豫医卷毛大鼠表皮生长因子基因的比较生物学分析

目的:对豫医卷毛大鼠的表皮生长因子(EGF)基因进行比较生物学分析。方法:采用PCR方法对豫医卷毛大鼠EGF基因cDNA序列进行克隆测序,并与BN大鼠、家鼠、原鸡、猕猴和人EGF基因的核苷酸序列及其编码蛋白的氨基酸序列进行同源性比较和系统遗传学分析。结果:获得了豫医卷毛大鼠EGF基因全长3522bp的cDNA序列(GenBank登录号:JX437943)。豫医卷毛大鼠EGF基因编码区的核苷酸序列与BN大鼠、家鼠、原鸡、猕猴和人的同源性分别为97.8%、83.4%、59.7%、76.5%、73.5%,其编码蛋白的氨基酸序列同源性分别为99.3%、79.9%、52.9%、69.6%、69.4%。结论:EGF基因在进化过程中具有一定的保守性,但不同物种之间也具有特异性。     

豫医卷毛大鼠转化生长因子α基因的比较生物学分析

目的：对豫医卷毛大鼠的转化生长因子α（ TGFα）基因进行比较生物学分析。方法：采用PCR方法对豫医卷毛大鼠TGFα的cDNA序列进行克隆、测序,并与BN大鼠、小家鼠、黄牛、野猪、猕猴、黑猩猩、人、原鸡、鹌鹑和斑马鱼的TGFαcDNA序列及其编码产物的氨基酸序列进行同源性比较和系统遗传学分析。结果：获得了豫医卷毛大鼠TGFα基因全长970 bp的cDNA序列（ GenBank登录号：KF366251）。豫医卷毛大鼠与BN大鼠、小家鼠、黄牛、野猪、猕猴、黑猩猩、人、原鸡、鹌鹑和斑马鱼的同源性分别为98．6％、95．0％、85．5％、85．3％、85．5％、86．3％、86．3％、73．2％、73．2％和56．8％,氨基酸序列的同源性分别为98．8％、96．9％、90．6％、90．6％、91．2％、91．9％、91．9％、72．6％、72．6％和38．8％。结论：TGFα基因在进化过程中具有较高的保守性,但不同物种之间也具有功能上的特异性。     

豫医卷毛大鼠与SD大鼠血液学常规指标比较

目的:比较豫医卷毛大鼠与SD大鼠血液学常规指标.方法:豫医卷毛大鼠和SD大鼠各20只(雌雄各半),检测12项血液学常规指标.结果与结论:卷毛雌鼠血红蛋白含量低于SD雌鼠(P＜0.05),雌、雄卷毛大鼠之间红细胞计数、血小板计数及血小板体积分布宽度差异有统计学意义(P＜0.05).试验时卷毛大鼠雌雄鼠应分开统计.     

豫医无毛小鼠无毛基因的比较生物学分析

目的:分析豫医无毛小鼠与其他物种间无毛基因组成的差异.方法:采用RT-PCR方法对豫医无毛小鼠无毛基因的cDNA序列进行克隆测序,并借助生物信息学分析技术对小鼠、大鼠、猴和人的无毛基因及其所编码的氨基酸序列进行比较生物学分析.结果:获得了豫医无毛小鼠无毛基因的全长4 014 bp的cDNA序列 (GenBank 登录号:AY547390).豫医无毛小鼠与国内外报道的2种小鼠、大鼠、猴、人等5种动物的核苷酸同源性分别为99.9%、99.7%、94.3%、 81.7%、 81.8%,氨基酸同源性分别是99.8%、99.7%、94.5%、79.8%、80.0%.结论:无毛基因是一个高度保守基因,不同物种间具有高度同源性.     

豫医卷毛大鼠与SD大鼠主要脏器系数及生长发育情况比较

目的:探讨豫医卷毛大鼠与SD大鼠主要脏器及生长特性的差异.方法:分别在21 d龄、28 d龄、60 d龄和90 d龄时测量20只豫医卷毛大鼠和20只SD大鼠(雌雄各半)的主要脏器质量、体质量及体长、尾长,计算各脏器占体质量的百分比(脏器系数).结果:28 d龄卷毛大鼠体长小于SD大鼠(P＜0.05),60 d龄卷毛雄鼠体质量、尾长大于SD大鼠(P＜0.05).28 d龄、90 d龄雄性卷毛大鼠脾脏系数小于SD大鼠(P＜0.05),60 d龄雄性卷毛大鼠胸腺系数小于SD大鼠(P＜0.05),其余日龄2种大鼠之间比较各指标差异无统计学意义(P＞0.05).结论:卷毛突变基因对大鼠的中期生长及免疫力有一定影响.     

