血管内皮生长因子-C蛋白和mRNA在胆管癌中的表达及其意义

目的 检测胆管癌和癌旁0.5 cm胆管组织及手术切缘的正常胆管组织血管内皮生长因子(VEGF)-C蛋白及mRNA的表达,探讨其在胆管癌发生发展中的作用.方法 应用免疫组织化学过氧化物酶标记链霉卵白素法(SP)检测42例胆管癌组织及20例正常组织中VEGF-C蛋白的表达,同时应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测42例术中所取的新鲜的胆管癌、17例同个体癌旁胆管黏膜和20例正常胆管组织中VEGF-C的mRNA表达,并与临床资料进行相关分析.结果 正常胆管组织、癌旁组织、胆管癌组织中VEGF-C mRNA相对表达量分别0.6105±0.0577、0.6270 ±0.0664、0.6930±0.1078,VEGF-C mRNA在3组之间表达呈上升趋势(P＜0.05).VEGF-C蛋白表达趋势同其相对应的基因表达趋势一致,即VEGF-C mRNA在胆管癌组织中高表达(P＜0.05).胆管癌组织、正常胆管组织中VEGF-C表达的阳性率分别为83.33%和30.00%.结论 VEGF-C基因转录和蛋白可能参与了胆管癌的发生发展过程.     

增殖细胞核抗原蛋白和mRNA在胆管癌中的表达及其意义

目的 检测胆管癌和癌旁0.5cm胆管组织及手术切缘的正常胆管组织增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白及mRNA的表达,探讨其在胆管癌发生发展中的作用.方法 应用免疫组织化学过氧化物酶标记链霉卵白素法(SP)检测42例胆管癌组织及20例正常组织中PCNA蛋白的表达,同时应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测42例术中所取的新鲜的胆管癌、17例同个体癌旁胆管黏膜和20例正常胆管组织中的PCNA mRNA表达,并与临床资料进行相关分析.结果 正常胆管组织、癌旁组织、胆管癌组织中PCNA mRNA相对表达量分别0.5605±0.0331,0.5692±0.0408,0.6303±0.0773,PCNA mRNA在3组之间表达呈上升趋势(P<0.05),PCNA蛋白表达趋势同其相对应的基因表达趋势一致,即PCNA mRNA在胆管癌组织中高表达(P<0.05).结论 PC-NA基因转录和蛋白可能参与了胆管癌的发生发展过程.     

法尼酯X受体在胆管癌中的表达特点

目的：探讨法尼酯X受体（farnesoid X receptor,FXR）在人胆管组织中表达及其与胆管癌发生的关系。方法：用免疫组织化学EnVision法检测FXR在12例人胆管癌、5例癌旁阴性切缘及3例正常胆管组织中的表达。采用等级秩和检验统计分析;使用SPSS15．0分析软件包分析数据;P〈0．05为有显著性差异。结果：FXR在胆管癌、阴性切缘和正常胆管组织中均有表达。在癌旁无瘤切缘和正常胆管组织中的表达显著高于癌组织（P〈0．01）,而在癌旁无瘤切缘与正常胆管组织中,表达无显著差异（P〉0．05）。在×400视野下,显示FXR细胞核与细胞浆中均有表达。结论：FXR可能是一个保护性受体,其表达下降是胆管癌形成的机制之一。     

X-盒结合蛋白1、血管内皮生长因子C在肝癌中的表达及意义

目的 检测X-盒结合蛋白1(XBP1),血管内皮生长因子C(VEGF-C)在肝癌组织中的表达,探讨在肝癌发生发展过程中存在未折叠蛋白反应(UPR)的激活.方法 采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测术中取的新鲜42例肝癌标本、15例同个体癌旁1.0cm肝组织和15例正常肝组织中XBP1 、VEGF-C的mRNA表达,应用Western blot法检测57例肝癌组织和正常肝组织标本中XBP1、VEGF-C在蛋白水平的表达.结果 肝癌组织、癌旁肝组织、正常肝组织中XBP1 mRNA相对表达量分别为0.4396±0.0241、0.4152±0.0252、0.4095±0.0149,XBP1 mRNA在3组之间的表达呈下降趋势(P＜0.05);肝癌组织、癌旁肝组织、正常肝组织中VEGF-C mRNA相对表达量分别为0.4447±0.0335、0.4195 ±0.0334、0.4019±0.0259,VEGF-C mRNA在3组之间的表达呈下降趋势(P＜0.05). 在肝癌组织和正常肝组织中均有两种蛋白的表达,但肝癌组织中的表达明显高于正常肝组织.结论 肝癌组织中XBP1、VEGF-C mRNA和蛋白的表达一致,均为高表达.     

