胸腺近期输出功能测定在评价细胞免疫功能重建中的应用

T细胞受体重排删除环(TRECs )是T细胞受体基因重排过程中删除的DNA环,可作为胸腺近期输出功能的指标,本文综述其在造血干细胞移植、HIV-1感染和AIDS患者抗逆转录病毒治疗、肿瘤化疗以及细胞因子补充治疗后免疫重建评价中的应用.     

T细胞受体删除环定量检测的意义及应用现状

T细胞受体重排删除环(TRECs)是T细胞受体基因重排过程中删除的DNA环,可作为最近从胸腺输出初始细胞的标记,其定量检测应用于胸腺近期输出功能的评价.近年来由于免疫重建研究的广泛开展,定量检测TRECs得到重视.本文拟从TRECs的产生以及定量检测在正常人和各类免疫缺陷性疾病中的应用及其意义给予综述.     

T细胞受体删除环定量检测的意义及应用现状

T细胞受体重排删除环(TRECs)是T细胞受体基因重排过程中删除的DNA环，可作为最近从胸腺输出初始细胞的标记，其定量检测应用于胸腺近期输出功能的评价。近年来由于免疫重建研究的广泛开展，定量检测TRECs得到重视。本文拟从TRECs的产生以及定量检测在正常人和各类免疫缺陷性疾病中的应用及其意义给予综述。     

检测T细胞受体重排切除环的意义及应用研究

T细胞受体重排切除环是T细胞受体基因重排过程中切除的DNA环 ,可作为新近从胸腺迁出者的标记 ,应用于胸腺功能的评价。近年来由于免疫重建研究的缘故 ,检测T细胞受体切除环受到了重视。本文拟从T细胞受体切除环产生及应用的意义、方法上作一综述。     

080 检测T细胞受体重排切除环的意义及应用研究

T细胞受体重排切除环是T细胞受体基因重排过程中切除的DNA环，可作为新近从胸腺迁出者的标记，应用于胸腺功能的评价。近年来由于免疫重建研究的缘故，检测T细胞受体切除环受到了重视。本文拟从T细胞受体切除环产生及应用的意义、方法上作一综述。     

检测T细胞受体重排切除环的意义及应用研究

T细胞受体重排切除环是T细胞受体基因重排过程中切除的DNA环，可作为新近从胸腺迁出者的标记，应用于胸腺功能的评价。近年来由于免疫重建研究的缘故，检测T细胞受体切除环受到了重视。本文拟从T细胞受体切除环产生及应用的意义、方法上作一综述。     

T细胞受体Dβ-JβsjTRECs连接区多样性

目的了解T细胞受体Dβ-Jβ重排形成的T细胞受体删除DNA环(sjTRECs)连接区序列特点。方法利用巢式PCR分别扩增10例正常人外周血单个核细胞和3例正常胸腺细胞DNA中不同的Dβ片段和Jβ重排时形成的TRECs的情况,PCR产物进一步进行克隆和序列分析以确定结合区的序列。结果获得Dβ1与5个Jβ1基因片段、Dβ2与4个Jβ2基因片段分别形成的sjTRECs连接区序列,部分所形成sjTRECs的Jβ与Dβ之间存在核苷酸的随机插入(N区)等多样性。结论Dβ-Jβ sjTRECs的连接并非简单的头对头拼接方式,部分连接时存在N区而形成结合区多样性。     

胸腺切除对小鼠胸腺功能及外周T淋巴细胞的影响

目的通过小鼠模型研究胸腺切除对免疫学功能的影响。方法将新生期及幼龄期BALB/c小鼠分别随机分为2组,每组20只:行开胸手术并切除胸腺为手术组;除不切除胸腺外其余操作同前为假手术组。然后将2组再分别随机分为2个亚组,每组10只:一组于术后1个月,另一组于术后2个月,分别通过实时定量PCR检测T细胞受体重排删除环(TREC)、流式细胞术检测外周血T淋巴细胞及其亚群评估胸腺功能及外周血T淋巴细胞的变化。结果手术组外周血T淋巴细胞总数及其亚群、TREC明显低于假手术组,差异有统计学意义(P0.01)。新生期与幼龄期比较以及术后1月与术后2月检测指标比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论幼年个体在开胸手术中切除胸腺会造成术后T细胞免疫功能降低,其影响可能与手术时年龄无关,且长期存在。     

TCR Dβ-Jβ sjTRECs检测方法的建立和应用

目的：建立检测TCR Dβ-Jβ sjTRECs的方法，并了解不同T细胞受体Dβ-Jβ之间T细胞受体删除DNA环(sjTRECs)在胸腺细胞和外周血T细胞中的形成情况。方法：利用巢式PCR分别扩增10例正常人外周血单个核细胞和3例正常胸腺细胞DNA中不同的Dβ片段和Jβ重排时形成的sjTRECs的情况，PCR产物进一步进行克隆和序列分析以确定结合区的位置。结果：可检测到Dβ1与5个Jβ1基因片段、Dβ2与4个Jβ2基因片段分别形成的sjTRECs，其中以Dβ1-Jβ1S1、Dβ1-Jβ1S2和Dβ2-Jβ2S2sjTRECs最常见，PCR产物经克隆和序列分析证实其形成Dβ-jβsjTRECs的情况。结论：成功地建立了检测Dβ-Jβ-sjTRECs的方法，为分析各TCRβ亚家族的sjTRECs含量和确定TCRβ naive细胞提供了新方法。     

