苯丁酸钠对体外人肺腺癌细胞A549的影响

目的观察苯丁酸钠（PB）对体外人肺腺癌细胞A549的影响。方法采用MTT法观察不同浓度PB对人肺腺癌细胞A549增殖的抑制作用,流式细胞术分析不同浓度PB对生长期人肺腺癌细胞A549的细胞周期及凋亡情况的影响。结果 PB作用后人肺腺癌细胞A549的生长缓慢,细胞阻滞于G0/G1期（P〈0.05）,凋亡增加（P〈0.05）,其抑制作用呈时间和浓度依赖性。结论 PB能抑制人肺腺癌细胞A549的生长,促进其凋亡。     

番荔枝内酯单体squamocin诱导人肺腺癌A549细胞凋亡的实验研究

目的 观察番荔枝内酯单体squamocin对人肺腺癌A549细胞的体外增殖抑制及诱导凋亡的作用,并探讨squamocin诱导肿瘤细胞凋亡的机制。方法 MTT法检测不同浓度的squamocin对人肺腺癌A549细胞体外增殖的影响;流式细胞仪检测squamocin干预在不同时间点对人肺腺癌A549细胞凋亡率的影响;Western blotting检测squamocin干预前后细胞凋亡相关蛋白caspase-3、Bax和Bcl-2的表达情况。结果 MTT法显示,squamocin对人肺腺癌A549细胞的体外抑制作用随着squamocin浓度的增加和作用时间的延长而增强,24、48、72h半数抑制浓度（IC50）分别为16.54、9.28、6.17μg／ml;流式细胞仪检测显示,在24、48、72h实验组人肺腺癌A549细胞凋亡率之间及其与阴性对照组比较,差异均有统计学意义（P＜0.01）,其中实验组72h的细胞凋亡率最高,为（51.87±1.79）％Western blotting显示,squamocin干预后细胞凋亡相关蛋白caspase-3和Bax表达上调,Bcl-2表达明显下调。结论 squamocin可诱导人肺腺癌A549细胞凋亡,这可能与squamocin上调细胞凋亡相关蛋白caspase-3、Bax表达以及降低抑制细胞凋亡基因Bcl-2表达有关。     

顺维甲酸体外诱导肺腺癌细胞A549凋亡的研究

目的:探讨9-顺维甲酸(9-cis-RA)对人肺腺癌细胞A549的诱导凋亡作用。方法:体外培养肺腺癌细胞株A549,用MTT法观察9-cis-RA对细胞的生长抑制作用,采用电镜、流式细胞仪等方法检测9-cis-RA对细胞的诱导凋亡作用。结果:9-cis-RA对A549细胞有生长抑制效应,抑制率随着9-cis-RA浓度、作用时间的增加而增加。9-cis-RA明显诱导A549细胞的凋亡,可观察到凋亡小体和凋亡峰,药物作用48h后,9-cis-RA浓度为5、10μmol/L的细胞凋亡率分别为7.2%和13.3%,细胞凋亡率呈现量效关系。结论:9-cis-RA可能通过诱导肺癌细胞凋亡抑制肺癌细胞增殖,发挥其抗癌作用。     

地塞米松预处理人肺腺癌 A549 细胞对顺铂抗肿瘤活性的影响

目的：探讨地塞米松（dexamethasone,DEX）预处理人肺腺癌A549细胞后,对化疗药物顺铂（cispla—tin,DDP）抗肿瘤活性的影响。方法：以不同浓度（500、1000nmol／L）DEX预先作用于人肺腺癌A549细胞12h后,再用不同浓度（1．25、2．5、5u/ml）DDP处理。流式细胞术测定细胞凋亡,细胞计数观察细胞生长密度、形态。结果：DEX对A549细胞增殖有抑制作用。DDP能够明显抑制A549细胞增殖,促进其凋亡。DEX预处理后DDP干预A549细胞的增殖抑制作用较单一用DDP增强,且随着DEX浓度的增加,其对化疗药物DDP凋亡抑制作用的影响增强。结论：DEX预处理对顺铂诱导的人肺腺癌A549细胞的凋亡具有明显的促进作用,能增强DDP的抗肿瘤活性。     