X盒结合蛋白1、免疫球蛋白结合蛋白在肝癌组织中的表达及意义

目的 检测X盒结合蛋白1( XBP1)、免疫球蛋白结合蛋白(Bip)在肝癌组织中的表达,探讨其在肝癌生长中的作用机制.方法 采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测术中所取的42例肝癌标本、15例同个体癌旁1.0 cm肝组织和15例正常肝组织中XBP1、Bip的mRNA表达.应用Western blot法验证57例肝癌组织和正常肝组织标本中XBP1、Bip在蛋白水平的表达.结果 肝癌组织、癌旁肝组织、正常肝组织中XBP1 mRNA相对表达量分别为0.4396±0.0241、0.4152±0.0252、0.4095±0.0149,XBP1 mRNA在3组之间的表达呈下降趋势(P＜0.05);肝癌组织、癌旁肝组织、正常肝组织中Bip mRNA相对表达量分别为0.4772±0.0401、0.4332±0.0488、0.4301±0.0398,Bip mRNA在3组之间的表达呈下降趋势(P＜0.05).实验对肝癌组织和正常肝组织中XBP1和Bip的蛋白表达进行了定性验证:在肝癌组织和正常肝组织中均有两种蛋白的表达,但肝癌组织中的表达明显高于正常肝组织.结论 在肝癌的生长过程中存在未折叠蛋白反应(UPR)的激活.在肝癌组织中XBP1、Bip mRNA和蛋白的表达一致,均呈高表达.这些基因和蛋白表达的改变可能与肝癌的发生、生长及转移密切相关.     

免疫结核球蛋白、血管内皮生长因子-C在肝癌组织中的表达及意义

目的 检测免疫结核球蛋白(Bip)、血管内皮生长因子(VEGF)-C在肝癌组织中的表达,探讨其在肝癌生长中的作用机制.方法 采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测术中所取新鲜的42例肝癌标本、15例同个体癌旁1.0 cm肝组织和15例正常肝组织中Bip、VEGF-C的mRNA表达,应用Western blot方法验证57例肝癌组织和正常肝组织标本中Bip及VEGF-C在蛋白水平的表达.结果 肝癌组织、癌旁肝组织、正常肝组织中Bip mRNA相对表达量分别为0.4772±0.0401、0.4332±0.0488、0.4301±0.0398,Bip mRNA在3组之间的表达呈下降趋势(P＜0.05).肝癌组织、癌旁肝组织、正常肝组织中VEGF-C mRNA相对表达量分别为0.4447±0.0335、0.4195±0.0334、0.4019±0.0259,VEGF-C mRNA在3组之间的表达呈下降趋势(P＜0.05);实验对肝癌组织和正常肝组织中Bip和VEGF-C的蛋白表达进行定性验证:在肝癌组织和正常肝组织中均有两种蛋白的表达,但肝癌组织中的表达明显高于正常肝组织.结论 在肝癌的生长过程中存在未折叠蛋白反应(UPR)的激活.在肝癌组织中Bip、VEGF-C mRNA和蛋白的表达一致,均呈高表达.这些基因和蛋白表达的改变可能与肝癌的发生、生长及转移密切相关.     

肝外胆管癌组织中HBx mRNA的原位检测和临床病理意义

目的 检测肝外胆管癌和癌旁胆管组织中乙型肝炎病毒X基因(HBx)mRNA的表达,了解HBV感染与胆管癌发生间的关系,明确HBx蛋白和基因在胆管癌发生中的意义。方法酶切质粒凝胶回收HBx基因片段,地高辛标记HBx DNA探针,原位杂交检测胆管癌及癌旁胆管石蜡标本中HBx mRNA的表达,并与临床病理资料进行相关分析。结果71例肝外胆管癌组织中HBx mRNA表达阳性率为61％(43／71);而39例癌旁胆管组织中的HBx mRNA表达阳性率仅为18％(7／39),且阳性信号全部见于伴有中重度不典型增生的胆管上皮细胞内。统计分析显示胆管癌组织中HBx mRNA表达和分布与临床病理参数无相关性,但HBx蛋白和基因的表达呈正相关。结论 肝外胆管癌组织中可以检测到HBx mRNA表达,HBV感染及其基因整合在胆管癌发生中有一定意义。     

