丹参对正畸牙模型大鼠牙槽骨重塑的影响

目的:探讨丹参在正畸牙移动中对牙槽骨改建的作用机制。方法:选择48只Wistar大鼠,随机分两组,每组24只,实验组灌服6 g/kg体质量丹参水煎剂,对照组灌服3 ml生理盐水。在不同阶段处死动物取上颌骨,测量上颌第1磨牙近中移动距离、牙槽骨密度值等。结果:正畸加力第7天,实验组大鼠的牙齿移动距离和牙槽骨密度与对照组无显著性差异(P>0.05),破骨细胞数量有显著性差异(P<0.05)。正畸加力第14天、第21天、第28天,实验组大鼠的牙齿移动距离、破骨细胞的数量以及骨密度均与对照组有显著性差异(P<0.05)。结论:丹参能够有效减缓牙槽骨骨密度的减低,加速牙齿的移动,有利于正畸牙移动中牙槽骨的重塑调整。     

中药骨碎补对大鼠骨髓破骨细胞体外培养的影响

目的:研究中药骨碎补对大鼠骨髓破骨细胞体外培养的作用.方法:采用大鼠长骨骨髓体外培养的方法,通过检测抗酒石酸酸性磷酸酶(TRACP)阳性细胞生成数,反映破骨细胞的生成情况.结果采用SPSS软件包分析.结果:20%骨碎补提取液组及固邦组TRACP阳性破骨细胞数的形成受到明显抑制,与空白对照组比较有显著性意义(P＜0.01),10%骨碎补组TRACP阳性破骨细胞数的形成有抑制,但与对照组比较无显著性意义(P＞0.05).结论:骨碎补可抑制骨髓体外培养中破骨样细胞的生长,主要抑制破骨母细胞向成熟破骨细胞转化,但与浓度有关.     

蛇毒复方制剂对W256癌细胞诱导的骨癌痛大鼠破骨细胞的影响

目的观察冰茶栓(蝮蛇毒、冰片、茶叶、桂枝)对骨癌痛大鼠破骨细胞数量和活性的影响。方法将40只雌性SD大鼠分为冰茶栓组、阳性药对照组、模型对照组及假手术组,采用骨髓腔注射W256癌细胞复制骨癌痛模型;自模型复制第13天开始,冰茶栓组给予冰茶栓101 mg/kg;阳性药对照组给予伊班膦酸注射液20μg/kg,模型对照组和假手术组给予空白栓,末次给药后,取各组大鼠患肢骨组织采用TRAP染色法计数破骨细胞数量、透射电镜观察破骨细胞结构、免疫组化法观察骨保护素表达。结果冰茶栓可明显降低W256细胞诱导的骨癌痛大鼠骨组织破骨细胞数量(P<0.01);诱导破骨细胞凋亡;明显上调骨组织骨保护素表达(P<0.01)。结论冰茶栓可抑制骨癌痛大鼠骨组织破骨细胞的数量和活性。     

骨碎补对微重力下共培养骨细胞中成骨细胞分化的影响

目的:观察模拟微重力下骨碎补对成骨细胞破骨细胞共培养中成骨细胞分化影响及ALP、OPG、Runx2表达作用机制。方法:建立成骨细胞破骨细胞共培养系统,模拟微重力下加骨碎补总黄酮。正常重力组(A组)和微重力空白组(B组)加等容生理盐水组大鼠血清。骨碎补低剂量组(C组)加含低浓度骨碎补血清0.054 g/(kg·d),骨碎补中剂量组(D组)加含中浓度骨碎补血清0.162 g/(kg·d),骨碎补剂量组(E组)加入高浓度骨碎补血清0.486 g/(kg·d)。A组置于培养箱中,B、C、D、E置于摸拟微重力回转器48 h。测成骨细胞ALP活性、OPG、Runx2表达。结果:与正常对照组比较,微重力组成骨细胞ALP活性降低(P0.05);与微重力空白对照组比较,含药组ALP活性、OPG和Runx2表达升高,中剂量组差异显著(P0.05)。结论:中剂量骨碎补能提高微重力下成骨细胞破骨细胞共培养系统中提高成骨细胞ALP活性、OPG、Runx2表达,促成骨细胞增殖、分化。     

