μ受体基因118A→G突变对芬太尼椎管内镇痛作用的影响

目的研究μ受体基因（OPRM1）A118G单核苷酸多态对剖宫产术后硬膜外腔芬太尼镇痛作用的影响。方法选择广州医
学院第三附属医院ASAⅠ~Ⅱ级,拟在腰硬联合麻醉下行剖宫产的孕产妇100例,术后行硬膜外腔芬太尼自控镇痛。抽取产妇
静脉血,应用PCR-RFLP法,根据OPRM1 外显子1第118位点处的碱基情况判定产妇基因型,AA型为野生型,GG型为突变型,
AG型为杂合型,根据基因型将产妇分为3组即AA组、AG组、GG组。观察术后疼痛视觉模拟评分（VAS评分）、镇痛期间恶呕记
录和48 h 芬太尼总用量。结果最终96 名产妇完成研究,各种基因型所占比例为GG（16, 16.7%）,AA（35, 36.5%）,AG（45,
46.9%）。术后12、24 h两个时点的VAS评分,GG组要明显高于AA组和AG组（P<0.05）;术后镇痛芬太尼总用量,GG组亦明显
高于AA组和AG组（P<0.05）。结论OPRM1 A118G单核苷酸多态影响芬太尼硬膜外腔镇痛效果,GG型镇痛效果明显弱于
AA型和AG型;达到同样镇痛效果,GG型需要更大剂量的芬太尼。
     

海洛因依赖与μ阿片受体基因多态性的关联研究

目的探讨海洛因依赖和μ阿片受体基因多态性的关系.方法应用聚合酶链反应技术检测313例海洛因依赖者和214名正常对照μ阿片受体基因.结果海洛因依赖者和对照组之间的上述的基因型和等位基因频率的差异无显著性(P>0.05).结论μ阿片受体基因多态性与海洛因依赖无关联.     

探讨OPRM1基因A118G多态性与酒依赖的关系

目的研究μ阿片受体(OPRM1)基因A118G多态性与酒精依赖的关系。方法采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法检测延边地区朝、汉族男性酒精依赖组(103名)和健康对照组(95名)OPRMI基因A118G单核苷酸多态性,计算和比较各组基因型和等位基因的频率。结果酒精依赖者和对照组之间的OPRM1基因型和等位基因频率的差异无统计学意义(P>0.05)。结论本实验结果提示酒精依赖的发生与μ阿片受体基因多态性无关联性。     

镇痛阿片样药物和穴位电刺激对机体的效应

３８例具有疼痛症状的患者在合谷穴接受ＴＥＮＳ（穿皮电神经刺激）或电针治疗。将４２只小鼠分为６组：①度冷丁组，②颅痛定（阿片样中草药）组，③急性吗啡戒断（ＡＭＷ）组④吗啡戒断加电针（ＭＷ＋ＥＡ）组，⑤ＭＷ无ＥＡ（ＭＷ－ＥＡ），⑥对照组。以钾离子透入法测痛阀。依ＡＮＡＥ－点型（Ｆ）或ＣＤ４淋巴细胞亚群检测细胞中介免疫（ＣＭＩ）。以免疫酶组织化学显示ｃＡＭＰ及ｃＧＭＰ免疫反应性（ＩＲ）。结果表明患者的Ｔ     

μ阿片受体一号外显子SNP多态性与海洛因依赖关联研究

目的探讨西安汉族人群中μ阿片受体基因（OPRM1）一号外显子基因多态性与海洛因依赖关联性。方法采用病例对照研究策略,分别对102名海洛因依赖者（海洛因依赖组）和103名健康对照者（健康对照组）的OPRM1基因一号外显子（exon1）进行测序分析,从测序结果中确定出存在于这一区域中的单核苷酸多态性（SNP）位点,并分析海洛因依赖者OPRM1受体基因一号外显子上的多态性位点与海洛因依赖的相关性。结果共鉴定出两个SNP位点,分别为rs1799971（A118G）和rs6912029（G172T）,单位点关联分析显示两位点在两组之间的分布并不存在显著性差异;单体型分析两位点3种单体型均与海洛因依赖间无关联。结论 OPRM1基因一号外显子区域多态性位点与海洛因依赖无显著相关性。     

