极低密度脂蛋白受体在泡沫细胞形成中的作用地位

为探讨极低密度脂蛋白受体在摄取富含甘油三酯的脂蛋白及泡沫细胞形成中的作用，在体外实验中，将极低密度脂蛋白、β极低密度脂蛋白及低密度脂蛋白分别与小鼠腹腔巨噬细胞孵育24及48h后，检测细胞内甘油三酯及总胆固醇的含量，油红O染色观察泡沫细胞的形成，半定量逆转录聚合酶链反应检测极低密度脂蛋白受体、LRP及极低密度脂蛋白受体的mRNA表达变化。结果发现，三种脂蛋白与巨噬细胞均能升高细胞内甘油三酯、总胆固醇含量；极低密度脂蛋白受体受极低密度脂蛋白、β极低密度脂蛋白的刺激表达上调，低密度脂蛋白受体表达下调，LRP表达略有上调。在稳定表达极低密度脂蛋白受体细胞中的实验表明，极低密度脂蛋白受体介导对富含甘油三酯的脂蛋白的摄取在胞内脂质聚集及泡沫细胞形成过程中具有重要作用。     

胰淀素及肾上腺髓质素与骨代谢关系的研究进展

胰淀素及肾上腺髓质素属于降钙素/降钙素基因相关肽家族成员,有相似的二级结构,均可促进骨合成代谢。分子生物学研究显示,降钙素受体、降钙素受体样受体及受体活性调节蛋白等相关分子可能是它们的受体,而蛋白激酶A、蛋白激酶C及细胞外信号调节激酶与其胞内信号转导有关。临床研究发现血浆胰淀素水平在骨质疏松患者体内下降。作为新发现的骨代谢调节因子,它们将成为治疗代谢性骨病的一类新型药物。     

氧化型和正常极低密度脂蛋白对猪主动脉平滑肌细胞脂类堆积的不同影响

为了观察氧化型及正常极低密度脂蛋白对血管平滑肌细胞内脂类堆积的不同影响，探索平滑肌细胞摄取氧化型极低密度脂蛋白的受体途径，用200mg/L的氧化型及正常极低密度脂蛋白与猪主动脉平滑肌细胞温育48h后，细胞内甘油三酯含量分别为对照组的3．2倍和10．6倍（P〈0．01），且两个实验组之间相比，差异也有显著性意义（P＜0．01）；细胞内总胆固醇明显升高（P＜0．05）．但是两个实验组之间无显著差异（P＞0．05）。荧光素异硫氰酸酯标记的氧化型极低密度脂蛋白结合试验表明；平滑队细胞可通过低亲和力受体途径可饱和性地摄取完整的氧化型极低密度脂蛋白（Kd＝48．82mg／L，Bmax＝2067μg／g）。与正常极低密度脂蛋白相比（Kd＝37．17mg／L，Bmax＝2596μg／g），Kd值升高，Bmax值减小。竞争抑制实验表明，氧化型极低密度脂蛋白、正常极低密度脂蛋白及正常低密度脂蛋白均对荧光素异硫氰酸酯标记的氧化型极低密度脂蛋白的结合摄取表现出明显的竞争作用（50％），而乙酰化低密度脂蛋白仅能抑制10％。提示氧化型极低密度脂蛋白通过低密度脂蛋白受体和／或极低密度脂蛋白受体途径进入平滑肌细胞。     

β-Arrestins在胰岛素/胰岛素样生长因子-1信号转导中的作用

β-Arrestins是G蛋白耦联受体信号转导通路的负调节因子,越来越多的证据表明,β-arrestins也能作用于细胞内的多种信号分子,调节胰岛素/胰岛素样生长因子-1(IGF-1)信号转导通路.在胰岛素的刺激下,β-arrestin 2能够募集蛋白激酶B(Akt)和酪氨酸激酶Src到胰岛素受体,从而调节胰岛素介导的糖代谢效应;而β-arrestin 1则与胰岛素受体底物-1(IRS-1)竞争性结合泛素连接酶Mdm2,从而减少IRS-1的泛素化和降解,促进磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)通路的信号转导.在IGF-1介导的信号转导通路中,β-arrestin 1结合并介导了IGF-1受体(IGF-1R)的内吞,促进胞外信号调节激酶活化,正性调节丝裂原活化蛋白激酶通路.此外,β-arrestin 1与IGF-1R相耦联后,能越过信号分子IRS-1而激活PI3K,进而活化Akt,表现出对P13K途径的正性调控作用.     

