不同核酸检测方法检测非淋球菌性尿道炎病原体

目的探讨不同核酸检测方法在非淋球菌性尿道炎病原体检测中的应用价值。方法对162例疑似非淋球菌性尿道炎患者样本同时运用实时荧光定量PCR法(FQ-PCR)和实时核酸恒温扩增检测技术(SAT)进行沙眼衣原体(Ct)和解脲支原体(Uu)检测,并对结果比较分析。结果分别对162例患者尿液标本和拭子标本作Ct病原核酸检测,SAT法阳性率均为18.52%。FQ-PCR法阳性率分别为17.28%和20.37%。尿液标本和拭子标本Uu病原核酸检测,SAT法阳性率均为53.70%;FQ-PCR法阳性率分别为41.98%和50.00%。以FQ-PCR法为参考方法,SAT法在Ct检测中拭子标本的检测灵敏度为87.88%,特异度为99.22%。尿液标本的检测灵敏度为92.86%,特异度为97.01%。在Uu检测中,SAT法拭子标本的检测灵敏度为90.12,特异度为82.72%。尿液标本的检测灵敏度为100.00%,特异度为79.79%。结论 SAT和FQ-PCR均能为临床诊断Ct,Uu感染提供依据,SAT可以以尿液标本代替拭子标本,且可以用于判愈,防止过度治疗。     

不孕不育者SAT法和尿液快速检测法检测淋球菌比较

目的比较实时荧光核酸恒温扩增技术(SAT)和尿液快速检测法在淋球菌(NG)检测中的诊断价值,以选择更为准确、快速、实用的临床检测方法。方法采集本院就诊的不孕不育对象200例,每例分别进行SAT法和尿液快速检测法检测,每例另取1份分泌物拭子标本做分离培养金标准对照用。结果 SAT法阳性率为22.00%,快速法阳性率为26.00%,其中疑似标本SAT法与快速法阳性率分别为39.00%、44.00%,无症状标本SAT法与快速法阳性率分别为5.00%、8.00%。SAT法的敏感性和特异性分别为100.00%、97.50%,尿液快速法的敏感性和特异性分别为100.00%、92.50%,SAT法与尿液快速法的敏感性均较好,SAT法的特异性高于尿液快速法。结论 NG在不孕不育人群中隐性感染不容忽视,加强就诊对象NG的筛查、诊治和预防,确保优生优育。SAT技术精准、特异,具有较高的临床实用性,是适合实验室诊断的检测方法。     

男性淋病奈瑟球菌3种不同检测方法的对比研究

目的对比研究3种检测方法在淋病奈瑟球菌诊断中的临床应用价值。方法收集370例疑似淋病奈瑟菌感染男性患者的尿道分泌物和尿液标本,分别进行以下3种方法检测:普通培养法、DNA实时荧光定量法(RT-PCR)及RNA实时荧光恒温扩增检测(SAT)法。以普通培养法作为对照组,对比3组检测方法对淋病奈瑟菌的阳性率以及检测淋球菌的符合度情况。结果普通培养法、RT-PCR、SAT法阳性检出率分别为24.1%、11.8%、24.8%;普通培养法与SAT法淋病奈瑟菌阳性率均高于RT-PCR法,差异有统计学意义(P0.05);普通培养法与SAT法淋病奈瑟球菌阳性率差异无统计学意义(P0.05)。结论在临床工作中对男性淋病奈瑟球菌进行诊断时,建议选择2种以上的检测方法以提高阳性检出率;SAT法阳性反映活细菌数,可以更好地指导临床抗生素合理使用。     

多种不同检验方法检测生殖道沙眼衣原体感染结果准确率比较

目的 探讨不同检验方法检测生殖道沙眼衣原体感染结果准确率的临床应用。方法 对106例疑似生殖道沙眼衣原体感染的患者尿道、宫颈拭子和尿液分别用酶联免疫吸附试验(ELISA)、抗原快速检测试验(免疫层析试验)和生殖道沙眼衣原体核酸检测(PCR),比较不同检验方法诊断阳性率、灵敏度和特异度。结果 以生殖道沙眼衣原体核酸检测为“诊断标准”,其阳性率为97.17%(103/106),酶联免疫吸附试验阳性率为84.91%(90/106),免疫层析试验阳性率为80.19%(85/106),生殖道沙眼衣原体核酸检测试验的灵敏度和特异度高于酶联免疫吸附试验和免疫层析试验(P<0.01);酶联免疫吸附试验的灵敏度为87.25%,特异度为75.00%;免疫层析试验的灵敏度为82.18%,特异度为60.00%;酶联免疫吸附试验特异度高于免疫层析试验(P<0.05)。结论 根据临床诊断和治疗的不同需要，选择生殖道沙眼衣原体感染适宜的检测方法，可以提高临床诊断的准确性，避免误诊。     