WWOX基因在肝细胞癌及手术切缘中的表达意义

目的 探讨WWOX基因在肝细胞癌(HCC)和切缘中的表达状况和术后复发及预后的关系及其临床意义.方法 用免疫组化方法检测76例肝癌组织及其切缘组织、20例正常肝组织中WWOX基因蛋白产物表达水平,用TUNEL法检测76例肝细胞癌的细胞凋亡水平,结合临床病理指标和术后生存率进行分析.结果 WWOX基因蛋白产物在HCC中定位于细胞核,在癌旁组织中定位于细胞核与细胞浆.肝癌组织中WWOX基因蛋白表达指数为(35.2±20.1)%,低于癌旁组织和正常肝组织(P<0.05).并与肝癌的细胞凋亡率下降、PCNA增高、肿瘤较大、门脉分支浸润、低分化高恶性度以及术后复发等指标有关(P<0.05).肝癌切缘ww0X基因蛋白表达水平与术后复发率和生存率有关(P<0.05),而与1 cm以上切缘距离无关.结论 肝癌组织和手术切缘存在低WWOX表达和定位异常,并可能与影响肿瘤进展、预后的生物学行为有关.肝癌组织和手术切缘WWOX表达水平测定有望成为评估肝癌进展等生物学行为和预后的有用指标之一,并有助于确定较为安全的根治切除分子切缘.     

CXC趋化因子受体2在肝细胞癌中的表达及意义

目的 探讨CXC趋化因子受体2(CXCR2)在肝细胞癌中的表达及与肝细胞癌发生、发展的关系.方法 采用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blot检测42例肝细胞癌组织及相应癌旁组织和23例正常肝组织中CXCR2 mRNA和蛋白表达水平,分析表达水平与肝细胞癌生物学特征的关系.结果 肝细胞癌组织、癌旁组织和正常肝组织中CXCB2 mRNA和蛋白表达分别为(1.18±0.32、0.83±0.23和0.72±0.23)和(1.78±0.20、0.98±0.13和0.90±0.18),同癌旁组织和正常肝组织比较,肝细胞癌组织中CXCR2 mRNA和蛋白表达水平明显升高(P<0.05).肝内转移、门静脉癌栓和低分化组中CXCR2 mRNA和蛋白表达水平分别为(1.37±0.26、1.45±0.34、1.31±0.28)和(1.87±0.20、1.93±0.13、1.86±0.18),无肝内转移、无门静脉癌栓和高分化组CXCR2 mRNA和蛋白表达水平分别为(1.08±0.33、1.08±0.27、1.06±0.33)和(1.73±0.18、1.73±0.20、1.71±0.19),差异有统计学意义(P<0.05).CXCR2蛋白表达与TNM分期相关,Ⅲ-Ⅳ期和Ⅰ-Ⅱ期表达水平分别为1.86±0.20和1.72±0.19,差异有统计学意义(P<0.05).结论 CXCR2在肝细胞癌组织中高表达,其高表达可能与肝细胞癌发生、侵袭和转移相关.     

RNA干扰对肝癌细胞CDC20表达的影响

目的 观察RNA干扰(RNAi)对肝癌细胞株Hepal-6中CDC20表达的抑制作用.方法 设计针对小鼠肝癌细胞Hepal-6 CDC20 mRNA的小干扰RNA(siRNA),以阳离子脂质体包埋后转染鼠肝癌细胞Hepal-6,转染48 h后,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot方法 检测Hepal-6细胞CDC20 mRNA及蛋白质表达的变化.结果 siRNA各组与正常对照组和阴性对照组比较,CDC20 mRNA的表达均受明显抑制,并呈剂量依赖性(在100、50、25 nmol/L浓度下,Mixed siRNA组与正常对照组mRNA表达比较:0.370±0.058比0.840±0.044,0.480±0.081比0.900±0.068,0.830±0.062比1.010±0.054,各组P＜0.01);CDC20蛋白质的表达亦均受抑制(siRNA-1、siRNA-2、siRNA-3及Mixed组与N-Cont或Blank组蛋白质表达比较:0.482±0.035/0.402±0.003/0.479±0.026/0.446±0.017比0.826±0.03l或0.835±0.024,各组P均＜0.01).结论 CDC20 siRNA可显著抑制小鼠肝癌细胞Hepal-6中CDC20 mRNA和蛋白质的表达.     

