刺老苞根皮黄酮类化合物对抗大鼠泼尼松性骨质疏松的作用研究

目的 研究刺老苞根皮黄酮类化合物对泼尼松致大鼠骨质疏松的对抗作用.方法 将50只大鼠随机分成正常对照组、泼尼松模型组和刺老苞根皮黄酮类化合物高、中、低(10,20,30 mg/kg)剂量组,每组10只.分别灌胃相应药物,1次/d,连续8周后取血清检测生化指标,对骨进行组织切片检查,长度、宽度以及骨质的测量.结果 泼尼松模型组大鼠股骨重量、尺骨骨羟脯氨酸和骨钙含量比正常对照组明显降低,胫骨骨髓腔中脂肪组织增多(P<0.01),血浆胆固醇(TG)含量上升、碱性磷酸酶(ALP)和高密度脂蛋白(HDL)含量下降(P<0.01).刺老苞根皮黄酮类化合物组能有效提高骨的重量和骨质的含量(P<0.01),减少骨髓腔中脂肪的含量,升高碱性磷酸酶和高密度脂蛋白含量(P<0.01).结论 泼尼松可抑制大鼠的骨生长及引起骨丢失,而刺老苞根皮黄酮类化合物可有良好的对抗作用.     

刺老苞根皮黄酮类化合物对维甲酸致大鼠骨质疏松的影响

目的研究刺老苞根皮黄酮类化合物对维甲酸致大鼠骨质疏松的影响。方法将60只大鼠随机分成对照组,模型组,刺老苞根皮黄酮类化合物高、中、低剂量(10、20、30 mg/kg)组和仙灵骨葆胶囊(20 mg/kg)阳性对照组,每组10只。各组以ig维甲酸70 mg/kg造模后,各给药组分别ig给予相应药物,每日1次,连续8周。取血清检测相关生化指标,进行骨组织切片检查和骨生化指标检测,测定股骨长度、宽度及质量。结果与对照组比较,模型组大鼠股骨质量、尺骨羟脯氨酸(Hyp)和骨钙的量明显降低,胫骨骨髓腔中脂肪组织增多(P<0.01),血浆胆固醇(TC)水平升高、碱性磷酸酶(ALP)和高密度脂蛋白-胆固醇(HDL-C)水平降低(P<0.01)。与模型组比较,刺老苞根皮黄酮类化合物各剂量组能有效增加骨质量和提高骨质的量(P<0.01),减少骨髓腔中脂肪的量,升高ALP和HDL-C的量(P<0.01)。结论刺老苞根皮黄酮类化合物可有效对抗维甲酸引起的大鼠骨生长抑制及骨丢失。     

刺老苞根皮黄酮类化合物对破骨细胞分化的影响

目的：研究刺老苞根皮黄酮类化合物对体外破骨细胞分化的影响。方法：建立由骨保护素配体（RANKL）和巨噬细胞集落刺激因子（M-CSF）共同细胞因子的小鼠破骨细胞骨髓诱导体系,将不同浓度的刺老苞根皮黄酮类化合物作用于破骨细胞。受试细胞分为对照组、刺老苞根皮黄酮类化合物低剂量组（10-8mol·L^-1）、刺老苞根皮黄酮类化合物中剂量组（10^-7mol·L^-1）和刺老苞根皮黄酮类化合物高剂量组（10^-6mol·L^-1）,并设立空白对照组。7天后取细胞玻片进行抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色,观察破骨细胞并计数;测量抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）活性以及破骨细胞表面NF—kB活化受体（RAVK）mRNA表达量。结果：诱导培养的破骨细胞形态特征明显;刺老苞根皮黄酮类化合物中、高剂量组在细胞数量、TRAP活性上与对照组相比有明显统计学差异（P〈0．05）;刺老苞根皮黄酮类化合物各剂量组在（RANK）mRNA表达量上与对照组相比有明显统计学差异（P〈0．05）,且呈量效关系。结论：刺老苞根皮黄酮类化合物可以抑制体外培养的破骨细胞分化。     