肺积宁方诱导人肺腺癌A549细胞凋亡及下调VEGF表达的实验研究

目的探讨肺积宁方对人肺腺癌A549细胞增殖、凋亡及血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法体外培养A549细胞,采用MTT法检测细胞生长抑制率、PI/Annexin V-FITC双染法检测细胞凋亡率、荧光染色法观察凋亡细胞形态变化、ELISA法检测细胞上清液中VEGF含量变化。结果随着药物浓度的增大,对细胞生长的抑制率逐渐增加;本方可以诱导A549细胞凋亡,当浓度达到1100mg/ml时,凋亡率明显高于对照组(44.8%:3.4%,P<0.01);各剂量组均可使VEGF表达下调,且中、高剂量组作用更明显(P<0.01)。结论肺积宁方能抑制人肺腺癌A549细胞增殖,其抑制作用可能是通过诱导细胞凋亡和下调VEGF表达来实现的。     

CyclinL2在化疗药物诱导肺癌细胞凋亡中的作用

目的：探讨cyclinL2基因在化疗药物顺铂（DDP）、长春瑞滨（NVB）和多西紫杉醇（DOC）诱导的肺癌细胞凋亡中的作用．方法：用肺腺癌A549细胞株进行培养传代，MTT试验检测DDP、NVB和DOC不同药物浓度对肺癌细胞生长的抑制作用．以及CyclinL2转染后对该细胞生长的抑制作用的影响。，同时利用流式细胞术定量检测细胞凋亡．结果：不同浓度DDP、NVB和DOC对肺癌细胞生长均有明显的抑制作用，并有浓度的依赖性。细胞凋亡率和CyclinL2基因表达率成正相关、结论：CyclinL2基因在化疗药物诱导肺癌细胞凋亡中起重要作用，     

核心蛋白聚糖对人肺腺癌细胞生长及转移的抑制作用研究

 目的 探讨核心蛋白聚糖（Decorin）对人肺腺癌细胞株A549细胞生长及转移的影响。方法 利用MTT法检测不同浓度不同时间Decorin对A549细胞的杀伤活性，流式细胞仪检测分析Decorin对A549细胞周期及凋亡的影响，体外黏附实验、侵袭实验和迁移实验检测Decorin对A549细胞黏附、侵袭及迁移能力的影响。结果 Decorin在体外能够抑制A549肿瘤细胞增生，且这种增生抑制作用呈剂量和时间依赖性。Decorin在体外能够诱导A549肿瘤细胞凋亡，作用与浓度和时间相关。Decorin 30 μg／ml在体外作用于A549细胞可使A549细胞黏附率下降，迁移细胞数和侵袭细胞数均减少。结论 Decorin在体外能够抑制人肺腺癌A549肿瘤细胞生长，诱导其凋亡，并通过对肿瘤转移多个步骤的抑制而发挥抗转移作用。     

多烯紫杉醇和姜黄素联用对人肺腺癌A549细胞增殖和凋亡的影响

目的研究姜黄素和多烯紫杉醇对肺腺癌A549细胞增殖及调亡的影响,并探讨两种药物的合用是否可增强抗癌作用及降低不良反应。方法体外培养肺腺癌细胞系A549细胞,采用 MTT 法计算细胞抑制率;Giemsa 染色法观察细胞形态学变化;流式细胞仪分析细胞的凋亡率。结果经MTT法检测显示,姜黄素能明显抑制A549细胞的生长,多烯紫杉醇50 μg/ml与姜黄素5、10、20 μmol/L联用对A549细胞的抑制作用明显大于两药单用时的抑制作用（P<0.01）;Giemsa染色显示多烯紫杉醇与姜黄素联用后诱导细胞凋亡的作用增强,可见典型的凋亡小体;流式细胞仪结果表明姜黄素能增加多烯紫杉醇的细胞凋亡率,其作用呈剂量依赖性。结论姜黄素与多烯紫杉醇可协同抑制人肺腺癌A549细胞的增殖;二者联合化疗有增效减毒作用。     

