克拉玛依地区的利什曼病 Ⅸ.白蛉自然感染前鞭毛体的鉴定

本文报道新疆克拉玛依地区的大沙鼠洞、旷野及人房等不同场所内白蛉自然感染利什曼原虫的情况、蛉体内原虫对实验动物的致病特征以及用利什曼原虫McAb的dot-ELISA法对白蛉自然感染的利什曼前鞭毛体的检测结果;并结合4年来对当地白蛉的生态和大沙鼠体内的利什曼原虫对白蛉的感染性等一系列的调查研究,证实蒙古白蛉和安氏白蛉为克拉玛依大沙鼠体内利什曼原虫的传播媒介。     

亚历山大白蛉人工感染不同地区杜氏利什曼原虫的实验

本实验旨在了解新疆砾漠内的亚历山大白蛉对不同地区的杜氏利什曼原虫的适应性,进而推断外来的黑热病患者进入该地带后能否引起传播。 一、材料与方法 (一) 原虫来源新疆的杜氏利什曼原虫(LD)系1977年从巴楚干旱荒漠黑热病疫区内由硕大白蛉吴氏亚种(Phlebotomus major wui)体内分离获得,甘肃的系1988年从文县一例幼儿黑热病患者体内分离获     

亚历山大白蛉传播黑热病的研究

在新疆吐鲁番煤窑沟黑热病疫区内,亚历山大的白蛉数量大,亲人,叮咬杜氏利什曼病鼠后,前鞭毛体在蛉胃内大量繁殖并进入喙部。野外和人房内该种白蛉具有杜氏利什曼原虫的自然感染。传播试验使正常仓鼠发生内脏利什曼病,从而首次证实亚历山大白蛉可作为黑热病的传播媒介。并对煤窑沟疫区的性质,作了讨论。     

三种白蛉人工感染沙鼠利什曼原虫的实验

用白蛉属的三种白蛉去叮咬感染沙鼠利什曼原虫的BALB/c鼠和长爪沙鼠的皮肤病变,表明副蛉亚属的亚历山大白蛉是沙鼠利什曼的良好昆虫宿主;该种原虫在阿蛉亚属的中华白蛉长管亚种体内发育良好,但仅进展到白蛉的咽基部;而在劳蛉亚属硕大白蛉吴氏亚种体内,原虫停滞在胃内。作者分析了我国沙鼠利什曼分布区内白蛉的种类和本文人工感染实验的结果,指出副蛉亚属蛉种是沙鼠利什曼原虫的主要媒介,而硕大白蛉吴氏亚种作为媒介的可能性很小。     

用利什曼原虫感染白蛉的一种简易方法

以往对白蛉人工感染利什曼原虫均采用白蛉叮咬感染动物或病人皮肤损害处的方法,这种方法既不简便又昂贵,为此作者建立了一种快速而简便的新技术:将在37℃下连续培养的小鼠巨噬细胞接种不同种的利什曼原虫前鞭毛期。实验用的虫种为热带利什曼原虫、杜氏利什曼原虫、巴西利什曼原虫巴拿马亚种、墨西哥利什曼原虫亚马逊亚种、墨西哥利什曼原虫墨西哥亚种以及恰加斯利什曼原虫等。媒介昆虫白蛉为静食白蛉与长须白蛉。     

应用单克隆抗体鉴定利什曼原虫的斑点ELISA试验

本文报道用单克隆抗体鉴定自蛉体内自然感染利什曼原虫的虫种,获得较好效果,其中L9E4单克隆抗体对新疆杜氏利什曼前鞭毛体抗原的最高阳性滴度达1:655 360;对吐鲁番亚历山大白蛉自_(10)及自_(11)的阳性滴度为1:81 920,比IFA法提高3～20倍。此法敏感,可用作鉴别白蛉体内利什曼原虫虫株的一种手段.     

首次从新疆民丰县吴氏白蛉中分离出利什曼原虫

目的从新发现的新疆民丰县黑热病疫区分离利什曼原虫。方法用镜检法调查白蛉自然感染利什曼原虫状况,以接种敏感动物和培养基方法分离利什曼原虫。结果捕捉白蛉282只,检查173只吴氏白蛉(♀),查出感染前鞭毛体白蛉9只,分别培养接种9只灰仓鼠,其中2只接种第二天死亡;分离出2株利什曼原虫,灰仓鼠出现典型的内脏利什曼病症状。结论分离自吴氏白蛉的利什曼原虫致使灰仓鼠表现出典型的内脏利什曼病症状,分离到的利什曼原虫对研究塔里木盆地的利什曼原虫进化具有重要的意义。     