骨碎补总黄酮对去卵巢大鼠基因水平的影响

目的:应用cDNA array技术分析骨碎补总黄酮对去卵巢大鼠基因水平的影响。方法:制作去卵巢大鼠模型,24周后,活杀动物,腹主动脉取血6 mL,并取出脊髓4锄,抽提totalRNA,分离mRNA,进行检测。结果:空白对照组血样与模型组的差异为70个基因,空白对照组与骨碎补总黄酮组的差异为9个基因。骨碎补总黄酮灌服后大鼠模型基因过度表达基本恢复正常。该实验cDNA array分析中脊髓基因基本无差异。结论:骨碎补总黄酮灌服6 个月后大鼠模型基因过度表达能基本恢复正常。表明骨碎补总黄酮对去卵巢大鼠基因表达水平有一定的影响。     

阻断钙离子通道对正畸牙齿移动的影响

目的研究阻断L型钙离子通道是否能减缓正畸牙齿的移动。方法选取60只雄性SD大鼠，分成加力组、加力＋硝苯地平I荆组和加力＋硝苯地平Ⅱ剂组，每组再按不同时间分为1天组、3天组、7天组、14天组和21天组。测量并比较牙齿石膏模型加力前后右侧上颌第一磨牙近中移动距离，对牙周组织切片采用HE染色和胶原特殊染色，再用计算机进行光密度分析。结果牙齿近中移动距离减少，牙周胶原量增多。结论阻断钙离子通道减缓了正畸牙齿移动的速度。     

补肾活血固齿方对牙周炎大鼠牙周膜OPG和RANKL影响的研究

目的 观察补肾活血固齿方对牙周炎大鼠牙周组织及牙周膜骨保护素(OPG)、核因子κB受体活化因子配体(RANKL)表达的影响,探讨补肾活血固齿方治疗牙周炎的作用机制。方法 将24只雄性SD大鼠随机分为空白组、牙周炎组、补肾活血固齿方组,每组8只。牙周炎组和补肾活血固齿方组大鼠采用牙周结扎联合喂食黏软食物和高糖水的方法建立牙周炎模型。造模成功后,补肾活血固齿方组给予补肾活血固齿方灌胃,空白组、牙周炎组给予等量生理盐水灌胃。连续灌胃4周后,切取各组大鼠上颌骨第一磨牙牙体牙周组织制作组织切片,HE染色观察牙周组织病理形态,免疫组化染色观察牙周膜组织中OPG和RANKL阳性表达情况。结果 HE染色显示：空白组大鼠牙周组织结构比较完整,牙龈组织无明显炎症细胞浸润,结合上皮无根方移位,破骨细胞少见,无牙槽骨吸收;牙周炎组大鼠牙龈上皮内炎症细胞增多,毛细血管扩张,牙龈结合上皮向根方移位,形成牙周袋,破骨细胞增多,牙槽骨有吸收;与牙周炎组比较,补肾活血固齿方组大鼠炎症细胞浸润减少,牙龈结合上皮部分恢复,牙周袋变浅,牙槽骨边缘破骨细胞数减少,有成骨细胞产生。补肾活血固齿方组OPG平均光密度值明显高于空白组...     

骨碎补总黄酮对模拟失重下共育骨细胞中ALP活性及BMP-2和OPG基因表达影响

目的:通过观察骨碎补总黄酮对模拟失重共育骨细胞OPG和BMP-2基因表达的影响,探讨其在失重条件下骨丢失骨代谢的影响及其作用机制。方法:体外分离培养成骨细胞和破骨细胞,建立成骨-破骨细胞共育体系,利用回转器建立骨细胞失重模型;共育骨细胞中加入不同浓度骨碎补总黄酮血清培养液,在模拟失重下,48 h后,检测ALP活性,用RT-PCR法检测OPG和BMP-2基因表达。结果:与正常对照组比较,失重模型组成骨细胞在回旋48 h后细胞培养液中的ALP活性显著降低(P0.05);与失重对照组比较,含药血清组ALP活性和OPG和BMP-2表达均显著升高(P0.05)。结论:利用共育骨细胞实验研究成骨细胞、破骨细胞相互作用及影响,中剂量骨碎补能有效提高失重下共育成骨细胞增殖及分化,与浓度相关。     