TSA对肺腺癌细胞株A549细胞凋亡的影响

目的：探讨组蛋白脱乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素A（trichostatin A，TSA）对A549肺腺癌细胞凋亡的影响。方法：Annexin V和Hoechst染色法检测细胞凋亡；流式细胞仪分析细胞周期；Western blot检测凋亡信号通路中caspas-8、caspase-9活化及多聚ADP核糖聚合酶（PARP）裂解情况。结果：TSA可诱导细胞凋亡，主要使细胞积聚在G2／M期，且呈浓度依赖性。Western blot检测表明TSA诱导了A549肺腺癌细胞caspase-8、caspase-9裂解活化及PARP裂解，且随TSA作用时间延长而逐步升高。结论：TSA诱导A549细胞凋亡中caspase-8、caspase-9介导caspas-3的活化，TSA通过caspase级联反应诱导A549细胞凋亡。     

地塞米松联合顺铂对肺腺癌 A549 细胞增殖和凋亡的影响

目的：探讨地塞米松（dexamethasone,DEX）联合顺铂（cisplatin,DDP）在体外对肺腺癌2,549细胞增殖和凋亡的影响及可能的机制。方法：体外培养人肺腺癌A549细胞。MTF法检测DDP和DEX对A549细胞增殖的影响。流式细胞术分析细胞周期及细胞凋亡。Westernblot检测DEX和DDP对A549细胞内VDR表达水平的影响。结果：地塞米松≥500nmol／L浓度时对A549细胞有一定的增殖抑制作用（P〈0．05）;〈500nmol／L浓度时对A549细胞无明显抑制作用（P〉0．05）;DDP浓度在0．3125-10ug／ml范围内对A549细胞增殖有明显的抑制作用,并呈浓度及时间依赖性（P〈0．05）。流式细胞仪检测到DDP＋DEX组的G．期细胞比例下降,s期比例上升（P〈0．05）,且细胞凋亡数目增加（P〈0．05）。Westernblot观察到DDP＋DEX组VDR表达水平明显升高（P〈0．05）。结论：DEX可能通过上调A549细胞内VDR表达水平,与顺铂协同促进细胞凋亡、诱导细胞周期阻滞,进而提高顺铂化疗敏感性。     

重组人血管内皮抑素对 HER -2 过表达乳腺癌细胞 MDA - MB -453 的诱导凋亡研究

目的：检测重组人血管内皮抑素（恩度）作用于HER-2过表达乳腺癌细胞后细胞的生长情况及凋亡率.方法：免疫细胞化学法检测乳腺癌细胞MDA-MB-453的HER-2表达水平,以25、50、100、200、300mg/ml的恩度作用于HER-2过表达乳腺癌细胞MDA-MB-453,光学显微镜下观察细胞生长情况,流式细胞仪检测乳腺癌细胞的凋亡率及细胞周期.比较各组药物对HER-2过表达乳腺癌细胞的诱导凋亡作用.结果：MDA-MB-453细胞HER-2表达率95%可信区间为63.32%-69.60%;25、50、100、200、300mg/ml的恩度作用于MDA-MB-453细胞24h后的凋亡率分别为17.98%、20.71%、43.06%、72.05%、84.93%.48h后的凋亡率为43.57%、47.69%、42.69%、49.61%、51.23%.恩度可将乳腺癌细胞阻滞于G2期.结论：恩度可诱导HER-2过表达乳腺癌细胞凋亡,呈剂量依赖关系,该药可将细胞阻滞于G2期.     

