五味子酯甲在大鼠体内代谢产物的鉴定

目的 考察五味子酯甲在大鼠体内的代谢转化。方法 采用超高效液相色谱串联四级杆飞行时间质谱(UPLC-TOF-MS/MS)分析鉴定大鼠灌胃五味子酯甲后,其在尿样中的代谢产物。Phenomenex UPLC C₁₈色谱柱,流动相为乙腈-1‰甲酸水,梯度洗脱,质谱仪离子源为电喷雾离子源(ESI),正离子方式检测。结果 经代谢物软件处理后,根据MS/MS给出质谱碎片信息对五味子酯甲代谢产物进行结构推测,共检测到5种代谢产物。结论 五味子酯甲在大鼠体内的代谢途径主要为氧化反应和还原反应。     

UPLC-MS/MS法鉴定五味子酯甲在大鼠体内的代谢产物

目的:鉴定大鼠给予五味子酯甲后尿样中的代谢产物,阐明五味子酯甲在大鼠体内的代谢途径。方法:采用超高效液相色谱-串联四极杆质谱(UPLC-MS/MS)法与Metabolite Pilot 1.5代谢物分析软件进行分析鉴定。色谱柱为Phenomenex Kinetex C18,流动相为乙腈-0.1%甲酸水溶液(梯度洗脱),柱温为50℃,流速为0.4 ml/min,进样体积为5μl。一级全扫描范围100~1 000 amu,累积时间200 ms;子离子扫描范围50~1 000 amu,累积时间80 ms。大鼠ig给予五味子酯甲(15 mg/kg),收集并分析给药前后的尿样。结果:共鉴定代谢产物7种(M1~M7),即五味子醇乙、14-OH-五味子醇乙、1-OH-五味子醇乙或3-OH-五味子醇乙、2-OH-五味子醇乙、7-脱羟基-五味子醇乙、7-甲氧基-五味子醇乙。结论:该研究首次报道了五味子酯甲在大鼠体内的代谢物质,均为Ⅰ相代谢产物;其在大鼠体内的主要代谢途径是脱去苯甲酸,发生氧化反应和还原反应。     

LC/MSn鉴定咖啡酸在大鼠体内的代谢产物

目的研究咖啡酸（CA）在大鼠体内的代谢产物。方法大鼠灌胃（50mg·kg^-1）给予CA后采集0～4h尿样,用电喷雾离子阱多级质谱法对CA在大鼠体内的代谢产物进行分析。结果大鼠灌胃给予CA后,在体内可测到2个原形药的甲基化代谢物、2个原形药的单葡萄糖醛酸结合物、1个原形药的双葡萄糖醛酸结合物、2个原形药的单硫酸结合物、2个甲基化物的葡萄糖醛酸结合物和2个甲基化物的硫酸结合物。结论CA在大鼠体内广泛代谢,其代谢物的结构有待于进一步分析后确证。     

LC/MSn鉴定咖啡酸在大鼠体内的代谢产物

目的 研究咖啡酸（CA）在大鼠体内的代谢产物。方法 大鼠灌胃（50 mg·kg-1）给予CA后采集0 ~ 4 h尿样,用电喷雾离子阱多级质谱法对CA在大鼠体内的代谢产物进行分析。结果 大鼠灌胃给予CA后,在体内可测到2个原形药的甲基化代谢物、2个原形药的单葡萄糖醛酸结合物、1个原形药的双葡萄糖醛酸结合物、2个原形药的单硫酸结合物、2个甲基化物的葡萄糖醛酸结合物和2个甲基化物的硫酸结合物。结论 CA在大鼠体内广泛代谢,其代谢物的结构有待于进一步分析后确证。     

基于UPLC-Q-TOF-MS技术鉴定防风在大鼠体内的入血成分及代谢产物

目的 研究防风Saposhnikovia divaricata（Turcz.）Schischk.水煎液在大鼠体内的入血成分及代谢产物。方法 应用超高效液相色谱串联飞行时间质谱（UPLC-Q-TOF-MS）技术鉴定防风入血成分及代谢产物。采用Eclipse Plus C₁₈色谱柱（150mm×2.1mm,1.8μm）,流动相为0.1%甲酸水溶液（A）-0.1%甲酸乙腈（B）,梯度洗脱,流速0.3 ml/min,进样量3 μl。结果 建立了大鼠给药后血浆样品的分析测定方法,并且与空白血浆、防风水煎液和对照品的保留时间及质谱碎片离子信息对比,共鉴定了大鼠血浆中21个来源于防风的化合物,包括10个入血原型成分和11个代谢产物。结论 防风主要成分在大鼠体内的代谢途径主要包括羟化、去甲基化、葡萄糖醛酸化等。所建立的方法简单可靠,为揭示防风的药效物质基础提供研究依据。     

