小檗碱抑制JAK2/STAT3信号通路改善糖尿病大鼠前额叶皮层神经元损伤

目的 探讨小檗碱(BBR)通过介导JAK2/STAT3信号通路对糖尿病大鼠前额叶皮层神经元损伤的作用。方法 将48只8周龄的雄性Wistar大鼠分为对照组(Nor组)、糖尿病组(DM组)、小檗碱治疗组(BBR组)、二甲双胍治疗组(Met组)4组。DM模型通过给予高脂高糖饲料并联合尾静脉注射链脲佐菌素(25mg/kg)诱导造模,之后将小檗碱187.75mg/(kg·d)和二甲双胍184mg/(kg·d)以灌胃方式给药治疗,连续给药6周。取材后通过HE染色观察各组大鼠前额叶皮层区神经元形态的变化;通过免疫组化观察各组大鼠前额叶皮层区小胶质细胞的活化程度;通过Western blot法检测各组大鼠前额叶皮层中p JAK2/JAK2与p STAT3/STAT3的蛋白表达水平;通过免疫荧光检测各组大鼠前额叶皮层区Caspase 3的蛋白表达水平。结果 与Nor组相比,DM组大鼠的前额叶皮层区神经元发生了变性,小胶质细胞过度活化,Iba 1蛋白表达水平明显升高,JAK2/STAT3信号通路显著激活和Caspase 3蛋白荧光强度明显增强;经BBR和Met治疗后,糖尿病大鼠的前额叶皮层区神经元均有不...     

基于AMPK介导的线粒体自噬分析温阳益气方改善大鼠梗死后心衰的药理机制

目的观察温阳、益气方药对梗死后心力衰竭大鼠模型腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)介导的线粒体自噬的影响,完善其药理机制提供数据支撑。方法将100只健康SPF级大鼠随机分为5组,各组20只。除对照组和假手术组以外,均采用冠状动脉结扎法制备梗死后心力衰竭大鼠模型。模型制备成功后,中药干预组采用温阳益气方灌胃,AMPK激动组在温阳益气方灌胃的基础上肌肉注射AMPK激动剂EX229。干预4周,测定左室射血分数(LEVF)与心脏/体重比;采用线粒体呼吸机测定线粒体呼吸控制比(RCR),采用WB实验测定磷酸化AMPK/非磷酸化AMPK(p-AMPK/AMPK)及自噬标志物微管相关蛋白1轻链3(LC3Ⅱ/LC3Ⅰ)、PINK1、Parkin的蛋白表达。结果与对照组比较,模型组和AMPK激动组心脏/体重比明显升高,state3呼吸速率与RCR明显降低;与模型组比较,中药组心脏/体重比降低,state3呼吸速率与RCR升高;差异有统计学意义(P0.05)。与对照组比较,模型组、中药组和AMPK激动组心肌组织p-AMPK/AMPK、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、PINK1及Parkin蛋白表达水平升高;与模型组相比,中药组p-AMPK/AMPK、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、PINK1及Parkin蛋白表达水平降低;组间差异有统计学意义(P0.05)。结论温阳、益气方药能够改善梗死后心衰大鼠的心肌功能,其作用机制可能与抑制AMPK介导的线粒体自噬有关。     

电针“足三里”对脾虚大鼠心肌细胞AMPK-线粒体通路的影响

目的观察电针"足三里"对脾虚大鼠心肌细胞线粒体能量代谢、线粒体自噬的影响。方法 48只SD大鼠,随机分为正常对照组、模型组、足三里组、非经非穴组,每组12只。采用三因素复合法复制脾虚证模型,持续14 d。足三里组针刺大鼠双侧足三里穴,非经非穴组针刺大鼠双侧髂嵴上非经非穴点,电针治疗10 d。高效液相色谱法检测大鼠心肌细胞三磷酸腺苷(ATP)、二磷酸腺苷(ADP)以及磷酸腺苷(AMP)的含量;Western blotting法检测大鼠心肌细胞腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)、磷酸化AMPK(p-AMPK)、微管相关蛋白1轻链3-I(LC3-I)以及LC3-II蛋白的表达;利用透射电镜观察大鼠心肌细胞线粒体及线粒体自噬体的超微结构。结果与正常对照组相比,模型组、足三里组以及非经非穴组大鼠心肌AMP/ATP、LC3-II/LC3-I均明显上调(P﹤0.01);模型组大鼠心肌p-AMPK/AMPK有所上调(P﹤0.05),足三里组大鼠心肌p-AMPK/AMPK显著上调(P﹤0.01)。与模型组相比,足三里组大鼠心肌LC3-II/LC3-I显著上调(P﹤0.01)。模型组大鼠心肌线粒体损伤明显,足三里组线粒体损伤有所改善,见大量的线粒体自噬体。结论电针"足三里"可能通过激活脾虚大鼠心肌细胞AMPK,调节线粒体能量代谢、提高线粒体自噬水平,对脾虚大鼠起到干预作用。     

