急性白血病免疫分型的临床应用

目的：研究急性白血病(AL)细胞抗原表达特点及临床意义。方法：采用流式细胞仪(FCM)对72例初诊急性白血病患进行免疫分型。结果：AML患均表达两种以上髓系抗原，其中部分伴有淋系抗原(CD7)表达，M7表达巨核细胞抗原。ALL患均表达淋系抗原，部分表达一种或两种髓系抗原。1例混合型白血病同时表达两种以上淋系和髓系抗原标志。4例慢粒急淋变既表达髓系抗原又表达淋系抗原。结论：免疫分型是细胞形态学和细胞化学染色基础上对于急性白血病诊断与分型的重要补充。     

初治成人急性白血病48例免疫表型分析

目的：探讨初治成人急性白血病(AL)的免疫表型的分布和特征。方法：用流式细胞仪—单克隆抗体双色直接免疫荧光标记法检测初治成人AL48例骨髓细胞的免疫标志。结果：系列专一型占64．6％，其中急性髓细胞白血病(AML)中纯系表达占70．4％，急性淋巴细胞白血病(ALL)中纯系表达占63．2％；系列非专一型占25％，其中AML伴淋巴细胞系表达占22．2％，ALL伴髓细胞系表达31．6％；混合型占4．2％。结论：白血病细胞具有高度异质性；FAB分型(French—American—British Carcinoma staging)与免疫分型结合可互相补充，提高诊断率。     

急性双表型白血病临床研究

目的 探讨急性双表型白血病（biphenotypic acute leukaemia BAL)的临床与生物学特点、治疗及预后。方法 本文总结报道了5例BAL的诊治资料，所有患者均结合细胞形态学、组织化学染色、免疫表型，参照急性白血病免疫学特征欧洲协作组(European Group for the Immunological Characterization of Acute Ledtemias EGIL)评分系统诊断。结合相关文献复习。结果 全部患者均有相应的肿瘤相关的症状。5例患者中，免疫表型为共同表达髓系和B淋巴系标志者2例。共同表达髓系和T淋巴系标志者2例，同时表达三个细胞系标志者1例。CD34阳性者2例。治疗宜采用兼顾急性髓细胞白血病(AML)及急性淋巴细胞白血病(ALL)的化疗方案，但患者对治疗反应差。结论 BAL具有独特的临床、生物学和预后特征。     

成人急性白血病细胞三色流式细胞术的免疫分型

目的:探讨成人急性白血病(AL)细胞三色流式细胞术免疫分型的特点.方法:采用CD45/SSC双参数散点图设门方法、三色流式细胞术对197例急性白血病细胞进行免疫表型分析.结果:急性淋系白血病细胞均表达淋系抗原,46.7%和11.1%的成人ALL细胞表达CD13和CD33;急性髓系白血病细胞均表达髓系抗原,M3中只有1例表达CD34,HLA-DR均无表达;同时AML中有12例表达淋系抗原CD7,21例表达CD10;197例急性白血病中有11例(占5.6%)为杂舍型急性白血病(HAL),其中有6例B/M型.结论:CD45/SSC设门方法能排除骨髓中正常细胞的干扰,免疫表型的检测和研究对急性白血病的分型和明确诊断有帮助.     

BAG-1蛋白在急性髓系白血病患者骨髓单个核细胞中的表达

目的:探讨急性髓系白血病(AML)患者骨髓单个核细胞中BAG-1蛋白的表达及意义。方法:用免疫细胞化学SP染色法分别检测初治AML患者(76例)、急性髓系白血病完全缓解(AML-CR)患者(49例)、急性髓系白血病难治复发(RRAML)患者(17例)及正常对照者(15例)的骨髓单个核细胞中BAG-1蛋白的表达。结果:四组BAG-1蛋白阳性表达率差异有统计学意义(字2=47.857,P0.001);初治AML组和RRAML组中BAG-1蛋白阳性表达率均高于AML-CR组和正常对照组(P0.001);AML各分型患者的BAG-1蛋白阳性表达率差异无统计学意义(字2=1.920,P0.05);初治AML患者骨髓单个核细胞中BAG-1蛋白阳性表达率与白细胞计数及髓外浸润有关(字2=9.248,13.689,P0.01)。结论:BAG-1可能参与了急性髓系白血病的发生发展。     

