建立小鼠急性心肌缺血再灌注损伤模型手术技巧及TTC染色方法探讨

目的探讨建立小鼠缺血再灌注损伤（I/R）模型更好的办法。方法共30只雄性C57BL/6小鼠,其中20只用于建立I/R模型（实验组）,10只为假手术组。采用小动物呼吸机,开胸结扎冠状动脉左前降支（LAD）30 min,待小鼠苏醒后撤离呼吸机。结果行30 min LAD结扎术后实验组存活率为95%（19/20）。实验组和假手术组缺血危险区分别为（59.5±0.9）%、（60.7±1.1）%,P〉0.05;实验组梗死面积为（32.2±0.7）%,假手术组无心肌梗死形成。结论采用本方法制作小鼠心肌I/R模型成功率高,且操作简单,创伤小。     

小鼠心肌缺血/再灌注损伤中TTC染色方法的改进及蛋白酶体作用机制的探讨

目的:探讨改进的主动脉逆行灌注TTC-Evans blue双染法对小鼠心肌梗死面积的显示效果,并探讨蛋白酶体参与缺血/再灌注(I/R)的作用。方法:16只8周龄,C57BL/6J野生小鼠,随机分为假手术组(sham组)及I/R组,采用结扎冠状动脉左前降支45min,复灌2h,复制小鼠心脏I/R损伤模型。用改进主动脉逆行灌注法,分别灌注TTC和Evans blue染料,垂直于心脏长轴切片,计算梗死面积;Western-blot方法检测心肌组织中蛋白酶体各亚基表达;TUNEL染色法检测心肌细胞凋亡,试剂盒检测蛋白酶体活性及Caspase-3活性。结果:与sham组相比,I/R组的心肌梗死面积/危险区面积比值增加32.6%(n=8,P0.01),心肌组织中Caspase-3活性升高2.82倍(n=8,P0.01),而蛋白酶体糜蛋白酶样活性降低32%(n=8,P0.01),免疫蛋白酶体亚基β1i、β2i、β5i蛋白表达分别降低49%、48%和54%(n=8,均P0.05)。结论:改进的TTC-Evans blue双染色方法操作性强,成功率高,能够更好地为心肌I/R损伤研究提供可靠的形态学支持,心肌I/R损伤导致小鼠心肌组织蛋白酶体功能被抑制及心肌梗死面积、凋亡和Caspase-3活性增加。     

小鼠心肌缺血/再灌注模型制备方法的改良

1 现有的小鼠心肌缺血/再灌注(MI／R)模型目前，制备小鼠心肌缺血模型多采用药物诱导方法，如血管升压素(垂体后叶素)、异丙肾上腺素等，这些药物诱发的作用复杂，且无法准确实现再灌注。     

小鼠心肌缺血再灌注损伤模型制备及心肌梗死面积评价方法学比较

目的对小鼠心肌缺血再灌注损伤模型制备及心肌梗死面积评价方法进行比较。方法40只雄性BAB/c小鼠按完全随机设计方法分为传统方法组和改良方法组,传统方法组的心肌再灌注操作采用再次开胸、松开结扎线的方法,改良方法组的心肌再灌注操作为在体外松开结扎线,无需再次开胸。采用伊文思蓝-TTC双染色方法区分缺血再灌注损伤后心肌的梗死区(IA)、缺血危险区(AAR)和左心室总面积(LV)。同时采用传统算法和质量权重法计算心肌梗死面积,质量权重法即在传统算法的基础上,用切片中各区域面积乘以该片心肌质量的百分比,累加各切片的相应区域面积,再计算百分比。结果无论采用哪种算法,传统方法组与改良方法组心肌梗死面积(IA/AAR)差异无统计学意义(传统算法:传统方法组44.43%±2.28%,改良方法组44.24%±1.68%,P=0.96;质量权重法:传统方法组51.74%±2.26%,改良方法组54.51%±1.14%,P=0.23)。与传统方法组相比,改良方法组术后存活率高、麻醉剂使用剂量小、苏醒时间短(均为P<0.05)。此外,采用质量权重法计算AAR/LV、IA/AAR数据的标准差显著小于传统算法(AAR/LV:传统算法标准差2.90,质量权重法标准差1.24;IA/AAR:传统算法标准差2.22,质量权重法标准差:1.00)。结论与传统方法相比,改良方法能够更加稳定、有效地制备小鼠心肌缺血再灌注模型。此外,采用质量权重法计算的心肌梗死面积数据比传统方法准确性更高。     

