克山病患者心肌肠道病毒VP1结构蛋白检测

目的 探讨肠道病毒感染与克山病发病的关系。方法 应用抗柯萨奇B5病毒(Coxsackie B5 virus，CVB5)VP1蛋白单克隆抗体，采用免疫组化方法，检测黑龙江、山东、云南省克山病病区急型、亚急型、慢型、潜在型克山病死亡病例心肌标本83例，风心病10例，冠心病10例，心肌炎21例，扩张型心肌病29例，非病区非正常死亡的正常人10例，病区发病季节非克山病死亡病例13例。结果 克山病83例心肌标本中有74例VP1结构蛋白阳性，阳性率89．2％；风心病、冠心病、非正常死亡健康人VP1阳性检出率均为10％；心肌炎、扩张型心肌病VP1阳性检出率分别为66．7％和70％；病区发病季节非克山病死亡病人VP1阳性检出率为38．5％。结论 来自3省份的各型克山病死亡病例心肌标本中均能检出肠道病毒VP1结构蛋白，克山病的发生与肠道病毒感染高度相关。     

用原位核酸杂交法探讨柯萨奇病毒与克山病的关系

为进一步探讨柯萨奇病毒与克山病的关系，采用柯萨奇Ｂ３病毒（ＣＶＢ３）制备的ｃＤＮＡ探针与黑龙江、山东、云南三省病区克山病尸检心肌组织及胎儿克山病心肌组织的石蜡切片进行了原位核酸杂交，并用脑外伤、ＣＯ中毒等意外死亡健康成人及冠心病、风心病尸检心肌组织和病区、非病区７～８个月引产胎儿心肌组织的石蜡包埋切片作为对照。结果急型克山病８／１３、慢型克山病３４／５０、亚急型克山病２２／２９呈现阳性杂交信号，提示有柯萨奇病毒ＲＮＡ的存在，冠心病２／１５、风心病１／１５、显著低于克山病，而健康成人对照组均为阴性，胎儿克山病一例呈阳性反应，病区引产胎儿心肌组织１０例中有２例也检出柯萨奇病毒ＲＮＡ，而非病区胎心则为阴性。结果提示在一些克山病的发生和发展过程与柯萨奇Ｂ组病毒的感染高度相关。     

用原位核酸杂交技术探讨肠道病毒与急型克山病的关系

目的 探讨肠道病毒(柯萨奇病毒)与吉林省急型克山病的关系。方法 用柯萨奇病毒B3、B4、B5、A9共同序列作寡核苷酸探针对吉林省急型克山病尸捡心肌组织12例及病区与非病区尸捡正常心肌组织各7例进行原位核酸杂交。结果 吉林省急型克山病12例中有11例出现阳性杂交信号，即有肠道病毒RNA存在，阳性率为91．66％，对照组均为阴性。结论 吉林省急型克山病病人心肌组织中有肠道病毒感染，提示急型克山病的发病可能与肠道病毒感染有关。     

克山病患者心肌中肠道病毒VP1抗原的检测

目的为进一步探讨肠道病毒感染与克山病的发病关系.方法应用抗柯萨奇B5病毒的VP1壳蛋白的单克隆抗体,采用免疫组化方法,对黑龙江、山东、云南3省区急型、亚急型、慢性、潜在型克山病患者尸检心肌共83例,风心病10例,冠心病10例,心肌炎21例,扩张型心肌病29例,非病区非正常死亡的正常人10例,病区发病季节非克山病死亡病人13例的尸检心肌进行了检测.结果克山病尸检心肌83例中有74例阳性,阳性率89.2%;风心病、冠心病、非正常死亡健康人的阳性检出率分别为10%,心肌炎,扩张型心肌病的阳性检出率分别为66.7%和70%;病区发病季节非克山病死亡病人心肌阳性检出率为38.5%.结论 3省区各型克山病心肌中均能检出肠道病毒VP1结构蛋白,支持克山病的发生与肠道病毒感染高度相关.     

应用聚合酶链式反应探讨肠道病毒感染与克山病及扩张型心…

用聚合酶链式反应对云南楚雄地区克山病及扩张型心肌病心内膜心肌活检标本各６例和“正常人”心肌标本１６例进行肠道病毒ＲＮＡ的检测。发现１２例患者心肌组织中肠道病毒ＲＮＡ阳性率达５８．３３％，而“正常人”中均为阴性。证实患者心肌组织中存在肠道病毒持续感染，且肠道病毒感染与患者心功能及心肌病理损害密切相关，提示肠道病毒感染在楚雄地区克山病及扩张型心肌病发病中起重要作用。     

应用聚合酶链式反应探讨肠道病毒感染与克山病及扩张型心肌病发病的关系

用聚合酶链式反应对云南楚雄地区克山病及扩张型心肌病心内膜心肌活检标本各６例和＂正常人＂心肌标本１６例进行肠道病毒ＲＮＡ的检测。发现１２例患者心肌组织中肠道病毒ＲＮＡ阳性率达５８．３３％，而＂正常人＂中均为阴性。证实患者心肌组织中存在肠道病毒持续感染，且肠道病毒感染与患者心功能及心肌病理损害密切相关，提示肠道病毒感染在楚雄地区克山病及扩张型心肌病发病中起重要作用。     

