局灶性缺血再灌注大鼠脑线粒体损伤的实验研究

采用大鼠大脑中动脉缺血（MCAO）再灌注模型，观察缺血再灌注不同时相（分为五组）脑线粒体损伤的变化规律。结果为脑缺血再灌注后线粒体基质游离钙含量（MCa）明显高于假手术组Na^＋、K^＋-ATP酶、Ca^2＋、Mg^＋-ATP酶活性明显下降，且随时间的延长下降明显；再灌注0．5h的MDA和SOD均元明显变化，再灌注1h后线粒体MDA含量明显升高，SOD活性明显下降。说明脑缺血再灌注线粒体损伤与线粒体钙超载及线粒体内膜氧化磷酸化有关。     

黄体酮对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑组织SOD及MDA水平的影响

目的探讨黄体酮对局灶性脑缺血大鼠脑组织匀浆超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量的影响。方法采用线栓法制作左侧大脑局灶性脑缺血模型(MCAO模型),将SD大鼠随机分为假手术组、手术组、溶剂治疗组、黄体酮组,术后3、6、12、24 h断头取脑,制备脑匀浆,用生化方法检测MDA含量及SOD活性。结果与假手术组比较,缺血2 h再灌注3 h后,手术组和溶剂治疗组脑组织SOD活性开始下降,再灌注24 h达到最低,与手术组比较,再灌注6、12、24 h时黄体酮组脑组织的SOD活性显著升高(P<0.05)。与假手术组比较,缺血2 h再灌注3 h后,手术组和溶剂治疗组脑组织MDA含量开始升高,再灌注12 h时达到高峰,24 h时仍高,与手术组比较,黄体酮组脑组织的MDA含量在6、12、24 h均显著降低(P<0.05,P<0.05,P<0.01)。结论黄体酮可通过一定的抗氧化作用,对脑缺血再灌注大鼠脑组织产生保护作用。     

四逆汤对局部脑缺血大鼠的保护作用及其神经酰胺机制

目的：研究四逆汤对大鼠局部脑缺血后脑组织神经酰胺含量的影响。方法：采用大鼠大脑中动脉局部阻塞模型（MCAO），观察四逆汤对脑缺血大鼠丙二醛（MDA）和神经酰胺含量、以及超氧化物歧化酶（SOD）活性的影响。结果：与正常组比较，缺血模型组MDA含量和脑组织神经酰胺含量均显著升高；与缺血模型组比较，四逆汤组能提高SOD的活性，减少MDA的产生（P〈0．05），降低神经酰胺含量（P〈0．001）。结论：四逆汤能对局部脑缺血大鼠产生保护作用，其可能机制是减轻氧化损伤，减少神经酰胺的生成量。     

心脑肾康对自由基清除作用的实验研究

目的研究心脑肾康对自由基的清除作用。方法连续给大鼠灌胃心脑肾康7d后，以线栓法建立大脑中动脉梗死（MCAO）缺血再灌注模型，缺血1．5h再灌注24h后断头取脑，检测大脑皮层丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、一氧化氮（NO）、活性氧（ROS）、谷胱甘肽（GSH）含量。结果与模型组相比，商、中、低3个剂量心脑肾康用药后均能显著降低缺血后脑组织匀浆中MDA、NO、ROS含量，增加SOD、GSH活性（P〈0．05）并呈剂量依赖性。其中，高剂量效果最好，优于阳性对照药（P〈0．05）。结论心脑肾康具有良好的自由基清除作用。     

大鼠实验性脑出血后高血糖对血肿周围脑组织乳酸与氧自由基的影响

目的观察大鼠脑出血（ICH）后高血糖对血肿周围脑组织乳酸（LA）和氧自由基的影响,探讨ICH后高血糖加重脑损伤的可能机制。方法采用自体血注入法建立ICH模型,将SD大鼠随机分成假手术组（SO）、单纯脑出血组（PCH）、ICH后高血糖组,ICH后高血糖组又分为2g／kg（2-IG）和4g／kg（4-IG）注射葡萄糖组。观察各组大鼠术前和术后1、6h血糖变化;测定各组大鼠术后1、3、7、10、14d血肿周围脑组织LA、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）的含量变化。结果与SO组比较,2-IG组和4-IG组术后1、6h血糖明显升高（P〈0．05）;与PCH组比较,2-IG组和4-IG组大鼠血肿周围脑组织IA和MDA含量明显升高（P〈0．05）,SOD含量明显降低（P〈0．05）。结论脑出血后高血糖导致能量代谢障碍,LA蓄积甚至中毒,可能通过氧自由基连锁反应加重脑损伤。     