丹酚酸B在大鼠体内的代谢产物及代谢途径研究

目的 建立大鼠血浆、胆汁、尿液与粪便中丹酚酸B代谢产物的测定方法,并考察其代谢途径。方法 取SD大鼠18只,平分为灌胃和静注2组,每组再分成3个小组,分别采集血浆、胆汁、尿液及粪便,每小组2只大鼠分别单剂量灌胃（500 mg·kg^-1）和尾静脉注射（16.5 mg·kg^-1）给予丹酚酸B,另一只分别灌胃水和尾静脉注射生理盐水作为空白对照。采用高效液相色谱串联四极杆飞行时间质谱（HPLC-Q-TOF-MS/MS）联用法测定血浆、胆汁、尿液与粪便中的丹酚酸B代谢产物,同时推断代谢途径。结果 根据一级质谱分子离子信息和二级质谱碎裂离子信息,在大鼠体内共发现8个丹酚酸B的代谢产物,其中胆汁、粪便中均含有这8个代谢产物,尿液中发现3个代谢产物,血浆中发现2个代谢产物。由丹酚酸B及其代谢产物结构推断丹酚酸B体内主要通过甲基化反应、酯键水解反应代谢。结论 建立的分析方法准确、灵敏、快速,符合生物样品分析要求,适用于大鼠血浆、胆汁、尿液与粪便中丹酚酸B代谢产物的分析,并分析鉴定了8个代谢产物。代谢实验结果表明,胆汁排泄是丹酚酸B最主要的排泄方式。     

UHPLC-MS/MS测定大鼠尿液中环磷酰胺及其代谢产物浓度

目的 基于超高效液相色谱-串联质谱法（UHPLC-MS/MS）,建立测定给予高剂量环磷酰胺（cyclophosphamide,CTX）后大鼠尿液中CTX及其代谢产物脱氯乙基环磷酰胺（dechloroethylcyclophosphamide,DCCTX）、4-酮基环磷酰胺（4-Ketocyclophosphamide ,4-KetoCTX）、羧基磷酰胺（Carboxyphosphamide ,CEPM）浓度的方法。方法 大鼠尿液样品经10%甲醇水溶液直接稀释,离心后取上清液,采用UHPLC-MS/MS法进行检测分析。色谱柱：Agilent poroshell SB-C18 (2.1 mm × 75 mm,2.7 μm);流动相：甲醇-10 mmol?L-1乙酸铵水溶液,进行梯度洗脱,流速0.25 mL?min-1,柱温25 °C。采用电喷雾离子源,以多重反应监测模式进行正离子检测。用于定量检测分析的离子对分别为：CTX：m/z 261.10→140.10;DCCTX：m/z 199.20→78.00;4-KetoCTX：m/z 275.10→142.00;CEPM：m/z 293.10→221.10;替硝唑（tinidazole,TNZ）：m/z 248.10→121.10。结果 CTX及其代谢产物尿中浓度在40~2000 ng?mL-1范围内线性关系良好（CTX、DCCTX、4-KetoCTX、CEPM的r2分别为：0.9915,0.9910,0.9956,0.9918）,最低定量限均为40 ng?mL-1;日内、日间RSD分别为0.67%~12.76%、1.30%~11.92%;由内标归一化的基质因子计算RSD,结果在0.52%~7.60%之间;该方法的提取回收率为74.00%~102.70% （n=6）,方法回收率为85.89%-110.69% （n=5）;测定成分和内标的稳定性均良好。结论 该方法快捷、准确可靠、重复性好,适用于大鼠高剂量CTX给药后CTX及其代谢产物尿药浓度的测定及排泄研究。     