Raf蛋白激酶与大肠癌的关系研究进展

细胞表面的外来刺激可引起一系列胞内信号，对促进细胞增值、分化和凋亡起重要的生理作用。而信号转导途径中的某个环节异常，可引起细胞异常增殖和细胞外基质过多集聚，这是肠道炎症和肿瘤的病理基础。促分裂原蛋白活化激酶（mitogen—activated protein kinases，MAPKs）是连接细胞膜表面受体和基因表达的重要信号调节酶，已发现哺乳动物肠道组织细胞内至少存在4种MAPKs，即ERK／MAPK（或称p44／42MAPK）、c-Jun氨基末端激酶（JNK1／JNK2），p38MAPK（α，β）和ERK5／BMK。     

血管紧张素Ⅱ对血管平滑肌细胞钙化的影响及信号通路

目的在钙化大鼠主动脉血管平滑肌细胞上观察血管紧张素Ⅱ对钙化的影响及其信号通道。方法用β磷酸甘油制备钙化的大鼠血管平滑肌细胞,再以血管紧张素Ⅱ,血管紧张素Ⅱ1型受体阻断剂缬沙坦,选择性蛋白激酶A或蛋白激酶C抑制剂等干预,通过Von Kossa染色及检测钙含量、碱性磷酸酶活性、骨钙素浓度和核心结合因子a1 mRNA表达来探讨血管紧张素Ⅱ对钙化的影响及其信号通道。结果血管紧张素Ⅱ增加钙化大鼠血管平滑肌细胞的钙含量、碱性磷酸酶活性、骨钙素浓度和核心结合因子a1 mRNA表达(P<0.05);而血管紧张素Ⅱ1型受体阻断剂和选择性蛋白激酶C抑制剂可阻断血管紧张素Ⅱ对血管平滑肌细胞的钙含量、碱性磷酸酶活性、骨钙素浓度和核心结合因子a1 mRNA表达的影响(P<0.05)。结论血管紧张素Ⅱ可促进β磷酸甘油诱导的血管平滑肌细胞钙化,其途径是通过血管紧张素Ⅱ1型受体,胞内信号途径是蛋白激酶C核心结合因子a1途径。     

缺氧—复氧诱导ECV304细胞与中性粒细胞粘附的分子机制

为探讨缺氧-复氧诱导人脐静脉内皮细胞ECV304与中性粒细胞粘附的信号转导机制，以缺氧-复氧诱导粘附为模型，采用比色法检测粘附率，流式细胞术检测ECV304细胞表面粘附分子E选择素、细胞问粘附分子1的表达，Western blot法检测ECV304细胞亲环素A、磷酸化细胞外信号调节激酶、总细胞外信号调节激酶、磷酸化D70核糖体S6激酶、总p70核糖体S6激酶蛋白的表达。结果发现，经缺氧-复氧处理后，ECV304细胞E选择素、细胞间粘附分子1的表达上调，其表面中性粒细胞粘附增加。总细胞外信号调节激酶、总p70核糖体S6激酶蛋白表达无明显改变，亲环素A蛋白表达明显上调，细胞外信号调节激酶和p70核糖体S6激酶显著活化。亲环素A抑制剂环孢霉素A以及亲环素A反义寡核苷酸均明显减轻缺氧-复氧诱导的细胞外信号调节激酶和p70核糖体S6激酶激活，显著减少ECV304细胞与中性粒细胞粘附。p70核糖体S6激酶阻断剂雷帕霉素显著抑制p70核糖体S6激酶的激活，中性粒细胞与ECV304细胞的粘附亦明显减少。细胞外信号调节激酶信号通路特异性阻断剂PD98059亦显著抑制ECV304细胞与中性粒细胞粘附。结果提示，亲环素A-细胞外信号调节激酶-p70核糖体S6激酶信号通路介导缺氧-复氧诱导的ECV304细胞与中性粒细胞粘附。     