丹参骨髓腔内注射对兔股骨头坏死破骨细胞数量的影响

目的:复制激素性股骨头坏死动物模型,观察兔破骨细胞数量,从分子水平探讨丹参注射液骨髓腔内注射预防激素性股骨头缺血性坏死的可行性及机制。方法:选用家兔30只,随机分为对照组、模型组、丹参注射液预防组,每组10只。糖皮质激素诱导兔激素性股骨头坏死动物模型,造模同时预防组行骨髓腔内注射丹参注射液,每侧0.4 mg.kg-1,每周2次,连续8周。8周后观察3组家兔破骨细胞数量及组织病理学的改变。结果:预防组能有效的降低破骨细胞数量及股骨头空骨陷窝率。结论:丹参骨髓腔内注射可抑制破骨细胞生成,对早期激素性股骨头缺血性坏死有预防作用。     

补肾填精方对去卵巢大鼠炎症因子与破骨细胞活性的影响

目的:对比观察补肾填精方左归丸与左归丸去补阳药对去卵巢骨质疏松模型大鼠炎症因子和破骨细胞活性的影响,探讨左归丸阳中求阴配伍的作用机制。方法:雌性SD大鼠32只,双侧卵巢摘除术建立骨质疏松模型,分为假手术组、模型对照组、左归丸组、左归丸去补阳药组4组,每组8只。灌胃给药90 d,收集各组大鼠血清和股骨组织,采用HE染色法观察股骨组织形态学,采用TRAP染色法检测股骨组织破骨细胞数,采用ELISA法检测血清中TNF-α、IL17和RANKL水平。结果:与模型对照组比较,补肾填精方改善去卵巢大鼠股骨组织形态学,减少破骨细胞数量;显著降低去卵巢大鼠血清TNF-α、IL-17、RANKL水平(P0.05)。结论:补肾填精方能够抗去卵巢骨质疏松症大鼠骨丢失,其作用机制可能与其通过提高雌激素水平以调节炎症因子抑制破骨细胞活性有关,全方效果较为明显。     

7种中药鼻吸嗅给药后对中暑大鼠血压的影响

目的:研究7种中药鼻吸嗅给药后对中暑大鼠血压的影响。方法:将SD大鼠随机分为8组,第1～7组为7种不同中药给药组,第8组为空白对照组。先用BESN-Ⅱ型多通道尾动脉无创测压系统测定大鼠在室温(25℃左右)下的血压,然后将大鼠放入温度为(42±2)℃的自制高温仓内,30min后测定大鼠的血压,随后第1～7组通过鼻腔给药,给药时间持续5min,然后测定大鼠的血压,观察给药前后不同组别大鼠血压的变化情况并记录。结果:和空白对照组相比,厚朴、白芷、石菖蒲给药后收缩压的数值小于空白对照组,具有统计学差异(P<0.01);白芷给药后舒张压的数值小于空白对照组,具有统计学差异(P<0.05)。结论:厚朴、白芷、石菖蒲这三味中药在一定程度上可以降低中暑大鼠的血压,具有开发成抗中暑中药新药的前景。     

骨碎补对大白鼠骨质疏松模型的影响

实验选10月龄雄性大白鼠30只,随机分为空白组、对照组和实验组。空白组不进行任何处理,对照组和实验组每天皮下注射醋酸可的松,试验组同时每天给骨碎补制剂。21天杀死,测定各组骨密度、单位体积骨中脱钙骨其质、钙、磷、羟脯氨酸的含量。结果表明:对照各项指标均明显低于空白组。松质骨的差别尤为明显。而实验组各项指标高于对照组,但仍低于空白组。提示:骨碎补制剂有部分抑制糖皮质激素引起的骨丢失的作用,但不能完全阻止其发展。     