吉非替尼对A549细胞增殖及细胞周期、凋亡的作用

目的：观察吉非替尼对人非小细胞肺癌A549的生长增殖、细胞周期及细胞凋亡的影响。方法：用5—40μmol／L浓度范围内的吉非替尼和A549细胞共培养24、48、72h,采用四甲基偶氮唑蓝（MTr）法检测吉非替尼对细胞增殖的影响;用流式细胞仪检测其对细胞凋亡及细胞周期分布的影响;利用抗Capspase-3的ELISA（酶联免疫吸附）法检测是否发生细胞凋亡。结果：在5—40μmol／L浓度范围内,吉非替尼对A549细胞的增殖有明显的抑制作用,并呈时间和剂量依赖性,以40μmol／L作用72h时的抑制率最高。流式细胞仪检测显示10μmol／L-401μmol／L的吉非替尼作用可使细胞发生G0／G,期阻滞,但即使作用48h也未发现凋亡细胞。ELISA法显示48h内,吉非替尼组与正常细胞组的Capspase-3浓度无统计学差异,但作用72h时出现凋亡。结论：吉非替尼在5—40μmol／L浓度下作用时间小于48h时,其对A549细胞的增殖抑制可能是通过阻滞A549细胞于G0／G1期而非引起细胞凋亡实现的,但作用时间达到72h时,其可以诱导A549发生细胞凋亡。     

回苏宝液对A549细胞抑制作用及其机制的初步探讨

目的：观察红藤脂酸钠中药制剂回苏宝体外对人肺腺癌细胞系A549的生长抑制作用,并对其作用机制作初步探讨。方法：MTT法测定不同时间点不同浓度紫杉醇、回苏宝对A549细胞生长的抑制百分率,计算IC50（半数抑制浓度）值,用DIP染色法观察A549细胞核的改变。结果：对照组（紫杉醇）作用30min后对A549细胞抑制率可达93％,24h达到100％;实验组血浆药浓度（80．3mg/ml）或2倍稀释回苏宝（40．15mg／ml）在8h内对A549细胞抑制率迅速升高,12h后缓慢上升（抑制率超过90％）,48h到达平台期,72h达到98％左右。回苏宝在24h、48h的IC50值均为22．1mg／ml。正常A549细胞8h、24hDAPI染色其细胞核染色质饱满;2倍稀释回苏宝液作用8h的A549细胞核染色质有边集、减少现象,作用24h后显微镜视野中完整的A549细胞极少,核有固缩、凋亡现象;血浆浓度回苏宝液作用8h、24h后细胞残存很少,细胞核染色质边集、固缩,有凋亡小体形成的现象。结论：回苏宝体外对A549细胞生长有明显的抑制作用,其作用机制可能主要是诱导肿瘤细胞发生凋亡。     

重组人血管内皮抑制素对肺微血管内皮细胞增殖及其周期分布的影响

目的：探讨重组人血管内皮抑制素（恩度）对肺微血管内皮细胞增殖的影响及机制。方法：以人非小细胞肺癌细胞系Ａ５４９和人肺微血管内皮细胞系ＨＰＭＥＣ建立非接触式共培养血管模型,并在此模型上应用ＭＴＴ方法研究肿瘤血管内皮细胞的增殖,以流式细胞仪检测血管内皮细胞的周期分布,以ＲＴ-ＰＣＲ和Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ检测血管内皮细胞的ｃｙｃｌｉｎＤ１转录水平和蛋白表达水平的变化。结果：恩度能明显抑制共培养模型下血管内皮细胞的增殖,并呈剂量依赖性;肿瘤内皮细胞Ｇ０／Ｇ１细胞数增多,Ｓ期细胞显著减少;转录和蛋白检测水平ｃｙｃｌｉｎＤ１呈剂量依赖性下调。结论：恩度能抑制肿瘤血管内皮细胞增殖,且这一作用与抑制ｃｙｃｌｉｎＤ１表达,使肿瘤血管内皮细胞滞留于Ｇ０／Ｇ１期有关。     