刺老苞根皮黄酮类化合物对MC31E-E1成骨细胞OPG和RANKL mRNA基因表达影响的实验研究

目的:探讨刺老苞根皮黄酮类化合物对MC3T3-E1成骨细胞骨保护素(OPG)和核因子κB受体激活因子配体(RANKL)mRNA基因表达的影响.方法:体外培养MC313-E1成骨细胞,分别加入含0mol·L-1、10-8mol·L-1、10-7mol·L-1、10-6mol·L-1刺老苞根皮黄酮类化合物的培养液,48h及96h后分别提取细胞总mRNA,用RT-PCR方法分析OPG/RANKL的mRNA的表达,进行半定量分析.结果:培养48h后,与对照组比较,刺老苞根皮黄酮类化合物增强了OPGmRNA的表达,有显著性差异(P<0.05或P<0.01),VOPG/VRANKL比值增大;96h后,刺老苞根皮黄酮类化合物明显增强了OPG mRNA的表达,各浓度组与对照组相比,均有显著性差异(P<0.05或P<0.01),各浓度组VOPG/VRANKL比值增大,有显著性差异(P<0.05或P<0.01).结论:刺老苞根皮黄酮类化合物可能通过增加成骨细胞OPG的表达来抑制破骨细胞的分化和成熟,从而抑制骨吸收,达到治疗骨质疏松症的目的.     

刺老苞根皮黄酮对骨折模型大鼠骨质代谢的影响研究

目的研究刺老苞根皮黄酮对胫骨骨折模型大鼠骨质代谢变化的影响。方法将50只6周龄SD（雌雄各半）大鼠随机分成5组,即对照组（A组）、模型组（B组）、刺老苞根皮黄酮低剂量组（C组）、刺老苞根皮黄酮中剂量组（D组）、刺老苞根皮黄酮高剂量组（E组）,每组10只。其中刺老苞根皮黄酮低、中、高剂量组给予刺老苞根皮黄酮相应剂量灌胃（分别为10mg/kg、20mg/kg、30mg/kg）,对照组和模型组以等量的0.9%NaCl溶液灌胃。观察各组灌胃第4天、7天、14天、21天、28天不同时间点其他骨代谢相关参数（碱性磷酸转移酶、骨钙素、羟脯氨酸以及骨盐）变化情况。结果与对照组比较,模型组不同时间点的骨碱性磷酸转移酶（ALP）、骨钙素、羟脯氨酸、骨钙、骨磷含量均降低,差异有统计学意义（P〈0.01）。与模型组比较,刺老苞根皮黄酮各剂量组除骨折第4天外其他时间点的ALP、羟脯氨酸、骨钙、骨磷含量均升高,差异有统计学意义（P〈0.05或P〈0.01）;而刺老苞根皮黄酮各剂量组骨钙素的含量在骨折第14天、第21天及第28天升高,差异有统计学意义（P〈0.05或P〈0.01）。与低剂量组比较,中、高剂量组除骨折第4天外其他时间点的骨碱性磷酸转移酶（ALP）、骨钙素、羟脯氨酸、骨钙、骨磷含量均升高,差异有统计学意义（P〈0.05或P〈0.01）。与中剂量组比较,高剂量组除骨折第4天外其他时间点的骨碱性磷酸转移酶（ALP）、骨钙素、羟脯氨酸、骨钙、骨磷含量均升高,差异有统计学意义（P〈0.01）。结论刺老苞根皮黄酮可以改善胫骨骨折大鼠骨代谢状况,有利骨折愈合修复。     

刺老苞根皮总皂苷和总多糖含量测定

目的对湖北恩施土家族道地药材刺老苞根皮中总皂苷及总多糖含量进行测定。方法用Flex station3自动化筛选检测系统在400～900 nm波长处对其总皂苷及总多糖进行扫描,在最大吸收波长550,480 nm处分别测定两者含量。结果刺老苞根皮中总皂苷及总多糖的含量分别为3.28%、7.33%,RSD值分别为0.77%、0.46%。结论作为刺老苞根皮主要物质成分,总皂苷及总多糖含量较高,为该药材治疗骨折愈合机制的研究提供了参考数据。     

ICP—MS法测定骨质疏松症大鼠股骨7种金属元素的含量

目的：探讨土家族药刺老苞根皮抗骨质疏松症作用。方法：将50只大鼠随机分成正常对照组、泼尼松模型组和刺老苞根皮水提物高、中、低（10mg·ks^-1、20mg·ks^-1、30mg·kg^-1）剂量组,每组10只。分别灌胃相应药物,每日1次,连续8周后运用电感耦合等离子体质谱法（ICP—Ms）测定灌喂刺老苞根皮提取物大鼠股骨中Ca、Sis、P、Mn、Cu、Se和Zn7种微量、常量元素的含量。结果：经灌喂刺老苞根皮提取物的骨质疏松症大鼠模型股骨中上述7种元素含量均有不同程度的提高,呈现一定的刑量关系。结论：这为土家医利用刺老苞根皮治疗骨折不愈、骨质疏松疾病从微量元素的角度提供有用数据。     