益气养阴活血法对糖尿病大鼠额叶皮质神经元NT-3表达的影响

目的探讨益气养阴活血法对糖尿病大鼠额叶皮质神经元神经营养因子3(NT-3)表达的影响。方法用链脲佐菌素(STZ)腹腔注射诱发糖尿病大鼠模型,益气养阴活血药灌胃给药进行防治,8周后取脑做NT-3免疫组化染色。结果正常对照组大鼠额叶皮质内NT-3阳性神经元数目多,染色深;糖尿病模型组大鼠额叶皮质内NT-3阳性神经元数目少,染色浅;益气养阴活血法治疗组大鼠数目和染色与正常组大鼠接近。结论益气养阴活血法具有防治糖尿病大鼠额叶皮质神经元退行性变的功效。     

改良中药复方Formula-3治疗BN大鼠食物过敏模型的疗效及肠道的病理变化

目的探讨改良中药复方Formula-3治疗卵清蛋白(ovalbumin,OVA)致敏BN大鼠食物过敏模型的疗效及肠道的病理变化。方法将24只BN大鼠按随机数字表法分为生理盐水对照组、OVA模型组、中药复方Formula-3治疗组和中药复方Formula-3对照组,每组6只。将OVA模型组6只BN大鼠建立OVA模型,均成功建模。前6周,OVA模型组、中药复方Formula-3治疗组BN大鼠均给予OVA混合液灌胃,生理盐水对照组、中药复方Formula-3对照组BN大鼠均给予生理盐水灌胃。第7周开始,中药复方Formula-3治疗组、中药复方Formula-3对照组BN大鼠均给予中药复方灌胃,生理盐水对照组、OVA模型组BN大鼠均给予生理盐水灌胃,同时第7、9、11、13周,OVA模型组、中药复方Formula-3治疗组BN大鼠均给予OVA混合液灌胃。第13周后用100g·L-1 OVA灌胃激发,24h后给予乙醚注射液麻醉,处死,摘除眼球取血。检测各组BN大鼠血清OVA-免疫球蛋白E(IgE)、IL-4的水平,光学显微镜和透射电镜下观察各组BN大鼠肠道组织的病理变化。结果 OVA模型组、中药复方Formula-3治疗组BN大鼠血清OVA-IgE、IL-4水平均明显高于生理盐水对照组、中药复方Formula-3对照组(均P<0.05)。中药复方Formula-3治疗组BN大鼠血清OVA-IgE、IL-4水平均明显低于OVA模型组(均P<0.05)。光学显微镜下观察显示中药复方Formula-3治疗组的肠道炎症程度、肠绒毛破坏明显减轻。透射电镜下观察显示OVA模型组可见肠道上皮细胞消失,微绒毛排列紊乱,细胞器破坏,肥大细胞脱颗粒严重,细胞核固缩、消失。中药复方Formula-3治疗组的肠道上皮细胞排列整齐,微绒毛轻度肿胀,肥大细胞脱颗粒减少,细胞核结构正常。结论改良中药复方Formula-3能够通过保护肠道黏膜屏障和抑制炎症来治疗食物过敏性疾病。     