用非放射性标记杜氏利什曼原虫全虫DNA探针筛选自然感染的白蛉

印度比哈尔邦内脏利什曼病十分流行。传统的解剖白蛉调查自然感染方法,效率低且无法检测轻度感染的白蛉。分子生物学技术为此提供了快捷、特异的方法。本文讨论了非放射性地高辛标记的杜氏利什曼原虫全虫DNA探针检测白蛉感染利什曼原虫的情况。     

新疆伽师县荒漠型内脏利什曼病流行区媒介白蛉监测

为了解新疆伽师县内脏利什曼病流行区媒介白蛉的动态,于2016年6月15-30日白蛉季节高峰期间,以伽师县卧里托格拉克乡荒漠农业区为监测点,采用人房外墙捕蛉管人工捕集法、野外悬挂白布灯照诱引法和黏性油纸法捕集白蛉,观察白蛉密度、鉴定白蛉种类并观察雌蛉消化道自然感染利什曼原虫(Leishmania)前鞭毛体情况。结果共采集白蛉497只,经鉴定均为吴氏白蛉(Phlebotomus wui)。其中,雌蛉占75.3%(374/497),雄蛉占24.7%(123/497),雌雄比例3.04∶1。人房外墙捕集白蛉182只,密度为30.3只/人工小时;野外捕集白蛉259只,密度为43.2只/人工小时;居民庭院内捕集白蛉56只,密度为5.6只/张。剖检的109只吴氏白蛉雌蛉中,自然感染利什曼原虫前鞭毛体的2只,自然感染率为1.8%。提示卧里托格拉克乡白蛉密度甚高,存在利什曼原虫感染。     

内蒙古白蛉种类分布的调查

1980-1982年,在内蒙古不同景观地带的21个旗(县)内对白蛉种类进行了调查。仅在6个旗(县)查见6种白蛉,即白蛉属的中华白蛉,硕大白蛉吴氏亚种,蒙古白蛉,安氏白蛉和亚历山大白蛉;司蛉属的微小司蛉新疆亚种。对不同景观地带的调查结果表明,白蛉主要分布在干旱荒漠地带,平原和山丘地区的数量很少,而在半荒漠(沙地)及干旱草原地带则未查见白蛉。     

新疆砾漠地带的黑热病

在新疆天山山麓的一些砾漠地(?)有黑热病散在发生,其流行病学特征为:1.疫灶局限在与山地衔接的砾漠地带;2,患者主要是10岁以内的儿童,成人偶可获得感染;3.发病季节集中在冬春两季;4.媒介为副蛉亚属的亚历山大白蛉。犬未介入传播,推测当地的黑热病是野生动物源性疾病,但疫源动物尚待阐明。     

应用单克隆抗体检测白蛉体内的前鞭毛体

以杜氏利什曼前鞭毛体为靶抗原的L12G9单克隆抗体(McAb),检测人工感染杜氏利什曼原虫的白蛉。当空腹雌蛉吸取病鼠血液后,分别饲养4、6、8和10d后解剖。吸血后4d,前鞭毛体较少。阳性率仅为15.9％;而10d,其感染程度较重,可获100％的阳性检出率。其阳性率与白蛉的感染程度呈正相关。另外又证明应用单克隆抗体检测时,原虫数不能低于11×10~7/ml,宜选择胃血完全消化后的白蛉,方可得到良好的效果。如捕获的白蛉,胃内前鞭毛体较少,则可经NNN基培养后,再进行检测,亦可获得同样效果。     

Phlebotomus (Paraphlebotomus) alexandri: a probable vector of Leishmania infantum in Iran

The incidence of human visceral leishmaniasis (VL) caused by Leishmania infantum, which is endemic in several parts of Iran, has recently increased in the Nourabad-Mamassani district of Fars province, in the south of the country. Between 2003 and 2005, 12,688 sandflies were caught in this focus, using CDC miniature light traps, sticky traps and aspirators, in an attempt to identify the main vector of L. infantum. When 120 of the parous, female Phlebotomus (Paraphlebotomus) alexandri caught were individually checked for Leishmania infection, in an assay based on PCR and kinetoplast minicircle primers (LINR4 and LIN17), five (4.2%) of the flies were found to be infected with L. infantum. Thirty-nine (32.5%) of the 120 blood-fed Ph. alexandri checked in an ELISA were found positive for human blood. Since Ph. alexandri was the third-most common species caught (representing over 17% of the total catch), was clearly anthropophilic, and was not infrequently infected with L. infantum, it is probably an important vector in the Nourabad-Mamassani focus. Although other sandfly species have been found naturally infected with promastigotes in Iran, Ph. alexandri is the first that has been proven to harbour L. infantum in the country.     