阿片受体基因A118G多态性与物质依赖的关系

目的 研究μ-阿片受体(OPRM1)基因A118G多态性与物质依赖的关系.方法 检索PubMed、CNKI、EMBASE和EBSCO数据库,收集有关A118G多态性与物质依赖(包括海洛因和酒精依赖)关联分析的相关文献,进行Meta分析.结果 总病例组OPRM1基因A118G多态性基因型和等位基因与物质依赖间无关联(P＞0.05).针对不同的成瘾物质分别进行Meta分析,发现A118G多态性G等位基因与酒精依赖存在阳性关联关系(P＜0.05).结论 G等位基因可能是酒精依赖的危险因素.单纯OPRM1基因可能不足以解释所有成瘾物质的遗传机制,可以进一步从阿片受体基因不同亚型以及与其他基因多态性间相互关系着手研究物质成瘾的遗传机制.     

阿片受体基因A118G多态性与物质依赖的关系

目的研究μ-阿片受体(OPRM1)基因A118G多态性与物质依赖的关系。方法检索PubM ed、CNK I、EMBASE和EBSCO数据库,收集有关A118G多态性与物质依赖(包括海洛因和酒精依赖)关联分析的相关文献,进行M eta分析。结果总病例组OPRM1基因A118G多态性基因型和等位基因与物质依赖间无关联(P>0.05)。针对不同的成瘾物质分别进行M eta分析,发现A118G多态性G等位基因与酒精依赖存在阳性关联关系(P<0.05)。结论G等位基因可能是酒精依赖的危险因素。单纯OPRM1基因可能不足以解释所有成瘾物质的遗传机制,可以进一步从阿片受体基因不同亚型以及与其他基因多态性间相互关系着手研究物质成瘾的遗传机制。     

镇痛阿片样药物和穴位电刺激对机体的效应

３８例具有疼痛症状的患者在合谷穴接受ＴＥＮＳ（穿皮电神经刺激）或电针治疗。将４２只小鼠分为６组：①度冷丁组，②颅痛定（阿片样中草药）组，③急性吗啡戒断（ＡＭＷ）组，④吗啡戒断加电针（ＭＷ＋ＥＡ）组，⑤ＭＷ无ＥＡ（ＭＷ－ＥＡ），⑥对照组。以钾离子透入法测痛阀。依ＡＮＡＥ－点型（Ｆ）或ＣＤ４淋巴细胞亚群检测细胞中介免疫（ＣＭＩ）。以免疫酶组织化学显示ｃＡＭＰ及ｃＧＭＰ免疫反应性（ＩＲ）。结果表明患者的ＴＥＮＳ镇痛及细胞中介免疫的效应均与ＥＡ的效应相似。小鼠的镇痛效应为吗啡＞度冷丁＞颅痛定＞电针或颅痛定，而细胞中介免疫的效应为ＥＡ＞颅痛定＞度冷丁或吗啡。ＡＭＷ组的小肠ｃＡＭＰ－ＩＲ增加而ｃＧＭＰ－ＩＲ相对减弱，ＥＡ能调控ｃＡＭＰ－ＩＲ及ｃＧＭＰ－ＩＲ趋向正常水平。     

μ型阿片受体和催产素受体二聚化的研究

目的 探讨μ型阿片受体（MOR）和催产素受体（OTR）可否形成异源性受体二聚体。方法 采用免疫共沉淀（IP）和荧光共振能量转移（FRET）方法,检测在MOR和OTR质粒共转染中国仓鼠卵巢（CHO）细胞和大鼠脑组织中是否存在MOR和OTR异源二聚体。结果 IP方法检测显示,在MOR和OTR质粒共转染CHO细胞及大鼠脑组织中可见MOR和OTR蛋白条带。MOR和OTR共转染CHO细胞FRET方法检测信号为阳性（FRET率均值为2.01）。结论 在MOR和OTR质粒共转染CHO细胞及大鼠脑组织中存在异源性MOR和OTR二聚体。     