豫医卷毛大鼠与SD大鼠皮肤组织学比较

目的:探讨豫医卷毛大鼠和SD大鼠皮肤组织学的差异。方法:挑选豫医卷毛大鼠封闭群1d龄、12d龄、18d龄、4月龄、24月龄同窝大鼠与SD大鼠各2只,颈椎脱臼法处死,取背部中央皮肤,制片,HE染色,显微镜下观察。结果:与SD大鼠相比,豫医卷毛大鼠皮肤毛囊弯曲,排列紊乱,皮肤其他结构与SD大鼠无区别。结论:突变基因影响了大鼠毛囊的生长发育。     

豫医卷毛大鼠与SD大鼠血清电解质、生化指标的比较

目的:比较豫医卷毛大鼠与SD大鼠血清电解质、生化指标的差异.方法:取180～220 g豫医卷毛大鼠和SD大鼠各20只(雌雄各半),检测15项血清生化指标及电解质水平.结果与结论:卷毛大鼠血清甘油三酯、肌酸激酶、乳酸脱氢酶、尿素氮、尿酸含量高于SD大鼠(P＜0.05),其余生化指标2种鼠之间差异无统计学意义(P＞0.05).卷毛大鼠血清钠、氯、离子钙、总钙、磷含量均高于SD大鼠(P＜0.05),钾含量2者差异无统计学意义(P＞0.05).     

豫医卷毛大鼠的遗传特性

目的:分析豫医卷毛大鼠的表型特征及遗传方式。方法:观察卷毛大鼠的表型,并通过遗传测交实验测定其遗传规律。结果:卷毛大鼠被毛和触须卷曲,纯合子被毛受累比杂合子严重,4周龄后开始出现短暂脱毛现象,几乎变为全身无毛,然后被毛重新生长,但毛发稀疏。卷毛性状呈半显性遗传,由常染色体上单一显性基因控制。结论:卷毛大鼠表型特征明确,遗传方式清楚,可能是一种新的突变型。     

豫医无毛小鼠无毛基因部分DNA序列分析

目的：探讨豫医无毛小鼠的无毛基因突变情况.方法：采用PCR方法扩增豫医无毛小鼠无毛基因的部分DNA序列,并进行克隆测序,将测序结果与国外公布的小鼠、大鼠及人无毛基因的cDNA序列做同源性比较和分析,确定该鼠无毛基因的特异性.结果：克隆测序结果为一923 bp的片段,相当于Genbank上公布的小鼠无毛基因cDNA序列的3 150～3 565 bp位置,包含4个外显子（外显子13～16）及3个内含子（内含子13～15）;与本室以前所测昆明小鼠无毛基因部分DNA序列100%同源,其外显子部分共416 bp,可编码138个氨基酸,与国外公布的小鼠、大鼠、人的无毛基因核苷酸同源性分别为100%、95%、84%,氨基酸同源性分别为100%、97.8%、84%.结论：①克隆定序了豫医无毛小鼠无毛基因的部分DNA序列;②排除了豫医无毛小鼠无毛基因的突变发生于本段序列的可能;③无毛基因在哺乳动物体内同源性很高,应属保守基因,其蛋白质产物可能在一些基本的调节途径中起重要作用,推测豫医无毛小鼠的无毛基因可能也位于14号染色体.     

鸡贫血病毒Apoptin蛋白编码基因的克隆和序列分析

目的:为了寻找肿瘤特异凋亡蛋白,克隆鸡法氏囊组织中鸡贫血病毒Apoptin蛋白的编码基因并进行序列分析. 方法:根据基因数据库资料设计合成引物,以成鸡法氏囊组织中提取的DNA作模板,通过PCR获得了特异扩增产物,将其插入到pGEMT-easy载体并转染感受态E.coli-DH5α菌株,提取质粒经限制性内切酶酶切鉴定后,使用DNA测序仪测定插入片段的DNA序列. 使用DNAsis分析软件分析所克隆的DNA序列及其编码蛋白质,并与数据库中Apoptin蛋白的编码基因相比较. 结果:序列分析表明,成功地克隆了鸡贫血病毒的Apoptin基因,同基因数据库中的相关资料比较发现与山东报道的Apoptin基因(GenBank AY171617)的核酸序列一致,同鸡贫血病毒全基因序列中的Apoptin序列(GenBank AF 313470)有6个核酸差异. 结论:Apoptin编码基因的克隆为特异诱导肿瘤细胞凋亡治疗肿瘤奠定了基础.