刺老苞根皮黄酮对抗骨性关节炎软骨细胞氧化损伤及炎性的影响研究

目的研究刺老苞根皮黄酮对骨关节炎软骨细胞氧化损伤及炎性的逆转作用。方法选15只5月龄新西兰兔,采用内侧副韧带、前后交叉韧带切断并切除内侧半月板的Hulth骨性关节炎动物模型制作方法,分离培养软骨细胞,其中模型组分别加入10,20,30μg/ml刺老苞根皮黄酮低、中、高剂量处理。从第9周开始,采用DCFH-DA法检测细胞内活性氧水平,Griess法测定细胞培养上清中NO、SOD和GSH-Px含量,RT-PCR法检测各组细胞相关炎性因子IL-1β、诱导型一氧化氮合酶iNOS、转录调节因子p53基因mRNA的表达。结果与模型组比较,刺老苞根皮黄酮各剂量组细胞内活性氧水平、NaNO2含量、IL-1β/GAPDH表达水平、iNOS/GAPDH表达水平、p53/GAPDH表达水平均有所降低,且差异均有统计学意义(P<0.01),而SOD、GSH-Px均有所升高,且差异均有统计学意义(P<0.01)。结论刺老苞根皮黄酮对骨关节炎软骨细胞的氧化损伤及炎性有逆转作用,具有研发成为骨性关节炎治疗药物的潜能。     

刺老苞根皮黄酮对兔骨性关节炎软骨细胞增殖与凋亡影响的研究△

目的：通过观察刺老苞根皮黄酮对新西兰兔骨性关节炎模型的软骨细胞增殖与凋亡基因表达的影响,初步探索其干预软骨细胞代谢的作用机制。方法：取5月龄新西兰兔骨性关节炎模型的膝关节软骨建立软骨细胞体外培养体系,分别采用MrITll法、TUNEL法、免疫组化法对细胞增殖、凋亡及细胞周期调控基因Bax、Bcl-2、Caspase-3、p53mRNA的表达进行检测。结果：不同剂量组刺老苞根皮黄酮可显著促进软骨细胞体外增殖,并可通过减弱软骨细胞Bax、Caspase-3、p53mRNA的表达,增强Bcl-2mRNA的表达来减缓软骨细胞凋亡进程。结论：刺老苞根皮黄酮可有效调控兔骨性关节炎软骨细胞代谢,增强细胞活性,延缓凋亡,具有研发成为骨性关节炎治疗药物的潜能。     

刺老苞根皮含药血清对原代成骨细胞Wnt/β-catenin信号通路的影响

该文研究了不同浓度刺老苞根皮含药血清对原代成骨细胞Wnt/β-catenin信号通路中β-catenin,Wnt-1,Frizzed-2,TCF和Axin表达的影响。经SPF级健康雌性SD大鼠(80只)给予蒸馏水、刺老苞根皮水煎剂高、中、低3种剂量,连续灌胃7d,制备刺老苞根皮含药血清。体外培养原代成骨细胞(OB)并鉴定,取第3代成骨细胞,培养48 h后用各组含药血清干预培养10 d,采用茜素红染色钙化结节并计数;干预培养48 h后收集细胞,分别采用Real-time PCR(RT-PCR)和Western blot法测定β-catenin,Wnt-1,Frizzed-2,TCF和Axin的表达情况。结果显示,经鉴定体外培养细胞为原代成骨细胞;在干预培养后,与模型组相比,各剂量组可促进原代成骨细胞的矿化能力,且上调β-catenin,Wnt-1,Frizzed-2,TCF mRNA和蛋白的表达,下调Axin mRNA和蛋白的表达。结果发现刺老苞根皮含药血清可通过调节原代成骨细胞Wnt/β-catenin信号通路中β-catenin,Wnt-1,Frizzed-2,TCF和Axin表达,增强成骨细胞的分化和增殖。     