重组人内皮抑素对肺鳞癌细胞抑制作用的体外实验

 目的 探讨重组人内皮抑素（恩度）对肺鳞状细胞癌细胞系H-520细胞生长的影响及其机制。 方法 应用四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测恩度不同浓度和作用时间对H-520细胞的生长抑制作用;Hoechst33258染色观察恩度处理后 细胞凋亡形态并通过流式细胞术对凋亡细胞进行定量及检测细胞周期分布。采用划痕修复实验检测内皮抑素处理后H-520细胞的 迁移能力。 结果 恩度可以抑制H-520细胞的生长,且呈时间-剂量依赖性;恩度可以促进H-520细胞的凋亡,随时间延长,凋亡率显著增加,与 对照组相比,差异具有统计学意义（P<0.01）;恩度可以引起H-520细胞周期分布变化,细胞发生G₀/G₁ 期阻滞。划痕实验表明,恩度可以使H-520细胞体外迁移能力显著下降,与对照组相比,24h划痕修复率差异具有显著意义。 结论 恩度对H-520细胞增殖具有明显抑制作用;其主要机制为促进细胞凋亡,调整细胞周期分布和减弱细胞迁移能力。     

大蒜素对结肠癌ＬｏＶｏ细胞增殖的影响

目的：观察大蒜素对结肠癌细胞ＬｏＶｏ生长、细胞凋亡及细胞周期的影响。方法：不同浓度的大蒜素作用于体外培养的ＬｏＶｏ细胞,倒置显微镜下观察ＬｏＶｏ细胞的形态学变化,采用ＭＴＴ法检测大蒜素对ＬｏＶｏ细胞增殖抑制能力,Ａｎ ｎｅｘｉｎＶ ＦＩＴＣ标记流式细胞术检测大蒜素对ＬｏＶｏ细胞的凋亡抑制率,流式细胞术检测大蒜素对ＬｏＶｏ细胞周期影响。结果：大蒜素可抑制人结肠癌ＬｏＶｏ细胞增殖,具有明显量效和时间依赖性,２４、４８和７２ｈ大蒜素抑制ＬｏＶｏ细胞的ＩＣ５０分别为３２.２３、１０.７４和６.５８μｇ／ｍｌ;大蒜素能够诱导ＬｏＶｏ细胞凋亡,作用２４ｈ其诱导凋亡率随着药物浓度的递增具有增高趋势,作用４８ｈ其诱导凋亡作用峰值浓度为８μｇ／ｍｌ,后再继续增加浓度凋亡率反而下降;大蒜素作用ＬｏＶｏ细胞２４ｈ后,大蒜素浓度低于４μｇ／ｍｌ时,ＬｏＶｏ细胞周期被阻滞于Ｇ２／Ｍ;     

重组人血管内皮抑素与紫杉醇联合诱导人食管癌细胞Eca-109凋亡的实验研究

目的 探讨重组人血管内皮抑素（恩度）与紫杉醇联合作用对人食管癌细胞Eca-109增殖和凋亡的影响。方法 MTT法检测恩度与紫杉醇联合用药48h后对Eca-109细胞增殖的抑制作用;倒置显微镜下观察恩度、紫杉醇单药与联合作用于人食管癌Eca-109细胞48h后细胞形态学的改变;Annexin V/PI双染流式细胞术检测恩度、紫杉醇不同用药组作用48h后的细胞凋亡率;RT-PCR法检测凋亡相关基因Bcl-2、Bax、p21、p53 mRNA的表达情况。结果恩度、紫杉醇作用于Eca-109细胞48h后的半数抑制浓度（IC₅₀）分别为276.6627μg/ml和3.8789μg/ml。恩度单药组、紫杉醇单药组、恩度+紫杉醇组、恩度→紫杉醇组、紫杉醇→恩度组作用Eca-109细胞48h后的抑制率分别为（33.62±2.30）%、（49.14±1.45）％、（56.29±0.71）％、（41.88±1.23）％和（51.48±0.98）％;与阴性对照组比较,恩度、紫杉醇各加药组对Eca-109细胞均有明显的抑制作用（P＜0.01）;恩度+紫杉醇组的抑制率高于其他各组（P＜0.05）。光镜下恩度、紫杉醇作用48h后Eca-109细胞具有典型的凋亡形态学改变,恩度单药组、紫杉醇单药组、恩度+紫杉醇组、恩度→紫杉醇组、紫杉醇→恩度组的总凋亡率分别为（8.78±0.19）％、（13.82±0.15）％、（18.88±0.29）％、（11.37±0.24）％和（14.88±0.34）％;恩度、紫杉醇各加药组的总凋亡率均高于阴性对照组（P＜0.05）;恩度+紫杉醇组的总凋亡率明显高于其他各组（P＜0.01）。与阴性对照组比较,恩度单药组、紫杉醇单药组、两药序贯组的Bcl-2 mRNA表达均明显降低;恩度与紫杉醇联合用药组的Bax mRNA表达均降低;各用药组的p21 mRNA表达均降低;恩度与紫杉醇序贯用药组的p53表达降低。结论 恩度与紫杉醇联合可协同诱导人食管癌细胞的凋亡,其作用机制可能与下调凋亡抑制基因的表达有关。     