基于网络药理学探讨骨碎补抗骨质疏松的物质基础及作用机制

目的:通过网络药理学思路,预测骨碎补活性成分的作用靶点,结合骨质疏松(OP)相关靶点进行映射,拓扑出相互作用的关键节点进行富集分析,全方位探讨骨碎补抗OP的药理作用机制。方法:首先,在中药系统药理学数据库和分析平台(TCMSP)中基于药代动力学特征筛选出骨碎补的主要活性成分,并使用有机小分子生物活性数据库(Pub Chem)和Swiss Target Prediction数据库根据二维或三维结构相似性预测出相关作用靶点,然后通过人类孟德尔遗传数据库(OMIM)和Pubmed文本挖掘已知的OP治疗靶点,结合预测靶点导入String数据库构建骨碎补治疗OP靶点相互作用网络图,借助Cyto NCA软件根据相关节点参数拓扑出相互作用的关键节点,再次导入String构建蛋白质相互作用网络图,最后通过DAVID数据库对关键节点进行生物功能及代谢通路分析。结果:筛选出16个骨碎补活性成分,根据靶点预测技术预测出相关靶点118个;经过文本挖掘检索出OP相关靶点316个,根据String网络数据库构建蛋白相互作用网络,经Cyto NCA拓扑后,筛选出关键节点97个,富集分析显示骨碎补可能通过多条通路,从增殖、分化、免疫、氧化应激等多个方面,对干细胞、成骨细胞、破骨细胞、免疫细胞等产生调控作用。结论:基于网络药理学研究表明,骨碎补可能通过直接或间接作用靶点,参与调控多条主要信号通路,影响多类细胞的增殖、分化,从而起到抗OP的作用,为阐释其抗骨质疏松的物质基础与作用机制提供了科学依据。     

海藻酸抗动脉粥样硬化实验研究

目的探讨海藻酸抗动脉粥样硬化（AS）的作用及其机制。方法将2年龄雄性Wistar大鼠60只随机分成对照组、模型组、治疗组、阳性组。对照组喂食普通饲料,其他各组喂食高脂饲料,并一次性腹腔注射维生素D3 40万IU/kg。10周后处死对照组和模型组大鼠各10只,进行造模指标检测和病理学观察。各组所余10只大鼠继续喂养,对照组和模型组每日1次予生理盐水10 mL/kg灌胃,治疗组和阳性组每日1次分别予海藻酸0.6 g/kg和普罗布考0.02 g/kg灌胃治疗。10周后处死各组大鼠,应用RT-PCR技术检测超氧化物歧化酶（SOD）、一氧化氮合成酶（NOS）、高密度脂蛋白（HDL）和细胞间黏附分-1（ICAM-1）的基因表达,用流式细胞术检测内皮细胞的凋亡率。结果造模10周后,模型组大鼠的主动脉病变评分明显升高（P〈0.01）,光镜下为典型的AS斑块形成。治疗10周后,治疗组的AS斑块消退,内膜光滑无红染,评分明显低于模型组（P〈0.01）。治疗组大鼠的SOD、NOS、HDL基因表达明显上调,ICAM-1基因表达明显下调,内皮细胞凋亡率明显下降,与模型组比较,差异有统计学意义（P〈0.01）。治疗组大鼠一氧化氮的生成明显升高,丙二醛和非对称二甲基精氨酸的生成都明显减少。结论海藻酸通过促进SOD、NOS、HDL的基因表达和抑制内皮细胞的凋亡,而清除自由基、改善内皮细胞功能,发挥抗AS的作用。     

