β1整合素及MMP-2在脂多糖致幼鼠感染性脑水肿中的研究

目的观察脂多糖致幼鼠感染性脑水肿后脑组织β1整合素和基质金属蛋白酶2(MMP-2)表达的变化及其相关性研究。方法将50只幼鼠随机分为内毒素组(40只)和对照组(10只)。建立脂多糖致幼鼠感染性脑水肿模型。于术后6、12,24、48 h处死动物,分别行脑组织含水量,血脑脊液屏障(BBB)通透率测定。干湿法测脑组织含水量,以伊文思兰含量判定血脑屏障通透率,并应用免疫组织化学技术检测脑组织内β1整合素和MMP-2表达水平。结果内毒素组脑组织含水量和伊文思兰(EB)含量明显高于对照组。在脂多糖注射后6 h时,幼鼠脑组织β1整合素表达下降,且随时间延长及脑损伤的加重其表达呈持续下降趋势,各时间点与对照组比较均有显著性差异(P<0.01)。MMP-2表达明显增加,24h时达高峰,各时间点与对照组比较均有显著性差异(P<0.01)。MMP-2与脑组织含水量以及EB呈正相关;β1整合素和MMP-2表达呈负相关。结论β1整合素、MMP-2参与感染性脑水肿的发生发展,二者之间可能存在一定的调控。     

尼莫地平对早期脑出血大鼠AQP4mRNA、MMP-9mRNA表达的影响

目的：探讨尼莫地平对早期脑出血周边组织AQP4mRNA、MMP-9mRNA表达及由脑出血引起的继发性脑水肿与AQP4、MMP-9的关系。方法：制做脑出血大鼠模型,分为假手术组,脑出血组及尼莫地平组,分别观察6h、1d、3d、5d、7d等5个时间点出血周边脑组织含水量、AQP4mRNA、MMP-9mRNA。结果：（1）脑出血组3d含水量达到高峰,第7天明显下降,但仍高于正常水平;尼莫地平组3d含水量达高峰,但低于脑出血组。（2）脑出血组AQP4mRNA、MMP-9mRNA的表达逐渐升高,3d达到高峰,7d明显下降,5个时间点明显高于假手术组。（3）尼莫地平组大鼠脑水肿程度、AQP4mRNA、MMP-9mRNA表达逐渐升高,3d达到高峰,明显低于脑出血组。（4）脑出血的水肿程度与AQP4mRNA、MMP-9mRNA呈正相关。结论：（1）AQP4、MMP-9参与了出血性脑水肿损伤的过程。（2）尼莫地平可以抑制AQP4、MMP-9的表达,进而减轻脑水肿的程度。     

藻蓝蛋白对大鼠脑缺血再灌注后MMP-2和MMP-9表达的影响

目的探讨藻蓝蛋白对大鼠局灶性脑缺血再灌注后基质金属蛋白酶-2和9（MMP-2和MMP-9）表达的影响。方法应用线栓法建立大鼠左侧大脑中动脉阻塞再灌注（MCAO／R）模型，应用藻蓝蛋白进行干预，干湿重法测定脑组织含水量（BWC），比色法测定脑组织伊文斯蓝（EB）含量，免疫组化技术检测脑组织MMP-2和MMP-9的表达。结果脑缺血再灌注6h BWC和EB含量增加，至2d达高峰，应用藻蓝蛋白后均明显减少。对照组脑缺血再灌注24h脑组织MMP-2阳性细胞即开始出现，3～7d阳性细胞数达高峰，14d仍高于假手术组。藻蓝蛋白组MMP-2阳性细胞的变化趋势与对照组相似，但同一时间点明显低于对照组。对照组缺血侧脑组织MMP-9阳性细胞于再灌注后6h开始出现，12h明显增高，至2d达高峰，3d开始减少，至14d时恢复至假手术组水平。藻蓝蛋白组MMP-9阳性细胞变化趋势与对照组相似，同一时间点相比明显低于对照组。结论藻蓝蛋白可能通过下调MMP-2和MMP-9的表达而减轻脑水肿，对脑缺血再灌注损伤具有保护作用。     

