McAbDot-ELISA检测卫氏并殖吸虫循环免疫复合物

应用Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ法，以抗卫氏并殖吸虫囊蚴单克隆抗体ＩＦ８Ａ３检测了卫氏并殖吸虫感染犬血清循环免疫复合物动态。感染后１～２ｗｋ可以检测到免疫复合物，３～４ｗｋ阳性滴度逐渐上升，５～６ｗｋ处于较高水平，第８ｗｋ达高峰，然后较快地下降。研究结果表明，卫氏并殖吸虫囊蚴抗原特异的循环免疫复合物具有明显的期特异性；单克隆抗体Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测特异的循环免疫复合物，可用于卫氏并殖吸虫病的早期诊断和活动性感染的诊断。     

BALB／C小鼠感染卫氏并殖吸虫后血清中循环抗原的动态

用滤纸血以抗卫氏并殖吸虫囊蚴单克隆抗体Ｇ２Ｂ３间接双抗体夹心－ＥＬＩＳＡ检测感染卫氏并殖吸虫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠血中循环抗原（ＣＡｇ），结果显示：小鼠感染卫氏并殖吸虫囊蚴后第３天检出ＣＡｇ，其阳性率为３８％，第１５天起ＣＡｇ达高峰，阳性率１００％，２６～５６天ＣＡｇ维持高水平，第７１天ＣＡｇ滴度下降，以后维持在一定水平，说明滤纸血可以代替血清作ＣＡｇ检测。以抗卫氏并殖吸虫囊蚴单克隆抗体Ｇ２Ｂ３间接双抗体夹心－ＥＬＩＳＡ检测感染卫氏并殖吸虫小鼠血中ＣＡｇ时，具有简便，敏感和特异的优点，可试用于肺吸虫感染的早期诊断和流行病学调查。     

应用Dot-ELISA进行日本血吸虫循环抗原检测时其滴度与感染度关系的动态观察

以２０条／只和１００条／只剂量的尾蚴感染家兔，并于第９ｗｋ用吡喹酮对约半数家兔进行一次性灌胃治疗，依此建立日本血吸虫感染模型。用分别定位于日本血吸虫表皮膜、肠道上皮和虫卵的单克隆抗体建立直接斑点酶联免疫吸附试验（Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）并应用该法分别检测感染家兔血中３类循环抗原、膜相关抗原（ＭＡＡ），肠相关抗原（ＧＡＡ）和可溶性虫卵抗原（ＳＥＡ），观察循环抗原滴度水平和日本血吸虫感染度之间的关系。结果发现，当用Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ法检测３类循环抗原时，２０条尾蚴感染组与１００条尾蚴感染组家兔不论治疗与否，血中３类循环坑原滴度水平无显著性差异。因此Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ法检测循环抗原不适宜于作为日本血吸虫感染度的判断方法     

不同动物宿主感染卫氏并殖吸虫后的抗体动态变化

【摘要】 目的 以卫氏并殖吸虫囊蚴感染适宜和非适宜宿主，观察感染后的抗体动态变化情况。 方法  从安徽省休宁县采集溪蟹捣碎并收集囊蚴，以卫氏并殖吸虫囊蚴感染适宜宿主犬和非适宜宿主大鼠，收集感染后 ０ ～ １６ 周血清；以卫氏并殖吸虫成虫可溶性抗原为探针，建立 ＥＬＩＳＡ 方法检测不同宿主感染后的血 清抗体。 结果 检测卫氏并殖吸虫囊蚴感染动物的血清，均有抗体出现。 其中感染犬 ３ 周可检测抗体阳性，抗体水平达高峰的时间最早为 ５ 周；感染大鼠 １ 周检出抗体阳性，２ ～ ３ 周抗体水平达到高峰，至 ８ 周时抗体水平降低并维持在平衡状态。 结论 不同宿主感染卫氏并殖吸虫囊蚴后抗体变化有区别，在非适宜宿主体内短期抗体水平下降较快且维持在弱阳性水平。     