RNA恒温扩增技术在非淋球菌性尿道炎病原体检测中的临床评估

目的探讨不同核酸检测方法在非淋球菌性尿道炎病原体检测中的临床价值。方法对173例疑似非淋球菌性尿道炎感染患者尿液以及尿道分泌物样本运用RNA恒温扩增技术(RNA-SAT)和实时荧光定量PCR技术(FQ-PCR)分别进行解脲支原体(Uu)和沙眼衣原体(Ct)检测,并对结果统计分析。结果 2种方法检测,尿道分泌物样本的Uu阳性率均高于尿液样本,差异有统计学意义(χ~2=4.011,P0.05),而Ct阳性率经χ~2检验比较差异无统计学意义(χ~2=0.25,P0.05)。Uu-尿液检测的敏感度(100.0%)高于Uu-尿道拭子(88.0%),差异有统计学意义(χ~2=9.049,P0.01)。Ct-尿液和Ct-尿道拭子,二者敏感度差异无统计学意义(χ~2=0.642,P0.05)。结论 RNA-SAT法既具备了FQ-PCR的高敏感度和特异度,又能很好地判断预后效果,同时可采用尿液作为待检样本,具有取样方便、耗时短、污染小及结果准确等优点,可用于临床实验室检测与疗效监测。     

荧光定量PCR法和显色培养法检测孕妇生殖道无乳链球菌感染阳性率比较

目的比较荧光定量PCR法和显色培养法检测孕妇生殖道无乳链球菌(GBS)感染阳性率,了解检测效果,分析两种方法的优缺点,选择合适的检测方法,提高GBS检出率,保护易感人群。方法应用荧光定量PCR法和显色培养法检测998例妊娠女性孕晚期生殖道GBS感染阳性率,与原有血平板培养法比较,评价这两种检测方法的结果。结果在998例样本中,血平板培养法检测出阳性标本28例,阳性率为2.81%,显色培养法检测出阳性标本61例,阳性率为6.11%,荧光定量PCR法检测出阳性标本84例,阳性率为8.42%。荧光定量PCR法与显色培养法检测GBS阳性率与血平板培养法比较差异均有统计学意义(P<0.05),荧光定量PCR法和显色培养法检测GBS阳性率比较差异也有统计学意义(P<0.05)。结论显色培养法和荧光定量PCR法检测GBS的检出率明显高于血平板培养法,其中荧光定量PCR法检测阳性检出率高于显色培养法。筛查孕妇生殖道GBS带菌情况可指导临床医生对该菌进行预防性治疗,更好地保护易感人群,选择荧光定量PCR法更具优势。     

淋球菌快速免疫层析法的临床应用

目的评估采用免疫层析法(immunochromatography test,ICT)的淋病奈瑟菌抗原检测试剂盒,检测男性尿道分泌物、女性宫颈分泌物中淋球菌(Neisseria gonorrhoeae,NG)的临床应用。方法选取近2年本院门诊收集总计159例怀疑为淋病感染者的生殖道分泌物标本,进行淋球菌快速免疫层析检测,同时进行PCR检测,结果不符的以培养法为金标准。结果159例生殖道分泌物分析,ICT法的阳性率为94.12%,灵敏度为88.24%,特异度为99.11%。结论淋球菌ICT具有较高的灵敏度和特异性,且具有快速检测的特点,可为临床医生诊断淋病提供一个快速、准确、更具参考和诊断价值的检测结果。     

实时荧光定量PCR检测女性淋球菌的评价

[目的]评价实时荧光定量PCR检测方法在诊断女性淋球菌(NGH)感染的效果和可行性,试图寻找一种快速而敏感的淋球菌检测方法。[方法]用革兰染色涂片法、培养法和FQ-PCR法检测女性疑诊淋病患者,其中FQ-PCR法采用宫颈拭子、阴道拭子和尿液3种取材方法进行对比。以培养法为“金标准”,分别计算其敏感性、特异性、阳性预期值和阴性预期值。并对部分患者治疗前后定量结果进行分析。[结果]培养法检测淋球菌的检出率为6.7%,涂片法的敏感性为60.00%,阳性预期值为54.55%。宫颈拭子FQ-PCR、阴道拭子FQ-PCR和尿液FQ-PCR法的敏感性分别为90%、95%和80%,3种FQ-PCR法特异性高达98%。[结论]FQ-PCR法检测女性淋球菌,具有快速、定量准确、较高敏感性和特异性等优点,可弥补涂片法较粗糙、培养法耗时长的缺点。是一种具有临床应用价值的淋球菌快速定量检测方法。     