系统性红斑狼疮患者Toll样受体9基因多态性的初步研究

目的 研究Toll样受体9(TLR9)基因在系统性红斑狼疮(SLE)中是否存在多态性.方法 提取26例SLE患者mRNA并逆转录为cDNA,扩增产物经3730 DNA自动测序仪测定TLR9基因序列.结果 TLR9 mRNA自起始位点起第1783、2269和3222位碱基存在二态性(A或G),这3个位点为单核苷酸多态性(SNP)位点,分别称之为SNP1、SNP2和SNP3,其中SNP1是我们新发现的多态性位点,SNP2和SNP3为美国国立生物技术信息中心(NCBI)SNP数据库中公布的位点,它们均不改变氨基酸编码.SNP2在人群中可表现为AA纯合、GG纯合或AG杂合3种基因型,在SLE患者中以AG型为主(50%),而在正常人中以GG型为主(75%)(P＜0.05);SNP1和SNP3只在一名男性SLE患者中发现,表现为AG杂合,其余个体均为GG纯合.结论 TLR9基因编码区中的一个单核苷酸多态性与SLE发病相关联.     

系统性红斑狼疮患者Toll样受体9基因多态性的初步研究

目的研究Toll样受体9(TLR9)基因在系统性红斑狼疮(SLE)中是否存在多态性。方法提取26例SLE患者mRNA并逆转录为cDNA,扩增产物经3730 DNA自动测序仪测定TLR9基因序列。结果TLR9 mRNA自起始位点起第1783、2269和3222位碱基存在二态性(A或G),这3个位点为单核苷酸多态性(SNP)位点,分别称之为SNP1、SNP2和SNP3,其中SNP1是我们新发现的多态性位点,SNP2和SNP3为美国国立生物技术信息中心(NCBI)SNP数据库中公布的位点,它们均不改变氨基酸编码。SNP2在人群中可表现为AA纯合、GG纯合或AG杂合3种基因型,在SLE患者中以AG型为主(50%),而在正常人中以GG型为主(75%)(P<0.05);SNP1和SNP3只在一名男性SLE患者中发现,表现为AG杂合,其余个体均为GG纯合。结论TLR9基因编码区中的一个单核苷酸多态性与SLE发病相关联。     

肺结核患者杀伤细胞免疫球蛋白样受体基因多态性分析

目的探讨杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIRs)基因多态性与肺结核(TB)的关系。方法采用序列特异性引物聚合酶链反应(SSP-PCR),分析109例肺结核患者(TB组)和30例健康者(对照组)中14个KIR基因多态性。TB组又分为30例痰涂片抗酸杆菌阳性(SP组)和79例涂片阴性患者(SN组)。结果与对照组比较,SP组KIR2DL5(P=0.007)、2DS1(P=0.038)、2DS3(P=0.010)、3DS1(P=0.002)阳性率增高,KIR2DS5频率降低(P=0.038);SN组KIR2DL5(P=0.018)、2DS1(P=0.000)、2DS5(P=0.000)、3DS1(P=0.001)阳性率增高;KIR2DS4(P=0.004)和KIR2DS5(P=0.000)频率SP组较SN组升高;患者携带两个及以上活化KIR的频率较对照组明显升高(P=0.013);患者组基因型AJ的频率较对照组显著降低。结论 KIR基因多态性可能与肺结核的易感性有关。     

糖皮质激素对吗啡依赖大鼠脑区阿片μ受体的影响

目的:观察吗啡成瘾大鼠脑区内阿片μ受体的定位分布,研究糖皮质激素(地塞米松)控制阿片戒断症状的分子机制.方法:剂量递增腹腔注射吗啡建立大鼠成瘾模型,给予地塞米松干预,纳洛酮促瘾后观察戒断症状,采用免疫组化实验观察成瘾后阿片μ受体的分布定位变化.结果:吗啡依赖大鼠经地塞米松干预后,由纳洛酮催促戒断症状评分明显低于未经地塞米松处理组;吗啡成瘾后的阿片μ受体在各脑区的表达下调,尤以蓝斑、伏隔核、下丘脑、腹侧被盖区、海马等脑区明显.结论:吗啡成瘾后阿片μ受体在奖赏中枢和海马的表达下降.地塞米松能抑制吗啡依赖大鼠戒断症状及脑区阿片μ受体的表达.     