HPLC-ESI-ITMSn法鉴定麻黄碱及其大鼠体内主要代谢产物

目的建立快速灵敏的LC-ESI-ITMSⁿ分析检测麻黄碱及其大鼠体内代谢物的方法。方法以麻黄碱对照品对LC-ESI-ITMS²色谱及质谱条件进行了优化，分析总结其电喷雾质谱的一级电离规律和多级质谱裂解规律，以此作为麻黄碱大鼠体内代谢物分析鉴定的依据。健康大鼠空腹灌胃麻黄碱10 mg·kg^-1，收集0~48 h的尿样，经C₁₈小柱固相萃取分离纯化后，直接采用LC-ESI-ITMSⁿ方法对尿样进行测定。结果根据生物体内药物代谢转化规律及母体药物的色谱-质谱行为规律，在尿样中鉴定出3个第I相代谢产物，未发现第II相代谢产物。结论本方法灵敏、快速、选择性高、专属性好，可用于麻黄碱的代谢产物研究。     

去氢毛钩藤碱在大鼠体外肠道菌群中代谢产物的鉴定

目的研究去氢毛钩藤碱在大鼠体外肠道菌群中的代谢途径,阐明肠道菌群对去氢毛钩藤碱吸收和代谢的影响。方法采用UPLC/Q-TOF MS技术,鉴定并推测了去氢毛钩藤碱在大鼠体外肠道菌群培养液中的代谢产物。采用HSS C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.8μm),以乙腈(A)-体积分数0.2%甲酸水溶液(B)为流动相梯度洗脱,流速为0.5 m L·min-1,采用ESI离子源,正离子模式下检测。结果通过色谱保留时间及质谱碎片等信息,在大鼠肠道菌群中鉴定了原型化合物去氢毛钩藤碱,以及经还原、氮氧化和羟基化反应后得到的3个微量代谢产物。结论建立了采用UPLC/Q-TOF MS技术鉴定去氢毛钩藤碱在大鼠体外肠道菌群中代谢产物的方法,为吲哚类生物碱在体内吸收和代谢机制的研究提供试验依据。     

牡荆素在大鼠体内的代谢研究

目的 研究黄酮碳苷牡荆素在大鼠体内的代谢产物,并推测其代谢途径。方法 SD大鼠灌胃给予5 mg·kg^-1牡荆素,收集0~3 h,3~6 h,6~12 h的尿液,采用UPLC-Q-TOF检测尿样中代谢产物。结果 采用Metabolynx XS代谢物分析软件,根据质谱碎片信息对代谢物进行结构鉴定,最终得到3个代谢产物。结论 牡荆素在大鼠尿液中检测得到1个一相代谢产物,2个二相代谢产物,推测牡荆素在大鼠体内主要发生氧化、甲基化和葡萄糖醛酸结合反应,其中葡萄糖醛酸化反应是较强的代谢种类。     

哈巴苷在大鼠体内代谢产物的鉴定与分析

目的:研究玄参活性成分哈巴苷在大鼠体内的代谢产物及其分布、代谢类型和其可能的活性。方法:4只SD大鼠随机分为空白组(超纯水)和给药组(哈巴苷对照品溶液),每组2只,ig给药,160 mg/kg,每日2次,连用3 d。于给药前及首次给药后每12h收集各组大鼠尿液和粪便,最后1次给药后0.5、1 h穿心取血8 mL并取出心、肝、脾、肺、肾、胃和小肠等组织,分别制备血液、尿液、粪便及各组织样品溶液。采用高效液相色谱-质谱联用法检测和鉴定哈巴苷在大鼠体内的代谢产物并推测其代谢途径,采用PharmMapper软件预测代谢产物活性。结果:从大鼠体内鉴定出哈巴苷代谢产物12种,其原型及代谢产物主要分布在心、肝、脾、肺、肾、胃和小肠中,其代谢类型主要包括水解、脱水、还原、甲基化、硫酸酯化、葡萄糖醛酸结合、一级香豆酸结合等。12种化合物可能具有治疗癫痫、肌萎缩侧索硬化、糖尿病、脑中风等活性。结论:哈巴苷可能是以原型和代谢产物的形式发挥药效的。本研究为归属玄参体内代谢产物来源、研究玄参显效形式、阐明玄参药理作用机制和炮制机制提供了依据。     

雷公藤甲素和雷公藤红素在大鼠体内的代谢产物分析

大鼠灌胃给予雷公藤甲素与雷公藤红素混合液.采用液相色谱-串联质谱法,在负离子模式下,以一级、二级全扫描方式检测大鼠血清、尿与粪中的代谢产物.在大鼠血清中仅发现原形药物.在尿样中检测到了雷公藤甲素的3种代谢产物,推测分别为其单羟基化代谢产物、环氧化物水解开环代谢产物及谷胱甘肽结合物.在粪中则检测到1种代谢产物,推测为雷公藤甲素的另一单羟基化代谢产物.在尿样中检测到雷公藤红素的1种代谢产物,推测为葡萄糖醛酸结合物;在粪中检测到硫酸结合物.     