中性粒细胞碱性磷酸酶（NAP）染色对急性白血病鉴别诊断的研究

目的：通过中性粒细胞碱性磷酸酶（NAP）染色,探讨急性淋巴细胞白血病（ALL）与急性髓细胞白血病（AML）患者NAP的阳性率及积分鉴别诊断的价值,以提高急性白血病诊断的准确性和及时性。方法：应用偶氮偶联法⑴对105例急性白血病,包性急性淋巴细胞白血病（ALL）41例、急性髓系细胞白血病（AML）64例,90例正常对照组进行NAP阳性率及积分进行检测,经统计学分析,算出相关性、特异性及差异性。结果：急性淋巴细胞白血病NAP阳性率和积分比急性髓性白血病、正常对照组明显增高,有显著差异（P＜0．01）;急性髓性白血病比急性淋巴细胞白血病、正常对照组明显降低,有显著差异（P＜0．01）。结论：NAP对急性白血病有重要的鉴别作用。     

急性混合细胞白血病11例临床分析

目的 总结急性混合细胞白血病(MAL)的免疫表型。方法 用流式细胞仪对本院1999年12月以来住院的11例MAL病人进行免疫表型分型。结果 B系和髓系共同表达8例，B、T系与髓系共同表达2例，T系与髓系共同表达1例。结论 MAL的免疫分型以B系和髓系共同表达最多。     

细胞免疫表型检测在急性淋巴细胞白血病诊断中的应用价值

目的：对26例初诊或化疗未缓解的急性淋巴细胞白血病（ALL）患者进行免疫表型检测分析。方法：采集白血病患者EDTA-K2抗凝外周或骨髓液，用流式细胞术检测髓系、T系、B系、红系、巨系分化抗原及非特异性抗原。结果：ALL患者均表达淋巴系抗原，但有部分病例同时表达髓系抗原（CD13或CD33）。3例髓系淋系双表型杂合性白血病同时表达2个以上淋系和髓系抗原标志，1例T系、B系双克隆杂合性白血病细胞分别表达两种以上T系和B系抗原。结论：细胞免疫表型检测可弥补形态学的不足，提高分型正确性，结合细胞形态学检验能为急性淋巴细胞白血病的诊断、治疗、预后判定及基础研究提供可靠的依据。     

流式细胞术在急性白血病细胞免疫表型分析中的价值

目的研究应用流式细胞技术对急性白血病进行免疫表型分析,为临床治疗和预后提供有价值的信息。方法运用双色免疫荧光抗体标记患者骨髓或外周血单个核细胞,用流式细胞仪分析白血病细胞膜免疫表型。结果分析75例急性白血病患者中,急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)患者12例,占16.0%;急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)患者24例,占32.0%;急性髓细胞白血病(AML)患者37例,占49.3%。混合型急性HALL/B有2例,占2.6%。ALL患者除均表达淋系抗原外,同时伴有髓系统抗原的表达;AML患者除均表达髓系抗原外,少部分同时伴有淋系抗原的表达。AML细胞表面抗原表达百分率成人明显高于儿童(73%/27%)。结论流式细胞技术能准确地分析并鉴别出急性白血病各型别,是白血病诊断分型的重要手段之一。     

