利用固定化酶柱进行体外血液净化的实验研究

采用正酱置方法计算了固定化Ｌ－天冬酰胺酶柱，对连续化血浆净化过程的数学模型。计算结果与实验测定值相吻合，表明适用于描述体外循环净化过程。     

醋酸纤维素薄膜固定COD的催化特性及影响因素研究

０　前言利用醋酸纤维素薄膜固定酶具有许多优点：方法简便易行，制造的酶膜稳定，比活力高［１］。因此，许多学者在这方面都作了大量的研究，酶的活性和稳定性都有很大提高。其中Ｓｔｅｒｎｂｅｒｇ等［２］采用高碘酸氧化的方法在膜上引入活性基团，将葡萄糖氧化酶共价地固定在膜上，但方法较繁琐，不易操作；１９９５年，王顺光等［１］在此基础上稍加改进工艺也制备出了性能优异的葡萄糖氧化酶膜，但是，迄今为止尚未见到用醋酸纤维素薄膜固定胆固醇氧化酶的报道。本文作者在这二者的基础上进一步改进工艺，制备出了醋酸纤维素为基础的…     

用聚乙烯醇为载体固定化枯草杆菌生产α-淀粉酶的研究（Ⅱ）——发酵条件对聚乙烯醇固定化细胞产酶能力的影响及聚乙烯醇固定化细胞的连续发酵

研究了一些主要发酵条件对聚乙烯醇(PVA)固定化细胞产酶性能的影响．并在连续进料搅拌槽式反应器中进行了连续发酵试验。结果表明：枯草杆菌经PVA固定化后对pH的适应性有所提高，在连续进料搅拌槽式反应器中连续发酵360h．酶活力保持在170u／ml左右。     

发热伴血小板减少综合征患者D-二聚体、心肌酶谱及肝酶谱的检测

目的 探讨本地区发热伴血小板减少综合征患者发热期、多器官功能障碍期、恢复期三期D-二聚体、心肌酶谱和肝酶谱的动态变化规律,研究其临床意义。方法 我院2011年3月~ 2015年12月收住院的124例发热伴血小板减少综合征患者回顾性分析。患者入院及后每2 d进行D-二聚体检测,早晨采空腹静脉血送检心肌酶谱、肝酶谱检测,至恢复期患者出院,记录各数据,进行统计学分析。结果 发热期D-二聚体水平（2231.4±158.6）μg/L、多器官障碍期D-二聚体水平（1520.5±106.7）μg/L,与恢复期D-二聚体水平（321.9±35.3）μg/L相比,发热期、多器官障碍期D-二聚体水平明显升高,差异有统计学差异（P<0.01）;多器官功能障碍期AST（183.1±67.1）U/L与发热期AST（372.9±90.0）U/L、恢复期AST（95.8±34.3）U/L对比明显升高,差异有统计学意义（P<0.05）;普通型AST水平（259.8±65.8）U/L低于危重型AST水平（428.6±140）,差异有统计学差异（P<0.05）;普通型LDH（305.4±132.0）U/L、CK（284.4±118.0）U/L、CK-MB（96.5±18.8）U/L与危重型LDH（3902.3±187.4）U/L、CK（799.8±437.3）U/L、CK-MB（206.1±51.4）U/L对比差异有统计学意义（P<0.01）,普通型ALT（96.66±42.16）、AST（156.1±37.1）与危重型ALT（372.9±61.6）、AST（651.8±34.3）比较差异显著,存在统计学差异（P<0.01）。结论 发热伴血小板减少综合征患者D-二聚体、心肌酶谱早期便出现异常改变,且病情越重,D-二聚体、心肌酶谱升高越明显,但肝酶谱的改变有一定的滞后性,早期检测D-二聚体、CK水平可以识别发热伴血小板减少综合征危重病例、D-二聚体、CK水平下降预示病情好转,可以指导预后。     

D-半乳糖调控SD大鼠大脑皮质巯醇抗氧化物(酶)致衰老的作用研究

构建D-半乳糖(D-gal)致衰老模型,探讨D-gal诱导衰老的分子机制,为临床治疗阿尔茨海默病(AD)提供理论依据。腹腔注射D-gal构建SD大鼠衰老模型,采用Morris水迷宫实验(MWM)进行行为学检测,采用化学比色法检测大脑皮质一氧化氮合酶(NOS)、一氧化氮(NO)、铜锌-过氧化物岐化酶(Cu,Zn-SOD)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽还原酶(GR)、谷胱甘肽s-转移酶(GSH-ST)、谷胱甘肽过氧化酶(GSH-PX)、谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA),总抗氧化能力(T-AOC)和过氧化氢(H2O2)的含量。结果显示:衰老模型组与正常对照组比较:逃避潜伏期明显延长(P<0.05),在第III象限逗留的时间明显减少(P<0.05),跨越平台次数明显减少(P<0.05);皮质MDA、H2O2和NO的含量增加(P<0.05),SOD、GSH、GSH-ST、GSH-Px和T-AOC的含量降低(P<0.05),而NOS的含量没有明显变化(P>0.05)。结果提示,D-gal能通过调控内源性巯基抗氧化物(酶)和NO的表达,减退学习记忆能力,而诱导SD大鼠神经系统的衰老。     

