RGD序列合成肽抑制喉癌细胞增殖的实验研究

目的 研究含RGD序列合成肽对人喉癌Hep-2细胞株增殖能力的影响,并对其可能机制进行初步探讨.方法 化学合成RGD肽,免疫荧光技术检测RGD肽与Hep-2细胞结合能力;MTF法检测不同浓度RGD肽对喉癌细胞增殖能力的影响;免疫细胞荧光技术检测RGD肽处理前后喉癌细胞整合素αv蛋白表达.结果 RGD肽与喉癌Hep-2细胞有特异性结合作用,经RGD肽处理后的喉癌细胞增殖能力显著降低,整合素αV表达明显降低.结论 作为整合素αv受体拮抗剂,RGD肽对喉癌细胞的增殖能力有明显的抑制作用,为喉肿瘤基因治疗方面提供一个新靶点.     

血管活性肠肽瘤

血管活性肠肽瘤是一种分泌血管活性肠肽（ＶＩＰ）的胰岛细胞瘤;临床罕见,我院最近收治１例,现报告如下。１临床资料男,６７岁,以软瘫原因待查收入院。该患于入院前的２～３个月无诱因出现稀水样便,每日３～８次,无腹痛、无里急后重及脓血便,无恶心呕吐,食欲可。...     

游离脂肪酸对大鼠胰岛分泌功能和胰岛细胞凋亡的影响研究

目的：研究游离脂肪酸对体外培养SD大鼠胰岛功能和胰岛细胞凋亡的影响并探讨可能机制。方法：取健康雄性SD大鼠胰岛原代分离培养,分为6组,培养1d：NC1组（5．6mmol／L葡萄糖）、FFA1组（0．25mmol／L）、FFA2组（0．5mmol／L）;培养3d：NC2组（5．6mmol／L葡萄糖）、FFA3组（0．25mmol／L）、FFA4组（0．5mmol／L）;每组6个样本,每个样本20个胰岛。采用RT—PCR扩增胰岛素、PDX-1、Bax、Caspase-3基因mRNA表达,TUNEL法检测胰岛细胞凋亡率,放射免疫法检测胰岛素水平。结果：①FFA1、FFA2组Insulin、PDX-1基因表达量、胰岛素分泌较NC1组明显下降,FFA1、FFA2组凋亡基因Bax、Caspase-3表达量及胰岛细胞凋亡率较NC1组明显升高,差异有统计学意义（P〈0．05）;②FFA3、FFA4组Insulin、PDX-1基因表达量、胰岛素分泌较NC2组明显下降,FFA3、FFA4组凋亡基因Bax、Caspase-3表达量及胰岛细胞凋亡率较NC2组明显升高,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：游离脂肪酸抑制体外培养SD大鼠胰岛细胞的胰岛素分泌功能,其可能机制是FFA抑制胰岛素基因、PDX-1基因的合成,刺激胰岛细胞凋亡基因Bax、Caspase-3表达,并导致胰岛细胞凋亡,最终导致胰岛细胞分泌功能下降。     

胰高血糖素样肽-1改善胰岛功能的研究进展

胰高血糖素样肽-1(GLP-1)通过保护胰岛生存环境,对抗细胞因子对细胞的损伤,改善细胞对葡萄糖敏感性,刺激胰岛素释放,抑制胰高血糖素分泌,为糖尿病治疗提供新的研究方向。文章对GLP-1的生物学活性及其在改善胰岛功能方面的机制及近年研究进展进行综述。     

