粒细胞集落刺激因子在急性白血病中的应用

粒细胞集落刺激因子 (Ｇｒａｎｕｌｏｃｙｔｅｃｏｌｏｎｙ ｓｔｍｉｎ ｍｕｌａｔｉｎｇｆａｃｔｏｒ,ｒｈＧ ＣＳＦ)主要作用于中性粒细胞造血细胞的增殖、分化 ,和成熟。因此 ,对白血病强烈化疗后的骨髓抑制有治疗作用。我科于 1996年 10月至 1997年 10月对 2 0例急性白血病在强烈化疗后使用 (ｒｈＧ ＣＳＦ)进行了临床治疗 ,疗效良好 ,现报道如下 :1　临床资料病例本组 2 0例中 ,男性 8例 ,女性 12例 ,年龄最大 60岁 ,最小 2 4岁 ,均为我科住院病人 ,经骨髓细胞学检查、血常规检查、组织化学及免疫学分型等确诊为急性白血病 ,全组均为初…     

粒细胞集落刺激因子作用研究进展

粒细胞集落刺激因子(G-CSF)主要用于各种原因引起的粒细胞减少症。近年的研究发现,G-CSF具有免疫调节、血管保护、促进血管发生、抗动脉粥样硬化等作用。本文主要综述了G-CSF在糖尿病及并发症领域应用研究进展,其作用机制涉及调节中性粒细胞的功能、内皮祖细胞的动员、影响树突状细胞和T细胞的功能等。     

血清粒细胞集落刺激因子对新生儿急性感染诊断价值探讨

采用双抗体夹心酶联免疫法测定62例急性感染新生儿血清粒细胞集落刺激因子（G－CSF），其阳性率显著高于血培养（P＜0．005）；患儿感染控制后，G－CSF全部转阴提示G－CSF可作为新生儿急性感染诊断指标之一，优于血培养及白细胞计数。     

小剂量粒细胞集落刺激因子在急性白血病中的应用

治疗急性白血病的主要手段是强烈化疗 ,但是强烈化疗所引起的骨髓抑制 ,往往会导致严重感染 ,成为白血病的死亡原因之一。为了促进化疗后骨髓抑制的恢复 ,防止感染 ,我们用小剂量分泌型基因重组人粒细胞集落刺激因子 (ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔｈｕｍａｎｇｒａｎｕｌｏｃｙｔｅ ｃｏｌｏｎｙｓｔｉｍｕｌａｔｉｎｇｆａｃｔｏｒ ,ｒｈＧ ＣＳＦ)治疗急性白血病强烈化疗后所致的骨髓抑制 ,取得了良好的效果。1　对象和方法1.1　病例1.1.1　治疗组 :我科住院的 2 6例急性白血病患者。其中急性粒细胞白血病 16例 ,急性淋巴细胞白血病10例。男 16…     

粒细胞集落刺激因子的脑保护作用研究进展

粒细胞集落刺激因子(G-CSF)是一种造血生长因子,最开始被用于治疗粒细胞减少症等血液系统疾病,目前越来越多的研究证明G-CSF在缺血性脑梗死中能发挥强大的神经保护效应。该文就其作用机制及其在临床应用中的一些研究进展予以综述。     

粒细胞集落刺激因子对SCID小鼠急性脑梗死的治疗作用

目的探讨粒细胞集落刺激因子（G-CSF）对严重免疫缺陷（SCID）小鼠急性脑梗死的治疗作用。方法SCID小鼠大脑中动脉闭塞后,立即皮下注射G-CSF,连续3d,对照组注射同样剂量磷酸缓冲液（PBS）,3d后观察脑梗死体积变化、梗死边缘血管再生情况、细胞凋亡和炎症反应情况。结果G-CSF对SCID小鼠急性脑梗死后梗死体积无影响,能促进脑梗死边缘血管再生和抑制细胞凋亡,但梗死边缘CD11b和F4/80阳性细胞数均较对照组明显增加,差异均有统计学意义（均P〈0.05）。结论SCID小鼠急性脑梗死后,立即注射G-CSF对脑组织有保护作用,但同时也加重急性梗死后的炎症反应。     