肢体反复短暂缺血预处理在大鼠脑缺血再灌注损伤中的保护作用

目的 探讨肢体反复短暂缺血预处理(LIP)在大鼠脑缺血再灌注损伤中可能的脑保护机制.方法 随机将42只成年健康雄性Wistar大鼠分为7组,假手术组、脑缺血组、脑缺血再灌注组、预处理0 h组、预处理6 h组、预处理12 h组、预处理24 h组.采用线栓法制备大脑中动脉缺血及缺血再灌注模型,重复夹闭大鼠双侧股动脉4 次(每次10 min,间隔10 min) 作为LIP,采用生化方法测定各组脑组织中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、三磷酸腺苷(ATP)酶的含量;HE染色观察大鼠脑组织的病理改变.结果 肢体反复短暂缺血预处理组可明显减少MDA的含量,升高SOD活性,增加ATP含量,尤以预处理0 h和6 h组为著,同其余预处理组及对照组相比差异有统计学意义(P<0.05).结论 肢体缺血预处理可提高脑缺血大鼠的SOD活性、降低MDA含量、促进ATP的生成,推知反复短暂的肢体缺血预处理对大鼠脑缺血再灌注损伤有保护作用,它可通过提高脑组织抗氧化酶活性、提高线粒体能量,抑制氧自由基产生及脂质过氧化反应来发挥作用.     

PrxⅥ、SOD、CAT在肝脏缺血再灌注损伤大鼠模型脑内的表达

目的 观察过氧化物酶Ⅵ(PrxⅥ)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)在大鼠肝脏缺血再灌注损伤模型脑内的表达变化.方法 雄性Wistar大鼠随机分为对照组和肝脏缺血再灌注损伤组,通过无损伤血管夹夹闭通往大鼠肝左叶、肝中叶的血管和胆管蒂,30 min后松开血管夹,制造大鼠70％肝脏缺血再灌注损伤模型.6h后取血、肝脏和脑组织.全自动生化分析仪测血清ALT含量,HE法观察大鼠肝脏和脑组织形态学改变,脑组织MDA含量由南京建成试剂盒测定,采用RT-PCR的方法观察大鼠脑内PrxⅥ、SOD、CAT mRNA水平的表达变化,SOD活性采用黄嘌呤氧化酶法测定,PrxⅥ的蛋白水平采用Western印迹测定.结果 与对照组相比,血清中ALT水平和肝脏HE结果均显示肝脏缺血再灌注损伤组大鼠的肝细胞明显受损,证明大鼠肝脏缺血再灌注损伤模型成立.虽然脑组织的HE结果显示脑的形态学结构未发生明显改变,但脑组织内MDA的含量却增加(P＜0.01).同时,PrxⅥmRNA和蛋白水平均升高(P＜0.01),SOD和CAT mRNA水平(P＜0.01)和抗氧化活性(P＜0.01)也都明显增强.结论 在大鼠肝脏发生缺血再灌注损伤后脑内的氧化应激水平也随之增强,而PrxⅥ、SOD、CAT在脑内均发挥了抗氧化应激作用,对脑组织具有一定的保护功能.     

纳洛酮对肠缺血再灌流大鼠氧自由基的影响

目的探讨纳洛酮是否具有对抗肠缺血再灌流大鼠体内氧自由基的作用。方法选择成年雄性SD大鼠32只，随机分为假手术、肠缺血再灌流（I／R）及分别用生理盐水和纳洛酮干预后的肠I／R四组，分别测各组血浆及肺组织的丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活力。结果用纳洛酮干预后的肠I／R组大鼠MDA含量及SOD活力显著不同干I／R及I／R＋NS二组，而与假手术组相当。结论纳洛酮具有对抗肠I／R时氧自由基的作用，从而保护了肺组织免遭自由基的破坏。     

智脑胶囊对血管性痴呆模型大鼠行为学及脑组织SOD活性、MDA含量的影响

目的观察智脑胶囊对血管性痴呆模型大鼠学习记忆及脑组织超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）含量的影响。方法反复夹闭双侧颈总动脉（CCA）结合腹腔注射硝普钠制备拟血管性痴呆模型大鼠,检测模型大鼠学习记忆能力及脑组织SOD活性、MDA含量。结果与模型组相比,智脑胶囊组能明显改善模型大鼠学习记忆能力;智脑胶囊3剂量组均能提高脑组织中SOD活性,其中以中、高剂量组为著;智脑胶囊3剂量组、尼莫通组能够显著降低脑组织中MDA含量。结论智脑胶囊可改善实验性血管性痴呆模型大鼠学习记忆障碍,提高脑组织SOD活性,降低MDA含量。     