丙戊酸对耐药细胞株A549／DDP增殖和凋亡作用的实验研究

目的：探讨丙戊酸（valproicacid,VPA）抑制肺癌耐药细胞株A549／DDP增殖和凋亡的作用。方法：0—4mmol／L丙戊酸作用于A549／DDP细胞48h,观察细胞数量和形态的变化,MTT法分析细胞生长抑制,流式细胞仪测定细胞周期动力学变化,细胞免疫组化测定Caspase-3。结果：VPA干预后细胞数量明显减少,形态不规则,细胞核固缩,胞质减少;与对照组比较,VPA可造成A549／DDP细胞生长抑制,且随着VPA浓度的增加,抑制率增加;G1期比例明显升高,S期明显降低;与对照组比较,各实验组细胞胞质中Caspase-3表达明显增加,Caspase-3表达与VPA的浓度成正相关。结论：VPA可明显抑制A549／DDP的生长,诱导凋亡和G1期阻滞作用,在肺癌耐药方面具有重要理论价值和实践意义。     

榄香烯联合紫杉醇诱导肺癌细胞凋亡和调控细胞周期的体外研究

目的：观察榄香烯和紫杉醇对肺癌A549细胞的诱导凋亡和周期调控作用。方法：榄香烯和紫杉醇单独及联合作用于肺癌A549细胞,MTT法检测细胞增殖抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡及细胞周期,免疫印迹法检测蛋白的表达。结果：榄香烯（20μg/ml、80μg/ml）和紫杉醇（2μg/ml）两种药物联合作用A549细胞时,产生协同的增殖抑制作用。榄香烯只诱导A549细胞少量凋亡,紫杉醇使细胞阻滞在G2/M期。榄香烯和紫杉醇联合应用时,细胞凋亡率提高,并检测到PARP的裂解。榄香烯没明显改变survivin的表达,紫杉醇能上调survivin表达。低浓度榄香烯和紫杉醇联合后survivin仍高表达,而高浓度榄香烯和紫杉醇联合后,sur-vivin表达明显下调。结论：榄香烯和紫杉醇对肺癌A549细胞有诱导凋亡和调控细胞周期的作用。     

诃子水提取物对肺癌A549细胞抑制作用的实验研究

目的：探讨诃子水提物对人肺癌细胞A549体外增值的影响和作用机制。方法：利用MTT法检测不同剂量组的诃子水提物对肺癌A549细胞增殖的影响,通过倒置显微镜观察肺癌A549细胞的形态学变化,流式细胞仪测定各浓度组诃子水提物对肺癌细胞A549作用后的周期变化。结果：诃子水提物对人肺癌细胞A549的增殖具有抑制作用,且有浓度和时间依赖性;在显微镜下观察到典型的凋亡细胞形态特征;流式方法测定的结果显示,诃子水提物阻滞肺癌A549细胞于G0／G1期。结论：诃子水提物对人肺癌细胞A549增殖具有抑制作用,其机制是诃子水提物使细胞周期阻滞于G0／G1期并诱导细胞凋亡。