粒细胞集落刺激因子对大鼠急性肝衰竭肝细胞凋亡的影响

目的 探讨粒细胞集落刺激因子(G-CSF)抑制大鼠急性肝衰竭(ALF)肝细胞凋亡的作用及机制.方法 D-氨基半乳糖(D-GalN)制备SD大鼠急性肝衰竭模型.治疗组皮下注射重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)50 μg/kg共3 d,安慰剂组皮下注射生理盐水共3 d.建模后观察动物生存率,分别于6 h、12 h、1 d、3 d取肝脏,流式细胞仪检测肝细胞凋亡率,免疫组化法检测肝脏Bcl-2、半胱氨酸蛋白水解酶(caspase)-3表达,图像分析系统半定量分析.结果 治疗组生存率高于安慰剂组(53.3% vs 33.3%,P=0.027).两组肝细胞凋亡率、肝组织Bcl-2、caspase-3表达量均随时间而升高.1 d时治疗组肝细胞凋亡率(29%±7%)低于安慰剂组(44%±12%),差异有统计学意义(P=0.026).治疗组12 h、1 d时肝组织Bcl-2灰度值均低于安慰剂组,差异有统计学意义(分别为152±37 vs 161±7,P=0.012;150±12 vs 159±9,P=0.018),表示Bcl-2表达量高于安慰剂组;治疗组1 d、3 d时肝组织caspase-3灰度值均高于安慰剂组,差异有统计学意义(分别为189.6±4.6 vs 169.6±15.7,P=0.000;184.7±4.8 vs 160.0±5.0,P=0.000),治疗组caspase-3表达量低于安慰剂组.结论 肝细胞凋亡在ALF发病过程中发挥了重要作用.G-CSF通过促进肝细胞Bcl-2表达和减少caspase-3表达,延缓并减少肝细胞凋亡的发生,提高ALF大鼠生存率.     

外周血造血干细胞移植与粒细胞集落刺激因子动员治疗急性肝衰竭的疗效比较

目的观察外周血造血干细胞移植(PBHSCT)及重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)动员后对大鼠急性肝衰竭的疗效,并探讨其机制。方法采用D-氨基半乳糖(D-Gal)诱导大鼠急性肝衰竭模型,随机分为3组。对照组(Ⅰ组):尾静脉及肌肉均注射0.9%氯化钠注射液;rhG-CSF单纯动员组(Ⅱ组):造模前24h、12h、4h及造模同时皮下注射rhG-CSF,尾静脉及肌肉均注射0.9%氯化钠注射液;异体外周血造血干细胞移植组(Ⅲ组):正常大鼠连续5 d皮下注射rhG-CSF,第6天分离外周血造血干细胞,造模后24 h尾静脉注射外周血造血干细胞,肌肉注射环孢霉素A(CsA)。观察各组存活率、肝功能、肝脏病理变化。结果Ⅱ组和Ⅲ组存活率显著高于Ⅰ组(<0.01),但Ⅱ组和Ⅲ组间差异无统计学意义(>0.05)。肝功能及病理情况在Ⅱ组和Ⅲ组均有明显改善,但两者间差异无统计学意义。结论应用外周血造血干细胞移植及G-CSF均能有效治疗大鼠急性肝衰竭,改善D-Gal诱导的肝衰竭大鼠的存活率,促进肝功能恢复及改善肝脏病理状况。     