应用单克隆抗体检测蚊体内幼丝虫的实验观察

以马来丝虫感染期幼虫为靶抗原制备多株单克隆抗体从中筛选出１Ｇ１，１Ｈ１单克隆抗体，检测人工感染马来丝虫的中华按蚊。当中华按蚊吸食马来微丝蚴的兔血后，分别解剖同时以ＥＬＩＳＡ及Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测饲养不同时间的中华按蚊。结果显示，饲养９ｄ的按蚊马来丝虫幼虫阳性率，人工解剖为８６．６％，ＥＬＩＳＡ和Ｄｏｔ－ＥＬＳＩＡ法分别为８２．２％和７７．８％。     

应用特异性单克隆抗体测定脑囊虫病患者血清及脑脊液中循…

应用特异单克隆抗体作ＤＯＴ－ＥＬＩＳ和竞争ＥＬＩＳＡ检测６５例脑囊虫病患者血清和脑脊液中前淳离循环Ａｇ（ＦＣＡｇ）和循环免疫复合物抗原（ＣＩＣＡｇ）。血清ＦＣＡｇ阳性率分别为８１．３％和８１．５％，ＣＩＣＡｇ阳性率为９５．４％和９２．３％（０．１９－１２０．０ｇ／ｍｌ）脑脊液测定ＦＣＡｇ阳性率为７８．５％和８６．２％，ＣＩＣＡｇ阳率率为９０．８％和９３．８％。结果表明检测总循环抗的有利于提高脑囊虫     

COMPARATIVE STUDY ON DETECTION OF ANTI-TOXOPLASM A GONDII ANTIBODIES BY USING DOT-ELISA AND DOT-IMMUNOGOLD SILVER STAINING

为比较斑点免疫金银染色（Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ）和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测弓形虫抗体的敏感性和特异性，本实验以弓形虫速殖子可溶性蛋白抗原为诊断用抗原，同时用Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测６５份弓形虫感染者血清、１７６份其他寄生虫感染者血清和７６份对照血清。结果显示，用Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ及Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测弓形虫感染者抗体阳性率分别为９８．４６％及９２．３１％，平均抗体滴度分别为１∶３８４及１∶２１８（１∶２０－１∶２５６０）。用Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ检测，有２３份血清抗体滴度高于Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ，有８份低于Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ。二种方法所测抗体滴度呈直线正相关关系（ｒ＝０．６０８，Ｐ＜０．０１）。二种方法检测其他寄生虫感染者和对照血清，假阳性率分别为５．９５％及１３．８９％。Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ操作流程和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ相似，但敏感性、特异性均优于Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ，前者不使用对人体有害的底物，有较好的推广前景。     

三种免疫学方法检测抗班氏丝虫IgG的比较

用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ），斑点酶联免疫吸附试验（Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）和斑点免疫金银染色（Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ）同步检测５０份班氏微丝蚴血症者血清中抗丝虫ＩｇＧ。ＥＬＩＳＡ，Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ和Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ检测抗体阳性率分别为８６％（４３／５０），９０％（４５／５０）。ＥＬＩＳＡ和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ联合应用阳性率为９６％（４８／５０）。ＥＬＩＳＡ与Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ检测微丝蚴血症者抗体阳性率有     

应用Dot—ELISA进行日本血吸虫循环抗原检测时其滴度与？…

以２０条／只和１００条／只剂量的尾蚴感染家兔，并于第９ｗｋ用吡喹酮对约产数家兔进行一次性灌胃治疗，依此建立日本血吸虫感染模型。用分别定位于日本血吸虫表皮膜、肠道上皮和虫卵的单克隆抗体建立直接斑点酶联免疫吸附试验（Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）并应用该法分别检测感染家兔血中３类循环抗原、膜相关抗原（ＭＡＡ），肠相关抗原（ＧＡＡ）和可溶性虫卵抗原（ＳＥＡ），观察循环抗原滴度水平和日本血吸虫感染度之间的关系。结果     

单克隆抗体Dot－ELISA直接法检测血吸虫病循环抗原的现场应用

单克隆抗体Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ直接法检测血吸虫病循环抗原的现场应用湖北医科大学血吸虫病研究室（武汉４３００７１）倪永晖，陈静卿，蒋明森沙市市血吸虫病防治所黄盘兴近年来应用单克隆抗体（ＭｃＡｂ）检测血吸虫肠相关循环抗原取得了较好的结果￣［１～３］。作者曾...     