应用原位杂交法对比研究慢型克山病,扩张型心肌病与肠道病？…

本文用生物素标记的柯萨克Ｂ３病毒（ＣＶＢ３）的ＣＤＮＡ探针，通过原位杂交技术检测５０例组织学诊断为慢型克山病、１例扩张型心肌病的心肌石蜡包埋切片，并以１５例正常心肌标本作阴性对照。结果５０例慢型克山病有３４例出现阳性结果。１４例扩张型心 ７７例出现阳性结果。１５例正常对照组心肌标本杂交均为阴性，从而确定慢型克山病的心肌组织中、扩张型心肌病的心肌组织中有肠道病毒核酸存在，表明肠道病毒感染与慢型克山病     

亚急型克山病与肠道病毒的关系

目的 用RT-PCR技术探讨亚急型克山病与肠道病毒的关系。方法 用RT-PCR技术对3例亚急型克山病尸检病例心肌组织中肠道病毒进行检测，并对所得片段进行序列分析。结果 对CVB35′NTR的序列分析表明，亚急型克山病患者心肌组织中存在的CV83RNA的5′NTR第234位点与已知的无心肌毒性的毒株CVB3/0不同，而与已知的有心肌毒性的毒株相同。结论 CVB3病毒RNA可在克山病患者心肌组织中有生存、复制，可能对克山病的发生发展起重要作用。克山病的发生可能与CV83基因组5′NTR中234点突变有关。     

从云南186例克山病尸检谈病因

为探讨云南克山病与肠道病毒感染的关系，对云南省１６个县１８６例克山病尸检作了总结分析，结合部分尸检病例的病原学检查结果，认为肠道病毒感染可能是云南克山病的主要病因。     

应用原位杂交法对比研究慢型克山病、扩张型心肌病与肠道病毒的关系

本文用生物素标记的柯萨奇B_3病毒(CVB_3)的cDNA探针,通过原位杂交技术检测50例组织学诊断为慢型克山病、14例扩张型心肌病的心肌石蜡包埋切片,并以15例正常心肌标本作阴性对照。结果50例慢型克山病有34例出现阳性结果。14例扩张型心肌病有7例出现阳性结果。15例正常对照心肌标本杂交均为阴性,从而确定慢型克山病的心肌组织中、扩张型心肌病的心肌组织中有肠道病毒核酸存在,表明肠道病毒感染与慢型克山病、扩张型心肌病的发病高度相关。经统计学处理二者之间无明显差异。     

克山病的心肌损伤与细胞凋亡

为探讨克山病的心肌损伤与细胞凋亡的关系，采用Ｏｎｃｏｒ公司的细胞凋亡原位检测试剂盒（ＴＵＮＥＬ）对３０例克山病尸检心肌组织进行了检测，其中急型、亚急型、慢型克山病心肌组织各１０例，以因交通事故死亡的５例正常人尸检心肌组织作为对照，结果显示，急型、亚急型、慢型克山病心肌组织中凋亡细胞阳性检出率分别为２／１０、８／１０与７／１０。５例正常心肌组织中，未检出凋亡细胞，以上结果提示：在克山病的发生发展中有凋亡机制参与。     

用原位核酸杂交法探讨柯萨奇B组病毒与克山病的关系──（黑龙江省急型克山病）

为探讨柯萨奇Ｂ组病毒感染与黑龙江省急型克山病的关系。本文用缺口平移法制备生物标记的柯萨奇Ｂ３病毒的ｃＤＮＡ探针与１３例急型克山病尸检心肌组织及脑外伤、ＣＯ中毒等意外死亡的正常成人心肌组织１０例，非病区７～８个月引产胎儿心肌组织１０例的石腊切片进行原位杂交。结果１３例急型克山病中有８例出现阳性杂交信号，即有柯萨奇Ｂ组病毒的ＲＮＡ存在，阳性率达６１．５％。对照组均为阴性，提示黑龙江省急型克山病有柯萨奇Ｂ组病毒感染，可能是急型克山病发病因素之一。     

ECHO6型肠道病毒与克山病及病毒性心肌炎的血清学研究

关于克山病病因的研究,60年代就有人提出克山病与某些肠道病毒有关。但对另一型肠道病毒——ECHO_6型病毒与这两种病之间关系的研究国内外尚未见报道。本室1975年从克山病区四川西昌市2例亚急型克山病患儿的血与便中分离出两株病毒,命名为川便_5和川血_1。经电镜证实都是微小核糖核酸肠道病毒,经血清学鉴定,两毒株同属ECHO_6。型。为探讨ECHO_6型肠道病毒与克山病和心肌炎的关系,本研究通过检测克山病病区内克山病人和健康人及非病区健康人和病毒性心肌炎4组人群对两株病毒的血清中和抗体水平,从探讨ECHO_6。型病毒在克山病的发生和流行中所起的作用,阐述其与心肌炎的关系,为克山病的病因研究及心肌炎的预防提供依据。     