用结扎法建立小型猪心肌缺血再灌注损伤模型

目的用结扎法建立小型猪心肌缺血再灌注损伤模型,为研究干细胞移植对小型猪心肌缺血再灌注损伤后的治疗作用提供基础。方法选用中国小型猪25头,结扎冠状动脉左前降支中远1/3处,90 min后松开。在结扎前后及松开时分别进行冠状动脉造影和描记心电图,4周后处死, 进行心肌TTC染色、HE染色和PTAH染色。结果造模成功率为92％(23/25),结扎法阻断冠状动脉血流及重新开放血流血管再通的成功率均为100％。模型猪心肌经病理显微镜检查有坏死心肌。结论结扎法阻断冠状动脉血流及血管再通的成功率均为100％,此法是建立小型猪心肌缺血再灌注损伤模型的较好方法。     

心肌缺血再灌注损伤研究进展

急性心肌梗死是主要的致死致残原因,再灌注治疗是其标准的治疗方案,然而再灌注治疗伴随着再灌注损伤,再灌注损伤的机理目前还未完全清楚,分子、细胞、组织上的改变均与参与再灌注损伤,本文就心肌缺血再灌注损伤的研究进展作一综述。     

心肌缺血再灌注损伤进展

缺血-再灌注损伤指的是在组织器官缺血恢复血流后,不仅没使组织器官功能恢复,反而使缺血所致的功能和代谢障碍及结构破坏进一步加重,甚至出现不可逆损伤的现象。研究最多的就是心肌缺血-再灌注损伤。随着溶栓、冠状动脉搭桥术、经皮冠状动脉内成形术等血管再灌注疗法通过恢复缺血组织的供血有效挽救濒死心肌。但是再灌注受缺血组织血管再通时间限制并存在再灌注损伤等问题,因此随着新的再灌注技术在临床广泛应用,防治心肌缺血-再灌注损伤成为冠心病治疗亟待解决的关键问题之一。     

心肌缺血再灌注损伤研究进展

八十年代以来 ,随着冠状动脉溶栓术、经皮冠状动脉成形术 (ＰＴＣＡ)、冠状动脉内扩张术、冠状动脉旁路术等技术的推广应用 ,心肌再灌注损伤 (ｍｙｏｃａｒｄｉａｌｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎｉｎｊｕｒｙ ;ＭＲＩ)已越来越受到广大基础和临床工作者的重视。心肌缺血再灌注损伤具有多因素复杂的机制 ,概括起来 ,包括以下几点 :1　自由基与心肌缺血再灌注损伤大量研究表明 ,心肌缺血再灌注时 ,氧自由基含量明显增加。1.1　心肌缺血再灌注时 ,氧自由基生成增多 :(1)次黄嘌呤 黄嘌呤氧化酶系统。在心肌缺血时 ,能量消耗 ,细胞内三磷酸腺苷 (ＡＴＰ…     

心肌缺血再灌注损伤研究进展

正心肌缺血本质是心肌的氧供需求平衡失调,缺血心肌可呈现功能、形态及代谢等方面的损伤[1,2],减少心肌缺血后损伤的最有效办法就是恢复组织灌注。但是,目前遇到的问题是缺血心肌在恢复血液再灌注后,出现了心律失常、心肌能量代谢障碍、心肌细胞超微结构的变化及微血管内皮细胞(VEC)损伤和功能障碍等一系列的功能、结构、代谢及心肌细胞电生理特性等各个方面的损伤进一步加重的现象,即心肌缺血/再灌     

急性心肌缺血再灌注对大鼠脑组织损伤及发生机制的探讨

结扎大鼠左冠状动脉前降支建立急性心肌缺血再灌注模型,采用免疫组织化学方法观察大脑、小脑、脑干延髓部、海马等部位热休克蛋白70（HSP70）表达的改变.结果心肌缺血再灌注0.5h后即可在大鼠大脑、小脑、海马和延髓等部位的神经细胞和血管内皮细胞见阳性HSP70表达,随着再灌注时间延长表达增强.心肌缺血再灌注后不同时间段的血压明显降低,脑血流速度明显下降,以心肌缺血后和再灌注30min时下降较为明显.     