环介导等温扩增法诊断初诊肺结核病研究

目的:初步评价环介导等温扩增法(Lamp)检测痰中结核分枝杆菌的准确性,探讨临床诊断初诊肺结核病人的应用价值。方法:选取249例初诊疑似肺结核病人的痰标本,同时进行Lamp、直接涂片抗酸染色法和改良罗氏培养基培养法检测。结果:剔除培养失败和非结核杆菌的标本,共检测了739份痰标本,其中直接涂片抗酸染色法检出阳性标本70份,阳性率9.47%;培养检出阳性标本118份,阳性率15.97%;Lamp检出阳性标本99份,阳性率13.40%。以培养法为标准,涂片法的灵敏度57.63%,特异度99.68%,符合率为94.30%;Lamp的灵敏度77.12%,特异度98.71%,符合率为96.61%。结论:Lamp在检测初诊疑似肺结核病人中有较高的灵敏度和特异性,适用于基层结核病工作中初诊肺结核病人的诊断。     

两种实验室检测方法在小儿巨细胞病毒感染诊断中的比较

目的探讨胶体金法与实时荧光定量PCR法在临床小儿巨细胞病毒(HCMV)感染中的诊断效果。方法收集浙江衢化医院2011年6月-2016年6月收治的疑似HCMV感染患儿100例。采集患儿血清及尿液,采用实时荧光定量PCR法(A组)及胶体金法(B组)检测患儿血清中HCMV的感染情况;采用实时荧光定量PCR法检测患儿尿液中HCMV的感染情况。比较两组血清中HCMV阳性率。参考HCMV感染诊断方案及临床诊断标准,统计HCMV感染阳性例数,并以此为金标准,统计两组对血清中HCMV感染的诊断效能(计算准确度、敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值)。比较实时荧光定量PCR法对血液中、尿液中HCMV感染的检测阳性率及诊断效能。结果 A组HCMV检测阳性率为19.0%,明显高于B组的9.0%(P0.05)。在对血中HCMV诊断效能方面,A组准确度、敏感度、阴性预测值均明显高于B组(P0.05)。通过比较实时荧光定量PCR法对血液及尿液中HCMV的诊断效能,发现尿液中HCMV诊断的准确度明显高于血液(P0.05)。结论实时荧光定量PCR法在检测HCMV感染方面较胶体金法更准确、敏感;在选择检测标本方面应优先选择尿液。     

临床患者泌尿生殖系统感染情况分析

目的探讨泌尿生殖系统感染患者沙眼衣原体(CT)、淋病奈瑟菌(NG)、解脲脲原体(UU)及生殖支原体(MG)感染情况,比较不同检测方法性能。方法对425例疑似患者感染率、感染危险因素、不同检测方法及样本类型结果一致性进行分析。结果总感染率为39.8%,其中病原体单一感染、2种混合感染、3种混合感染分别占68.6%、27.8%、3.6%。是否存在性行为、是否采用避孕方式是导致感染的独立危险因素。尿液样本与拭子样本检测结果符合率高,阳性检出率差异无统计学意义(P0.05)以PCR结果为参照,CT-RNA、NG-RNA、UU-RNA拭子标本的检测灵敏度分别为93.3%、100.0%、95.0%;特异度分别为97.3%、98.6%、96.7%。阳性患者治疗1个月后,Ct、NG、UU、MG的RNA检测阳性率明显下降(P0.05)。结论 CT、NG、UU、MG是泌尿生殖感染的重要病原体,RNA尿液检测灵敏度高特异性好,适合筛查。     

布病血清学检测RBPT与SAT一致性研究

目的寻求快速、简便、准确的布鲁杆菌病临床诊断方法。方法采用布鲁杆菌病虎红平板凝集试验(RBPT)和试管凝集试验(SAT),对疑似布鲁杆菌病患者血清进行同步检验。结果用RBPT和SAT 2种方法同时检测疑似布病患者血清524份,RBPT的阳性率为21.18%(111/524),SAT的阳性率为22.14%(116/524)。在413份RBPT阴性的血清中,有7份SAT阳性,假阳性率为1.69%。RBPT与SAT总体阳性进行比较,敏感度为93.97%,特异度为99.51%。经一致性检验,K值为0.95,2种试验方法的一致性很高;RBPT与SAT 1∶100++及以上阳性者比较,K值为0.60,2种试验方法的一致性不高。结论 RBPT的假阳性率很高,不能替代SAT用于布病临床诊断。     