急性髓系白血病细胞β-catenin和MMP-7的表达

目的:探讨急性髓系白血病细胞中β-catenin和MMP-7表达的意义.方法:急性髓系白血病患者21例(病例组),非恶性血液病患者14例(对照组),采用免疫组织化学SP法测定骨髓单个核细胞(BMMNC) β-catenin和MMP-7的表达水平,记录免疫积分和表达阳性率.结果:病例组BMMNC中β-catenin和MMP-7的免疫积分分别为(88.17±36.58)和(74.79±35.39),阳性率分别为(50.75±34.78)%和(46.42±26.14)%,均高于对照组(P<0.05).病例组β-catenin和MMP-7的免疫积分和阳性率均呈正相关关系(r分别为0.576,0.593,P均<0.05).病例组伴有肝脾淋巴结肿大的患者β-catenin和MMP-7的免疫积分和阳性率均高于无肝脾淋巴结肿大者(P<0.05).结论:急性髓系白血病细胞中β-catenin和MMP-7的表达呈正相关,2者与急性髓系白血病细胞髓外浸润有关.     

大肠癌核基质蛋白变化与其生物学行为的关系

目的：比较不同分化程度大肠癌及伴有或不伴有淋巴结转移大肠癌与切缘大肠正常组织核基质蛋白表达差异,初步探讨核基质蛋白变化与大肠癌生物学行为的关系及其机制.方法：应用高分辨率双向电泳分析12例大肠癌组织及切缘大肠正常组织核基质蛋白成分的差异.用免疫组织化学SP方法检测大肠癌MMP-9、CB的表达.结果：大肠癌组织中存在5个特异性核基质蛋白,在正常大肠组织中未表达.正常大肠组织中存在3个特异性核基质蛋白,在大肠癌组织中缺乏.不同分化程度大肠癌核基质蛋白表达也具差异.一核基质蛋白（N4）,存在于12例切缘正常大肠组织及9例中高分化不伴有淋巴结转移的癌组织中,而在3例低分化且伴有淋巴结转移的癌组织中则缺乏.免疫组织化学染色显示MMP-9、CB在缺乏核基质蛋白N4的低分化大肠癌中表达呈强阳性,明显强于具有核基质蛋白N4的中-高分化大肠癌.结论：大肠癌中存在肿瘤特异性核基质蛋白,不同分化程度及伴有或不伴有淋巴结转移大肠癌核基质蛋白表达也具有差异,大肠癌特异性核基质蛋白可望成为大肠癌的肿瘤标志物.大肠癌核基质蛋白改变可能与淋巴结转移有关,且可能与其对MMP-9、CB表达调节有关.     

胃癌组织核基质与p16基因上游序列的相关性研究

目的 :研究胃癌组织核基质蛋白与 p16基因上游序列的相关性。 方法 :应用SDS PAGE技术和Southwestern印迹技术 ,对 2 2例胃癌组织、癌旁组织及正常组织的核基质蛋白进行研究。结果 :与正常组织比较 ,胃癌组织 3 0kD、2 8kD的核基质蛋白表达量明显减少 (P <0 .0 5 ) ;不同分化类型及不同临床分期胃癌组织间比较 ,3 0kD、2 8kD核基质蛋白表达量无明显差异 (P >0 .0 5 )。正常组织核基质蛋白与p16基因上游序列的结合主带为 2 8kD、3 0kD、40kD、43kD、5 0kD ,胃癌组织中为 40kD、66kD。胃癌组织与正常组织比较 ,66kD结合阳性信号明显增强 (P <0 .0 5 ) ;而不同分化类型及不同临床分期胃癌组织间 ,66kD结合阳性信号无显著性差异。结论 :胃癌组织中核基质蛋白的改变及 66kD蛋白与p16基因上游区结合量的异常可能是胃癌发生的早期分子事件。     

慢性粒细胞白血病和慢性淋巴细胞白血病白细胞核基质蛋白研究

采用高盐抽提方法制备正常人，慢性粒细胞白血病和慢性淋巴细胞白血病患者外周血白细胞核基质蛋白，经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析，发现不同来源的白细胞，其核基质蛋白表达存在显著差异，主要表现在分子量为１１０ＫＤ，１２０ＫＤ和１３５ＫＤ的条带上，该发现对于进一步研究慢性粒细胞白血病和慢性淋巴细胞白血病的发病机制有一定意义。     