WWOX在胆管癌组织中的表达及其对胆管癌细胞生物学行为的影响

目的 研究抑癌基因WWOX表达对胆管癌RBE细胞生长的影响.方法 采用免疫组化方法检测2005年7月至2010年5月54例胆管癌组织、12例正常胆管组织中WWOX蛋白表达水平.将携有WWOX基因的真核表达载体转染胆管癌细胞系RBE细胞(RBE/WWOX组),筛选稳定转染的细胞并扩增培养,以转染空载质粒(RBE/con组)及未经转染(自然生长组)的RBE细胞作为对照.荧光定量RT-PCR和Western Blot法检测WWOX在RBE细胞中的表达情况;噻唑蓝实验检测转染前后各组细胞增殖活性;FCM法检测各组细胞的凋亡;JC-1染色法检测细胞线粒体膜电位;Transwell小室侵袭实验检测各组肿瘤细胞侵袭力;荧光定量RT-PCR和Western Blot法检测胆管癌细胞bcl-2、bax、FasL、caspase-3表达的变化.结果 WWOX在胆管癌中的表达低于正常胆管组织(P＜0.05),蛋白表达的缺失频率为40.7%.建立稳定表达WWOX基因的RBE/WWOX细胞株,mRNA及蛋白表达明显增加.转染后的RBE细胞噻唑蓝吸光度明显下降(P＜0.05).与自然生长组和RBE/con组比较,FCM显示RBE/WWOX组细胞的凋亡率明显增高(P＜0.01),JC-1显示转染后的线粒体膜电位下降(P＜0.01),侵袭实验显示转移至下室滤膜的细胞数明显减少(P＜0.01).荧光定量RT-PCR结果显示bcl-2 mRNA表达是自然生长组的0.12倍,bax、caspase-3 mRNA分别是自然生长组的4.72和2.57倍,FasL mRNA的表达无明显变化;Western Blot法检测发现bcl-2蛋白的表达降低,bax、caspase-3蛋白表达升高,FasL无明显变化.结论 抑癌基因WWOX通过诱导胆管癌细胞凋亡发挥抗肿瘤增殖的作用.

Abstract：

Objective To study the effects of anti-oncogene WWOX on cell growth of cholangiocarcinoma. Methods The expression of WWOX protein was detected with immunohistochemical method-SP in 54 patients with cholangiocarcinoma from July 2005 to May 2010 and 12 samples of normal bile duct tissues. The recombinant WWOX eukaryotic expression plasmid was introduced into RBE cells by liposome-mediated transfection and positive cell clones were selected and amplified. The mRNA and protein expressions in RBE cells stably transfected with WWOX were investigated by quantitative RT-PCR and Western Blot before and after transfection. Cell proliferation was tested by MTT, cell apoptosis was assessed by FCM, the alteration of mitochondria membrane potential (△Ψm) was detected by JC-1 staining method,cell invasion was determined by Transwell chamber assay. The expression change of bcl-2, bax, FasL,caspase-3 mRNA and protein was detected by quantitative RT-PCR and Western Blot. Results The expression of WWOX protein was significantly lower in cholangiocarcinoma than that in normal bile duct tissues and loss of WWOX protein expression was found in 40. 7% of cholangiocarcinoma specimens ( P ＜0.05). RBE cells with stable transfection of WWOX were established. Quantitative RT-PCR showed that the expression of WWOX mRNA was significantly enhanced and Western Blot demonstrated that WWOX protein expression was markedly increased. MTT showed that WWOX gene transfection significantly decreased the proliferation of RBE cells ( P ＜ 0. 05 ). FCM analysis showed that the apoptosis rate after transfection was significantly promoted [( 1.1 ± 0. 6 ) % vs. ( 1.7 ± 0. 5 ) % vs. ( 35.2 ± 4. 4 ) %, P ＜ 0. 01], JC-1 staining method indicated that the experimental group was loss of △Ψm [( 12. 6 ± 1.9 ) % vs. ( 13.6 ± 1.8 ) % vs.(48. 7 ± 2. 9 ) %, P ＜ 0. 01], transwell chamber assay showed that the number of transfected cells that passed the transwell membrane was significantly less than those of control groups ( 77 ± 6 vs. 72 ± 8 vs. 48 ±6, P ＜0. 01 ). Quantitative RT-PCR and Western blotting showed that the expression of bcl-2 mRNA and protein was markedly decreased and the expression of bax, caspase-3 were significantly increased. There was no significant change in the expression of FasI. Conclusion WWOX exerts its antitumor effect against proliferation through inducing cell apoptosis in cholangiocarcinoma.     