骨碎补总黄酮对IL-1β介导的软骨肉瘤细胞SW1353干预的最适浓度范围

目的通过检测不同浓度的骨碎补总黄酮对IL-1β介导的SW1353细胞增殖、凋亡以及细胞形态的影响,探索最适药物干预浓度范围。方法细胞分为正常组、骨碎补1.0组、骨碎补0.5组、骨碎补0.25组、骨碎补0.125组、骨碎补0.0625组共6组,每组均以IL-1β10 ng/mL诱导细胞致炎,骨碎补1.0组以骨碎补1.0 mg/mL加药干预,骨碎补0.5组以骨碎补0.5 mg/mL加药干预,骨碎补0.25组以骨碎补0.25 mg/mL加药干预,骨碎补0.125组以骨碎补0.125 mg/mL加药干预,骨碎补0.0625组以骨碎补0.0625 mg/mL加药干预,在12、24、36、48 h 4个时间点检测SW1353细胞的增殖率与凋亡率,光镜下观察细胞形态。结果细胞增殖情况可见:骨碎补1.0组、骨碎补0.5组、骨碎补0.25组、骨碎补0.125组4组细胞在不同时间点,细胞均呈不增殖状态(P<0.01),0.0625组细胞增殖在12 h与36 h时与正常组无差异(P>0.05),在24 h与48 h时较正常组略低(P<0.01);细胞凋亡情况可见:骨碎补1.0组与骨碎补0.5组两组细胞凋亡率在10%以上,存活率不足正常组90%(P<0.01),骨碎补0.25组、骨碎补0.125组、骨碎补0.0625组3组细胞凋亡率<10%;光镜下结果可见:骨碎补1.0组、骨碎补0.5组两组细胞状态不佳,数量较少,骨碎补0.25组、骨碎补0.125组、骨碎补0.0625组3组细胞状态与正常组细胞相仿,但骨碎补0.25组细胞数量较少,骨碎补0.125组、骨碎补0.0625组细胞数量与正常细胞无明显差异。结论骨碎补总黄酮干预IL-1β介导的SW1353细胞选择的最适浓度范围为0.0625~0.25 mg/mL。     

阴行草水煎液对肝纤维化大鼠的肝保护作用

目的：探讨阴行草水煎液对四氯化碳（CCl4）诱导的肝纤维化大鼠的肝脏保护作用。方法120只雄性SD大鼠随机分为空白对照组、肝纤维化模型组、阴行草组、丹参组、虎杖组及易善复组,每组20只。除空白对照组外,其余5组以CCl4皮下注射诱导肝纤维化;除空白对照组、肝纤维化模型组外,其余4组大鼠分别给予阴行草、丹参、虎杖及易善复10 ml/kg灌胃,1次/d。10周后,采用酶联免疫吸附法检测血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平;光镜下观察肝脏病理组织学改变,并进行肝纤维化分期。结果与肝纤维化模型组比较,阴行草组可降低肝纤维化程度（P＜0.01）,且阴行草组、虎杖组、丹参组和易善复组之间肝纤维化组织学分期无显著差异（P＞0.05）。与肝纤维化模型组 TNF-α浓度（368.06±24.90）U/L比较,阴行草组（336.61±20.20）U/L明显降低（P＜0.01）;阴行草组与丹参组（337.81±21.04）U/L、虎杖组（338.95±24.43）U/L、易善复组（337.11±23.64）U/L比较差异均无统计学意义（P＞0.05）。结论阴行草水煎液对CCl4诱导的肝纤维化大鼠肝脏有保护作用。     

Effects of traditional Chinese medicine on bone remodeling during orthodontic tooth movement

Ethnopharmacological relevance

Dipsacus asper Wall (Dipsacaceae), Salvia miltiorrhiza (Salvia) and Drynaria fortunei (Drynaria) have been traditionally used in Chinese medicine as the main ingredient of many formulations for the treatment of cardiovascular and inflammatory diseases.

Aim of the study

This study was aimed to evaluate the effect of the traditional Chinese medicine (TCM) Dipsacaceae, Salvia and Drynaria on bone remodeling during orthodontic tooth movement (OTM).

Setting

This study was conducted in School of Stomatology, Shandong University between 2009 and 2010 [Jinan, Shandong, China].

Materials and methods

Ninety-six eight-week-old female SPF Wistar rats 180–200 g were selected and randomly divided into four groups of 24: Dipsacaceae group, Salvia group, Drynaria group and control group. Animal models for orthodontic tooth movement were then established which consisted of a closed coil spring ligated to the upper first molar and incisors, exerting a force of 40 g during the experimental period. Rats in the TCM groups were given Dipsacaceae, Salvia and Drynaria decoction respectively by intragastric administration 6 g/kg/day and the control group were given normal saline 3 ml. The rats were sacrificed in batch on the 7th, 14th, 21st and 28th days after orthodontic treatment. Slices from periodontium of the upper first molar were observed under optical microscope. Neovascularization, new bone formation and osteoclast number were observed.