MMP-9和咬合蛋白在弥漫性脑损伤大鼠皮层的表达变化及与脑水肿的关系

目的：观察弥漫性脑损伤大鼠脑水肿及损伤区皮层MMP-9和咬合蛋白表达的变化。方法成年健康SD雄性大鼠160只,按随机数字表法分为对照组（ n ＝60）和模型组（ n ＝100）。应用Marmarou’s法建立弥漫性脑损伤大鼠模型。2组分别于术后3、12、24、72、144 h行干湿重法检测2组大鼠脑组织含水量变化,行免疫组化和Western blot检测损伤区周围皮层MMP-9和咬合蛋白表达水平。对各结果进行相关性分析。结果与对照组比较,模型组各时间点大鼠脑组织含水量明显增加,脑组织损伤区周围皮层MMP-9表达明显增高（ P ＜0．05）,咬合蛋白表达明显降低（ P ＜0．05）。脑组织含水量变化与MMP-9表达变化呈正相关（ P ＜0．05）,脑组织含水量变化与咬合蛋白表达变化呈负相关（ P ＜0．05）,MMP-9蛋白表达变化与咬合蛋白表达变化呈负相关（ P ＜0．05）。结论弥漫性脑损伤发生后损伤区皮层MMP-9蛋白表达明显增加,咬合蛋白表达明显降低,脑水肿形成。 MMP-9表达的增加,导致了咬合蛋白破坏,脑水肿形成。     

高血压性脑出血周围脑组织超微结构及脑水肿发生机制研究

目的:高血压性脑出血后周围脑组织超微结构变化,基质金属蛋白酶2,9(MMP-2,MMP-9)表达在高血压性脑出血后(早期)脑水肿发生中的作用。方法:应用免疫组织化学方法检测高血压性脑出血患者出血后6h,12h,24h,48h,72h,120h,1W,2W血肿周围脑组织中MMP-2、MMP-9的表达,透射电镜下观察,血肿周围脑组织超微结构变化。结果:研究表明在高血压性脑出血患者血肿周围有脑水肿发生,正常对照组中未发现明显的MMP-2,MMP-9阳性表达,而在高血压性脑出血组出血24 h内MMP-2及MMP-9则见明显表达(P<0.01)。结论:MMP-2及MMP-9在脑出血患者血肿周围脑组织的表达增高与高血压性脑出血后脑水肿的发生具有密切的关系。     

大鼠脑出血后MMP-2、MMP-9的表达与神经元凋亡关系的实验研究

目的 探讨脑出血后基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达和血肿周围神经细胞凋亡发生情况之间的关系,以明确MMP-2、MMP-9对脑出血后神经细胞发生凋亡的贡献作用.方法 80只雄性Wistar大鼠按照出血后的时闻分成对照组和出血后6 h、12 h、1 d、2 d、3 d、6 d和10 d组,分别应用免疫组化和流式细胞仪方法检测血肿周围脑组织MMP-2、MMP-9的表达和神经细胞凋亡率,同时检测脑组织的含水量并进行脑出血动物的神经缺损评分,并统计这些指标的相关性.结果 MMP-9,细胞凋亡率,神经功能缺损评分和脑组织含水量的动态变化均一致,脑出血后6 h开始升高,2 d达到高蜂,10 d与对照组差异仍有统计学意义(P<0.05).而MMP-2则是脑出血后1 d开始升高,6 d达到高峰,10 d后开始下降,与细胞凋亡率,神经功能缺损评分和脑组织含水量无明显相关性.结论 神经细胞凋亡和脑组织含水量直接与神经功能缺损相关,而MMP-9的高表达则促进神经细胞的凋亡,脑组织含水量的增加.     

中性粒细胞弹性蛋白酶在实验性脑出血大鼠脑组织中的动态变化

目的通过测定中性粒细胞弹性蛋白酶（NE）在实验性脑出血大鼠脑组织中的动态变化从而来探讨NE的含量和脑出血关系。方法将雄性Wistar大鼠随机分为对照组和ICH模型组,分别于束后6h,12h,24h,48h和72h取脑,测定脑组织NE的含量及脑含水量。结果ICH大鼠脑组织NE含量明显增加。6h即升高,24h达最高峰（P〈0．01）。以后逐渐下降,72h与对照组差异仍然具有统计学意义;ICH大鼠脑组织含水量升高较慢。48h达高峰（P〈0．01）。结论实验性脑出血大鼠脑组织内NE含量的升高与大鼠脑出血后脑组织水肿密切相关,NE增加可能是脑出血后早期引起血脑屏障开放、血管源性脑水肿形成的重要原因之一。     