粒细胞集落刺激因子联合辛伐他汀治疗急性脑梗死的临床研究

目的：探讨粒细胞集落刺激因子（G-CSF）联合辛伐他汀治疗急性脑梗死的临床疗效和预后、方法：110例急性脑梗死患者随机分为（56例）和对照组（54例），随访3个月，比较两组治疗前、后的美国国立卫生研究院卒中量表（NIHSS）评分、日常生活能力指数（BI）、改良的Rankin（mRS）评分和简易智能量表（MMSE）评分。结果：两组患者在治疗后1和3个月的NIHSS、BI和mRS评分均比治疗前有好转，差异均有统计学意义（P〈0．05）。粒细胞集落刺激因子（G—CSF）联合辛伐他治疗组在治疗后3个月时NIHSS、BI、mRS和MMSE评分的好转优于对照组且差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论：探讨粒细胞集落刺激因子联合辛伐他汀治疗有利于神经功能、日常生活能力、智能方面的恢复，改善预后，可作为急性脑梗死治疗的联合药物。     

粒-巨噬细胞集落刺激因子对小鼠体内树突状细胞增殖和活化的影响

目的：研究粒-巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）在体内对树突状细胞（DC）增殖和活化的影响。方法：将Balb／c小鼠随机分为GM-CSF处理组和对照组,致死量γ射线照射后移植入绿色荧光蛋白（GFP）标记的骨髓来源的造血干细胞（HSC）,GM-CSF处理组隔天皮下注射0．1μg直至处死,对照组隔天皮下注射PBS。应用流式细胞仪分析和比较两组移植后1,2,3及4周小鼠脾脏内DC的数目、活化状态和随时间变化的DC动力学。结果：移植后各时间点GM-CSF处理组小鼠脾脏内DC数目明显高于对照组（均P〈0．05）,其中最大高出倍数为5倍;GM-CSF处理组DC的CD40,CD80和CD86均高于处理组;骨髓移植后第1周,小鼠脾脏内即出现HSC来源的DC,第2周数目开始上升,至第3周达到高峰,第4周开始下降。结论：GM-CSF对体内HSC分化为DC具有促进作用,并且可促进体内DC的成熟与活化。     

HSF1调控的炎症相关基因的筛选及SOCS3基因的实验验证

目的：筛选热休克因子1（HSF1）调控的炎症相关基因,初步探讨HSF1对下游基因的调控作用。方法：采用HSF1基因敲除小鼠,制备内毒素腹腔注射以及热休克反应后再给予内毒素腹腔注射的内毒素血症模型,分别抽提HSF1缺失突变纯合子和HSF1野生型小鼠肺组织总RNA,用微阵列进行筛选;用转录元件搜索软件分析差异表达基因的启动子区;选取启动子区含有热休克元件的基因：细胞因子信号转导抑制子3（SOCS3）,采用热休克反应（HSR）和HSF1过表达的RAW264,7巨噬细胞给予内毒素刺激,抽提总RNA进行RT—PCR,Northern印迹实验,观察HSR和HSF1过表达对内毒素诱导的SOCS3基因表达的影响。结果：用微阵列的方法筛选到HSF1可能抑制表达的炎症介质基因15个,其中9个基因的启动子区含有热休克元件;HSF1可能促进表达的炎症介质基因11个,其中8个基因的启动子区含有热休克元件;HSR和HSF1过表达可明显抑制小鼠RAW264．7巨噬细胞内毒素诱导的SOCS3mRNA的表达。结论：HSF1可抑制炎症介质SOCS3mRNA的表达。     

西帕依固龈液对LPS抑制人牙龈成纤维细胞DNA合成和细胞周期改变的影响

目的：研究西帕依固龈液对内毒素（lipopolysaccharide,LPS）引起人牙龈成纤维细胞（humangingival fibroblast,HGF）DNA合成和细胞周期改变的影响。方法：采用健康人牙龈组织原代培养的HGF,以25mg/L LPS作为刺激因子,用流式细胞仪技术观察西帕依固龈液对LPS引起HGF细胞周期改变的影响。结果：LPS刺激后,DNA合成前期细胞比例（G1期）明显上升,而DNA合成期（S期）细胞比例及细胞增殖指数（proliferation index,PrI）下降,西帕依固龈液可以使Gl期细胞所占百分比下降,并可使S期细胞比例及蹦上升。结论：西帕依固龈液能够明显改善LPS抑制HGF增殖的影响,对牙龈纤维层也有保护作用,有助于牙周病的防治。     