异欧前胡素在大鼠体内代谢产物的UHPLC-HRMS鉴定分析

目的 分析鉴定异欧前胡素在正常大鼠体内的代谢产物。方法 大鼠灌胃给药后,收集正常组和给药组大鼠的血浆、尿液和粪便样本,并以固相萃取柱提纯生物样品。采用UHPLC-HRMS(Q-Exactive Orbitrap MS)高分辨质谱对生物样品进行分析,并对代谢产物筛选鉴定。结果 在正、负离子模式下,根据所获得的精确分子质量、色谱保留行为、质谱裂解规律、特征碎片离子、对照品比对以及文献报道,最终分析鉴定了32个代谢产物。其代谢途径主要包括呋喃环开环、内酯水解、氧化、甲基化、葡萄糖醛酸化、硫酸酯化以及它们的复合反应。其中,葡萄糖醛酸化产物为首次发现。结论 本研究较为全面地阐明了异欧前胡素在正常大鼠体内的代谢转化情况,可为其进一步的药效学研究提供依据,并为呋喃香豆素类物质的代谢产物分析提供借鉴。     

UHPLC-Q-Orbitrap HRMS分析吉马酮大鼠体内代谢产物及代谢途径

目的 研究吉马酮在大鼠体内的代谢产物,探讨其可能的代谢途径。方法 采用超高效液相色谱-四级杆/静电场轨道阱高分辨质谱技术（UHPLC-Q-Orbitrap HRMS）对灌胃给予吉马酮（10 mg·kg^-1）后大鼠的生物样品（血浆、尿液和粪便）进行分析,色谱柱采用Waters ACQUITY UPLC^® BEH C₁₈（2.1 mm×50 mm,1.7 μm）,流动相乙腈-0.1%甲酸水溶液,梯度洗脱,Q-Exactive高分辨质谱仪采用HESI离子源,辅助气温度300℃,离子传输管温度320℃,喷雾电压为+3.50 kV或者-2.80 kV,扫描方式Full MS/dd-MS²。分析比对给药组和空白组中高分辨质谱提供的准分子离子峰和碎片离子信息,使用Xcalibur 3.0、Mass Frontier 2.0和Compound Discovery 2.1软件进行数据处理,筛选并鉴定其可能的代谢产物。结果 从大鼠生物样品中共筛选鉴定了包括原型在内的23个代谢产物,推断吉马酮在大鼠体内发生的代谢类型主要有脱水反应、脱饱和反应、氧化反应、葡萄糖胺结合反应、葡萄糖醛酸化反应以及相关的复合反应等。结论 本研究较为详细地阐明了吉马酮在大鼠体内的代谢情况,剖析了其代谢途径,可为其进一步的药效学、药动学及毒理学研究提供理论依据。     

UPLC-Q-TOF/MS法分析岩大戟内酯B在大鼠体内的代谢产物

目的:分析岩大戟内酯B在大鼠体内的代谢产物,预测其代谢途径。方法:将大鼠随机分为空白组(灌胃0.5%羧甲基纤维素钠溶液)和给药组(灌胃岩大戟内酯B,100 mg/kg),每组8只。分别收集给药后0~12、>12~24、>24~36 h的粪便,给药后0~2、>2~8、>8~12、>12~24、>24~36、>36~48 h的尿液以及给药后1、2、8、12、24、36 h的血液样品,分别以超声提取法、固相萃取法、蛋白沉淀法处理后,采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF/MS)联用技术和Analyst?TF 1.7.1、PeakView?2.2等软件联合分析、鉴定各样品中的代谢产物。结果与结论:从大鼠粪便中共检测到原型药物和7个代谢产物,从尿液和血液样品中分别检测到1、2个代谢产物。岩大戟内酯B灌胃后在大鼠体内经Ⅰ相的开环、脱水、氧化、脱氧、加氢反应等途径代谢;未检测到Ⅱ相代谢产物。     