谷氨酰胺与心肌缺血再灌注损伤

谷氨酰胺是人体内最丰富的一种自由氨基酸,血液浓度为500～900mmol/L,占人体游离氨基酸20%以上,在骨骼肌和许多器官如肾脏中存贮,浓度达到血液中谷氨酰胺浓度的30倍以上,占游离氨基酸池的60%以上。谷氨酰胺是参与合成谷胱苷肽的谷氨酸的主要来源。谷胱苷肽系统是体内细胞减少氧化应激的主要机制之一。谷氨酰胺能够通过诱导谷胱苷肽的合成保护心肌细胞免受氧化应激的损伤,从而有利于缺血再灌注损伤后心肌细胞的恢复,并且能够通过诱导热休克蛋白的表达增强抗氧化物质活性的能力,促进缺血再灌注损伤组织的功能复苏。围手术期早期使用谷氨酰胺保护心肌是一种防治心肌缺血再灌注损伤的新方法。     

心肌缺血再灌注损伤的研究进展

<正>心肌组织缺血时,尽早恢复血供是最重要的治疗手段,然而当缺血的心肌组织再次恢复血流灌注时,心肌的组织结构、能量代谢、电生理及心功能反而会产生更加严重,甚至不可逆的损伤,这种损伤被称为缺血再灌注损伤(ischemia reperfusion injury,IRI)。IRI的主要机制包括氧化应激反应、钙超载、炎症损伤及线粒体膜通透性转换孔(mitochondrial permeablity transition pore,mP TP)开放等~([1])。这些机制在缺     

活性氧与心肌缺血再灌注损伤

<正> 氧气为需氧生物提供了生存的必要条件,但人类也开始认识到氧对生物体毒性作刚的一而。本文仅就活性氧物质的基本概念、生化性质及其与心外科心肌缺血再灌注损伤父系等做一简述。一、活性氧物质的基本概念及生化特点: 活性氧指分子氧接受电子不完全还原而形成的各种氧自由基及过氧化物。自由基指任何带有奇数电子而独立存在的原子、分子     

心肌缺血再灌注损伤的机制

临床研究发现冠脉疾病的病人在冠脉痉孪或冠脉成形术后往往出现自发性再灌注损伤，而且公认以溶栓，冠脉成形术和冠脉搭桥术为代表的冠脉再灌注可以解救闭塞冠脉支配的大部分心肌，一直是临床治疗急性心肌缺血的根本措施．大量实验室研究表明：较长时间的心肌缺血得以血液再灌注井不使缺血损伤减轻，而是加重了损伤，甚到使可逆性损伤转为不可逆性损伤，这就是所谓的心肌缺血再灌注损伤(MIRI)。     

心肌缺血再灌注损伤的研究进展

心肌缺血再灌注(I/R)损伤会导致心律失常、心肌顿抑、微血管阻塞等,严重影响病人心功能及预后。因此,探索如何减少心肌I/R损伤具有重要的临床意义。综述缺血再灌注损伤发病机制及干预方法,以期为临床缺血性心脏病血运重建后引起I/R损伤的防治提供参考。     

MicroRNAs与心肌缺血再灌注损伤

MicroRNAs（miRNAs）是一类高度保守的非编码小分子RNA,经转录后调节细胞的增殖、迁移、分化、凋亡和免疫应答等。miRNAs与心血管疾病发生发展密切相关。心肌缺血后多种miRNA。异常表达,它们在介导心肌缺血再灌注损伤和调控心肌缺血保护环节中起重要作用,可作为诊断缺血再灌注损伤的标志物和潜在治疗靶点。     

氧自由基与心肌缺血再灌注损伤

大量的研究证明氧自由基(oxygen free radical,OFR)与心肌缺血再灌注损伤这一心血管疾病的发生、发展有密切关系。对OFR及其与心肌缺血再灌注损伤之间的关系进行综述。     

卡托普利减轻心肌缺血再灌注损伤

作者分别在离体和在体条件下就卡托普利对缺血再灌注心脏心律失常及血液动力学的影响进行了研究，结果显示卡托普利对离体和在体心脏缺血再灌注性心律失常均有抑制作用，且可加速昏厥心肌的恢复。