普乐可复和环孢素A对肝细胞分泌白蛋白作用的影响

目的：研究细胞因子及普乐可复（FK506）和环孢素A（CSA）对肝细胞分泌白蛋白的影响。比较FK506和CSA对IL-6抑制肝细胞分泌白蛋白的作用。方法：分别用IL-6，IL-2和IL-10（0-10μg／L）以及FK506和CSA（1-100μg／L）体外刺激人肝癌细胞株（HepG2）48h；另外用IL-6（5μg／L）刺激HepG2细胞，同时分别加入FK506和CSA（0.1-10μg／L）刺激细胞48h，采用全自动生化仪检测FK506和CSA组细胞上清中乳酸脱氢酶（LDH）的量，采用放射免疫法检测各组细胞上清白蛋白的量。结果：IL-6能明显降低HepG2细胞上清中白蛋白的水平，且在一定范围内呈剂量依赖性，IL-6为5μg／L时白蛋白的分泌量达最低（P〈0.05）。IL-2，IL-10和FK506对HepG2细胞白蛋白的分泌无明显影响，CSA能轻度降低HepG2细胞白蛋白的分泌，且当CSA为10和100μg／L时差异有统计学意义（P〈0.05）。FK506明显减少HepG2细胞释放LDH（P〈0.05），CSA则轻度增加HepG2细胞分泌LDH（但P〉0.05）。另外，FK506能减轻IL-6抑制HepG2细胞分泌白蛋白的作用（P〈0.01），但CSA对此无作用。结论：IL-6而非IL-2和IL-10能明显抑制HepG2细胞分泌白蛋白，FK506而非CSA能减轻肝细胞的损伤，并能减轻IL-6抑制肝细胞分泌白蛋白的作用，这为FK506用于治疗免疫性肾脏病低白蛋白血症提供了的理论依据。     

皮下注射胰岛素抑制胰岛β细胞凋亡预防NOD鼠糖尿病

目的：观察皮下注射胰岛素免疫干预对非肥胖糖尿病（non-obese diabetic,NOD）鼠胰岛炎、B细胞凋亡和糖尿病的影响,并探讨其诱导免疫耐受的机制。方法：60只NOD雌鼠随机分为胰岛素处理组（n=34）和磷酸盐缓冲液（phosphate buffered saline,PBS）对照组（n=28）,分别于4周、12周、20周、28周皮下注射中效胰岛素优泌林N（Humulin N）6U（60μL）＋不完全弗氏佐剂（incomplete Freund＇s adjuvant,IFA）60μL,对照组予PBS（60μL）＋IFA（60μL）。于12周龄观察胰岛炎和胰岛B细胞凋亡;检测胰岛Fas和FasL的表达;测定血清IL-4和IFN-γ浓度,以及胰岛内I-Aβ^x7,IL-1β,IFN-γ,Fas,IL-4 mRNA的表达水平。结果：NOD鼠皮下注射胰岛素加IFA组30周龄和52周龄时发病率仅为21．4％和28．6％,而皮下PBS加IFA组为71．4％和85．7％（P〈0．05）。胰岛素组胰岛炎积分比对照组低,但差异无统计学意义（P〉0．05）。胰岛素组胰岛Fas抗原表达和B细胞凋亡率均比PBS对照组低（均P〈0．05）。胰岛素组胰岛内I-Aβ^x7,IFN-γ,IL-1β,FasmRNA表达较PBS对照组低（均P〈0．05）,而IL-4mRNA表达较对照组高（P〈0．05）;胰岛素组血清IL-4比PBS组高,IFN-γ比PBS组低（均P〈0．05）。结论：皮下注射胰岛素能诱导NOD鼠的免疫耐受而预防糖尿病的发生,但不能阻断胰岛炎的进展。皮下注射胰岛素能诱导调节性T细胞产生,使全身和胰岛局部T细胞由,Th1向Th2转型,从而抑制Fas介导的B细胞凋亡而预防糖尿病。     