RASSF1基因在肝外胆管癌组织中转录表达及其临床意义的研究

目的　探讨RASSF1基因3种不同转录本在肝外胆管癌中的表达及其临床意义。方法用RT PCR的方法检测 48 例肝外胆管癌组织及 12 例癌旁正常组织中 RASSF1A、RASSF1B 和RASSF1C mRNA的表达情况。结果　RASSF1A 在肝外胆管癌组织中的转录表达缺失高达68 75%,其缺失与肝外胆管癌的淋巴转移(P< 0 05)及 TNM 分期(P< 0 01)相关。RASSF1B、RASSF1C的表达与肝外胆管癌的组织学类型、分化程度、淋巴转移不相关。结论　RASSF1 基因 3种转录本在胆管癌组织中的表达存在明显差异,转录本 RASSF1A与肝外胆管癌淋巴转移及 TNM分期相关,是一种肝外胆管癌的候选抑癌基因。     

食管鳞癌与细胞因子信号转导负调控因子3及其DNA甲基化的关系

目的 检测食管鳞癌(ESCC)组织中细胞因子信号转导负调控因子3(SOCS3)的DNA甲基化、mRNA及蛋白表达水平,探讨其在食管鳞癌发生、发展、浸润和转移中的作用.方法 采用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)、Real-Time聚合酶链反应(PCR)和Western blot法分别检测43例食管鳞癌组织中SOCS3的DNA甲基化、mRNA和蛋白表达水平,并与相应的癌旁正常食管组织进行对照研究,分析其与临床病理参数的关系.结果 (1)食管鳞癌组织SOCS3 DNA甲基化的阳性率(79.1%)明显高于癌旁组织(14.0%,P＜0.01);(2)食管鳞癌组织SOCS3 mRNA相对表达强度比值(0.53±0.30)明显低于癌旁组织(1.15±0.44,P＜0.01),食管鳞癌组织中甲基化组的SOCS3 mRNA表达(0.45±0.24)显著低于非甲基化组(0.86±0.29,P＜0.05);(3)食管鳞癌组织SOCS3蛋白表达(1.66±0.22)显著低于癌旁组织(1.83±0.15,P＜0.01),食管鳞癌组织中甲基化组SOCS3蛋白表达(1.61±0.21)显著低于非甲基化组(1.87±0.15,P＜0.01);(4)在TNM分期中Ⅲ期组表达均低于Ⅰ～Ⅱ期组(P＜0.05),伴有淋巴结转移组表达也都低于无淋巴结转移组(P＜0.05),未发现其在性别、年龄、家族史、吸烟史中有明显差异(P＞0.05);(5)食管鳞癌组织中SOCS3mRNA表达及其蛋白表达水平与肿瘤分化级别呈正相关(0.301＜r＜1,P＜0.05),与TNM分期、淋巴结转移呈负相关(-1＜r＜-0.301,P＜0.05).结论 食管鳞癌组织中SOCS3 DNA甲基化阳性率高,导致SOCS3基因表达下调,与食管鳞癌的分化、浸润和转移密切相关.     