大鼠脑出血周边组织VEGF表达及Ang-1对其变化的影响

目的:研究Ang-1对大鼠脑出血周边组织脑含水量、脑组织EB含量、VEGF的表达的影响。方法:制备大鼠脑出血模型150只,随机分为正常对照组50只(A组)、脑出血组50只(B组)、Ang-1干预组50只(C组),分别设6h、12h、1d、3d、7d五个时间点各10只,检测脑含水量、脑组织EB含量、VEGF的表达情况。结果:1Ang-1对大鼠脑出血周边组织水肿有治疗作用,并能有效地减轻BBB的通透性。2脑出血后血肿周边组织VEGF表达增高,可诱导小血管生长,建立侧支循环,改善血液供应,促进脑功能的恢复。3Ang-1干预后VEGF阳性细胞数表达持续增高与微血管生长增高有正相关,能共同促进血肿周边组织的微血管形成作用和血液供应。结论:Ang-1对促进血肿周边新生血管的生成和降低脑水肿具有统计学意义。     

大鼠脑出血后血肿周围TIMP-1的表达及与脑水肿的关系

目的观察大鼠脑出血后血肿周围组织基质金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)的表达,探讨TIMP-1与脑出血后脑水肿的的关系。方法采用自体血注入法建立大鼠脑出血模型,分别用Western blot方法检测血肿周围组织的TIMP-1的表达,伊文思蓝(EB)测血脑屏障(BBB)通透性,干湿重法测组织含水量,并与对照组相比较。结果血肿周围组织的组织含水量和EB含量均48 h达到高峰,且二者呈正相关。TIMP-1在脑出血后12～36 h表达减低,且在脑出血后1～24 h时TIMP-1的表达与组织含水量以及EB含量都呈负相关。结论大鼠脑出血后血肿周围组织存在TIMP-1的表达下调,其可能促进了脑出血后早期脑水肿形成。     

卡托普利对脑缺血再灌注损伤大鼠血脑屏障通透性及MMP-9表达的影响

目的观察血管紧张素转化酶抑制药卡托普利对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后血脑屏障通透性和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响,并探讨其机制。方法采用血管内栓线阻断法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型,于脑缺血2h、再灌注24h后测定脑组织含水量、伊文斯蓝(EB)含量,放射免疫方法测定血浆中血管紧张素Ⅱ的含量,免疫组织化学方法测定MMP-9表达。结果研究发现,脑缺血2h、再灌注24h,缺血再灌组大鼠脑组织含水量及EB含量明显增加,MMP-9呈现高表达。而卡托普利组脑组织含水量、EB含量及MMP-9表达明显低于脑缺血再灌注组(P<0.05)。结论卡托普利通过减少血管紧张素Ⅱ的生成从而降低脑缺血再灌注大鼠基质金属蛋白酶-9的活性及血脑屏障通透性,发挥对脑缺血再灌注损伤的保护作用。     

子宫内膜异位症患者异位内膜组织中基质金属蛋白酶表达及其意义

目的 研究基质金属蛋白酶（MMP-1、MMP-9）在子宫内膜异位症发生中的作用。方法 采用免疫组化方法研究40例子宫内膜异位症患者的病理组织和32例正常子宫内膜组织中的MMP-1、MMP-9的表达情况。结果 子宫内膜异位症患者病理组织中MMP-1、MMP-9的表达水平明显高于对照组（P〈0．01）。结论 MMP-1、MMP-9在子宫内膜异位症发生中起一定的作用。     

软脉灵对动脉粥样硬化鹌鹑血管组织MMP-2、MMP-9活性及其基因表达的影响

为探讨软脉灵抗动脉粥样硬化的作用机理,采用高脂餐喂饲鹌鹑复制动脉粥样硬化模型,同时给予软脉灵,16 w后,取主动脉,制病理切片,明胶酶谱法测定血管中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的活性,RT-PCR半定量法测定血管组织中MMP-2、MMP-9的基因表达。结果表明,动物喂饲高脂饲料16 w后,主动脉内膜厚度显著增加,动脉粥样硬化斑块形成,动脉血管组织中MMP-2、MMP-9的活性及基因表达均增加。给予软脉灵干预治疗后MMP-2、MMP-9的活性和基因表达都下降。表明软脉灵可能通过稳定动脉粥样硬化斑块,防止动脉粥样硬化斑块破裂而达到防治冠脉综合征(冠心病、心绞痛等)。     