血浆髓过氧化物酶在急性冠脉综合征中的临床意义

目的：探讨血浆髓过氧化物酶（MPO）在急性冠脉综合征（ACS）中的临床意义。方法：分别测定ACS（54例）、稳定型心绞痛（SAP，54例）和对照组（54例）3组患者的血浆MPO、血清高敏C反应蛋白（hsCRP）、肌钙蛋白I（cTnI）浓度，比较各组的差异；所有患者常规治疗，随访半年，记录心脏事件。结果：ACS组血浆MPO浓度明显高于SAP组和对照组患者（P〈0.01），SAP组与对照组之间差异无统计学意义（P=0．74）；ACS组患者血浆MPO与hsCRP，cTnI及心血管传统危险因素无相关性，多元logistic回归分析发现血浆MPO、空腹血糖和性别是ACS诊断的影响因素；高浓度血浆MPO患者心脏事件发生率较高。结论：血浆MPO可能是ACS的生化标志物之一，可预报心脏事件的发生。     

冠心病患者外周血炎症相关指标及ox-LDL和ox-LDL抗体的检测及其临床意义

目的：检测不同类型冠心病及非冠心病患者炎症相关指标可溶性CD40配体（sCD40L）、中性粒细胞胶原酶-8（MMP-8）、妊娠相关性血浆蛋白-A（PAPP—A），脂质过氧化和自身免疫指标氧化型低密度脂蛋白（ox—LDL）、氧化型低密度脂蛋白抗体（ox—LDLAb）水平，探讨其与急性冠脉综合征的相关性。方法：酶联免疫吸附法测定109例冠心病患者（包括急性心肌梗死组36例，不稳定心绞痛组38例，稳定心绞痛组35例）和非冠心病对照组36例外周血sCD40L，MMP-8，PAPP—A，ox—LDL和ox-LDLAb浓度。结果：急性冠脉综合征（包括急性心肌梗死和不稳定心绞痛）患者外周血中sCD40L，MMP-8，PAPP-A，ox-LDL和ox—LDLAb水平均高于稳定心绞痛患者（P〈0．05）和非冠心病对照患者；急性冠脉综合征中急性心肌梗死患者和不稳定心绞痛患者以上各指标水平的差异无统计学意义（P〉0．05）；与对照组相比，稳定心绞痛组各指标水平除PAPP—A外均高于对照组（P〈0．05）。各指标对于急性冠脉综合征都有一定的诊断价值（ROC曲线下面积0．7～0．9）。结论：外周血sCD40L，MMP-8，PAPP—A，ox-LDL和ox-LDLAb水平升高，参与了急性冠脉综合征的发生，可作为动脉粥样硬化斑块不稳定的血清学标志。     

造血刺激因子对巨核细胞体外扩增的影响

目的:探讨造血刺激因子对巨核系成熟细胞体外扩增的影响。方法:将小鼠骨髓单个核细胞(BMNC)按(2,4,6,8,1 0)×1 05个/mL浓度加入半固体培养体系,体外培养巨核细胞集落形成单位(CFU-M eg),观察BMNC数与CFU-M eg生成数之间的关系;将BMNC分别加入含rmSCF rmTPO rm IL-3(3HSFs),rmSCF rm IL-3 rmTPO rm IL-6(4HSFs)或骨髓成纤维细胞条件培养液(F-CM)的液体培养体系中持续培养,从培养的第1 d开始每两天观察巨核系成熟细胞的生成情况。结果:当小鼠骨髓单个核细胞按(2,4,6,8,1 0)×1 05个/mL浓度种入CFU-M eg培养体系时,CFU-M eg生成数随细胞种入数增加而增多;种入细胞浓度对CFU-M eg产率有影响,种入细胞浓度为1×1 06个/mL时,与种入细胞浓度为2×1 05个/mL,每2×1 05个骨髓单个核细胞生成的CFU-M eg数相比,差异有统计学意义(P<0.0 5)。3HSFs,4HSFs和F-CM均对巨核系成熟细胞体外扩增有促进作用。3HSFs和4HSFs的扩增作用明显优于F-CM,4HSFs的扩增效果优于3HSFs;3HSFs和4HSFs扩增体系扩增7 d效果最好,F-CM扩增体系扩增5 d效果最好。结论:3HSFs,4HSFs和F-CM均对巨核系成熟细胞体外扩增有促进作用;4HSFs扩增成熟巨核细胞效果优于3HSFs和F-CM;不同扩增体系扩增巨核细胞的最佳效果所需的时间不同。     