脑温对大脑灶性脑缺血再灌注损伤的影响

目的 研究预高温和缺血时轻度高温、亚低温对脑缺血再灌注损伤组织脂质过氧化和缺血脑组织病变的影响。方法 75只Wistar大鼠按不同脑温和缺血条件被随机分为生化组（5组，n=7)和病理组（5组，n=8),采用Nagasawa脑缺血模型，观察脑缺血再灌注损伤组织超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH－Px)、还原型谷胱甘肽（GSH）、丙二醛（MDA）及缺血脑组织病理变化。结果 轻度高温加重常温脑缺血组织SOD、GSH的降低和MDA的增高，使GSH－Px呈降低趋势，而亚低温相反；预高温对常温脑缺血各项指标影响不显。轻度高温组脑缺血病理损伤最重，亚低温和预高温有改善脑缺血损伤的作用。结论 高温加重而亚低温抑制脑血损伤，分别与其增加或减少内源性抗氧化酶消耗、降低或增强缺血脑组织清除氧自由基的能力有关；预高温对缺血脑组织有保护作用，未能肯定此作用与内源性抗氧化酶消耗减少和缺血脑组织清除氧自由基的能力增强有关。     

Effects of blockade of cerebral lymphatic drainage on cerebral ischemia after middle cerebral artery occlusion in rats

This experiment aimed to investigate the effects of blockade of cerebral lymphatic drainage on cerebral ischemic damage. Seventy six Wistar rats were divided randomly into middle cerebral artery occlusion (MCAO) group and MCAO plus cerebral lymphatic blockade (MCAO+CLB) group for the experiment. The contents of water and electrolytes, the activity of superoxide dismutase (SOD) and the content of malondialdehyde (MDA) in the ischemic brain tissue were detected at 24, 48 and 72 hours after the operation. The morphologic examination was also performed. In MCAO group, contents of water, sodium and calcium in the ischemic brain tissue increased significantly at any time after the operation. The SOD activity decreased while the MDA content increased markedly. The morphologic findings showed severe damage of ischemic brain tissue and neurons. In MCAO+CLB group, the above parameters were altered more obviously. The present observation suggests that blockade of cerebral lymphatic drainage may deteriorate ischemic brain damage after MCAO.     

Effects of blockade of cerebral lymphatic drainage on regional cerebral blood flow and brain edema after subarachnoid hemorrhage

The study was designed to observe the influence of blockade of cerebral lymphatic drainage on the regional cerebral blood flow (rCBF) and brain edema after experimental subarachnoid hemorrhage (SAH). Wistar rats were divided into non-SAH, SAH, and SAH plus cervical lymphatic blockade (SAH + CLB) groups. Autologous arterial hemolysate was injected into rat's cisterna magna to induce SAH. The rCBF was recorded continuously by a laser Doppler flowmeter. Intracranial pressure (ICP) was also monitored. After 24 hours and 72 hours of SAH, the rats were sacrificed and the brain was harvested for water content detection. It was found that there was no obvious change of rCBF and brain water content during the experiment in non-SAH group. An immediate and persistent drop in rCBF was found in SAH group. The drop in rCBF was more obvious in SAH + CLB group. CLB also worsened the SAH-induced increase in ICP. The brain water content 24 hours and 72 hours after induction of SAH in SAH group increased significantly. CLB led to a further increase of brain water content. In conclusion, blockade of cerebral lymphatic drainage pathway deteriorates the secondary cerebral ischemia and brain edema after SAH.     

