术后稳定型心绞痛的影响。方法 回顾性分析2020年5月—2022年9月辽宁中医药大学附属医院收治的81例冠心病PCI术后稳定型心绞痛患者,按照治疗方法分为对照组40例和观察组41例。比较两组中医证候疗效,心电图疗效,心绞痛发作次数、持续时间,生活质量。结果 观察组中医证候疗效总有效率为95.12%,高于对照组的77.50%(P<0.05);观察组心电图疗效总有效率为92.68%,高于对照组的75.00%(P<0.05);治疗后,观察组心绞痛发作次数更少、发作时间更短(P<0.05);治疗后,两组生活质量明显提高,观察组生活质量更优(P<0.05)。结论 瓜蒌薤白半夏汤可提高冠心病PCI术后稳定型心绞痛患者的临床疗效,缓解临床症状,提高生活质量。     

越橘中原花青素抑制新生大鼠心肌成纤维细胞增殖及其作用机制

目的 研究越橘中原花青素对血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)诱导新生大鼠心肌成纤维细胞(cardiac fibroblast,CFb)增殖的影响及其作用机制.方法 用AngⅡ诱导新生大鼠CFb增殖,采用MTT法检测细胞增殖,ELISA法测定Ⅰ型胶原,Ⅲ型胶原及转化生长因子β1(TGF-β1)的量,硝酸还原酶法、分光光度法检测NO、一氧化氮合酶(iNOS)活性,流式细胞仪检测细胞周期,免疫细胞化学法测定p27蛋白的量.结果 原花青素(25、50、100 mg/L)可抑制AngⅡ诱导的CFb增殖、胶原合成增加及TGF-β1蛋白量增多,并明显提高CFb NO的量、iNOS的活性,同模型组比较差异有显著性(P<0.05、0.01),且呈现剂量依赖性.流式细胞仪检测表明G0/G1期细胞比例随原花青素质量浓度增加而增加,S期细胞比例随原花青素质量浓度增加而减少,与模型组相比差异有显著性(P<0.05、0.01),免疫细胞化学染色结果也表明原花青素可增加p27的蛋白表达,与模型组相比具有统计学意义(P<0.01).结论 原花青素通过促进p27的表达,使细胞周期阻滞于G0/G1期,从而抑制CFb增殖和胶原分泌量的增加.     

中药对成纤维细胞增殖及胶原合成的抑制作用研究概况

临床上有多种疾病皆可引起机体组织纤维化,在此过程中,成纤维细胞起着极其重要的作用;因此,研究药物尤其是中药对人成纤维细胞的影响成为抗组织纤维化研究的热点。近年的研究表明,中药在对成纤维细胞的增殖、胶原合成等方面有显著作用,现将其研究概况综述如下。 1 单味药研究 1.1 活血化瘀类 李氏等[1]采用改良四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法,测定21种常用活血化瘀中药的水溶性提取物对体外培养的硬皮病病人的皮肤成纤维细胞增殖的影响。结果显示:17种药物对该细胞增殖有抑制作用,其中以赤芍、丹参、红花、牡丹皮、茜草、乳香、没药、苏…