超高倍显微镜检测妇科泌尿生殖道病原微生物

目的分析超高倍显微镜对妇科泌尿生殖道病原微生物检测的作用。方法以寿光市人民医院在2017年1-12月纳入治疗的200例妇科患者为研究主体。分成超高倍镜组和培养法组各100例。超高倍镜组利用超高倍显微镜进行泌尿生殖道病原微生物检测,培养法组利用培养法进行检测。分析病原体分布情况和诊断效果。结果标本中,阳性157例,阳性率为78.50%。其中单纯性病原体占88.54%。单纯性病原体中,阳性率最高的为支原体占31.50%,依次为霉菌占17.00%、线索细胞占12.50%、滴虫占8.50%。超高倍镜组的阳性诊断率为52.00%,培养法组为39.00%,差异无统计学意义(P0.05)。超高倍镜组的诊断灵敏度为60.98%,特异度为88.89%,准确性为66.00%;培养法组的诊断灵敏度为34.67%,特异度为48.00%,准确性为38.00%,差异有统计学意义(P0.05)。结论为妇科患者行超高倍显微镜检测可有效诊断出泌尿生殖道内的病原体分布情况,且具有较高的诊断准确性,可作为常规诊断方式加以推广。     

尿液HIV-1抗体检测及其临床意义

目的探讨尿液标本中人免疫缺陷病毒(HIV)-1抗体检测的临床意义。方法应用酶联免疫吸附试验(ELISA)对59例经疾病预防控制中心(CDC)确诊的HIV感染者及30例健康体检者血液和尿液标本同时进行HIV-1抗体检测;以确认结果为准,计算尿液HIV-1抗体检测的敏感度、特异度。结果 59例经CDC确诊的HHIV感染者血清HIV-1抗体全部阳性,相应尿液中HIV-1抗体阳性53例,阴性6例;对照组30例的血清HIV-1抗体全部阴性,相应尿液1例HIV-1抗体阳性,经血清ELISA法及胶体硒法对该样本进行HIV-1抗体检测均阴性。以确认结果为准,尿液HIV-1抗体检测阳性敏感度为89.83%,特异度为96.67%。结论在采集血液标本不便的情况下,可通过检测尿液HIV-1抗体对高危人群进行HIV感染筛查。     

尿液HIV 1抗体检测及其临床意义 FREE

目的探讨尿液标本中人免疫缺陷病毒（HIV） 1抗体检测的临床意义。方法应用酶联免疫吸附试验（ELISA）对59例经疾病预防控制中心（CDC）确诊的HIV感染者及30例健康体检者血液和尿液标本同时进行HIV 1抗体检测;以确认结果为准,计算尿液HIV 1抗体检测的敏感度、特异度。结果59例经CDC确诊的HIV感染者血清HIV 1抗体全部阳性,相应尿液中HIV 1抗体阳性53例,阴性6例;对照组30例的血清HIV 1抗体全部阴性,相应尿液1例HIV 1抗体阳性,经血清ELISA法及胶体硒法对该样本进行HIV 1抗体检测均阴性。以确认结果为准,尿液HIV 1抗体检测阳性敏感度为89.83%,特异度为96.67%。结论在采集血液标本不便的情况下,可通过检测尿液HIV 1抗体对高危人群进行HIV感染筛查。     

女性泌尿生殖道支原体、衣原体及淋球菌感染的结果分析

目的了解女性泌尿生殖道支原体、衣原体和淋球菌的感染情况及药敏分析,为临床合理用药提供依据。方法收集3 916例女性泌尿生殖道感染患者分泌物进行支原体、衣原体和淋球菌联合检测,并对阳性标本进行药敏分析。结果 3 916例标本中检出阳性患者1 951例(49.82%),其中单纯感染中以Uu阳性率最高,为35.93%,其次为Mh阳性率(2.15%);CT、NG阳性率分别为0.38%和0.31%。混合感染中以Uu+Mh阳性率最高(10.52%);其次为Uu+CT双重感染。支原体感染好发于16岁～35岁育龄妇女且白带清洁度异常者阳性检出率高。支原体对强力霉素、美满霉素和交沙霉素敏感性在92.84%以上,对氟喹诺酮类药物高水平的耐药,对罗红霉素和阿奇霉素的敏感度也较低。淋球菌感染者对头孢菌素及大观霉素敏感,而对四环素、环丙沙星耐药。结论联合检测阴道分泌物中支原体、衣原体和淋球菌,根据病原菌种类和药敏结果合理用药,对临床早期诊断及正确治疗女性泌尿生殖道感染具有重要意义。     