脑温对大鼠灶性脑缺血再灌注损伤的影响

目的　研究预高温和缺血时轻度高温、亚低温对脑缺血再灌注损伤组织脂质过氧化和缺血脑组织病变的影响。方法　 75只Wistar大鼠按不同脑温和缺血条件被随机分为生化组 (5组 ,n=7) 和病理组 (5组 ,n=8) ,采用Nagasawa脑缺血模型 ,观察脑缺血再灌注损伤组织超氧化物歧化酶 (SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH Px)、还原型谷胱甘肽 (GSH)、丙二醛 (MDA)及缺血脑组织病理变化。结果　轻度高温加重常温脑缺血组织SOD、GSH的降低和MDA的增高 ,使GSH Px呈降低趋势 ,而亚低温相反 ;预高温对常温脑缺血各项指标影响不显著。轻度高温组脑缺血病理损伤最重 ,亚低温和预高温有改善脑缺血损伤的作用。结论　高温加重而亚低温抑制脑缺血损伤 ,分别与其增加或减少内源性抗氧化酶消耗、降低或增强缺血脑组织清除氧自由基的能力有关 ;预高温对缺血脑组织有保护作用 ,未能肯定此作用与内源性抗氧化酶消耗减少和缺血脑组织清除氧自由基的能力增强有关     

神经生长液对缺血性脑损伤的保护作用

目的观察神经生长液(NGD)对大鼠实验性脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法采用大脑中动脉线栓法建立大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,观察NGD对大鼠神经功能的恢复、血清总超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量、梗死体积、病理组织损伤及细胞超微结构改变的影响。结果NGD能改善大鼠的神经功能评分,增加血清SOD活性,降低血清MDA含量,减少梗死体积(P<0.05或0.01)。NGD能改善大鼠局灶性脑缺血再灌注3d后的病理组织学损害及细胞超微结构改变。结论神经生长液对实验性脑缺血再灌注损伤具有保护作用。     

原花青素对脑缺血再灌注损伤大鼠血脑屏障通透性和自由基含量的影响

目的 探讨原花青素(procyanidin,PC)对缺血再灌注损伤大鼠脑组织含水量、血脑屏障通透性和自由基含量的影响.方法 将大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组、PC低剂量治疗组和PC高剂量治疗组,线栓法建立局灶性脑缺血再灌注模型.观察缺血90 min再灌注24 h大鼠脑含水量和伊文斯蓝(EB)含量变化及超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量变化,并进行2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)染色.结果 与假手术组比较,缺血再灌注组脑含水量和EB含量明显升高;与缺血再灌注组比较,PC高、低剂量治疗组脑含水量和EB含量明显降低(P<0.05),高、低剂量组之间差异亦具有统计学意义(P<0.05).与缺血再灌注组比较,PC治疗组显著降低MDA含量,增加SOD活性,高、低剂量组之间差异亦有统计学意义(P<0.05).PC高、低剂量治疗组脑梗死体积较缺血再灌注组减小,高、低剂量组之间差异具有统计学意义(P<0.05).结论 PC对缺血再灌注脑损伤具有保护作用,可能与减轻再灌注损伤后血脑屏障通透性和氧化性损伤有关.     

抗凋亡基因bcl-2对大鼠脑梗死早期缺血部位基质金属蛋白酶-9的影响

目的研究质粒pLXSN介导的bcl-2cDNA对在大鼠脑梗死后缺血部位基质金属蛋白酶-9表达的影响，并探讨其可能存在的调节机制。方法60只成年雄性Wistar大鼠按随机原则分为2组：生理盐水组（n=30）和bcl-2组（n=30），每组再按照缺血再灌注后24、48、72h分为3个亚组。各组大鼠均成功制备MCAO模型，2h后再灌注；再灌注3h，经颈内动脉分别缓慢注射生理盐水及质粒pLXSN介导的bcl-2cDNA120μl。干湿重法测脑水含量；免疫组化法测定基质金属蛋白酶-9表达。结果与对照组相比，bel-2组脑组织水肿明显减轻，基质金属蛋白酶-9阳性细胞数在相应时间点均有明显减少（P〈0．05），两组基质金属蛋白酶-9蛋白表达均于再灌注48h左右达到高峰。结论在脑梗死数小时内，经颈内动脉注射质粒pLXSN介导的bcl-2 cDNA可以减轻对脑梗死后缺血区域的基质金属蛋白酶-9表达调节作用，降低基质金属蛋白酶-9的水平，并减轻脑水肿。     

山楂叶总黄酮对脑缺血-再灌注损伤的保护作用

目的 探讨山楂叶总黄酮(FMCL)对脑缺血-再灌注(CIR)损伤的保护作用及其可能机制.方法 采用线栓法制备大鼠局灶性脑缺血-再灌注损伤模型,对其进行行为指标评分,TTC染色测定梗死范围,HE染色检测脑组织病理变化,透射电镜检测神经元超微结构变化,并检测大鼠脑组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)及一氧化氮(NO)含量的变化.结果 FMCL可明显改善大鼠神经行为,缩小梗死范围,减轻脑组织病理改变,并可提高脑组织中SOD活性,降低脑组织中MDA及NO含量(P＜0.05或P＜0.01).结论 FMCL可减轻CIR神经细胞损伤,其机制可能与抗自由基损伤、减轻NO神经毒性有关.     