胰高糖素样肽1对大鼠胰岛功能影响的研究

目的:研究胰高糖素样肽-1(GLP-1)对大鼠胰岛功能的影响,探讨GLP鄄1在糖尿病治疗中的作用。方法:①GLP鄄1(10nmol/L)与原代培养的大鼠胰岛共孵育1天、3天和5天后,分别行葡萄糖刺激下的胰岛素分泌试验(GSIS),在试验的0、10、20及60min依次收集细胞培养上清液,放免法检测胰岛素水平的变化。或与GLP鄄1共育1天、3天、5天后分别收集各组胰岛细胞,RT鄄PCR法检测各组胰岛素基因表达的变化。②分别予不同浓度的GLP鄄1(0、1、10、102和103nmol/L)与大鼠胰岛细胞瘤细胞RINm5f共育24h,及GLP鄄1(10nmol/L)与RINm5f共育24h、48h及72h,MTT法检测各组A值变化。结果:①与GLP鄄1共育后,大鼠胰岛基础胰岛素分泌量增加(P<0.05),GSIS试验中各时间点胰岛素分泌量均升高(P<0.05),胰岛素基因的表达量呈时间依赖性升高,即予GLP鄄1刺激5天后,胰岛素基因表达量最高;②与GLP鄄1共育后,随GLP鄄1浓度的增高及刺激时间的延长,RINm5f细胞MTT法中A值呈剂量及时间依赖性的增加。结论:GLP鄄1可促进大鼠胰岛细胞胰岛素基因的表达和蛋白的分泌,对大鼠胰岛细胞亦有明显的促增殖作用。     

灌注法提取大鼠胰岛及其体内外分泌功能的实验研究

目的:评估胶原酶灌注法提取大鼠胰岛体内外分泌功能.方法:Wistar大鼠以质量浓度0.05%V型胶原酶胆管灌注提取大鼠胰岛.DTZ、AO/PI染色计数及纯度、活性.葡萄糖刺激试验及体内肾被膜下移植检测其体内外分泌活性.结果:以0.05%的胶原酶提取大鼠胰岛有良好体外分泌活性,胰岛移植可使糖尿病大鼠血糖水平获不同程度下降,部分血糖水平正常.结论:灌注法提取胰岛数量多、活性良好,有良好葡萄糖刺激反应性及移植活性.     

中药对胰岛功能保护的新进展

目前,对糖尿病的治疗仍以西药为主。西药治疗糖尿病存在低血糖等多种不良反应,不能阻止胰岛功能的进行性衰竭,部分药物还存在继发性失效的情况。近年来,一些中药被发现具备降糖作用,对胰岛功能具有一定的保护作用,且不良反应较轻,易于被患者接受,因此临床对中药治疗糖尿病寄予厚望。文中根据中药对胰岛功能保护的机制,从减少氧化应激,增加胰岛β细胞数量及促进β细胞分泌,减轻胰岛素抵抗、增进胰岛素敏感性等方面进行综述,阐述中药在糖尿病治疗中的独特作用。     

RGD肽固定对胶原黏附细胞性能的影响

目的将促黏附分子RGD肽（精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸）固定于胶原材料，检测其对细胞黏附性的影响。方法实验分4组（n=12）：耦联组采用化学交联剂Sulfo-LC—SPDP，使含RGD肽的GRGDSPC肽与胶原支架结合；混合组将GRGDSPC肽与胶原直接混合后涂层；以及单纯胶原涂层组和未涂层孔板组。采用X射线光电子能谱法（XPS）对材料作表面分析。MTT试验检测种植于材料表面的大鼠肌成纤维细胞的细胞黏附效率。结果耦联组的XPS谱图检测到硫元素，证明已将RGD肽化学结合于胶原材料表面。MTT法检测显示，耦联组RGD肽固定胶原后细胞黏附效率明显高于其它各组，且呈时间和肽浓度依赖性。结论RGD肽对胶原的表面修饰，可提高生物源性支架的细胞黏附性，促进组织工程心脏瓣膜构建。     

胰淀素致大鼠胰岛细胞功能损伤的实验研究

OBJECTIVE: To investigate the effect of amylin on the functions of pancreatic islet cells in vitro. METHODS: In vitro cultured pancreatic islet cells from neonatal rats were used for studying the effects of amylin at different concentrations on insulin secretion, and DNA content and insulin contents in the cells. RESULTS: Insulin secretion was significantly inhibited when amylin concentration was higher than 10 micromol/L (P < 0.01). After incubation with 10 micromol/L amylin for 2 h, insulin secretion of islet cells was dose-dependently inhibited by to 16.7 mmol/L glucose stimulation (P < 0.01). The DNA and insulin contents in the cells rose significantly when amylin concentration was higher than 10 micromol/L as compared with the control group (P < 0.01). CONCLUSION: Amylin at concentrations higher than 10 micromol/L can remarkably inhibit insulin secretion and release induced by 16.7 mmol/L glucose stimulation.     