Genistein对Aβ所致痴呆大鼠工作记忆的影响及机制探讨

目的比较不同浓度染料木黄酮Genistein对痴呆模型大鼠认知功能的影响,并探讨可能的分子机制。方法 50只SD大鼠随机分为对照组、DMSO组、Aβ1-40模型组、2.0 mg/kg和20.0 mg/kg Genistein治疗组。对照组,DMSO组侧脑室注射0.9%生理盐水,其余3组侧脑室注射Aβ1-42制备阿尔茨海默病（AD）痴呆模型大鼠,1周后,不同剂量Genistein治疗组分别用2.0 mg/kg和20.0 mg/kg Genistein灌胃,DMSO组则用0.5%DMSO溶剂灌胃,对照组与Aβ1-40组分别用0.5%生理盐水灌胃,1次/d,连续四周后,通过Y迷宫试验测定各组大鼠工作记忆,利用RT-PCR分析大鼠海马组织中STAT3和Caspase-3 mRNA相对表达量。结果单独给予Aβ1-40的大鼠在Y迷宫试验中自发交替反应率明显降低,海马STAT3的m RNA相对表达量明显降低,但Caspase-3 m RNA相对表达量显著上升;低剂量Genistein组逆转Aβ1-40形成的损伤,给予高剂量Genistein（20 mg/kg）后,检测结果与Aβ1-40组差异无统计学意义。结论低剂量Genistein通过上调STAT3 mRNA同时抑制Caspase-3基因表达拮抗了Aβ1-40诱导的神经毒作用,而高剂量Genistein表现出相反的效应与机制。以上提示,给予低剂量Genistein可能有助于预防或延缓AD患者认知功能的衰退。     

运动干预对阿尔茨海默病模型大鼠记忆能力及神经元AMPK信号分子和自噬的影响

〔目的〕探讨运动干预对阿尔茨海默病模型大鼠记忆能力及神经元AMPK信号分子和自噬的影响。〔方法〕将60只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、运动对照组、AD模型对照组、AD模型训练组。在立体定位仪下向大鼠两侧海马注射Aβ25-35制造AD模型。实验结束后,通过Morris水迷宫检测各组大鼠学习记忆能力,用Nissl法检测海马神经元存活状态;通过免疫荧光染色检测磷酸化AMPK表达;用Western blot法检测P-AMPK、LC3I、LC3II及Beclin-1的表达。〔结果〕与AD模型对照组相比较,AD模型训练组大鼠的逃避潜伏期明显减少,穿越平台区域次数明显增加(P<0.01);AD模型训练组大鼠的CAI区海马神经元形态较AD模型对照组改善明显,神经元数目显著增加(P<0.05);P-AMPK在AD模型训练组大鼠的表达明显增强,且主要在胞浆表达;与AD模型对照组相比,AD模型训练组大鼠的P-AMPK和Beclin-1的蛋白表达都明显增强(P<0.01),LC3II/LC3I比值明显增加(P<0.01)。〔结论〕8周的跑台运动可明显改善AD模型大鼠的记忆能力、减少AD模型大鼠海马CAI区神经元损伤数量。其机制可能是8周运动训练激活AD模型大鼠海马神经元AMPK通路和自噬,进而保护神经元。     

针药联合对阿尔兹海默病模型大鼠小脑皮质谷氨酸受体2及Caspase-3表达的影响

目的 观察针药联合对阿尔兹海默病(AD)模型大鼠小脑皮质谷氨酸受体(GluR2)及天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase-3)表达的影响,探讨小脑在AD发病机制中的作用。方法 30只雄性SD大鼠随机分为5组：对照组(C组)、模型组(M组)、电针组(EA组)、天麻素组(Gas组)、针药联合组(EA+Gas组),每组6只。C组不作任何处理;M组大鼠给予双侧海马内微量注射5μL的Aβ1-42进行造模;EA组予以频率2 Hz、强度1mA的电针刺激,选取穴位“大椎”“百会”“足三里”,每日30 min,连续4周。Gas组予以腹腔注射Gas注射液(10 mg/kg),每天1次,连续4周;EA+Gas组同时予以电针和Gas治疗,连续4周。Morris水迷宫检测大鼠学习记忆行为能力,Nissl染色和免疫组化方法观察各组大鼠小脑皮质细胞形态和数量,Western Blot法检测各组GluR2和Caspase-3蛋白的表达。结果 M组小脑皮质中浦肯野层细胞数量减少(P<0.05),GluR2表达降低(P<0.05),Caspase-3表达增高(P<0.05);各治疗组较M组的细胞形态趋于正常...     