VEGF-C介导的乳腺癌肿瘤淋巴管生成及定位

目的：探讨血管内皮生长因子C（vascular endothelial growth factor C，VEGF-C）介导的乳腺癌肿瘤淋巴管生成及定位。方法：分子生物学原位杂交方法检测VEGF-C mRNA基因在89例原发性乳腺癌组织中的表达；免疫组化SP法对乳腺癌肿瘤淋巴管进行血管内皮生长因子受体3（vascular endothelial growth factor receptor-3，VEG-FR-3）标记。结果：在89例原发性乳腺癌组织中，49例表达VEGF-C mRNA，表达率为55．06％。VEGF-C mRNA的表达与乳腺癌淋巴管密度（lymphatic vessel density，LVD）和腋淋巴结转移呈正相关；与VEGF-CmRNA阴性组相比，VEGF-C mRNA阳性组的肿瘤淋巴管密度大、腋淋巴结转移率高（均P〈0．05）；所有病例都有不同程度的淋巴管生成，但以肿瘤间质组织中淋巴管生成为主，癌巢中未见到明显的成形淋巴管。肿瘤淋巴管密度与乳腺癌临床分期和腋淋巴结转移呈正相关，临床分期越晚，肿瘤淋巴管密度越高（P〈0．05）；腋淋巴结转移组的肿瘤淋巴管密度比无淋巴结转移组高（P〈0．05）。结论：原发性乳腺癌组织VEGF-C mRNA的表达与乳腺癌肿瘤淋巴管生成、腋淋巴结转移呈正相关；VEGF-C介导的乳腺癌肿瘤淋巴管生成主要发生在肿瘤间质组织中。     

核结合因子促进骨髓间质细胞MBA-1凋亡

目的：研究核结合因子（core binding factor alpha 1,cbfa1）的2种亚型Cbfa1／P56和Cbfa1／P57对骨髓间质细胞MBA-1凋亡的影响,并探讨其促进MBA-1凋亡的作用机制。方法：用带有cbfa1／P56或cbfa1／P57全长cDNA的质粒瞬时转染到骨髓间质细胞MBA-1,72h后用流式细胞仪观察细胞凋亡率的变化,并抽提蛋白进行Cbfa1及相关凋亡蛋白Bax,Bc1-2,cytochrome-C,caspase-3,caspase-9和TNF-α的免疫印迹检测。结果：流式细胞仪检查发现,转染Cbfa1／P56或Cbfa1／P57质粒后,MBA-1细胞的凋亡率明显增加。Western b1ot显示,Cbfa1／P56或Cbfa1／P57能增加Bax蛋白表达和Bax／Bc1-2比值,并增加cytochrome-C,caspase-3,caspase-9,TNF-α蛋白的表达。结论：Cbfa1／P56和Cbfa1／P57能诱导骨髓间质细胞MBA-1凋亡。Cbfa1促进MBA-1凋亡的机制包括线粒体途径和膜受体途径2种,凋亡相关蛋白Bax,Bc1-2,cytochrome-C,caspase-9和caspase-3组成的信号级联反应构成了Cbfa1促进MBA-1凋亡的信号转导通路,TNF-α也参加了该凋亡的信号转导。