κ阿片受体激动通过钙调神经磷酸酶和胞外信号调节激酶信号抑制异丙肾上腺素诱导的乳鼠心肌肥大

目的探讨κ阿片受体(κ-OR)激动抑制异丙肾上腺素(Iso)诱导的乳鼠心肌细胞肥大的信号转导机制。方法利用体外培养模型,以Iso 10μmol/L诱导心肌细胞肥大,观察κ-OR激动剂U50488 H1μmol/L的作用,并进一步探索在钙调神经磷酸酶(CaN)特异性抑制剂环孢菌素A(CsA)、细胞外信号调节激酶(ERK)抑制剂U0126、L型钙通道阻滞剂维拉帕米及β肾上腺素受体阻断剂普萘洛尔存在的情况下,κ-OR的激活对心肌肥大的影响。Lowry法测心肌细胞蛋白含量;消化分离法及计算机图像分析系统测细胞体积;采用Till阳离子测定系统,以Fura-2/AM为荧光探针,观察胞内[Ca2+]i瞬间变化;Western blot法测CaN、ERK表达。结果U50488 H1μmol/L可以明显抑制Iso诱导的心肌蛋白含量增加、体积增大和胞内[Ca2+]i瞬间变化的增高,其抑制程度与CsA、U0126、维拉帕米及普萘洛尔相似;U50488 H可以抑制Iso诱导的CaN表达增加和ERK磷酸化增加;CaN抑制剂CsA可以抑制Iso诱导的ERK磷酸化增加,ERK抑制剂U0126可以抑制Iso诱导的CaN表达增加。结论κ-OR...     

氧化型极低密度脂蛋白诱导小鼠腹腔巨噬细胞凋亡

探讨氧化型极低密度脂蛋白诱导小鼠腹腔巨噬细胞凋亡的作用。应用低温超速离心法分离健康人血浆极低密度脂蛋白，用CuCl2氧化得到氧化型极低密度脂蛋白。琼脂糖凝胶电泳观察巨噬细胞凋亡DNA断裂“梯状”图谱；流式细胞仪和二苯胺法分别测定凋亡巨噬细胞百分率和：DNA片断百分率；光镜观察凋亡巨噬细胞形态变化。结果发现：①氧化型极低密度脂蛋白能诱导巨噬细胞发生凋亡及DNA断裂；②抗氧化剂二甲基硫脲能部分抑制氧化型极低密度脂蛋白诱导的：DNA断裂；③核转录因子核因子kB抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲酸盐可完全抑制氧化型极低密度脂蛋白诱导的DNA断裂。提示氧化型极低密度脂蛋白诱导巨噬细胞凋亡可能是动脉粥样硬化形成机制之一；氧化型极低密度脂蛋白诱导巨噬细胞凋亡的作用可能与自由基和激活核因子kB有关。     

PI3K-Akt/PKB信号通路与胰岛β细胞功能

磷脂酰肌醇3激酶-蛋白激酶B／Akt（P13K-AkL／PKB）介导β细胞的生存通路近来较受关注。P13K-Akt／PKB信号通路是细胞内重要的信号转导通路，与细胞生长、增殖、分化、凋亡等密切相关。P13K-Akt／PKB信号通路激活通过下游效应分子促进β细胞增殖、生长调节、增强β细胞抗凋亡功能，改善β细胞生存。调节该通路P13K、Akt／PKB及其上下游靶位点，可能为2型糖尿病的防治提供广阔前景。     

PPAR-γ对巨噬细胞ACAT-1表达的影响及可能的信号途径

目的 探讨过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPAR-γ)对巨噬细胞中酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶-1(ACAT-1)表达影响及可能参与的信号途径.方法 在RPMI1640培养基中培养人单核细胞(THP-1),加入佛波酯(PMA)培养48 h,细胞贴壁呈巨噬细胞样分化.在高浓度胰岛素状态下,分别加入PPAR-γ的配体罗格列酮和胰岛素信号途径阻滞剂[细胞外信号调节激酶(ERK)抑制剂PD98059、p38促分裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)抑制剂SB203580和c-Jun氨基末端激酶(JNK)抑制剂SP600125],采用Western-blot法检测巨噬细胞ACAT-1蛋白水平,实时定量PCR法检测ACAT-1 mRNA水平.结果 在高胰岛素状态下,给予罗格列酮干预后ACAT-1 mRNA和蛋白表达均降低;再加入SB203580后ACAT-1 mRNA和蛋白表达较加入罗格列酮时均增加.结论 p38MAPK途径参与了PPAR-γ抑制ACAT-1的表达,并发挥抗动脉粥样硬化的作用.     