复健片对大脑中动脉闭塞模型大鼠脑组织P-4502C11mRNA表达的影响

目的:探讨复健片对大脑中动脉闭塞(MCAO)模型大鼠脑组织P-4502C11mRNA表达的影响。方法:将72只雄性Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组和药物组,每组24只,采用电凝大脑中动脉手术造模。自术后1周末始,药物组给予复健片水溶液灌胃,其余两组给予等量生理盐水。在每个观察时点(1周、2周、3周末),各组随机抽取8只大鼠,采用激光多普勒血流仪测定梗死侧额叶局部脑血流量(rCBF),用RT-PCR技术测定梗死额叶周围皮质P-4502C11mRNA的表达。结果:造模结束1周后,与假手术组比较,模型组与药物组梗死侧额叶皮质rCBF、P-4502C11mRNA表达量均显著降低(P<0.01);而治疗1周、2周后,药物组与同期模型组比较,梗死侧额叶皮质的rCBF均有所增加(均为P<0.05),同时,P-4502C11mRNA表达量亦显著增强(分别为P<0.05,P<0.01)。结论:复健片可上调MCAO大鼠受损侧脑组织中原本因缺血而下调的P-4502C11mRNA表达,增强星形胶质细胞释放环氧-二十碳三烯酸(EETs)的能力,这可能是本药改善受损脑组织血流灌注的重要机制之一。     

大鼠Sesn2/AMPK信号介导肝脏的自噬在间歇低氧和复氧致糖代谢异常中的作用

目的 探讨大鼠Sesn2/AMPK信号介导肝脏的自噬在间歇低氧和复氧致糖代谢异常中的作用。方法 48只大鼠随机分为对照组(NC)与慢性间歇低氧(CIH)组,每组24只,CIH组置于间歇低氧舱8 h/d,持续8周,随后予常氧饲养4周;NC组始终常氧饲养。两组大鼠分别在基线、间歇低氧8周、复氧4周时检测空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、肝脏Sesn2、AMPK、p-AMPK蛋白及mTOR、LC3 mRNA水平。结果 基线时,两组上述指标差异无统计学意义(P>0.05);间歇低氧8周时,与NC组比较,CIH组FBG、FINS、HOMA-IR、mTOR水平增高,Sesn2、p-AMPK/AMPK、LC3水平降低,差异有统计学意义（P<0.05）;复氧4周后,两组上述指标差异无统计学意义（P> 0.05）。结论慢性间歇低氧可以导致大鼠FBG、FINS增高,可能是通过抑制Sesn2/AMPK介导肝脏的自噬引起胰岛素抵抗。     

健脑益智汤对阿尔茨海默病大鼠学习记忆和氧化应激的影响

目的观察健脑益智汤对AD大鼠学习记忆和氧化应激的影响。方法选出正常老年大鼠48只,随机分为对照组、模型组、安理申组和健脑益智汤大、中、小剂量组。除对照组左侧侧脑室注射5μl生理盐水外,其余各组给予等量聚集态的Aβ25-35建立AD模型,并且各组按规定剂量灌胃3周。采用Morris水迷宫测试各组大鼠学习记忆能力,并检测血清和脑组织MDA含量和SOD活力。结果健脑益智汤大、中剂量组较安理申组能更有效地减少AD大鼠MDA含量(P<0.05)、增加SOD活力;而对AD大鼠学习记忆能力的改善作用二者无明显差别。结论健脑益智汤可以通过影响自由基水平对阿尔茨海默病大鼠有一定的防治作用。     