放射配基法测定大鼠海马μ-阿片受体的方法总结及优化

目的 建立一套安全、经济、可靠的实验条件.为检测大鼠海马μ阿片受体奠定方法学基础.方法 从膜蛋白提取、结合反应体系、孵育温度、孵育时间等方面,对放射配基结合分析的实验条件进行摸索;并从环保、经济的角度考虑,对实验进行了优化.结果 发现当蛋白浓度为1 mg/mL、[3H]DAMGO 0.5～8.0 nmol/L5个浓度点、非标记配基DAMGO浓度为5 μmol/L、4℃孵育过夜的条件下,结果稳定、可靠.结论 该方法经济、可靠、重复性好,且易于掌握、污染少.     

μ型阿片受体参与CFA大鼠慢性炎性痛的外周调控

目的观察大鼠慢性炎性痛时背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)μ型阿片受体(mu opioid receptor,MOR)表达的变化及炎症局部注射MOR激动剂和拮抗剂对痛阈的干预作用,探讨MOR在慢性炎性疼痛中的作用。方法足底注射弗氏完全佐剂(complete freund’s adjuvant,CFA)制备大鼠慢性炎性痛模型,采用免疫组化法检测DRG MOR阳性细胞的表达;经大鼠足跖背部分别注射MOR激动剂、拮抗剂,采用辐射热法检测给药前后大鼠痛阈的变化。结果足底注射CFA诱导出大鼠慢性炎性痛,在造模后第18天,痛阈依然低于正常对照组;免疫组化结果表明,与正常对照组相比,CFA大鼠DRG MOR阳性细胞表达增多(P<0.01);足跖背部注射MOR激动剂减轻CFA大鼠的疼痛,对正常大鼠痛阈无影响;足跖背部注射MOR拮抗剂加重CFA大鼠的疼痛,对正常大鼠痛阈无影响。结论 DRG神经元MOR在慢性炎性痛时表达上调,参与慢性炎性痛的外周调控,可能有助于防止慢性痛的进一步加重。     

吗啡对大鼠尾壳核神经元阿片受体基因表达的影响

目的探讨较长时间给予吗啡对体外培养大鼠尾壳核神经元的μ、δ型阿片受体mRNA表达的影响.方法采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法.结果吗啡可使μ、δ型阿片受体的mRNA水平显著降低(P＜0.01),吗啡作用12h、24h和48 h可使μ型阿片受体mRNA由0h时的94.8%分别降至50%、42.7%和67.2%;而对δ型阿片受体,则只有在24h和48h有明显的抑制作用(P＜0.01),由0h时的95.8%分别降至59.5%和84.5%;吗啡在10-8mol/L时即可引起μ型阿片受体的mRNA水平显著降低,且该抑制效应在10-8mol/L～10-5mol/L浓度范围内呈明显的剂量依赖性,但对δ型阿片受体则在10-6mol/L时才有效.结论吗啡较长时间作用于原代培养大鼠尾壳核神经元,可明显抑制μ、δ型阿片受体的基因表达.     