山萘酚对脂肪酸诱导的胰岛微血管内皮功能损伤的保护效应及多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶1的作用机制

目的 探讨山萘酚对脂肪酸诱导的胰岛微血管内皮功能损伤的保护效应及多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶1(PARP-1)的作用.方法 以小鼠胰岛微血管内皮MS-1细胞为研究对象,将细胞分为正常对照组、溶剂(DMSO)对照组、脂肪酸组(0.25 mmol/L软脂酸+0.5mmol/L油酸)、山萘酚组(50 μmol/L)、脂肪酸+山萘酚组、PARP-1抑制剂(8μmol/LBYK204165)+脂肪酸组和PARP-1抑制剂+脂肪酸+山萘酚组,分别检测各组细胞活力、凋亡水平、一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)及氧化应激相关指标的改变.结果 脂肪酸处理后,MS-1细胞存活率下降,细胞凋亡率升高(P＜0.05);同时,脂肪酸也增加了细胞内NO的含量,升高了总NOS(tNOS)、诱导型NOS(iNOS)和结构型NOS(cNOS)的活性(P＜0.05);促使脂质过氧化产物丙二醛(MDA)含量增加,抗氧化物质谷胱甘肽(GSH)和超氧化物歧化酶(SOD)的水平下降(P＜0.05);并增强了PARD-1、iNOS和cNOS的mRNA和蛋白表达水平(P＜0.05).而山萘酚干预后,各项指标的水平均得以改善(P＜0.05);而且,利用PARPP-1抑制剂BYK204165预处理1h,山萘酚对脂肪酸的拮抗效应更为显著,各项检测指标与正常对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 脂肪酸可直接引起胰岛微血管内皮功能损伤,而山萘酚具有拮抗脂肪酸毒性的作用,且抑制PARP-1的表达水平能增强山萘酚的保护效应.     

含RGD肽CP9修饰的聚乙烯亚胺复合物的理化特性及其转基因功能的研究

目的：构建含精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸（RGD）肽CP9修饰的聚乙烯亚胺（PEI），观察其理化特性和转基因功能。方法：通过琥珀酰亚胺-3-（2-嘧啶二硫）丙酸酯（N-Succinimidyl-3-（2-pyridyldithio）]propionate，SPDP）将CP9偶联到PEI上，合成新型转基因载体CP9-PEI。用^1H-NMR和FT-IR验证CP9的偶联；用凝胶电泳阻滞实验、电镜和粒径检测，观察CP9-PEI浓缩质粒DNA的能力以及浓缩质粒DNA后形成的转染颗粒形态和粒径；通过CP9-PEI在人肝癌细胞株HepG2中的转染实验来验证CP9对PEI的转染效率的影响；通过游离CP9肽的竞争抑制实验验证CP9-PEI的整合素靶向功能。结果：CP9成功偶联到PEI上；CP9-PEI能有效浓缩质粒DNA，形成的转染颗粒形态为圆形或类圆形，在N／P比为10时，粒径约为200nm。CP9-PEI的转染效率是PEI的2倍，游离CP9肽能抑制CP9-PEI的转染效率。结论：修饰了CP9的PEI能有效增加转染效率，具有整合素的靶向能力，是一种具有应用前景的转基因载体。     