达格列净对糖尿病肾病大鼠肾脏保护作用机制研究

目的 探讨达格列净对糖尿病肾病（diabetic nephropathy,DN）大鼠的肾脏保护作用及对AMP活化蛋白激酶（AMP-activated protein kinase,AMPK）/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin,mTOR）信号通路表达的影响。方法 SPF级Wistar雄性大鼠40只,随机分为正常组、模型组、低剂量组和高剂量组,每组各10只。成功制备DN模型后,正常组大鼠给予普通饲料+生理盐水灌胃;模型组大鼠给予高糖高脂饲料+生理盐水灌胃;低剂量组大鼠给予高糖高脂饲料+达格列净1mg/（kg·d）灌胃;高剂量组大鼠给予高糖高脂饲料+达格列净10mg/（kg·d）灌胃。各组大鼠连续干预12周。比较各组大鼠的肾功能指标、肾脏病理组织变化、p-AMPK和p-mTOR蛋白表达、Ⅰ型胶原（collagen type Ⅰ,COL Ⅰ）、Ⅳ型胶原（collagen type Ⅳ,COL Ⅳ）、纤维连接蛋白（fibronectin,FN）水平。结果 模型组、低剂量组和高剂量组大鼠的血尿素氮（blood urea nitrogen,BUN）、血肌酐（serum creatinine,SCr）、24h尿蛋白定量、p-mTOR蛋白表达、COL Ⅰ、COL Ⅳ和FN水平均显著高于正常组,p-AMPK蛋白表达显著低于正常组（P<0.05）;低剂量组和高剂量组大鼠的BUN、SCr、24h尿蛋白定量、p-mTOR蛋白表达、COL Ⅰ、COL Ⅳ和FN水平均显著低于模型组,p-AMPK蛋白表达显著高于模型组（P<0.05）;高剂量组大鼠的BUN、SCr、24h尿蛋白定量、p-mTOR蛋白表达、COL Ⅰ、COL Ⅳ和FN水平均显著低于低剂量组,p-AMPK蛋白表达显著高于低剂量组（P<0.05）。结论 达格列净对DN大鼠具有良好的肾脏保护作用,其机制可能与调节AMPK/mTOR信号通路表达有关。     

调气活血补肾汤对慢性肾衰竭大鼠肾功能的影响

目的:探讨调气活血补肾汤对慢性肾功能衰竭(CRF)大鼠肾功能、肾组织一氧化氮(NO)及脂质过氧化的影响.方法:Wistar大鼠64只随机分为模型组、调气活血补肾汤大剂量治疗组、小剂量治疗组和正常对照组,前3组大鼠麻醉后,用摘除5/6肾脏皮质的方法制备CRF模型;模型制备后,小剂量模型组给予调气活血补肾汤生药13.9 g/kg灌胃,大剂量组给予27.8 g/kg灌胃,模型组给予蒸馏水,各组给药4周、10周分别处死8只大鼠,测定肾功能及NO含量、一氧化氮合酶(NOS)及超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量.结果:大鼠CRF模型成功制备,调气活血补肾汤大剂量组大鼠血清尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)明显降低;CRF模型组4周时匀浆NO水平和NOS活性均较对照组明显升高,随时间延长呈下降趋势,大剂量组、小剂量组用药4周NO水平和NOS活性下降,10周时持续降低;且治疗后肾组织SOD活性升高,MDA水平下降,大剂量组均优于小剂量组.结论:调气活血补肾汤可改善肾脏功能,其机制与其调节肾功能NO的代谢平衡、降低自由基损伤有关.     

女贞子提取物对帕金森病大鼠的神经炎症及AMPK/ERK信号通路的影响

目的：探讨女贞子提取物（LLE）对帕金森病（PD）大鼠神经炎症以及腺苷酸激活蛋白激酶（AMPK）/细胞外调节蛋白激酶（ERK）信号通路的影响。方法：通过注射6-羟基多巴胺（6-OHDA）构建PD大鼠模型,将建模成功的大鼠随机分为模型组、LLE低、中、高剂量组、阳性对照组,每组15只;另取15只正常大鼠作为对照组;LLE低、中、高剂量组分别给予0.2 g/kg、0.4 g/kg、0.8 g/kg LLE灌胃,阳性对照组给予1.67 mg/kg美多芭灌胃,对照组、模型组大鼠灌胃等体积生理盐水,每天1次,连续15d。干预结束后,利用旋转试验检测大鼠行为学变化;利用酶联免疫吸附（ELISA）法测定大鼠脑组织中氧化应激指标[丙二醛（MDA）、还原型谷胱甘肽（GSH）、超氧化物歧化酶（SOD）],炎症因子[肿瘤坏死因子α(TNF-α)、一氧化氮（NO）]水平;采用免疫组化法检测多巴胺标志物酪氨酸羟化酶（TH）阳性细胞数;采用蛋白免疫印迹（western blotting）法检测PD大鼠脑组织中AMPK、ERK、p-AMPK、p-ERK表达。结果：与对照组相比,模型组大鼠旋转圈数及脑组织MDA、TN...     