D- 二聚体、纤维蛋白原及活化部分凝血活酶时间在冠心病患者心血管事件中的诊断价值研究

目的? 探究冠心病患者 D- 二聚体（D-Dimer,D-D）、纤维蛋白原（Fibrinogen,Fib）、活化部分凝血活酶时间（Activated Partial Thromboplastin Time,APTT）变化与发生心血管事件的相关性。方法? 选取周口市中医院 2021 年 9 月至 2023 年 12 月接收的 92 例冠状动脉粥样硬化性心脏病（Coronary Heart Disease,CHD）均行经皮冠脉介入术（Percutaneous Coronary Intervention,PCI）治疗术后患者作为观察组,40 例健康体检者为对照组,对比两组受试者 D-D、Fib、APTT 水平,术后 3 个月内以电话形式随访记录患者发生心血管事件的情况,并分析 D-D、Fib、APTT 与 CHD 患者 PCI 术后心血管事件的相关性。结果? 观察组的 APTT 水平低于对照组,D-D、Fib 水平高于对照组,发生心血管事件患者的 D-D、Fib 水平高于未发生心血管事件患者,而 APTT 水平较未发生心血管事件的患者低（P<0.05）。经过二元 Logistic 回归分析,发现 D-D、Fib、APTT 的水平升高是导致 CHD 患者 PCI 术后心血管事件发生的高风险因素（P<0.05）。结论? D-D、Fib、APTT 指标参与患者病变过程,可有效预测 CHD 患者 PCI 术后是否会发生心血管事件,值得临床推广。     

老年肺心病患者血浆D-二聚体等纤溶指标的测定及临床意义

目的:分析老年慢性肺心病患者不同病理状态的血浆D-二聚体(D-D)等纤溶指标变化及临床意义。方法:对42例急性加重期、8例恶化期及16例缓解期患者和20例健康对照组血浆D-D及其它纤溶指标分别进行测定。结果:血浆D-D水平在急性加重期患者明显升高(与对照组比较,P<0.01);恶化期患者升高更为明显,其它纤溶指标在肺心病各组均下降;D-D及纤溶指标均与PCO2呈正相关;吸烟可降低纤溶活性。结论:血浆纤溶活性降低与老年肺心病患者的高凝状态及并发肺梗塞和DIC有关。肺心病患者应戒烟并提示临床考虑应用促纤溶药物治疗。     

羧甲基壳聚糖微球固定化AS1.398中性蛋白酶的制备和性质研究

以戊二醛为交联剂,制备羧甲基壳聚糖微球固定AS1．398中性蛋白酶。研究了羧甲基壳聚糖固定化酶微球的制备条件、固定化酶的适宜温度、pH、米氏常数和储存稳定性等性质。结果表明。在pH=7．0的中性环境下；交联剂与羧甲基壳聚糖摩尔比为0．4：1；干酶与羧甲基壳聚糖的质量比为0．125：1；在室温下交联至少4h。便可得到活力相对较高的固定化酶。自由酶和固定化酶的最适宜温度分别为40℃和65℃。在70℃下，固定化酶的热稳定性比自由酶要好。自由酶和固定化酶的最佳pH分别为7．0和6．0，固定化酶具有较宽的酸碱稳定性，在pH6～8都保持较高活力。固定化酶在5℃和35℃下储存1周后酶相对活力分别为97．6％和85．1％，而没有被固定的自由酶在5℃下储存1周酶相对活力仅为61．3％。自由酶和固定化酶的Km分别为5．66g／L和1．04g／L。     