基于UHPLC-Q/TOF-MS技术鉴定青钱柳叶在大鼠体内的入血成分及代谢产物

目的 研究青钱柳叶在大鼠体内的入血成分及代谢产物。方法 采用超高效液相色谱-飞行时间质谱联用技术(UHPLC-Q/TOF-MS)鉴定大鼠血清中的化学成分,通过比对青钱柳叶、空白血清和含药血清的图谱差异,解析青钱柳水提液经大鼠灌胃后血清中的原型成分和代谢产物。结果 共鉴定得到15个入血成分,6个为原型成分,9个为原型成分的代谢产物。入血的原型成分主要为咖啡酰奎宁酸类、黄酮类和皂苷类,代谢途径主要有甲基化和羟基化。结论 该研究表明入血的原型成分可能是青钱柳叶的有效成分,为阐明其药效物质基础提供了一定的依据。     

Excretion of Berberine and Its Metabolites in Oral Administration in Rats

Berberine (BBR) has been confirmed to show extensive bioactivities for the treatments of diabetes and hypercholesterolemia in clinic. However, there are few pharmacokinetic studies to elucidate the excretions of BBR and its metabolites. Our research studied the excretions of BBR and its metabolites in rats after oral administration (200 mg/kg). Metabolites in bile, urine, and feces were detected by liquid chromatography coupled to ion trap time‐of‐flight mass spectrometry; meanwhile, a validated liquid chromatography coupled with tandem mass spectrometry method was developed for their quantifications. Sixteen metabolites, including 10 Phase I and six Phase II metabolites were identified and clarified after dosing in vivo. Total recovered rate of BBR was 22.83% (19.07% of prototype and 3.76% of its metabolites) with 9.2 × 10^?6% in bile (24 h), 0.0939% in urine (48 h), and 22.74% in feces (48 h), respectively. 83% of BBR was excreted as thalifendine (M1) from bile, whereas thalifendine (M1) and berberrubine (M2) were the major metabolites occupying 78% of urine excretion. Most of BBR and its metabolites were found in feces containing 84% of prototype. In summary, we provided excretion profiles of BBR and its metabolites after oral administration in rats in vivo.     

Characterization of the Urinary Metabolites of Primaquine in Rats

Following the synthesis of reference standards of the primaquine metabolites, a high-performance liquid chromatographic (HPLC) analytical method for carboxyprimaquine, its glycine conjugate, and its glucuronide conjugate in urine samples was developed. After the administration of primaquine, only trace quantities of primaquine and carboxyprimaquine (each less than 1% of dose) and no significant quantity of the two conjugates of carboxyprimaquine were excreted in the urine. When carboxyprimaquine was administered, only 0.3% of the dose was excreted in the urine. When carboxyprimaquine glycinate was administered, the compound was found in the 700- to 1300-µg/ml concentration range in the urine within the first few hours. Using ¹⁴C-labeled primaquine, six new metabolites were found in the urine and partially characterized. The purported metabolites of primaquine (8-amino-6-methoxyquinoline, 5-hydroxyprimaquine, and 6-desmethyl-5-hydroxyprimaquine) were not found in the urine. A field screening test for the quantitation of primaquine metabolites in urine was also investigated. The inexpensive, but sensitive assay was found to give results that closely paralleled the more complex HPLC method and it was moderately well correlated with the total radioactivity in the urine samples.     

HPLC-MSn法分析当归乙酸乙酯提取物在大鼠体内的代谢产物

目的:探讨当归乙酸乙酯提取物的抗凝血活性药效物质及其显效形式。方法:采用高效液相色谱-二极管阵列-电喷雾飞行时间质谱联用(HPLC-DAD-ESI-IT-TOF-MSn)技术对当归乙酸乙酯提取物的化学成分进行鉴别,并对其在大鼠体内的代谢产物进行分析。色谱柱为Agilent Zorbax SB-C18(250 mm×4.6 mm,5μm),柱温为28℃,流动相为0.1%甲酸水-甲醇(梯度洗脱),流速为1.0 ml/min,检测波长为280 nm。结果:通过对当归乙酸乙酯提取物的成分进行分析,共指认出22个化合物,其中当归相关研究中首次报道的化合物为4,7-二羟基-3-丁基苯酞;从大鼠含药尿液中共指认出18个化合物,包括原形成分4个,以及当归相关研究中首次报道的代谢产物14个,其中新化合物2个,分别为N,N-4,5-alkene-ligustilide-6/7-O-sulphate和6,7-dihydrosenkyunolide F-9-sulphate-6/7-thiol。结论:该方法能准确、快速地从复杂的生物样品中筛选和鉴定相关代谢产物,可为阐明当归抗凝血活性的药效物质及显效形式(原形、代谢产物或两者兼有)提供化学依据。