基于P53/AMPK通路车前子醇提物对多囊卵巢综合征大鼠卵巢颗粒细胞自噬的作用研究

目的 研究车前子醇提物对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠卵巢颗粒细胞自噬的作用,并探讨其可能作用机制。方法 选取动情周期规律SD大鼠125只,取24只灌胃羧甲基纤维素钠(CMC-Na)设为对照组,其余101只灌胃来曲唑混悬液构建PCOS大鼠模型。建模成功的96只大鼠分为模型组(n=24)、3MA组(n=24)、低剂量组(n=24)和高剂量组(n=24)。对照组、模型组灌胃0.9%氯化钠溶液,低、高剂量组按10、20mg/(kg·d)灌胃车前子醇提物,3MA组按10mg/(kg·d)灌胃自噬阻断剂3MA,连续14天。酶联免疫吸附(ELISA)法检测大鼠血清促卵泡生成素(FSH)、黄体生成素(LH)、睾酮(T)、雌二醇(E₂)水平;苏木精-伊红(HE)染色法观察卵巢组织病变形态;流式细胞仪检测卵巢颗粒细胞自噬率;蛋白质印迹法(Western blot法)检测微管结合蛋白轻链3(LC3)、抑癌基因p53、磷酸化雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)、磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(p-AMPK)的表达情况。结果 与对照组比较,模型组大鼠血清LH、T和FSH水平均升高,E₂水平下降;卵巢组织病变最明显;颗粒细胞自噬率升高;LC3Ⅱ/LC3Ⅰ和p-AMPK蛋白表达增加,p53和p-mTOR蛋白表达降低(P＜0.05)。与模型组比较,3MA组、低剂量组、高剂量组LH、T和FSH水平降低,E₂水平升高,卵巢组织病变减轻,颗粒细胞自噬率降低,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ和p-AMPK蛋白表达降低,p53和p-mTOR蛋白表达升高(P＜0.05)。各组与模型组比较的指标变化中,3MA组的指标变化高于低剂量组,低于高剂量组,差异有统计学意义(P＜0.05)。结论 车前子醇提物可调节PCOS大鼠内分泌代谢,可能与调控p53/AMPK信号通路,抑制颗粒细胞自噬有关。     

肥胖大鼠骨骼肌AMPK表达及其与糖脂代谢的关系

目的 探讨肥胖大鼠骨骼肌组织腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)的表达及其对糖脂代谢的影响.方法 将28只6周龄雄性SD大鼠随机分为普通饮食组(NC组,15只)和高脂饮食组(HF组,13只),分别测体重(BW)、血清游离脂肪酸(FFA)、甘油三脂(TG)、总胆固醇(TCH)、空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)等指标.采用免疫印迹法测定各组大鼠骨骼肌中AMPK和磷酸化AMPK(p-AMPK)的水平.以p-AMPK/AMPK代表AMPK的活性.结果 与NC组大鼠相比,HF组大鼠的BW、FFA、TG、FPG、FINS均明显升高(P＜0.05),骨骼肌中AMPK表达降低,但差异无统计学意义(P＞0.05),p-AMPK表达及AMPK活性(p-AMPK/AMPK)降低显著(均P＜0.05).骨骼肌组织p-AMPK表达水平与FPG、FFA呈负相关(P＜0.05),AMPK活性与FPG、FFA、TG呈负相关(P＜0.05),与FINS无相关性.结论 高脂饮食诱导大鼠营养性肥胖,降低AMPK的活性,从而导致TG和TCH的合成增加,血糖升高,脂质在外周组织沉积增加.     