伏毛铁棒锤药材HPLC指纹图谱研究

目的:建立伏毛铁棒锤药材HPLC指纹图谱。方法:色谱条件:美国Thermo ODS-2HYPERSIL(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱;甲醇-乙腈-醋酸-醋酸钠(pH=4.5)缓冲液为流动相进行梯度洗脱;240～280nm整合波长检测,流速0.8mL/min,柱温30℃。结果:建立了伏毛铁棒锤药材HPLC-DAD指纹图谱,标定出25个共有峰,各批药材均具有上述特征峰,但特征峰的相对含量存在差异,即各批药材指纹图谱相似度大小与其来源相关。结论:本方法重现性好,所建立的指纹图谱可作为伏毛铁棒锤药材的鉴定依据。     

刺老苞胶囊治疗膝关节骨性关节炎疗效观察

目的:观察刺老苞胶囊治疗膝关节骨性关节炎的疗效。方法 :将60例膝关节骨性关节炎患者随机分为两组:治疗组30例,对照组30例。治疗组给予刺老苞胶囊(1次2粒,刺老苞总提物为200～300mg/粒,每日2次)治疗,对照组给予芬必得(1次2粒,200mg/粒,每日2次)治疗。比较两组治疗前后膝关节功能评分,观察主要症状缓解情况。结果:治疗组总有效率为66.67%,对照组总有效率为76.67%,两组疗效比较差异显著(P<0.05)。结论:刺老苞胶囊治疗骨性关节炎有一定的疗效。     

菟丝子黄酮干预去卵巢大鼠骨代谢研究

目的:观察菟丝子黄酮对骨质疏松症模型大鼠骨代谢和骨密度的影响。方法:去卵巢法建立骨质疏松症大鼠模型,对模型大鼠灌胃菟丝子黄酮,并设立假手术组、造模组、己烯雌酚组大鼠为对照,给药12周后处死大鼠,测定骨代谢指标s-Ca、s-P、u-Ca/Cr、u-P/Cr、BALP、uDPD/Cr和BMD水平。结果:造模组大鼠u-Ca/Cr、u-P/Cr、uDPD/Cr和BALP显著高于假手术组,而BMD值低于假手术组大鼠;菟丝子组大鼠与己烯雌酚组、假手术组大鼠的骨代谢指标s-Ca、s-P、u-Ca、u-P、BALP、uDPD/Cr和BMD值相近,而与模型组相比有显著性差异。结论:菟丝子黄酮能够显著抑制去卵巢大鼠的骨代谢增强,调整骨形成和骨吸收的关系,对去卵巢造成的骨质疏松有明显的防治作用。     

二仙汤对去卵巢骨质疏松大鼠股骨蛋白质组的影响

该实验为探究二仙汤防治骨质疏松的作用及对去卵巢骨质疏松模型大鼠股骨蛋白质组的影响。将雌性SD大鼠按体重随机分为4组,即假手术组、模型组、阿仑膦酸钠组(阿仑膦酸钠,1 mg·kg~(-1))、二仙汤组(生药量8 g·kg~(-1)),其中假手术组和模型组灌服生理盐水,阿仑膦酸钠组按1 mg·kg~(-1)剂量灌服阿仑膦酸钠,二仙汤组按生药量8 g·kg~(-1)灌服二仙汤,每日1次,连续给药90 d后检测股骨骨密度,同时应用Nano-LC-LTQ-Orbitrap系统检测股骨骨蛋白,Protein Discovery软件进行蛋白质鉴定,SIEVE软件对蛋白进行相对定量分析。实验结果显示,二仙汤能显著提高去卵巢大鼠股骨骨密度。二仙汤组与模型组相比较共发现41个与假手术组趋势一致的差异蛋白,主要包括生物氧化相关蛋白、信号转导通路相关蛋白、脂肪酸代谢相关蛋白、细胞骨架相关蛋白、能量代谢相关蛋白、糖代谢相关蛋白等。二仙汤能防治骨质疏松症,碳酸酐酶2、整合素β1等相关差异蛋白质可能是其作用靶点。     

超微粉碎对蒲公英成分溶出特性的影响

目的：对蒲公英超微细粉体有效成分溶出特性进行观察研究。方法：对蒲公英药材进行细胞级微粉碎;用薄层色谱法对其所含成溶出特性进行观察研究。结果：超微细粉体薄层色谱有明显改变,其中代表成分咖啡酸可在甲醇及水中快速溶出。结论：蒲公英经超微粉碎后,成分溶出特性有明显改变,由此可简化提取过程。