Results

The upper first molars were drawn mesial by the force. Telangiectasia and new bone formation in periodontal tissue were significantly in the TCM groups compared with the control group. Application of orthodontic forces in the experimental teeth showed a significant increase (P < 0.05) of osteoclast number in the TCM group when compared with the control group. In addition, the number of osteoclast had no significant differences among the TCM groups (P > 0.05). Osteoclast number in the TCM group and the control group were 10.12 ± 0.058, 10.13 ± 0.022, 10.09 ± 0.047 and 9.55 ± 0.045, respectively.

Conclusions

These findings suggest that the TCM decoction are beneficial to the alveolar bone remodeling by promoting osteoclast differentiation during OTM.     

骨碎补醇提物对骨质疏松预防作用的大鼠尿液UPLC-MS/MS代谢组学研究

目的:研究糖皮质激素性骨质疏松大鼠尿液的UPLC-MS/MS代谢物谱变化以及骨碎补醇提物对其的干预作用,探讨液质联用技术在中药代谢组学研究中的应用。方法:采用超高效液相色谱串联质谱(UPLC-MS/MS)技术对正常对照组、骨质疏松模型组、骨碎补给药组大鼠尿液代谢物谱进行分析测定,并对数据进行主成分分析(PCA)以鉴别尿液中代谢产物的变化。结果:正常对照组、骨质疏松模型组、骨碎补给药组得到明显分离,发现了肌酸酐、色氨酸、苯丙氨酸、甲酚硫酸盐、柠檬酸、壬二酸等9个潜在的生物标志物。与正常对照组相比,模型组大鼠尿液中肌酸酐、柠檬酸、壬二酸、马尿酸、色氨酸以及吲哚硫酸盐含量显著下调;苯丙氨酸、甲酚硫酸盐及苯乙酰甘氨酸含量显著上调。结论:骨碎补醇提物可以调节骨质疏松大鼠体内的代谢紊乱,其作用机制可能与调节能量代谢、肠道菌代谢、氨基酸代谢以及抗氧化损伤有关。     

利血平致脾虚大鼠唾液蛋白分泌改变及其机制的探讨

目的观察利血平致脾虚大鼠唾液蛋白分泌的改变并探讨其机制。方法利血平组大鼠20只皮下注射0.4mg/(kg.d)利血平9d造模,对照组大鼠20只注射生理盐水9d;10d时两组各随机抽取10只大鼠检测酸刺激前后唾液淀粉酶活性(sAA)比值,眼眶静脉采血检测血清的血管活性肠肽(VIP)和环磷酸腺苷(cAMP),处死动物取腮腺检测VIP和cAMP,取腮腺HE染色病理组织学观察和透射电镜计数腮腺酶原颗粒。两组剩余大鼠均停止注射并正常饲养40d,检测以上项目。结果利血平组大鼠较对照组食量明显减少、体重下降。10d时:利血平组sAA活性比值(0.39±0.18)显著低于对照组(0.80±0.21,P0.01),25d已恢复正常并持续至40d(与本组10d比较,P0.05;与对照组比较,P0.05);HE染色病理组织学检查未见两组腮腺有明显病理改变,透射电镜发现利血平组的单位观察视野腮腺酶原颗粒数(41.4±4.9)高于对照组(34.6±5.2,P0.01);血清VIP利血平组(22.5±13.1mg/L)低于对照组(38.5±14.1mg/L,P0.05),腮腺VIP两组差异无统计学意义;血清cAMP利血平组(125.8±15.5μmol/L)高于对照组(105.3±16.7μmol/L,P0.05),腮腺cAMP两组差异无统计学意义。40d时各项检测指标两组比较差异无统计学意义。结论利血平致脾虚大鼠酸刺激下唾液蛋白分泌减少,可能与VIP和cAMP调节途径有关。