低剂量伽玛刀照射对功能区癫痫猫模型的治疗作用及机制研究

目的 观察低剂量伽玛刀照射对青霉素点燃癫痫猫的行为和脑额叶功能区皮质神经递质的影响.方法 实验于2007-2009在河北省人民医院伽玛刀治疗中心和临床研究中心完成.选择雄性成年猫80只,按随机数字表法分成3组,癫痫模型组、伽玛刀治疗组各28只,正常对照组24只.正常对照组不做任何处理;其他两组均在猫额叶功能区皮质多次注射青霉素制作点燃癫痫的模型,伽玛刀治疗组在造模成功后给予低剂量照射,DG 15Gy/50%.观察时间点为伽玛刀照射后4、8、12周.采用Smialowki 6级评分法进行行为学观察;采用高效液相色谱荧光法测定脑额叶功能区皮质谷氨酸(Glu)、γ-氨基丁酸(GABA)的含量.结果 80只猫全部进入结果分析.(1)猫行为学观察结果:除正常对照组外,各组实验用猫均出现惊厥行为,点燃率为100%.第12周时伽玛刀治疗组发作级别显著低于癫痫模型组(P<0.05).(2)实验用猫额叶功能区皮质神经递质的含量:在各时间点,与正常对照组比较,癫痫模型组额叶功能区皮质Glu含量明显增加,GABA含量减低(P<0.05);与癫痫模型组比较,12周时,伽玛刀治疗组额叶功能区皮质Glu含量降低,GABA含量增加 (P<0.05).结论 低剂量(15 Gy)伽玛刀照射对青霉素点燃癫痫猫有明显的抗癫痫作用,其机制可能与降低额叶脑功能区皮质Glu的含量和增加GABA的含量有关.     

紫草素对糖尿病周围神经病变大鼠的治疗作用及对腺苷酸活化蛋白激酶/核因子E2相关因子2信号通路的影响

目的:探究紫草素对糖尿病周围神经病变(DPN)大鼠的治疗作用及对腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/核因子E2相关因子2(Nrf2)信号通路的影响。方法:构建DPN模型，将建模成功的48只大鼠随机分为模型组、紫草素低剂量组、紫草素高剂量组和甲钴胺片组，每组12只。另取12只大鼠作为对照组。紫草素低、高剂量组大鼠分别给予12.5、25 mg/kg紫草素灌胃，甲钴胺片组大鼠给予0.14 mg/kg甲钴胺片灌胃，对照组和模型组大鼠给予等体积0.9%氯化钠溶液灌胃，每日给药1次，连续8周。观察各组大鼠坐骨神经病理学变化。检测大鼠坐骨神经感觉神经传导速度(SNCV)和运动神经传导速度(MNCV),血清肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β,坐骨神经超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、AMPK、Nrf2 mRNA和蛋白水平。结果:对照组大鼠坐骨神经结构正常；模型组大鼠坐骨神经髓鞘变薄，出现白色结缔物质，间隙加宽，可见明显炎症细胞浸润；紫草素低、高剂量组大鼠坐骨神经病变程度依次减轻；甲钴胺片组和紫草素高剂量组大鼠坐骨神经病理学变化无明显差异。与对照组比较，坐骨神经SNCV和MNCV...     

电针联合氟西汀抑制慢性应激抑郁大鼠额叶皮质nNOS、c-Fos上调和SYP下调

目的:观察电针联合氟西汀对慢性应激抑郁模型大鼠额叶皮质神经元型一氧化氮合酶(nNOS)、基因片段(c-Fos)和突触素(SYP)表达的作用。方法:SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、电针组、氟西汀组和电针+氟西汀组。对大鼠进行21 d的应激刺激建立慢性应激抑郁模型。按分组给予电针刺激百会、神庭穴30 min,氟西汀灌胃,每天1次,持续21 d,旷场实验检测大鼠行为学。免疫组织化学法检测额叶皮质nNOS、c-Fos和SYP的表达。结果:与正常对照组比较,模型组大鼠额叶皮质nNOS和c-Fos阳性神经元表达增加(P<0.05),SYP阳性神经元表达减少(P<0.05),大鼠行为学指标降低;与模型组比较,电针组、氟西汀组和电针+氟西汀组大鼠额叶皮质nNOS和c-Fos阳性神经元表达减少(P<0.05),SYP阳性神经元表达增加(P<0.05),大鼠行为学指标提高;与电针组、氟西汀组比较,电针+氟西汀组大鼠额叶皮质nNOS和c-Fos阳性神经元表达减少(P<0.05),SYP阳性神经元表达增加(P<0.05),大鼠行为学指标提高。结论:电针联合氟西汀可发挥协同作用,可能通过抑制慢性应激抑郁对额叶皮质nNOS、c-Fos的上调和SYP的下调,更好地达到抗抑郁的作用。