四种弓形虫病血清学诊断方法的比较研究

本研究应用弓形虫的斑点酶联免疫吸附试验（Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）、常规酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）和间接免疫荧光试验（ＩＦＡ）及间接血凝抑制试验（ＩＨＡ）四种方法，分别检测了同一批人血清（１５０份）。结果表明：（１）四种方法中以Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ最为敏感，血清阳性检出率最高为１９．３％；ＩＦＡ次之为１１．３％；ＥＬＩＳＡ为８．６９％；ＩＨＡ最低仅为６．６６％。（２）Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ明显优于常规ＥＬ     

日本血吸虫感染家兔红细胞上非游离性循环抗原的分离及动态水平研究

采用特定方法成功地从５０和１００条尾蚴感染的家兔红细胞上分离出非游离性循环抗原（ＮＦ－ＣＡｇ），并应用抗ＳＥＡ和ＡＷＡ的多克隆及单克隆抗体进行ＥＬＩＳＡ，对ＮＦ－ＣＡｇ水平的动态进行了观察。结果表明，ＮＦ－ＣＡｇ的水平在感染后８～１０ｗｋ间达高峰，１０ｗｋ后下降到较低水平。提示检测ＮＦ－ＣＡｇ的优势是在感染早期（１０ｗｋ内）。结果还显示，ＮＦ－ＣＡｇ水平与感染程度密切相关。在检测ＮＦ－ＣＡｇ时，特异性的多克隆抗体具有与单克隆抗体相似的检测效果。本文为探索血吸虫循环抗原的新途径和新内容及其归宿问题，提供了重要依据。     

斑点免疫金银染色与Dot—ELISA检测抗弓形虫抗体的对比研究

为比较斑点免疫金银染色（Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ）和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测弓形虫抗体的敏感性和特异性，本实验以弓形虫速殖子可溶性蛋白抗原为诊断用抗原，同时用Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测６５份弓形虫感染者血清、１７６份其他寄生虫感染者血清和７６份对照血清。结果显示，用Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ及Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测弓形虫感染者抗体阳性率分别为９８．４６％及９２．３１％，平均抗体滴度分别为１：３８４及１：     

血吸虫感染鼠血清SEAIC水平与肝脏病变关系的动…

采用分离纯化的兔抗ＳＥＡ－ＩｇＧ以生物素－亲和素放大系统，用Ｃａｐｔｕｒｅ ＥＬＩＳＡ方法检测感染血吸虫鼠血清中抗ＳＥＡ循环免疫复合物（ＳＥＡＩＣ）水平在感染后各周的动态变化；并在观察肝脏病变的同时，采用图像分析技术，动态测定各周肝内虫卵肉芽肿的直径和面积。结果表明，血清ＳＥＡＩＣ在感染后４ｗｋ即可检出，６－７ｗｋ时达高峰，以后有所下降，但至实验观察结束时（１２ｗｋ）仍维持在较高水平。感染后４ｗｋ     

应用单克隆抗体检测蚊体内幼丝虫的实验观察

以马来丝虫感染期幼虫为靶抗原制备多株单克隆抗体（ＭｃＡｂ）从中筛选出１Ｇ１、１Ｈ１单克隆抗体，检测人工感染马来丝虫的中华按蚊。当中华按蚊吸食含马来微丝蚴的兔血后，分别解剖，同时以ＥＬＩＳＡ及Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测饲养不同时间的中华按蚊。结果显示，饲养９ｄ的按蚊马来丝虫幼虫阳性率，人工解剖为８６．６％，ＥＬＩＳＡ和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ法分别为８２．２％和７７．８％。经统计学处理，人工解剖与单抗检测无显著性差异，其灵敏度为每只蚊０．５条幼虫。实验证明，此ＭｃＡｂ与牛腹腔指状丝虫、猪肺丝虫抗原无交叉反应，显示了一定的特异性。     