GenoType MTBDRplus VER 2.0试剂盒检测痰标本中结核分枝杆菌复合群的效果评价

目的评价GenoType? MTBDRplus VER 2.0试剂盒检测痰标本中结核分枝杆菌复合群(MTBC)的检测效能。方法对177例疑似肺结核患者的痰标本同时进行涂片,MGIT液体培养和GenoType? MTBDRplusVER 2.0检测。对培养阳性菌株进行菌种鉴定。使用SPSS 22.0统计软件对结果进行统计学分析,计数资料的一致性比较使用Kappa检验。K值≥0.75认为一致性很好。对MTBC检测的效能比较分析用敏感度、特异度进行效果评估。结果以MGIT液体培养结果为判断标准,GenoType? MTBDRplusVER 2.0检测痰标本中MTBC的敏感度为91.67%,特异度为95.58%,阳性预测值为91.67%,阴性预测值为95.58%,总符合率为94.22%。对两种方法进行一致性Kappa检验,K=0.872(P<0.001)。结论GenoType? MTBDRplus VER 2.0试剂盒检测痰标本中MTBC具有较高的敏感度和特异度,对于结核病的早期诊断有很好的应用价值。     

晨尿ELISA法检测男性淋病的结果分析

目的用酶联免疫吸附法(ELISA)检测晨尿诊断男性淋病的效果作出评价。方法应用酶联免疫吸附法(ELISA)法对疑似淋病的男性患者的晨尿进行检测,同时取尿道拭子标本进行酶联免疫吸附法(ELISA)检测及淋球菌培养,三者进行比较,判断晨尿酶联免疫吸附法(ELISA)检测诊断男性淋病的效果。结果110例确诊病例,培养法96例阳性(87.3%),拭子酶联免疫吸附法(ELISA)法108例(98.2%),晨尿酶联免疫吸附法(ELISA)106例(96.4%)阳性。结论酶联免疫吸附法(ELISA)检测晨尿与拭子酶联免疫吸附法(ELISA)具有较好的一致性,检出率高于培养法,而晨尿酶联免疫吸附法(ELISA)取材方便,可代替拭子标本诊断男性淋病。     

台州地区门诊患者淋球菌、解脲脲原体和沙眼衣原体感染情况分析

目的调查台州地区门诊患者淋球菌(NG)、解脲脲原体(UU)和沙眼衣原体(CT)感染状况,为临床诊断治疗提供依据。方法采用实时荧光核酸恒温扩增技术(SAT)对2016年台州市中心医院诊治的疑似NUC门诊患者进行NG、UU和CT核酸检测,并对其检测结果进行统计学分析。结果 1 365例疑似NG门诊患者中,检出阳性患者127例,阳性率为9.30%;1 661例疑似UU门诊患者中,检出阳性患者676例,阳性率为40.70%;3 799例疑似CT门诊患者中,检出阳性患者417例,阳性率为10.98%。各年龄段阳性率不同,20岁~40岁阳性患者最多。混合感染中以UU+CT感染常见。结论台州地区门诊患者NUC感染率各不相同,其中UU感染率最高。男性易感染NG和CT,女性易感染UU。SAT技术在NG、UU和CT核酸检测中具有灵敏度高,方便快捷等优点,值得临床应用。     

实时荧光定量PCR和ELISA检测麻疹病毒的探讨

目的探讨实时荧光定量PCR(Real-time PCR)法和酶联免疫吸附试验(ELISA)法在麻疹病毒检测中的相关性。方法对疑似麻疹患者的咽拭子采用Real-time PCR进行病毒核酸检测,同时对发病不同时期的血标本采用ELISA法进行特异性IgM抗体检测。结果为历年送至本中心进行诊断的106例疑似麻疹患者的同一人标本:咽拭子标本106份,发病4d内和发病8~10d血标本各106份,Real-time PCR检测咽拭子标本阳性85例(阳性率为80.2%),患者发病4d内IgM抗体检测阳性64例(阳性率为60.4%)、8~10dIgM抗体检测阳性85例(阳性率为80.2%)。结论 Real-time PCR法在麻疹的早期诊断中准确性和及时性均优于ELISA法更适用于麻疹的早期诊断,但ELISA法因其简便、低成本更适用于基层,对于临床疑似麻疹患者,早期ELISA法诊断阴性的,应及时送检到有条件的检测机构进行PCR法检测,严防麻疹病毒的医源性传播。