南疆地区不同类型黑热病流行状况调查

南疆地区不同类型黑热病流行状况调查显示,荒漠型黑热病流行区人群利什曼素阳性率为68.24%（101/148）,砾漠型流行区为20.97%（39/186）。解剖白蛉1 475只,其中吴氏白蛉1 271只,占86.17%;长管白蛉193只,占13.08%;亚历山大白蛉11只,占0.75%。在3只吴氏白蛉和1只亚历山大白蛉体内共检出4株自然感染的前鞭毛体。荒漠型和砾漠型流行区分别检出1名黑热病患者。南疆地区黑热病流行基本状况和媒介白蛉的种类及分布未发生明显变化。     

克拉玛依地区的利什曼病Ⅻ.利什曼原虫单克隆抗体对大沙鼠及白蛉体内利什曼原虫的检测

本文报道建立的抗杜氏利什曼L.donovani,抗硕大利什曼L.major,抗热带利什曼L.tropica及抗新疆克拉玛依大沙鼠体内的利什曼原虫的4种单克隆抗体(McAb),以免疫荧光法的交叉反应显示出有较强的特异性,应用McAb的dot-ELISA试验,对新疆大沙鼠体内分离的利什曼原虫及白蛉自然感染的利什曼原虫前鞭毛体进行检测,证实新疆克拉玛依鼠体、蛉体的利什曼原虫仅与当地大沙鼠体内利什曼原虫制备的McAb呈阳性反应。     

Diagnostic PCR with Leishmania donovani specificity using sequences from the variable region of kinetoplast minicircle DNA

Kala azar or visceral leishmaniasis, a parasitic disease caused by Leishmania donovani, is presently causing an epidemic in the eastern region of India. Diagnosis of kala azar is often complicated. We developed a pair of oligonucleotides suitable as primers from the variable region of a predominant sequence class of minicircles of L. donovani. These primers were used in a nonisotopic polymerase chain reaction and found to be highly specific for the parasites of L. donovani complex. Using these primers, amplification of L. donovani kinetoplast DNA minicircle from the peripheral blood of kala azar patients results in a product of 204 bp. The patient group was comprised of individuals from a highly endemic region of India. We feel that PCR could assess the efficacy of new leishmanicidal drugs under investigation in these patients. PCR could also predict response to therapy which would be useful for both clinical and research applications.     

新疆南部不同类型内脏利什曼病流行区媒介白蛉监测

目的了解新疆南部不同类型内脏利什曼病部分流行区媒介白蛉动态。方法选择库尔勒砾漠地带、喀什古老绿洲农业区和伽师荒漠农业区作为监测点;3种类型监测点采用粘性油纸法、诱蛉灯法、捕蛉管人工捕集法和白布灯照诱引法捕集白蛉;对捕集的白蛉观察密度、鉴定蛉种并检查雌蛉自然感染前鞭毛体。结果喀什、伽师和库尔勒捕蛉管人工捕集法白蛉密度分别为34.83、27.69和0.73只/人工小时;喀什解剖白蛉860只,其中吴氏白蛉占77.6%,长管白蛉占22.4%。伽师解剖白蛉604只,均为吴氏白蛉;库尔勒解剖白蛉11只均为亚历山大白蛉;吴氏白蛉是喀什古老绿洲农业区和伽师荒漠农业区夜间在有灯光的户外和人房外墙活动的优势蛉种;长管白蛉是喀什古老绿洲农业区白天主要在人房内和畜舍内活动的优势蛉种,夜晚也可在人房外墙捕到;亚历山大白蛉是库尔勒砾漠地带的优势蛉种。结论喀什和伽师白蛉密度甚高,应根据各自的特点,采取有效方法控制传播媒介,降低人群内脏利什曼病发病率。     

新发现的内脏利什曼病流行区新疆民丰县Ⅱ. 传播媒介的初步研究

目的 在新发现的流行区新疆塔里木盆地南缘民丰县调查内脏利什曼病（黑热病）的媒介蛉种。方法 在民丰县安迪尔乡雅通古斯村居民点和附近野外采集白蛉,经鉴定后计算蛉种组成和数量比例; 定人、定点、定时观察白蛉数量统计密度;观察白蛉昼夜活动的数量变动;解剖白蛉,分析雌蛉生殖营养周期;检查白蛉有无前鞭毛体自然感染。结果 捕获白蛉1 210只,其中99.17%（1 200/1 210）为吴氏白蛉; 6月上中旬是该蛉季节消长的第一高峰; 生殖营养周期分析表明吴氏白蛉为野生野栖蛉种,夜间活动的白蛉主要在户外吸血,有较强的亲人性;在2只白蛉体内查到自然感染前鞭毛体。 结论 塔里木盆地南缘民丰县安迪尔乡雅通古斯村存在内脏利什曼病传播媒介吴氏白蛉,并有利什曼前鞭毛体自然感染,表明当地存在内脏利什曼病自然疫源地。