诱导型一氧化氮合酶影响吲哚醌类化合物抗肿瘤活性的实验研究

观察诱导型一氧化氮合酶(iducible nitric oxide synthase,iNOS)对新型吲哚醌类生物还原化合物630和630Ac的抗肿瘤活性和乏氧选择性的影响。以人纤维肉瘤细胞HT1080及其iNOS基因转染的细胞克隆为研究对象,噻唑蓝法检测不同iNOS活性的细胞克隆对化合物630和630Ac化学敏感性的差异;比较乏氧和有氧条件下半数抑制浓度(IC50)的差异;流式细胞术观察化合物对细胞周期的影响。630Ac和630在实验中均显示出较强的抗肿瘤活性,且630Ac的细胞毒性强于630;而iNOS转染的细胞对630和630Ac敏感性较亲本细胞HT1080有所下降,IC50分别高1~7倍左右。氧对630的细胞毒性无显著影响,而630Ac则具有较好的乏氧选择性细胞毒作用,尤其是对iNOS转基因细胞,有氧和乏氧条件下IC50相差4~7倍。提示iNOS活性的增强会引起肿瘤细胞对化合物630和630Ac敏感性的降低。     

大鼠D-氨基半乳糖中毒后肝细胞超微结构及G-6-P酶活性的变化

在大鼠腹腔内注射D-氨基半乳糖造成肝损伤后,电镜下观察肝细胞超微结构和葡萄糖-6-磷酸酶活性变化。结果表明,损伤组肝细胞中常染色质减少,核仁颗粒部消失,粗面内质网扩张,核糖体脱落,数量减少,滑面内质网扩张,其切面呈小泡状,次级溶酶体增多,糖原颗粒消失,葡萄糖-6-磷酸酶活性下降。本文为进一步探讨D-氨基半乳糖造成肝损伤的机理,提供了一些新的资料。     

大鼠鼻咽上皮组织酶学和发育酶学研究Ⅱ.已糖激酶,需NADP±与NAD±的异柠檬酸脱氢酶和5′-核苷酸酶

本文研究了5个年龄组100只健康大鼠三型鼻咽上皮的HK、T-IDH、D-IDH和5′-Nase的组化特征,根据半定量资料绘制了各种酶的发育线图,并用电镜细胞化学方法观察了5′-Nase的亚细胞分布规律。结果表明在生后发育过程中,HK和T-IDH活性存在两个加强时期,而D-IDH活性呈波浪式变化。从新生到15天龄,纤柱上皮的5′-Nase活性迅速加强达到成年大鼠水平,5′-Nase可分布于细胞膜和内质网膜外表面、核膜内侧面。讨论了这些酶活性变化的生物学作用和5′-Nase的各种亚细胞分布的代谢意义。     

大鼠肝大部切除与D-氨基半乳糖肝中毒后肝细胞增殖及甲胎蛋白和白蛋白免疫细胞化学研究

大鼠肝大部切除后和D-氨基半乳糖肝中毒后第1～7天,逐日取肝组织及血液样本,观察两种类型损伤后肝再生中肝细胞的增殖分化,以及血清甲胎蛋白(AFP)与白蛋白(ALB)浓度变化及其免疫细胞化学变化。结果表明:1.肝大部切除后肝细胞分裂高峰(1.5％)出现于术后第2天,半乳糖肝中毒组的高峰在第3天,且峰值仅为前者的一半(0.8％)。2.半乳糖肝中毒后,门管区和小叶周边带出现许多小型细胞,而大部切除后的肝内无此种小型细胞。3.AFP与ALB免疫细胞化学观察表明,两种损伤后肝再生中均有AFP阳性肝细胞,于第2～3天增多,第4天后渐少。部分小型细胞呈AFP阳性。电镜下见粗面内质网、滑面内质网、高尔基复合体及核周隙等处显示AFP阳性。ALB阳性细胞第1～3天较少,于第4天起渐增多。4.血清AFP含量于第1天开始升高,第4天达高峰,此后下降,ALB含量变化恰与AFP相反,第3天下降至最低点,此后回升。     

肺癌患者血浆D-二聚体、NSE及CYFRA21-1联合检测的临床价值

探讨血浆D-二聚体和神经元特异性烯醇化酶、细胞角蛋白19片段21-1联合检测在肺癌诊断中的临床价值。方法 选取2016年2月~2017年12月我院收治的130例肺癌患者作为肺癌组,同时选取40例肺部良性肿瘤患者（良性病变组）及40例同期体检健康者（健康对照组）为对照,采用化学发光法检测血清NSE、CYFRA21-1,血浆D-二聚体检测采用免疫比浊法分别检测各组血浆D-D、血清NSE和CYFRA21-1水平,并对结果进行分析。结果 肺癌组血浆D-D、血清NSE和CYFRA21-1水平均高于肺部良性病变组及健康对照组（P＜0.05）;三项指标与肺癌的恶性程度相关,肺癌分期Ⅲ~Ⅳ期患者血浆D-D、血清NSE和CYFRA21-1水平高于Ⅰ~Ⅱ期患者（P＜0.05）;血浆D-D、血清NSE和CYFRA21-1在肺癌中的敏感度分别为68.31%、54.44%及52.22%,其三项联合检测的敏感度为88.89%。结论 肺癌患者血浆D-D、血清NSE和CYFRA21-1水平升高,对肺癌的临床分期具有一定鉴别诊断作用,可以作为肺癌诊断的敏感指标。三项联合检测对肺癌的早期辅助诊断具有重要的临床价值。     