外周血白细胞核基质蛋白检测在造血系统恶性肿瘤中的应用

采用高盐抽提方法制备正常人、慢性粒细胞白血病、慢性淋巴细胞白血病及恶性组织细胞病患者外周血白细胞核基质蛋白，经ＳＤＳ－ＰＡＧ电泳分析，发现不同来源的白细胞，其核基质蛋白表达存在显著差异，主要表现在分子量为２１０ＫＤ、１３５ＫＤ、１１ＫＤ、４６ＫＤ和２１ＫＤ的条带上。该方法简便，对于研究造血系统恶性肿瘤外周血白细胞核基质蛋白有显著意义。     

运用蛋白质组学研究三氧化二砷诱导K562细胞凋亡过程中核基质蛋白的变化

目的:探讨三氧化二砷(As2O3)在体外对慢性粒细胞性白血病细胞系K562细胞核基质蛋白的影响. 方法:用DNA梯度电泳观察As2O3作用后K562细胞凋亡的情况.单向、双向电泳观察As2O3对K562细胞核基质蛋白分布影响. 结果:2.5 μmol/L As2O3处理72 h后,DNA电泳已能检测到发生凋亡的K562细胞,但早在As2O3处理48 h时, 即能观察到核基质蛋白分布的改变,此时尚不能观察到凋亡特征性的DNA片段梯形条带.双向电泳可检测出200多个核基质蛋白点,其中约18个点与As2O3处理相关. 结论:As2O3对K562细胞的影响是时间和剂量依赖性的.双向电泳检测As2O3对K562核基质蛋白分布的影响较DNA梯度电泳检测更为敏感.核基质蛋白成分可能是砷作用的靶蛋白,并且可能是药物发挥抗癌作用的关键点之一.     

胃癌组织中核基质蛋白与P16基因上游序列结合检测

目的 :研究胃癌组织核基质蛋白与p1 6基因上游序列的结合情况及其意义。方法 :采用Southwestern印迹技术及Genetools定量分析软件 ,对 2 2例胃癌及相应正常组织的核基质蛋白与P1 6基因上游序列的结合进行了检测。结果 :正常胃组织核基质蛋白与p1 6基因上游序列结合主带的相对分子质量 (Mr)为 2 80 0 0、30 0 0 0、4 0 0 0 0、4 30 0 0、5 0 0 0 0 ,胃癌组织中为 4 0 0 0 0、6 6 0 0 0。与正常胃组织比较 ,胃癌组织中核基质蛋白与P1 6基因上游序列结合的6 0 0 0主带阳性信号明显增强 (P <0 .0 5 ) ;而不同分化程度及不同临床分期胃癌组织间 ,此主带阳性信号强度差异无统计学意义 (P >0 .0 5 )。结论 :胃癌组织中 6 6 0 0 0蛋白与p1 6基因上游区结合量的异常可能是胃癌发生的早期分子事件。     

Proteomic analysis of nuclear matrix proteins during arsenic trioxide induced apoptosis in leukemia K562 cells

Background Arsenic trioxide (As2O3 ) has been identified as a very potent anti-acute leukemic agent. However its role in apoptosis needs to be elucidated. As2O3 interferes with the proliferation and survival of tumor cells via a variety of mechanisms. Drug-target interactions at the level of nuclear matrix (NM) may be critical events in the induction of cell death by As2O3. This study dealt with As2O3 -target interactions at the level of NM in chronic myelogenous leukemia cell line K562 by proteomics. Methods K562 cells were cultured in MEM and treated with different concentrations of As2O3. The nuclear matrix proteins were analyzed by high-resolution two-dimensional gel electrophoresis and computer-assisted image analysis. Results As2O3 significantly inhibited the growth of chronic myelogenous leukemia cell line K562 at low concentrations. While more than 200 protein spots were shared among the nuclear matrices, about 18 distinct spots in the nuclear matrices were found characteristic for As2O3 treated cells. Conclusions: As2O3 induces apoptosis in K562 cells in a dose and time-dependent manner. Our results demonstrated that for the detection of the onset of apoptosis, the alteration in the composition of nuclear matrix proteins was a more sensitive indicator than nucleosomal DNA fragmentation test. These results indicated that As2O3 might be clinically useful in the treatment of chronic myelogenous leukemia. The changes of nuclear matrix proteins in the treated cells can be used as a useful indicator for this treatment.     