神经生长因子对胆管癌细胞67-kDa层黏连蛋白受体表达的影响

目的 研究外源性神经生长因子(NGF)对QBC939细胞67-kDa层黏连蛋白受体(67LR)表达的影响,探讨胆管癌神经浸润的机制.方法 (1)细胞免疫荧光染色法检测QBC939细胞表面NGF高亲和力酪氨酸激酶受体A(TrkA)表达情况.(2)用不同浓度的重组人神经生长因子(β-NGF)对QBC939细胞进行处理,采用Real-Time PCR和Western blot检测QBC393细胞67LR mRNA和蛋白表达情况.实验分为对照组、β-NGF(1、10、100、200μg/L)组.(3)根据上述实验结果选定最佳β-NGF浓度,再加入不同浓度的TrkA阻断剂K252a,再次检测QBC939细胞67LR mRNA和蛋白表达情况.实验分为对照组、100μg/Lβ-NGF组、K252a(100、200、300 nmol/L)阻断组.数据采用单因素方差分析,两两比较采用LSD法.结果 (1)QBC939细胞膜上TrkA表达明显.(2)对照组和β-NGF(1、10、100、200 μg/L)组QBC939细胞67LRmRNA和蛋白表达水平分别为0.35±0.06、0.38±0.14、0.62±0.14、0.90±0.08、0.70±0.10和0.32±0.05、0.50±0.09、0.69±0.13、0.93±0.07、0.76±0.07,两者比较,差异有统计学意义(F=22.4,14.6,P＜0.05),其中100ng/ml β-NGF作用最明显(t=19.0,21.0,P＜0.05).(3)对照组、100 μg/L β-NGF组、K252a(100、200、300 nmol/L)阻断组QBC939细胞67LR mRNA和蛋白表达水平分别为0.35±0.10、0.88±0.14、0.80±0.08、0.67±0.12、0.43±0.07和0.41±0.10、0.84±0.10、0.76±0.04、0.61±0.09、0.50±0.12,两者比较,差异有统计学意义(F=14.1,8.9,P＜0.05),其中经300 nmol/L K252a处理后,QBC939细胞67LR mRNA和蛋白表达水平与对照组比较,差异无统计学意义(t=1.02,0.85,P＞0.05).结论 外源性NGF通过与其高亲和力受体TrkA结合,可增强QBC939细胞67LR表达,这可能是促进胆管癌细胞延外周神经纤维间隙浸润的机制之一.

Abstract：

Objective To investigate the effects of nerve growth factor (NGF) on the expression of 67-kDa laminin receptor (67LR) in human bile duct carcinoma QBC939 cells, and study the possible mechanism of perineural invasion and metastasis of bile duct carcinoma. Methods ( 1 ) The expression of a high-affinity receptor for NGF, TrkA, was detected by immunofluorescence staining. ( 2 ) QBC393 cells were pretreated by β-NGF at different concentrations ( 1, 10, 100,200 μg/L), and then the mRNA and protein expressions of 67LR were examined by Real-Time PCR and Western blot assay. QBC939 cells were divided into control group and β-NGF (1, 10, 100,200 μg/L) groups. (3) The ideal concentration of β-NGF was selected according to the results of previous tests, and then the mRNA and protein expressions of 67LR were re-examined by adding specific TrkA inhibitor K252a at different concentrations ( 100,200,300 nmol/L). QBC939 cells were divided into control group, β-NGF 100 μg/L group and K252a ( 100,200,300 nmol/L) groups. All data were analyzed by one-way analysis of variance or LSD-test. Results (1) A strong expression of TrkA was detected in the membrane of QBC939 cells. (2) The mRNA and protein expressions of 67LR in QBC939 cells were 0.35 ± 0.06 and 0. 32 ± 0.05 in the control group, 0.38 ±0.14 and 0.50 ±0.09 in the β-NGF 1 μg/L group, 0.62 ±0.14 and 0. 69 ±0. 13 in β-NGF 10 μg/L group, 0.90 ± 0.08 and 0.93 ± 0.07 in the β-NGF 100 μg/L group, and 0. 70 ± 0. 10 and 0. 76 ±0.07 in the β-NGF 200 μg/L group, there were significant differences among the five groups (F = 22. 4, 14. 6,P ＜0.05). The mRNA and protein expressions of 67LR in the β-NGF 100 μg/L group were significantly higher than those in the control group ( t = 19. 0, 21.0, P ＜ 0. 05 ). (3) The mRNA and protein expressions of 67LR in the QBC939 cells were 0.35 ±0.10 and 0.41 ±0.10 in the control group, 0. 88 ±0. 14 and 0.84 ±0.10 in the β-NGF 100 μg/L group, 0.80±0.08 and 0.76 ±0.04 in the K252a 100 nmol/L group, 0.67 ±0.12 and 0.61 ± 0.09 in the K252a 200 nmol/L group, and 0. 43 ± 0.07 and 0. 50 ± 0. 12 in the K252a 300 nmol/L group, there were significant differences among the five groups ( F = 14. 1, 8. 9, P ＜ 0.05 ). There were no significant differences in the mRNA and protein expressions of 67LR between the K252a 300 nmol/L group and the control group (t =1.02, 0. 85, P＞0.05). Conclusion In bile duct carcinoma cells, NGF enhances the expression of 67LR by combining with TrkA, which might be the mechanism of NGF mediating perineural invasion of bile duct carcinoma.