D-半乳糖联合染铝大鼠海马结构Aβ及相关蛋白的表达

目的:探讨D-半乳糖联合染铝的阿尔茨海默病大鼠海马结构Aβ及其相关蛋白的表达及其分布。方法:30只雄性SD大鼠随机分为2组,即:对照组和模型组(n=15)。模型组每日腹腔注射D-半乳糖60 mg/kg和灌胃三氯化铝500 mg/kg,连用60 d;对照组给予等量生理盐水进行腹腔注射和灌胃。铃木镀银法观察神经原纤维缠结的形成,确定模型是否成功。免疫组织化学法观察海马结构三个亚区的Aβ、β分泌酶(BACE)和早老素-1(PS-1)蛋白的表达。结果:铃木镀银染色可见模型组大鼠颞叶、顶叶皮层及海马神经元内的神经原纤维缠结。模型组大鼠海马CA1、CA3区及齿状回Aβ表达较强,与对照组相比差异显著(P<0.01);模型组海马CA3区神经元的BACE和PS-1蛋白表达量较对照组明显增加(P<0.01)。结论:D-半乳糖联合染铝的阿尔茨海默病大鼠海马结构Aβ、BACE及PS-1表达均明显上调,可能是导致AD大鼠功能障碍的主要原因。     

IgG3酶联免疫分析方法的建立及初步应用研究

目的:建立IgG3酶联免疫分析(ELISA)方法,探讨IgG3在炎症性疾病患者血清中的水平变化.方法:用兔抗人IgG3的多克隆抗体包被成固相酶标板,以识别结合待测标本中的IgG3,再用此多克隆抗体标记生物素(Bio-Ab),用亲和素标记辣根过氧化物酶(HRP-A),向固相酶标板中加入标准品或待测品,反应、洗涤后,加入Bio-Ab,反应、洗涤后,加入HRP-A,反应、洗涤后,酶标板上形成Ab-Ag-Ab-Bio-A-HRP复合物,加酶底物显色,用酶标仪在相应波长下测定光密度(OD值),根据标准曲线,计算出待测标本中的IgG3含量.结果:该法测定范围为(1.875～60)ng/ml,最低检出量1.5ng/ml,批内和批间误差分析＜8%和10%.用该法测得正常青年人血清IgG3含量为(12.91±4.25)ng/ml(n=64),风湿病患者为(11.23±4.64)ng/ml(n=64),肺部感染患者为(9.32±2.00)ng/ml(n=24),后两组血清IgG3水平均显著低于正常青年人(P＜0.05).结论:我们建立的IgG3 ELISA方法稳定、简便,特异性和灵敏度高,适于检测人血清IgG3水平的变化.     

改构型酸性成纤维细胞生长因子干预慢性衰老模型大鼠脑及肝组织和血液ATP酶的活力

背景：有研究表明改构型酸性成纤维细胞生长因子是多功能生长因子,但其抗衰老作用至今尚未有报道。 目的：观察改构型酸性成纤维细胞生长因子对D-半乳糖致衰老大鼠脑组织、肝组织及红细胞膜Na⁺-K⁺-ATP酶活力和Ca²⁺-Mg²⁺-ATP酶活力的影响。 方法：将Wistar大鼠采用皮下注射D-半乳糖建立衰老模型,建模成功后随机分为模型组、生理盐水对照组和改构型酸性成纤维细胞生长因子组,另设正常对照组。改构型酸性成纤维细胞生长因子组按12 µg/kg剂量肌肉注射改构型酸性成纤维细胞生长因子,生理盐水对照组肌肉注射等量的生理盐水,模型组不干预。 结果与结论：与正常对照组相比,模型组大鼠脑组织、肝组织及红细胞膜Na⁺-K⁺-ATP酶活力和Ca²⁺-Mg²⁺-ATP酶活力均明显著降低(P < 0.01)。改构型酸性成纤维细胞生长因子组脑组织、肝组织及红细胞膜Na⁺-K⁺-ATP酶活力和Ca²⁺-Mg²⁺-ATP酶活力均明显高于模型组和生理盐水对照组(P < 0.05)。结果提示,改构型酸性成纤维细胞生长因子能提高衰老大鼠脑组织、肝组织及红细胞膜Na⁺-K⁺-ATP酶活力和Ca²⁺-Mg²⁺-ATP酶活力,具有延缓衰老作用。