吗啡对大鼠尾壳核神经元阿片受体基因表达的影响

目的探讨较长时间给予吗啡对体外培养大鼠尾壳核神经元的μ、δ型阿片受体mRNA表达的影响。方法采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法。结果吗啡可使μ、δ型阿片受体的mRNA水平显著降低(P<0.01),吗啡作用12h、24h和48h可使μ型阿片受体mRNA由0h时的94.8%分别降至50%、42.7%和67.2%;而对δ型阿片受体,则只有在24h和48h有明显的抑制作用(P<0.01),由0h时的95.8%分别降至59.5%和84.5%;吗啡在10-8mol/L时即可引起μ型阿片受体的mRNA水平显著降低,且该抑制效应在10-8mol/L~10-5mol/L浓度范围内呈明显的剂量依赖性,但对δ型阿片受体则在10-6mol/L时才有效。结论吗啡较长时间作用于原代培养大鼠尾壳核神经元,可明显抑制μ、δ型阿片受体的基因表达。     

炎症性肠病Toll样受体的基因多态性及其在不同人群中的分布

目的 了解上海地区汉族炎症性肠病(IBD)患者TLR4(Asp299Gly、Thr399Ile)和TLR2的基因(Arg677Trp、Arg753Gln)多态性,探讨其多态性与IBD的相关性,并与其他国家不同人群中该基因多态性分布进行比较.方法 采用PCR-RFLP法,对IBD组(n=84)和健康对照组(n=135)进行TLR4(Asp299Gly、Thr399Ile)和TLR2的基因(Arg677Trp、Arg753Gln)多态性检测,PCR产物进行核苷酸序列分析.结果 在IBD组和对照组中均未发现TLR4突变基因(Asp299Gly、Thr399Ile)和TLR2突变基因(Arg677Trp、Arg753Gln).结论 TLR4基因(Asp299Gly、Thr399Ile)和TLR2基因(Arg677Trp、Arg753Gln)多态性与上海地区汉族人群IBD易感性无明显相关性;在其他国家不同人群中分布的多态性可能是由种族差异所造成的.     

炎症性肠病Toll样受体的基因多态性及其在不同人群中的分布

目的了解上海地区汉族炎症性肠病(IBD)患者TLR4(Asp299Gly、Thr399Ile)和TLR2的基因(Arg677Trp、Arg753Gln)多态性,探讨其多态性与IBD的相关性,并与其他国家不同人群中该基因多态性分布进行比较。方法采用PCR-RFLP法,对IBD组(n=84)和健康对照组(n=135)进行TLR4(Asp299Gly、Thr399Ile)和TLR2的基因(Arg677Trp、Arg753Gln)多态性检测,PCR产物进行核苷酸序列分析。结果在IBD组和对照组中均未发现TLR4突变基因(Asp299Gly、Thr399Ile)和TLR2突变基因(Arg677Trp、Arg753Gln)。结论TLR4基因(Asp299Gly、Thr399Ile)和TLR2基因(Arg677Trp、Arg753Gln)多态性与上海地区汉族人群IBD易感性无明显相关性;在其他国家不同人群中分布的多态性可能是由种族差异所造成的。     

Toll样受体2亚家族基因单核苷酸多态性与哮喘的关系研究

目的:探讨Toll样受体(Toll-like receptor,TLR)2亚家族基因单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNP)与中国东南方成人哮喘以及其临床表型之间的关系。方法:共招募哮喘患者318例,正常对照352例,TLR2亚家族中共8个SNP使用SNPstream方法进行了基因分型。对各SNP和单倍型与哮喘及其表型进行了分析。结果:运用Logistic回归分析后,发现rs7656411/TLR2突变基因型TT与野生型rs7656411 GG比较能明显降低37%哮喘的发生(校正OR=0.63,95%CI:0.41~0.98,P=0.41),rs7656411 TT+GT与哮喘无明显关系(校正OR=0.77,95%CI:0.54~1.09,P>0.05)。携有rs2381289/TLR6 T等位基因的哮喘患者患过敏性鼻炎的危险度为不携带此等位基因哮喘患者的1.79倍(95%CI:1.10~2.91,P=0.025),然而携有rs11466651/TLR10 A等位基因的哮喘患者患过敏性鼻炎的危险度较不携带此等位基因的哮喘患者下降了51%(95%CI:0.26~0.95,P=0.046)。结论 :TLR2亚家族基因的突变可能在哮喘易感性中起着重要作用。