不同类型脂肪酸饮食对肠促胰岛素及胰岛功能的影响

目的：探讨不同类型脂肪酸饮食对糖耐量正常受试者肠促胰岛素及胰岛功能的影响。方法选择2011年6月至2015年6月60例体检正常的受检者,按照数字列表法随机分为两组各30例,食用标准饮食洗脱1周,其中给予高饱和脂肪酸饮食(HSF)组为HSF组,给予高不饱和脂肪酸饮食(HMF)组为HMF组,比较两组受检者进餐前(T0)、进餐后60 min (T1)、120 min (T2)、180 min (T3)、240 min (T4)的血糖、胰岛素(FIns)、抑胃多肽(GIP)、胰高血糖素样肽-1(GLP-1)、胰岛β细胞功能指数(HOMA-β)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)以及胰岛素早时相分泌功能指数(ΔI30/ΔG30)。结果①两组受检者进餐后的FPG、GIP、GLP-1均呈升高后缓慢下降走势,T1、T2、T3、T4各时间段比较差异均有统计学意义(P<0.05),HMF组各时间段GIP、GLP-1均高于HSF组,差异均有统计学意义(P<0.05);②两组受检者进餐后FIns均呈升高后缓慢下降走势,各时间段比较差异均有统计学意义(P<0.05),HMF组T1、T2、T3、T4各时间段FIns均低于HSF组,差异均有统计学意义(P<0.05);③HSF组与HMF组受检者ΔI30/ΔG30分别为(47.08±10.32)、(42.55±9.83),差异无统计学意义(P>0.05),HSF组AUCins 240 min/AUCglu 240 min为(3.65±0.56),明显高于HMF组的(2.86±0.46),差异有统计学意义(P<0.05)。结论高不饱和脂肪酸饮食促进GIP、GLP-1分泌作用最明显,HSF可促进更多胰岛素的分泌,胰岛β细胞功能指数也明显增高。     

谷氨酸脱羧酶抗体滴度与糖尿病患者胰岛功能关系的研究

目的 探讨谷氨酸脱羧酶抗体（GAD-Ab）与糖尿病胰岛功能的关系及对胰岛功能衰减速度的影响.方法 对比137例糖尿病患者的胰岛功能检查及谷氨酸脱羧酶抗体（GAD-Ab）筛查,比较谷氨酸脱羧酶抗体（GAD-Ab）阳性组12例与阴性组125例的发病年龄、体重指数、胰岛功能-C肽及糖化血红蛋白等指标,并进行1年追踪随访.结果 ①GAD-Ab阳性组发病年龄、体重指数明显低于阴性组（P ＜ 0.01）;②空腹及餐后2 h C肽值较阴性组低（P ＜ 0.01）,糖化血红蛋白（HbA1C）明显高于阴性组（P ＜ 0.01）;③1年内GAD-Ab阳性者胰岛功能衰减明显,并与GAD-Ab滴度、发病年龄、体重指数及用药密切相关.结论 对糖尿病患者进行GAD-Ab检测,能预测胰岛细胞损伤进展情况,有利于协助糖尿病的确切分型,对于GADA阳性者,尽早使用胰岛素强化治疗,可以减轻或延缓自身免疫性胰岛炎的进程,对于改善患者预后具有重要的临床意义.     

2型糖尿病家系正常血糖一级亲属腰围与胰岛功能的关系

目的 探讨2型糖尿病家系正常血糖一级亲属不同腰围者胰岛素抵抗(IR)情况和胰岛B细胞功能状况.方法 测定50例2型糖尿病家系血糖正常一级亲属及30例健康人的腰围、臀围、腰/臀比、空腹胰岛素水平,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)和胰岛B细胞功能指数(HOMA-B),分析不同腰围组之间胰岛素抵抗和胰岛B细胞功能的关系.结果 一级亲属组内腰围正常组和中心性肥胖组HOMA-IR水平均明显高于对照组,随着腰围的增加,IR程度加重.而HOMA-B在各组之间差异无统计学意义.结论 一级亲属人群早期以胰岛素抵抗为主,而胰岛B细胞分泌功能基本正常.腰围是影响FDR胰岛素抵抗的独立危险因素.     