COX-2在急性白血病中的表达及意义

目的 探讨急性白血病患者骨髓细胞COX-2的表达水平及其作用机制、意义.方法 采用Western Blot方法检测了43例急性初治白血病患者及24例完全缓解期急性白血病患者骨髓细胞COX-2及Bcl-2的表达水平,以18例健康供者骨髓为阴性对照.结果 COX-2、Bcl-2在初治急性白血病组的表达率高于完全缓解组和对照组(P＜0.05),完全缓解组和对照组间差异无统计学意义(P＞0.05).COX-2阳性组LDH水平高于COX-2阴性组,差别有统计学意义(P＜0.001).结论 COX-2可能参与了急性细胞白血病的发病,且与预后相关.     

囊性纤维化跨膜转导调节因子与急性白血病患者临床特征及预后的关系

  目的  检测细胞囊性纤维化跨膜转导调节因子（CFTR）在急性白血病及其亚型中的表达情况,分析其与急性白血病患者的临床特征及预后的关系。  方法  纳入115例急性白血病患者为实验组,以同期体检健康者为对照组,收集其外周血或骨髓,分离单个核细胞,采用Western blot法检测细胞的CFTR蛋白相对表达量,分析CFTR蛋白表达与急性白血病患者的临床特征及预后的关系。  结果  正常人外周血单个核细胞未检测出CFTR蛋白表达,而一半以上急性白血病包括急性髓系白血病（AML）和急性淋巴细胞白血病（ALL）患者CFTR蛋白表达阳性,而急性早幼粒细胞白血病（M3）患者均未检测到CFTR蛋白阳性表达。在AML患者中,CFTR蛋白表达阳性和阴性患者在外周血白细胞计数（WBC）、外周血原始细胞数、血小板（PLT）和血红蛋白（HGB）等方面差异无统计学意义,也与NPM1、CEBPA、FLT3-ITD、C-Kit等基因突变无相关性,CFTR蛋白阴性患者2疗程完全缓解（CR）率略高于阳性患者,生存期略长于阳性患者,但差异无统计学意义。在ALL患者中,CFTR蛋白与患者的临床特征及预后均无关。  结论  本研究尚未发现CFTR蛋白与急性白血病患者临床特征、治疗反应及预后有相关性。     

Study of heat shock protein HSP90α, HSP70, HSP27 mRNA expression in human acute leukemia cells

Summary The expression of three heat shock proteins (HSPs)-HSP90α, HSP70, HSP27 in cells obtained from 22 patients with leukemia, K562 erythroleukemia cell line, and normal blood cells was observed by means of RNA dot blot analysis. The results showed that the expression of the HSP27 gene was enhanced in 4 cases of acute lymphoid leukemia (ALL), 7 cases of acute nonlymphoid leukemia (ANLL) and 2 cases of myelodysplastic syndrome. (MDS) as compared with that of the normal blood Cells, yet there was no significant difference in the HSP27 expression between the ALL and ANLL cells. The expression of HSP70 in all the 5 ALL and ANLL patients was much lower than that of the normal subjects, except 1 case of ALL and 1 case of MDS, in which the expression was obviously enhanced. All the cases including 11 ANLL, 5 ALL and 1 MDS had higher HSP90α expression than the normal subjects. The enhanced expression pf HSP90α in leukemia cells may be associated with the active and indefinite proliferation of leukemia cells. Our results also suggest that the high expression of the HSP27 gene may not be confined to a specific type of acute leukemia.