用原位核酸杂交法探讨柯萨奇B组病毒与克山病的关系

为探讨柯萨奇Ｂ病毒感染与黑龙江省急型克山病的关系。本文用缺口平移法制备生物标记的柯萨奇Ｂ３病毒的ｃＤＮＡ探针与１３例急型克山病尸检心肌组织及脑外伤、ＣＯ中毒等意外死亡的正常成人心肌组织１０例，非病区７－８个月引产胎儿心肌组织１０例的石腊切片进行原位杂交。     

用原位核酸杂交法探讨柯萨奇B组病毒与黑龙江慢型克山病的关系

克山病是原因未明的地方性心肌病，慢型克山病有关病毒病因的研究未见有关报道，作者用生物素标记的柯萨奇Ｂ３病毒的ｃＤＮＡ探针与黑龙江病区慢型克山病尸检心肌组织及非正常死亡成人心肌组织和非病区７￣８个月引产胎儿心肌组织进行了原位杂交，以检测柯萨奇Ｂ组病毒ＲＮＡ。结果１３例慢型克山病中有９例呈现阳性杂交信号，阳性率达６９．２％，两对照组均为阴性。表明黑龙江慢型克山病心肌组织中有柯萨奇Ｂ组病毒ＲＮＡ的存在，     

克山病病区与非病区胎儿心肌组织形态观察

据报导部分死于克山病的孕妇,胎儿心肌有不同程度的坏死和瘢痕形成。为了从多方面研究克山病的病因,尤其是胎儿心肌是否受到克山病致病因子的影响,我们在克山病多发病年对山东邹城市克山病重病区和非病区引产胎儿心脏进行了组织学检查,结果报告于下。一、材料和方法:病区胎心50例,由重病乡张庄、城前和田黄提供。非病区胎心34例,由城关、香城、落     

克山病病区12例急性心肌炎临床病理分析

目的 探讨云南省克山病病区急性致死性心肌炎暴发流行及其猝死的原因。方法 对１２例在季节性群体发病中收集到的死亡病例,作临床病理资料总结分析。结果 此类心肌炎暴发浒具有一定的发病特点,心肌病变主要表现为间质性炎症反应,在９例心肌组织中,有８例肠道病毒ＲＮＡ阳性。结论 肠道病毒感染可能是云南克山病病区急性心肌炎暴发流行的主要病因。     

用原位核酸杂交法探讨慢型克山病与柯萨奇B组病毒的关系

为探讨山东慢型克山病与柯萨奇Ｂ组病毒的关系，用缺口平移法制备生物素标记ＣｏｘＢ３病毒的ｃＤＮＡ探针与慢型克山病１４例尸检心肌组织及１０例脑外伤，ＣＯ中毒等意外死亡的正常成人心肌组织及１０例非病区７￣８个月引产胎儿的心肌组织切片进行原位杂交，１４例慢克中有９例检测到柯萨奇Ｂ组病毒的ＫＮＡ，阳性率达６４％，而对照组均为阴性。提示柯萨奇Ｂ组病毒感染可能是山东慢型克山病发病因素之一。     

克山病与病毒感染关系的实验研究

目的为了探讨克山病与肠道病毒特别与柯萨奇病毒(CVB)的关系.方法①选择用CVB3病毒的cDNA探针,应用原位核酸杂交的方法,检测克山病尸检心肌组织;②采用CVB5病毒VP1壳蛋白的单克隆抗体应用免疫组化法检测克山病尸检心肌组织;③用不同配方的低硒合成饲料喂养小鼠,分别感染CVB2、CVB4m'、CVB3m以及先后感染CVB4和CVB3m的病毒.结果①原位杂交法急型克山病、亚急型克山病、慢型克山病的阳性率分别为61.5%、75.8%和68%;②免疫组化法克山病阳性率分别为89.2%,两种方法阳性检出率均显著高于健康人,高于心肌炎及扩张型心肌病,但无差异;③光镜下低硒病毒组心肌病变位于心肌实质、乳头肌等.为多发性灶状坏死伴少量炎性细胞浸润,补硒组心肌病变为间质炎性细胞浸润,病变程度及检出率、低硒病毒组均重/高于补硒病毒组.结论以上实验结果均支持克山病的发生与肠道病毒,特别CVB病毒的感染高度相关.     

长春地区1992～1996年病毒性心肌炎柯萨奇B组病毒感染情况的调查

近年来用原位核酸杂交和套式聚合酶反应等技术,从各型克山病心肌标本中均发现有柯萨奇B组(CBV)病毒RNA的存在,其阳性率从61.5％到90.0％不等。证明很多克山病病人确有肠道感染,重新提出重视肠道病毒,特别是柯萨奇B组病毒感染在克山病发病中的作用。 作者对克山病非病区——长春地区近年来柯萨奇病毒感染引起的心肌炎给予特别关注。对1992～1996年临床拟诊为急性病毒性心肌炎患者进行了CBV特异性IgM抗体的检验,结果报告如下。