联合检测循环抗原和抗体在血吸虫病基本控制地区应用价值…

血吸虫病基本控制地区７岁以上的人群共８４７名为检测对象，应用抗日本血吸虫ＣＣＡ单克隆抗体Ⅲ Ｄ１０建立的Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测血虫循环抗原（ＣＡｇ），以ＥＬＩＳＡ和ＩＨＡ检测循环抗体（ＣＡｂ）。结果ＣＡｇ的阳性检出率为３．１９％，ＥＬＩＳＡ和ＩＨＡ检测ＣＡｂ的阳性检出率分别为６．２６％和９．４５％，两者的检出率间差异有显著性（Ｐ〈０．０１），ＣＡｇ与ＣＡｂ（ＥＬＩＳＡ和ＩＨＡ检测）的联合检出率分别     

Dot-ELISA检测感染家兔血吸虫病治疗前后血清循环抗原

我们用杂交瘤技术制备了抗ＳＥＡ和成虫肠道及成虫表膜的单克隆抗体，从中筛选出３株对循环抗原有高亲和力的单克隆抗体，经混合后用作ＤｏｔＥＬＩＳＡ检测血吸虫不同感染度的家兔血清，均具有较高的敏感性和特异性，现报告如下。１材料和方法１１单克隆抗体的制备感...     

日本血吸虫感染家兔红细胞上非游离性循环抗原的分离…

采用特定方法成功地从５０和１００条尾蚴感染的家兔红细胞上分离出非游离性循环抗原（ＮＦ－ＣＡｇ），并应用抗ＳＥＡ和ＡＷＡ的多克隆及单克隆抗体进行ＥＬＩＳＡ，对ＮＦ－ＣＡｇ水平的动态进行了观察。结果表明，ＮＦ－ＣＡｇ的水平在感染在８￣１０ｗｋ间达高峰，１０ｗｋ后下降到较低水平。提示检测ＮＦ－ＣＡｇ的优势是在感染早期（１０ｗｋ内）。结果还显示，ＮＦ－ＣＡｇ水平与感染程度密切相关。在检测ＮＦ－ＣＡｇ时，特     

Dot-ELISA的囊虫病免疫诊断价值

本文用纯化糖蛋白抗原对１１６ 例囊虫病人血清进行Ｄｏｔ－ ＥＬＩＳＡ检测,阳性率为９６．８％ （１１２／１１６）,３６ 例健康人血清皆为阴性,２７ 例肝吸虫病与包虫病人血清除２例外均为阴性,并以ＩＨＡ和ＥＬＩＳＡ作对照,结果表明Ｄｏｔ－ ＥＬＩＳＡ 在３种方法中敏感性和特异性较高     

抗恶性疟原虫复合重组抗原单克隆抗体的制备、鉴定及其体外抑制试验

目的制备抗恶性疟原虫单克隆抗体,为疟疾诊断及疟疾疫苗等方面的研究提供良好的材料。方法以恶性疟原虫复合重组融合蛋白为免疫原,经细胞融合及ＥＬＩＳＡ方法筛选获得阳性杂交瘤细胞。对其中３株２Ｈ１２、３Ｄ５、４Ｅ５进行了染色体核型分析,对其分泌的单克隆抗体作ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ及Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ鉴定,并初步观察了３株单抗对恶性疟原虫（海南分离株）的体外抑制作用。结果两次细胞融合共获得８株阳性克隆,其中３株即２Ｈ１２、３Ｄ５、４Ｅ５的ＯＤ值超过阳性对照,传至２０代以上经ＥＬＩＳＡ检测仍呈强阳性反应,将其腹腔接种给ＢＡＬＢ／ｃ小鼠获得血性腹水,抗体滴度为１∶１２８００。Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ及Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ分析显示３株单抗均与相应蛋白发生特异性反应。抑制试验结果表明：３株单抗对恶性疟原虫的体外生长和发育均有一定的抑制作用,抑制率分别为４９％±３％、７６％±６％、４１％±２％。结论已获得稳定分泌抗恶性疟原虫复合重组抗原单克隆抗体的杂交瘤细胞株。