TGF-β／smad信号通路在糖尿病肾病中的作用

转化生长因子-β(TGF—β)在糖尿病肾病发病中起重要作用。近年来研究发现丝／苏氨酸激酶受体(smad)蛋白在丝／苏氨酸型受体的信号转导中起重要作用。TGF-β与膜上特异受体结合后，经smad蛋白转导至核内，调节基因的转录。TGF-β/smad信号通路可通过介导足细胞损伤、系膜细胞增生、基底膜增厚、上皮细胞-间充质转化、肾细胞凋亡最终导致肾小球硬化及肾间质纤维化。对TGF-β／smad信号通路的研究为防治糖尿病肾病提供了一个新思路。     

抑制脂筏对肝细胞生长因子受体介导的信号跨膜转导作用的影响

目的 探讨脂筏在肝细胞生长因子受体介导的信号跨膜转导中的作用.方法 采用甲基-β-环糊精(MβCD)处理HepG2细胞,以干扰脂筏的形成,然后加入人工重组肝细胞生长因子以活化其受体.采用Western blot技术及计算机扫描定量分析分别检测MβCD处理组和对照组细胞磷脂酶Cγ1(PLCγ1)/二脂酰甘油/蛋白激酶C信号通路、磷脂酰肌醇-3-激酶/磷脂酰肌醇依赖的蛋白激酶/蛋白激酶B信号通路和有丝分裂原激活的蛋白激酶(MAPK)信号通路活性的变化.结果 (1)用MβCD处理细胞后,细胞PLCγ1磷酸化程度降低,为对照组的65%(P=0.022);胞浆中PLCγ1含量增加,为对照组的1.75倍(P=0.017);膜结合的PLCγ1减少,为对照组的70%(P=0.037).(2)用MβCD处理细胞后,胞浆中蛋白激酶B含量减少,为对照组的62%(P=0.028),同时膜结合的蛋白激酶B磷酸化程度降低,为对照组的86%(P=0.041).用MβCD处理细胞同时可抑制磷脂酰肌醇依赖的蛋白激酶由胞浆向质膜的转移及活化.(3)MβCD处理对MAPK信号通路,包括细胞外信号调节蛋白激酶/MAPK信号通路、p38/MAPK信号通路和C-Jun N末端蛋白激酶/MAPK信号通路均无显著的影响.结论 抑制脂筏形成可下调肝细胞生长因子/c-Met对PLCγ1/二脂酰甘油/蛋白激酶C信号通路和磷脂酰肌醇-3-激酶/磷脂酰肌醇依赖的蛋白激酶/蛋白激酶B信号通路的活化.     

内脂素激活PI3K-Akt和MAPK-ERK1/2信号通路抑制MIN6细胞凋亡

探讨内脂素对胰岛β细胞株MIN6细胞信号通路和棕榈酸诱导细胞凋亡的影响,并探讨其分子机制.人重组内脂素呈剂量和时间依赖性促进MIN6细胞细胞外信号调节激酶(ERK)1/2和蛋白激酶B(Akt)的磷酸化,抑制棕榈酸诱导的MIN6细胞凋亡(P<0.05或P<0.01).激活磷脂酰肌醇3激酶(PBK)-Akt和丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)-ERK1/2信号通路是内脂素抑制MIN6细胞凋亡的分子机制之一.     