实时荧光定量PCR分析脐血T细胞亚群中TRECs水平

近期研究发现成人胸腺仍存在活化T细胞合成的功能，胸腺近期功能需要通过测定胸腺近期输出的幼稚(Naive)T细胞的数量来衡量。而能够作为Naive T细胞的标志的是T细胞受体删除DNA环(T-cell receptor excision DNA circles，TRECs)。我们的前期研究也提供了正常人外周血T细胞和胸腺细胞中TRECs含量的情况，本研究进一步分析脐血中不同组分T细胞的TRECs含量特点。     

CML急变的Ig和TCR基因双重排

免疫球蛋自(Ig)和T细胞受体(TCR)基因重排可分别作为B细胞系和T细胞系的遗传学标记。约25%ALL,甚至AML,尤其是末端转脱氧核苷酸酶(TdT)阳性AML可有Ig和TCR基因双重排。CML急淋变多数源于有Ig基因重排的B细胞克隆,部分起源于有TCR基因重排的T细胞克隆。本文首次报告一例有IgH和TCR(β、δ)基因双重排,慢性期长达7年多的急淋变Ph~+CML。     

定量检测T细胞受体重排删除DNA环含量评价急性非淋巴细胞白血病患者胸腺近期输出功能

目的 检测急性非淋巴细胞白血病(ANLL)患者 T细胞受体重排删除DNA环(signal joint T-cell receptor excision DNA circles sjTRECs,TRECs)的含量,从而探讨患者的初始型naive T细胞水平和胸腺近期输出功能特点.方法利用实时定量PCR(TaqMan)方法,检测77例ANLL患者外周血单个核细胞(PBMC)TRECs的水平,并根据外周血中CD3阳性率计算CD3细胞中TRECs水平.14例ANLL缓解期患者和14例正常人外周血作为对照.结果 ANLL患者外周血中TRECs含量为(0.43±0.92)拷贝/1 000 PBMCs, (2.02±3.25)拷贝/1 000 CD3+细胞,明显低于正常人TRECs水平[(4.10±3.65)拷贝/1 000 PBMCs和(6.84±4.71)拷贝/1 000 CD3+细胞,P=0.0000和P=0.0001]和缓解期患者[(2.19±2.49)拷贝/1 000 PBMCs和(6.30±7.13)拷贝/1 000 CD3+细胞,P=0.0000和P=0.0005].各亚型ANLL患者的TREC水平差异无统计学意义(P＞0.05).结论 绝大多数ANLL型患者胸腺近期输出naive T细胞功能明显降低,缓解期患者的胸腺近期输出功能有一定程度恢复.     

先天性心脏病保留一叶胸腺较全切胸腺明显减轻术后T细胞免疫功能受损

目的通过小鼠模型研究儿童先天性心脏病(congenital heart disease,CHD)畸形矫正术中保留一叶胸腺的免疫学意义。方法将新生期Balb/c小鼠随机分为3组,每组10只:行开胸手术并切除全部胸腺为胸腺全切组(traditional group);行开胸手术并只切除一叶胸腺为保留一叶组(preservation group);除不切除胸腺外其余操作同前为假手术组(sham operation group)。于术后2个月分别通过实时荧光定量PCR检测T细胞受体重排删除环(T cell receptor rearrangement excision circles,TREC)、流式细胞术检测外周血T淋巴细胞及其亚群评估胸腺功能及外周T淋巴细胞的变化。结果保留一叶组TREC、外周血T淋巴细胞及其亚群明显高于胸腺全切组(P0.01),但低于假手术组(P0.01)。胸腺解剖学及组织学观察提示保留的一叶胸腺未出现代偿性增生。结论CHD保留一叶胸腺较全切胸腺明显减轻术后T细胞免疫功能受损,且术后免疫功能受损程度与保留胸腺体积呈负相关,提示临床CHD早期矫治术中应尽可能多地保留胸腺,至少保留一叶。     

辅助分子在淋巴细胞活化中的作用

T 细胞抗原受体的多样性是由于发生过程中T 细胞受体基因的重排引起的,是免疫系统中T 细胞成份特异性的基本决定因素,但是,T 细胞活化极少是因为抗原简单作用于T 细胞受体完成的。有证据认为,CD8与I 类抗原或CD4与Ⅱ类抗原相互作用能诱导不同T 细胞亚群的T 细胞活化。近来证明T 细胞能通过CD2分子活化,提示LFA-3可作为CD2的细胞配体而被鉴定。     

淋巴瘤基因重排检测技术及解读中国专家共识(2023版)