2型糖尿病患者胰岛β细胞功能、炎性因子与心功能的相关性研究

目的:分析2型糖尿病(T2DM)患者胰岛β细胞功能、炎性因子与心功能的关系。方法:选取T2DM患者1 879例,包括首次住院1 515例和重复住院364例。比较首次住院T2DM患者不同胰岛β细胞功能指数(HOMA-β)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、红细胞沉降率(ESR)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平下E/A比值<1的患病率,采用Logistic回归分析E/A比值<1的相关危险因素,并对其中重复住院患者进行COX回归分析。结果:与心脏舒张功能正常患者比较,首次住院的心脏舒张功能异常患者在性别、年龄、病程、腰围(WC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、hs-CRP、ESR、3 h C肽(3 h-CP)方面比较差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。随着HOMA-β、TNF-α水平升高,各组心脏舒张功能异常率均未见明显变化(P>0.05);随着hs-CRP水平、ESR的升高,心脏舒张功能异常情况总体呈上升趋势,且各组间心脏舒张功能异常率比较差异有统计学意义(P<0.01)。Logistic回归分析显示,hs-CRP、ESR是T2DM患者心脏舒张功能异常的影响因素。COX回归分析显示,ESR对重复住院的T2DM患者有重要影响,可作为预测心脏舒张功能异常的危险因素。结论:T2DM患者炎性浸润状态及部分炎性因子可能与心脏舒张功能异常的发生、发展有关,并对患者生存结局有重要影响。     

初诊2型糖尿病患者采用短期胰岛素泵强化治疗对其胰岛功能及其氧化应激的影响

目的:探讨短期胰岛素泵强化治疗对初诊2型糖尿病患者胰岛功能及其氧化应激的影响。方法:将63例初诊2型糖尿病患者分为观察组和对照组,观察组患者应用胰岛素泵强化治疗,对照组患者选择常规皮下注射法。检查并比较两组患者治疗前后一般血清指标,胰岛细胞功能及氧化应激指标。结果:治疗后,观察组患者FPG、2hPPG、HbA1c及FCP水平改善明显优于对照组(P<0.05)。观察组患者AUG、HomaB及I30/G30水平显著升高,HomaIR水平显著降低,其改善明显优于对照组(P<0.05)。观察组患者MDA水平均显著降低,SOD水平均显著升高,其改善明显优于对照组(P<0.05)。结论:短期胰岛素泵强化治疗可以明显改善患者各项指标,改善胰岛功能,降低氧化应激水平。     

骨化三醇对不同VitD水平糖尿病前期患者胰岛功能影响的研究

目的 探讨骨化三醇对不同VitD水平糖尿病前期患者胰岛功能的影响.方法 选取2018年1～8月我院糖尿病前期人群为研究组(n=91)、健康人群为对照组(n=30),测血清25(OH)VitD、空腹血糖及胰岛素.研究组予骨化三醇0.25μg/d治疗,3个月后复测空腹血糖及胰岛素,计算治疗前后HOMA-IR、HOMA-IS...     

供体凋亡细胞输注对大鼠胰岛移植物功能的影响

目的 研究供体凋亡细胞预输注对大鼠胰岛移植后胰岛移植物功能的影响.方法 应用STZ制备SD大鼠糖尿病模型,以直线加速器照射诱导供体Wistar大鼠脾细胞凋亡.经阴茎背静脉输注供体凋亡脾细胞,7d后于糖尿病SD大鼠双侧肾包囊进行同种异体胰岛移植,通过测定血糖变化、血清胰岛素水平以及胰岛移植物存活时间来观察胰岛移植物的功能状态.结果 预输注供体凋亡脾细胞能显著延长同种异体胰岛移植物存活时间(中位生存时间达31 d),并较长时间地维持受体鼠血清胰岛素处于较高水平.结论供体凋亡细胞预输注能够显著延长同种异体胰岛移植物的存活时间,能够较长时间维持胰岛移植物的正常功能状态.