兔脑缺血脑组织Ca^2＋和血小板胞浆游离Ca^2＋的动态变化

目的探讨Ｃａ２＋在缺血性脑损伤中所起的作用。方法Ｆｕｒａ－２荧光比值法测兔大脑中动脉阻断后不同时间血小板胞浆游离Ｃａ２＋浓度（〔Ｃａ２＋〕ｉ）；邻甲酚酞络合指示剂自动分析法测脑组织Ｃａ２＋含量。结果兔脑缺血４小时即有血小板〔Ｃａ２＋〕ｉ明显增加（Ｐ＜０．００１），２４及４８小时血小板〔Ｃａ２＋〕ｉ持续升高；缺血４８小时，缺血区脑组织水、Ｃａ２＋含量明显升高（Ｐ＜０．００１）。结论脑缺血的发生、发展与Ｃａ２＋大量病理性流入关系密切，Ｃａ２＋超载是导致神经细胞死亡的重要因素。     

Attenuation of focal cerebral ischemic injury in transgenic mice overexpressing CuZn superoxide dismutase.

Oxygen-derived free radicals have been implicated in the pathogenesis of vasogenic edema and infarction caused by ischemia and reperfusion injury. In earlier studies, exogenously supplied liposome-entrapped CuZn superoxide dismutase (CuZn-SOD) ameliorated ischemic brain edema and infarction in rats following focal cerebral ischemia. To ascertain directly the role of SOD in the protection against superoxide radical-induced injury, we measured infarct size and water content 24 hr following focal cerebral ischemia in nontransgenic mice and in transgenic mice bearing the human SOD1 gene. These transgenic mice have 3.1-fold higher cellular CuZn-SOD activity in the brain than do their nontransgenic littermates. We also measured antioxidant levels (reduced glutathione and reduced ascorbate) of contralateral cortex, infarct cortex, surrounding cortex, and striatum. Infarct size and brain edema were significantly decreased in transgenic mice compared with nontransgenic mice. Reduced glutathione and reduced ascorbate levels decreased in the ischemic hemisphere, but levels in surrounding cortex and striatum were significantly higher in transgenic mice than in nontransgenic mice. These results indicate that increased endogenous SOD activity in brain reduces the level of ischemic damage and support the concept that superoxide radicals play an important role in the pathogenesis of infarction and edema following focal cerebral ischemia.     

脑淋巴引流阻断对大鼠蛛网膜下腔出血后神经干细胞增殖、分化和可塑性的影响

目的 探讨脑淋巴引流途径对大鼠蛛网膜下腔出血(subarachnoid hemorrhage,SAH)后神经干细胞增殖、分化和可塑性的影响.方法 采用枕大池内新鲜自体动脉血二次注入法建立成年大鼠SAH模型,用颈淋巴管结扎和颈淋巴结摘除法制作大鼠脑淋巴引流阻断(cerebral lymphatic blockade,CLB)模型.30只大鼠随机分为正常对照组、SAH组和SAH+CLB组(n=10),各组再分为3 d和14 d组(n=5).应用5-溴脱氧脲嘧啶(5-bromodeoxytridine,BrdU)标记增殖的神经干细胞,免疫荧光双重染色检测大鼠皮质、海马和室下区BrdU~+/胶质纤维酸性蛋白(gtial fibrillary acidic protein,GFAP)~+、神经源性分化蛋白(neurogenic differemiation,NeuroD)~+、多聚唾液酸-神经细胞黏附因子(polysialic acid-neural cell adhesion molecule,PSA-NCAM)~+细胞,应用激光共聚焦显微镜观察并计数.结果 与正常对照组比较,SAH组BrdU~+细胞、NeuroD~+/BrdU~+细胞、GFAP~+/BrdU~+细胞以及PSA-NCAM~+/BrdU~+细胞均有不同程度增加(P<0.05或0.01);与SAH组相比,SAH+CLB组BrdU~+细胞、GFAP~+/BrdU~+细胞有所增加(P<0.05或0.01),而NeuroD~+/BrdU~+细胞、PSA-NCAM~+/BrdU~+细胞显著减少(P<0.05或0.01).结论 脑淋巴引流阻断可促进神经干细胞增殖,但不利于神经干细胞向神经元方向分化和可塑性.