糖皮质激素抑制狼疮肾炎MMP-2与MMP-9表达的实验研究

目的明确糖皮质激素调控MMP-2、MMP-9表达与活性变化与治疗狼疮肾炎的关系。方法采用MRL/lpr自发性狼疮小鼠为模型,将8wk龄小鼠随机分为甲基强的松龙(MPS)治疗组与对照组(control),MPS治疗组腹腔注射甲基强的松龙25mg·kg-1·d-1,将小鼠饲养至28wk,观察小鼠的存活率、蛋白尿、肾功能与肾脏病理改变。采用免疫组化检测MMP-2与MMP-9的表达变化,利用含有放射自显影的成像乳胶对冰冻肾组织切片进行原位明胶酶活性的检测。结果MPS能够延长狼疮小鼠的存活率(P<0·05)、降低蛋白尿的发生率(P<0·01)、降低血清尿素氮(P<0·01),并减轻肾小球、肾小管-间质以及肾小血管的病理改变(P<0·05)。狼疮小鼠肾小球内MMP-2、MMP-9的表达与活性随增龄明显增加(P<0·01)。MPS能够明显抑制肾小球MMP-2、MMP-9的表达及肾组织原位明胶酶的活性变化(P<0·01)。结论甲基强的松龙对自发性狼疮小鼠的治疗作用与抑制肾脏异常MMP-2与MMP-9的表达与活性密切相关,该作用可能是糖皮质激素治疗狼疮肾炎的机制之一。     

子宫内膜腺癌中MMP-2、MMP-9的表达及意义

目的探讨MMP-2、MMP-9与子宫内膜腺癌的关系。方法应用免疫组织化学法检测MMP-2、MMP-9在不同子宫内膜中的表达情况。结果MMP-2、MMP-9在子宫内膜腺癌中的阳性表达率明显高于正常子宫内膜和子宫内膜单纯性增生组织,并与子宫内膜腺癌组织学分级、浸润深度和淋巴结转移有关。结论MMP-2、MMP-9在子宫内膜腺癌中的表达呈正相关,可作为检测子宫内膜腺癌恶性程度的指标。     

血晶素诱导HO-1表达增加及对急性肺损伤小鼠MMP-2、MMP-9 mRNA的影响

目的 通过复制急性肺损伤模型,探讨血晶素诱导血红素加氧酶-1（heme oxygenase-1, HO-1）的表达对于小鼠急性肺损伤的影响.方法 利用逆转录-聚合酶链反应和蛋白质印迹方法检测急性肺损伤小鼠肺组织基质金属蛋白酶-2 （matrix metalloproteinas-2, MMP-2）、MMP-9 mRNA和HO-1蛋白的表达.结果 血晶素加脂多糖组和对照组比较,HO-1蛋白表达明显增高 （P〈0.05）;脂多糖组与对照组比较,MMP-2 mRNA和MMP-9 mRNA表达差异有统计学意义（P〈0.05）,血晶素加脂多糖组与对照组比较,差异无统计学意义（P〉0.05）.结论 HO-1降低了急性肺损伤小鼠肺组织MMP-2、MMP-9 mRNA的表达,对于小鼠的急性肺损伤有保护作用.     

不稳定性心绞痛患者血清基质金属蛋白酶-2、基质金属蛋白酶-9水平测定

目的:测定不稳定性心绞痛(UA)患者血清基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)水平,探讨MMP-2、MMP-9对UA的预测判断价值.方法:连续选取住院患者UA组26例,稳定性心绞痛(SA)组21例,均于入院第2天清晨空腹采取肘静脉血5ml,双抗体夹心酶联免疫(ELISA)法测定MMP-2、MMP-9.结果:UA组血清MMP-2、MMP-9水平明显高于SA组和对照组(P＜0.01).SA组血清MMP-2、MMP-9水平亦高于对照组(P＜0.01).结论: MMP-2、MMP-9对冠脉斑块的不稳定或破裂起重要作用,可能对不稳定心绞痛的发生具有一定的预测判定价值.     