Raf/MEK/ERK信号转导通路在糖尿病肾病发生发展中的作用

丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）广泛存在于真核细胞内,在上游蛋白Ras蛋白、蛋白激酶C作用下将细胞外有关信号转导到细胞核内部而引起多种细胞反应。Raf／MAPK／细胞外信号调节激酶通路是MAPK家族中的重要一员,糖尿病状态下高血糖、血流动力学异常、肾素一血管紧张素系统激活、内皮素（ET）-1以及转化生长因子（TGF）-β、血小板源性生长因子等均可使之激活,诱导肾小球系膜细胞肥大,细胞外基质合成增加,降解减少,从而参与和促进糖尿病肾病的发生、发展。     

极低密度脂蛋白与胰岛素抵抗患者的脂代谢紊乱

极低密度脂蛋白(VLDL)是机体转运内源性甘油三酯的主要形式,可分为大颗粒的VLDL1和小颗粒的VLDL2。VLDL血浓度升高是胰岛素抵抗(IR)脂代谢紊乱的主要特征,以VLDL1升高为主。其升高的机制与IR密切相关,包括:磷脂酰肌醇3激酶信号转导途径受损,固醇调节元件结合蛋白-C表达上调,游离脂肪酸大量内流,载脂蛋白(apo)B-100稳定性增加、肠内apoB-48水平升高,脂蛋白脂酶活性下降及低密度脂蛋白受体清除途径受损,导致VLDL生成过度、清除减弱,从而使其血浓度升高。     

衰老细胞相关信号传递系统

细胞信号传递系统是一个复杂的调控网络。激素、神经递质、细胞(生长 )因子等生物信息通过ｃＡＭＰ(α受体 )、磷脂酰肌醇 (β受体 )、丝氨酸 /酪氨酸蛋白激酶 (ＴＰＫ)、及离子通道、离子泵等途径发挥生物效应。β受体通过激活Ａ激酶而诱导细胞分化 ,抑制生长增殖 ;α受体及ＴＰＫ则通过激活Ｃ激酶、Ｇ激酶、Ｃａ2 + ＣａＭ激酶 ,并通过酪氨酸蛋白激酶的激活 ,诱导核内多种生长调控因子 ,如ｆｏｓ、ｍｙｃ基因表达 ,从而促进细胞生长增殖。衰老对细胞信号传递系统的影响主要表现在对细胞周期进程及与细胞生长增殖相关的转录调控因子功能的…     

胰岛β细胞胰岛素分泌的反馈调节

胰岛β细胞分泌的胰岛素可反馈调节其自身的分泌。胰岛素通过存在于β细胞的胰岛素受体信号转导系统直接作用于β细胞,抑制其内质网上的Ca2 -ATP酶活性,使胞浆内钙离子浓度升高,激活蛋白激酶C,诱导胰岛素分泌,对β细胞分泌起正反馈调节;还可通过旁分泌作用于β细胞周围的δ细胞及α细胞,对其自身分泌进行负反馈调节。同时,胰岛素反馈调节途径还受白细胞介素 -1β、肿瘤坏死因子-α、儿茶酚胺以及瘦素等多种因素影响。     

Ghrelin的抗细胞凋亡作用

Ghrelin是生长激素促分泌素受体的内源性配体,主要在胃部产生,也广泛分布于其他组织.具有多种生物学效应.近年来研究发现ghrelin可抑制多种细胞的凋亡,包括神经细胞、心肌细胞、骨细胞、内皮细胞、胰岛细胞及小肠上皮细胞等,其中可能涉及到腺苷酸环化酶/cAMP/蛋白激酶A、磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B、细胞外信号调节激酶1/2等信号转导途径.这方面的研究有一定的临床价值,将来有望应用于疾病的诊断和治疗,本文就ghrelin的抗细胞凋亡作用及其机制作一综述.     

Ghrelin的抗细胞凋亡作用

Ghrelin是生长激素促分泌素受体的内源性配体,主要在胃部产生,也广泛分布于其他组织.具有多种生物学效应.近年来研究发现ghrelin可抑制多种细胞的凋亡,包括神经细胞、心肌细胞、骨细胞、内皮细胞、胰岛细胞及小肠上皮细胞等,其中可能涉及到腺苷酸环化酶/cAMP/蛋白激酶A、磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B、细胞外信号调节激酶1/2等信号转导途径.这方面的研究有一定的临床价值,将来有望应用于疾病的诊断和治疗,本文就ghrelin的抗细胞凋亡作用及其机制作一综述.