淋巴瘤是我国常见的恶性肿瘤之一, 诊断难度较大。目前淋巴瘤的诊断主要基于细胞形态学(cell morphology)、细胞免疫学(cellular immunology)、细胞遗传学(cytogenetics)和分子生物学(molecular biology)4大类检查。其中, 分子检测是诊断淋巴瘤尤其是疑难病例的重要手段。基于肿瘤组织的所有细胞均来源于同一个癌变细胞这一理论基础, 我们可以利用细胞克隆性分析来辅助进行淋巴细胞恶性肿瘤的诊断。由于99%B细胞淋巴瘤和94%T细胞淋巴瘤分别伴有免疫球蛋白基因和T细胞受体基因的克隆性重排, 因此免疫球蛋白基因或T细胞受体基因克隆性重排的分子检测可作为克隆性分析的方法之一。淋巴瘤基因重排检测技术及解读中国专家共识(2023版)编写组结合临床实践经验, 主要基于临床常用的聚合酶链反应技术对淋巴瘤基因重排相关工作原理、方法及手段进行了相关阐述, 以进一步指导与规范我国淋巴瘤基因重排检测工作的进行。     

黏膜相关恒定的T淋巴细胞(MAIT):另一种进化保守的T细胞

免疫系统对机体的保护依赖于能识别多种病原物的特异细胞.这种识别是通过表达于B和T淋巴细胞上高度多样化的抗原受体完成的,而此受体的多样性是由V(D)和J片段的随机重排及在这些重排基因片段的连接处的核酸剪切、插入修饰所实现.这些机制保证了产生大量多样性受体的组成,而这些多样性受体是监测持续不断的攻击免疫系统的多样性抗原所必需.在比较传统B细胞和T细胞抗原受体的巨大多样性后确定了几种具有有限受体组成变化的淋巴细胞亚型.     

TCR Vβ2、Vβ5和Vβ17-Dβ1 sjTRECs在正常人胸腺、脐血和外周血中的检测情况

目的建立检测TCR Vβ2、Vβ5和Vβ17-Dβ1 sjTRECs的方法,分析其在胸腺细胞、脐血和正常人外周血T细胞中的存在情况,从而了解近期胸腺输出相应的TCR Vβ亚家族naive T细胞的情况。方法利用半巢式PCR分别扩增3例正常胸腺细胞、10例脐血和10例正常人外周血单个核细胞DNA中的Vβ2、Vβ5和Vβ17与Dβ1基因片段重排时产生的sjTRECs。结果在正常胸腺细胞、脐血和正常人外周血单个核细胞中均可检测到Vβ2、Vβ5和Vβ17与Dβ1片段形成的sjTRECs,其中胸腺细胞和脐血单个核细胞DNA中3种删除环的检出率均为100％,正常人外周血3种删除环的检出率分别为50％、70％和40％。结论成功地建立检测3种Vβ-Dβ1 sjTRECs的方法,并提供了Vβ2、Vβ5和Vβ17亚家族sjTRECs在胸腺、脐血和外周血中的检测情况。     

功能性T细胞内的T细胞受体mRNA在胸腺内分化期含量增高

探讨不同功能的T细胞亚群在免疫调节中的作用,弄清编码T细胞受体的基因的组合及表达,有着十分重要的意义.作者已克隆出人T细胞受体特异性cDNA(YT_(35)),并证实其mRNA与Ig mRNA的产生极为相似,经过重排从不连续的基因序列组合成一条mRNA.其编码的蛋白质与哺乳类的IgL链很相象.作者用Northern凝胶分析法测定了白血病T淋巴细胞系、人胸腺细胞、外周血T细胞、PHA致敏的T细胞、骨髓细     

T细胞性淋巴瘤诊断中TCR基因重排检测的应用

目的：探讨T细胞受体( T cell receptors, TCR)基因重排检测对T细胞性淋巴瘤诊断的价值。方法收集T细胞性淋巴瘤30例和淋巴反应性增生组织30例,提取DNA,应用BIOMED-2引物系统中的56条引物进行PCR扩增,核酸分子异源双链凝胶电泳分析结果。结果30例T细胞性淋巴瘤标本中TCRβ、TCRγ、TCRδ的检出率分别为83．3%(25/30)、93．3%(28/30)、13．3%(4/30),三者联合检测的检出率为96．7%(29/30),30例淋巴反应性增生组织中均未检测出TCR基因重排。结论利用BIOMED-2引物系统检测TCR 基因重排可作为T细胞性淋巴瘤的辅助诊断工具。     

外周T细胞TCR基因的重排(编辑/修正)与选择

T细胞在胸腺发育过程中,TCR通过VDJC基因重排(rearrangement)和选择(细胞水平选择或克隆选择,cellorclonalselection),而组成了外周多样性的T细胞库。现证实外周的T细胞存在着TCR的第二次重排(编辑/修正,editing/revision)与选择(受体水平或分子水平的选择,receptorormolecularselection),即外周的T细胞能重新开放RAG酶等进行VDJC基因的重新编排,修正原来的TCR或产生全新的TCR,再一次选择成为产生耐受或特异应答的新的T细胞,这种机制在外周T细胞库的扩展、自身免疫病、T细胞的外周耐受、肿瘤和感染、免疫缺陷和移植等免疫应答机制中发挥重要作用。