MMP-2、MMP-14、TIMP-2在退变腰椎间盘髓核组织的表达及意义

目的探讨基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、基质金属蛋白酶-14（MMP-14）和金属蛋白酶组织抑制剂-2（TIMP-2）在退变腰椎间盘髓核组织表达的意义。方法应用免疫组织化学法检测36例退变腰椎间盘髓核组织（退变组）、20例腰椎骨折腰椎间盘髓核组织（对照组）MMP-2、MMP-14和TIMP-2表达。结果退变组MMP-2、MMP-14表达明显高于对照组（P〈0.001）,TIMP-2表达无明显改变（P〉0.05）;椎间盘退变等级与MMP-2、MMP-14及TIMP-2表达呈正相关（分别rs=0.710,P〈0.001;rs=0.617,P〈0.001;rs=0.406,P=0.014）;MMP-2与MMP-14、TIMP-2表达呈正相关（分别rs=0.665,P〈0.001;rs=0.516,P=0.001）。结论 MMP-2、MMP-14和TIMP-2表达加强可能是导致椎间盘退变的重要原因之一。     

Losartan inhibited expression of matrix metalloproteinases in rat atherosclerotic lesions and angiotensin Ⅱ-stimulated macrophages

AIM: To explore whether the angiotensin Ⅱ (Ang Ⅱ) receptor 1 (AT1) antagonist, losartan could reduce activity and expression of matrix metalloproteinases (MMPs) in rat atherosclerotic plaques. METHODS: Male Wistar-Kyoto rats were ip injected a single dose of vitamin D3 600 kU·kg-1·month-1 and fed an atherogenic diet for 4 months to induce experimental atheroma. Then either placebo or losartan 50 mg·kg-1·d-1 was administered in rats for another 2 months. In vitro, the effect of losartan 0.1-10μmol/L on the expression of MMP-2 and MMP-9 was investigated in Ang II-stimulated rat peritoneal macrophages. The expression and activity of MMP-2 and MMP-9 were monitored by Western blot, RT-PCR, and SDS-PAGE zymography analysis. RESULTS: High levels of MMP-2 and MMP-9 were expressed in rat atherosclerotic lesions. Losartan significantly reduced the activity and expression of MMP-2 and MMP-9 compared with the placebo group (MMP-2, 5861±539 vs 8991±965, P<0.05; MMP-9, 10527±1002 vs 14623±2462, P<0.01). In     

哌芳胺他抗心肌缺血再灌注损伤作用特点及机制

目的用大鼠在体心肌缺血再灌注(iscm em ia/reperfu-sion,I/R)模型观察哌芳胺他(p ivanampeta,P iv)抗体心肌I/R损伤的特点,并探讨其分子机制。方法实验动物随机分为两组,一为再灌30 m in,包括假手术组、模型组、溶剂对照组、吡格列酮(p ioglitazone,P iog)3 mg.kg-1和P iv 9 mg.kg-1组,测定心功能指标和心肌梗死面积;另一为再灌注2 h组,再分为假手术组、模型组、溶剂对照组以及吡格列酮3mg.kg-1、P iv 3、6和9 mg.kg-1组,进行免疫组化、原位杂交、TUNEL法和DNA凝胶电泳检测。结果①与对照组比较P iv组坏死面积(nec)与缺血面积(aar)之比减少21%(P<0.05),坏死面积与左室面积(lv)之比减少22%(P<0.05);P iog组nec/aar减少28%(P<0.05),nec/lv减少32%(P<0.05)。P iv心率、反映心脏收缩功能的指标+dp/dtm ax和Vm ax以及反映心脏舒张功能的指标-dp/dtm ax分别在再灌注30 m in明显改善(P<0.05)。P iog组心率、+dp/dtm ax以及-dp/dtm ax改善明显(P<0.05~0.01)。②免疫组化检查,P iv 3、6和9 mg.kg-1呈剂量依赖性减少Bax、caspase-3、MMP-2(m atrix m etelloprote inase-2)蛋白质和MMP-2的mRNA表达,增加Bc l-2、PPAR(peroxisom e proliferator-activated receptor)γ蛋白质和PPARγmRNA表达,Piog的作用与Piv3相同;③TUNEL法检测,Piv各组和Piog组心肌细胞凋亡明显减少(P<0.05),但DNA凝胶电泳,模型组、Piv3、6 mg.kg-1组可见到DNA梯带,假手术组、Piog 3 mg.kg-1组和Piv 9 mg.kg-1组则无DNA梯带。结论Piv预处理对心肌缺血再灌注损伤有保护作用,表现为减少心肌梗死面积、改善心功能,且是通过减少心肌细胞凋亡和激活PPARγ后抑制MMP-2而发挥作用。